牛人工授精技术
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• • • • • • 采精及精液品质检查 精液稀释：二次稀释法 降温平衡： 分装 冻结：液氮熏蒸浸泡法 抽样检查
细管冻精的制作
人工授精技术
• 输精前的准备 • 输精的要求 • 输精方法
输精前的准备
• 母畜的准备：母畜经发情鉴定后，确定已到输精时间，将 其适当保定，尾巴拉向一侧，清洗消毒外阴。 • 器械准备：输精所用的器械应彻底消毒，用稀释液冲洗后 才能使用。
精子生存时间和生存指数的测定
• 精子生存时间：指精子在某温度下在体外 的总的生存时间。 • 生存指数：将精液在某温度下，每隔8～12 小时检查一次精子活力，直至无活动精子 为止，相邻两次检查的平均活力与间隔时 间的积之和为生存指数。
PH测定
• 正常精液PH： 牛、羊 6.5～6.9、猪、 马 7.4～7.5 • 同种精液PH偏低的，品质较好，PH偏高的 受精率、生活力和保存效果都显著降低。
公畜的采精频率
• 公牛：每周两天，每天两次。 • 公猪、马：宜隔日一次，如果连续两天采 精，要休息2-3天。 • 公羊：每天数次，连续数周。
精液的品质检查
• • • • • 外观检查 精子活力检查 精子密度检查 精子畸形率检查 其他检查
• • • •
精液量 精液色泽 精液气味 云雾状
项目
稀释方法
• 将精液精液与稀释液同处在30℃的环境中。 • 检查精液品质，确定稀释倍数。 • 稀释时，将稀释液沿着精液容器的壁慢慢 加入精液中，同时慢慢转动精液瓶，使之 混匀。 • 如需高倍稀释，应先做3—5倍的低倍稀释。
精液稀释
精液保存
• 常温保存：15—25℃ • 低温保存：0—5 ℃ • 冷冻保存：保存在液氮(-196℃)或干冰(79℃) 中。
在400倍显微 镜下观察 取样检查 镜检
载玻片预温
精液稀释
将生理盐水 与精液等温 后，按1:10 稀释
将恒温加热板放在 载物台上，打开电 源并调整控制温度 至37℃，然பைடு நூலகம்放在 载玻片
活力记录
活力估测
判断视野中直线 前进运动精子所 占的百分率
按"十级一分制"评 分和记录
精子密度检查
• 估测法 • 血细胞计计数法 • 精子密度仪测定
精液的冷冻保存原理
• 玻璃化假说：稀溶液在冰晶化温区（0～－ 60 ℃）易形成冰晶，冰晶为分子有序排列、 形态规则、颗粒较大的固体，可对精子产 生渗压和机械危害。如溶液快速降温，则 形成分子无序排列、颗粒较小的玻璃化固 体，对精子危害小，再以同样的方式升温， 精子即会恢复活力。
细管冻精的生产程序
牛人工授精技术
广西武宣金泰丰农业科技有限公司
人工授精的概念
• 种畜配种：自然交配、人工授精
• 人工授精是指利用器械采取公畜的精液，
经过适当的检查和处理，再用器械把精液
输送到母畜生殖道的适当部位，使之受孕
的配种方法。
人工授精的发展
• • • 试验阶段： 1780年意大利生理学专家司拜伦谨尼 （Spallanzani）第一次进行狗的人工授精。20世纪初 对马试验成功。 实用阶段：在20世纪30年代形成了一套较完整的操作方 法。40～60年代，欧洲多数国家，北美、大洋洲国家及 日本人工授精已相当普及。 冷冻精液阶段： 出现：1949年英国波芝（Polge）对鸡精液冷冻成功。 发展：1950年英国的史密斯（Smith）和波芝研究开发 了牛精液冷冻保存技术。1960年后冷冻精液的人工授精 技术广泛展开。我国的人工授精技术始于50年代（猪）， 但精液冷冻技术70年代才得以推广。
• 精液准备（1）液态保存的精液：轻轻振荡后升温至35℃， 活力不低于0.6 （2）冷冻精液：需先解冻，活力在0.3以上。 • 术者准备：输精人员应穿好工作服，指甲必须剪短磨光， 戴上长臂手套。
输精要求
• 输精时间的确定：母牛发情后9－24h输精 两次，间隔8-12小时。（第一次输精经产 牛在发情后12h左右，初产20h）
例：早9点某经产母牛发情，当晚7－8：30时第一次输精，次日早5 －9时可第二次输精，第二次输精前检查卵泡。
• 细管冻精1支，0.5ml或0.25ml，有效精子 数不少于1000万。
直肠把握子宫颈输精法操作要点
1、冻精的适宜解冻温度：38~39℃ 2、母牛的输精时间：发情开始后8~12小时一次，隔8~12小时一次。 3、适宜的输精部位：子宫颈深部和子宫体内。 4、精液解冻后要尽快输精。 5、精液解冻后要保存在34~36℃下，温度不可波动过大。 6、细管装入枪内后，要检查一下精液是否能从套管外流出。 7、排出宿粪后，先擦洗牛外阴部，再插入输精器。 8、插入输精器时，先斜向上方前进10~15cm ，再水平插入。 9、向子宫颈插入输精器时，要注意两手协同操作。 10、输精器与子宫颈方向要保持一致。 11、注入精液困难时，要适当改变输精器方向或稍后拉，但切忌后退过多。 12、注入精液要缓慢，一般为10秒。 13、注入精液的同时要减缓母牛的努责，防止精液倒流。 14、输精同时要注意保护输精器不受粪便污染。 15、输精完毕后，先撤出输精器后撤出直肠内的手臂。
液氮及其容器
• 液氮的特性：超低温性、易挥发性、抑菌 性。 • 利用液氮：防冻伤、防窒息、防爆炸 • 液氮罐：
液氮罐的构造
液氮罐的使用
• 购买时要检查合格证，查看各部件是否齐 备完好，测定液氮损耗率是否正常。 • 运输液氮要有专门的车辆，防止剧烈振荡。 • 贮存液氮要在专门的室内。 • 当液氮量达容积的1/3时要及时充氮。 • 每年要清洗保养一次
提高受胎率的措施
• 肌注维生素。输精后15～20分钟，肌肉注射维生 素E500毫克，情期受胎率可提高14.4%。在输精 的当天，输精后的第5～6天，各肌注维生素A58 万单位，维生素D310万单位，维生素E500毫克 一次情期受胎率可提高20%。 • 50%～70%葡萄糖溶液加入青霉素和链霉素 100～200万单位，于人工授精6～8小时后注入子 宫体内，对患子宫内膜炎的母牛可提高受胎率 26%～50%。
采精
• 采精的准备 • 采精方法 • 采精频率
采精的准备
• 场地：宽敞、明亮、安静、清结，有消毒 设施和保护栏。 • 台畜：活台畜、假台畜。 • 假阴道：安装调试后具备适宜的温度、压 力、和润滑度。 • 公畜：具备良好的繁殖体况；经过训练； 采精前进行充分的性准备。
采精操作
• • • • 假阴道法： 手握法： 电刺激法： 按摩法：
人工授精的意义
• 充分发挥优秀种公畜的种用价值和配种效能，加 快品种改良步伐。 • 提高母畜的受胎率。 • 防止疾病特别是传染病的传播。 • 克服因家畜体形悬殊造成的配种困难。 • 冷冻精液的应用使种畜的利用不受时间和空间的 限制。 • 是发展繁殖新技术的一项基础措施。
人工授精技术程序
• • • • • 采精 精液品质检查 精液稀释 精液保存 输精
•
•
稀释液的配制要求
• • •
• • •
药物原料应选用化学纯和分析纯制剂。 用具须洗净消毒。 药品用蒸馏水溶解后，要进行过滤和水浴 消毒。 蒸馏水要新鲜。 卵黄要取自新鲜鸡蛋。 最好现用现配，卵黄、奶类、抗生素现用 现加。
稀释倍数的确定
• 一头公牛一次采得鲜精12毫升，经检查精子活力 为0.7，密度为11亿/毫升，如为母牛输精时要求 有效精子数不少于0.1亿，输精量为0.25毫升，本 次采得的精液可为多少头母牛输精？ （1）每毫升原精液中有效精子数：11*0.7＝7.7亿/ 毫升 （2）稀释后每毫升精液中有效精子数：0.1/0.25＝ 0.4亿/毫升 （3）稀释倍数：7.7/0.4＝19.25 取19倍 （4）可配母牛头数：12*19/0.25＝912头
美蓝褪色试验
精液稀释
• • • • • 稀释的目的 稀释液的成分及作用 稀释液的配制方法 稀释倍数的确定 稀释方法
稀释的目的
•
• •
大精液容量，增加了一次采精量的可配母 畜数。 延长精子存活时间。 有利于精液的保存和运输。
稀释液的成分及作用
• • 稀释剂：单纯扩大容量的等渗液。0.9%NaCl、5%葡萄糖。 营养剂：主要提供营养，以补充精子在代谢过程中消耗营养。 （1）奶类：奶粉(脱脂、速溶)10—12%；鲜奶经消毒加入10—20ml。 （2）卵黄，通常加入20%。 （3）糖类，3%葡萄糖，11%蔗糖。 保护剂：主要保护精子免受各种不良外界环境因素的危害。 （1）非电解质或弱电解质：降低精液电解质浓度，常用糖类、氨基 乙酸。 （2）缓冲物质：维持精液的PH，常用柠檬酸盐、酒石酸钾钠、磷 酸二氢钾和三羟甲基氨基甲烷（tris)等。 （3）防冷物质：防止精子发生冷休克，常用卵黄、奶类。 （4）抗冻物质：甘油、二甲基亚砜(DMSO)。 （5）抗菌物质：青霉素、链霉素、氨基苯磺胺。 其他添加剂：激素类、维生素、酶类、染料类、有机酸、精氨酸等。
畸形率的检查
• 畸形精子：头部畸形、颈部畸形、尾部畸 形 • 精子畸形率：精液中畸形精子占总精子数 的百分率。 • 优质精液精子畸形率应小于：牛18%、羊 15%、猪18%、马12%
畸形率的检查
• 取一滴原精液，均匀的涂在载玻片上，干 燥1～2分钟。 • 用96%以上酒精固定2～3分钟。 • 用美蓝或墨水染色1～2分钟。 • 用蒸馏水轻轻冲洗。 • 干燥后镜检，
提高受胎率的措施
• 卵巢机能不全时，肌注0.5%新斯的明2毫升， 连注3次，每次间隔48小时。第3次可同时 注射孕马血清1000国际单位，82.4%的母 牛可恢复机能。 • 对隐性子宫内膜炎的母牛，在发情配种前2 小时，用生理盐水200～500毫升冲洗子宫 之后，注入青霉素40～100万单位，链霉素 100万单位，再适时输精，受胎率可达60% 以上。
其他检查
• • • • • • 顶体异常率 精子生存时间和生存指数的测定 PH测定 美蓝褪色试验 果糖分解试验 精子耗氧量测定
顶体异常率的检查
• • • • • 取鲜精适量，在37℃下用生理盐水稀释。 涂片，干燥，用5%福尔马林固定10分钟。 姬姆萨液染色1.5～2小时。 干燥后用树脂封闭，制成标本。 400～600倍镜检，数500～1000个精子， 计算项体异常率。
提高受胎率的措施
• 发情正常而屡配不孕的母牛：大麦芽120克，当 归、红花、生地、地骨皮各60克，黑豆500～ 1000克，加水熬汤。母牛发情1～3天开始喂药， 每日1剂，连服3剂，第3剂药服完后的第2天配种。 • 按碘片1克、碘化钾3克、蒸馏水6克的比例配成 稀释液，同时取4毫升原液，加200毫升蒸馏水冲 洗子宫。此方法对慢性子宫内膜炎、化脓性子宫 炎、卡他性子宫炎、阴道炎等引起的母牛不孕症 有明显疗效。
每周采精 次数
乳牛
2～6
肉牛
2～6
水牛
2～6
猪
2～5
绵羊
7～25
平均每次 射精量 （ml）
精子活率 （%）
5～10
4～8
3～6
150～ 300
50～80
0.8～1.2
50～75
40～75
60～80
60～80
精子活力检查
• 平板压片法
• 悬滴法
精子活力检查的程序
取10ul放在预温后载玻片中间， 盖上盖玻片
提高受胎率的措施
• 在母牛分娩后的第一、二情期，输精后5～7分钟， 各肌肉注射40～50万单位的催产素一次，受胎率 提高20%。 • 肌肉注射促性腺激素10毫克，受胎率可提高 12%～19.1%：屡配不孕的牛经注射后受胎率提 高26.1%。 • 在母牛分娩后45～60天肌肉注射前列素F两天， 20～25毫升、受胎率可达73%～85%。长期不孕 的牛，皮下注射初奶20毫升和0.5%新斯的明2毫 升，受胎率提高24%。
估测法
• 密：在整个视野中，精子间空隙不明显，看不清 单个精子运动。10亿／ml。 • 中：在整个视野中，精子间空隙明显，可容纳1— 2个精子，3—10亿／ml • 稀：在整个视野中，精子间空隙较大，可容纳数 个精子，1—3亿／ml。
(二)血细胞计数法：
• 在显微镜看清血细胞计数板上的方格： • 稀释精液：用移液管吸取精液50微升置于小试管中，
再吸取3%NaCI溶液450或950微升与精液混匀。
• 镜检：在400倍的显微镜下找出具有代表性的五个
中方格，四角和中间一个或对角线五个，用计数器计 数其中的精子数。
• 计算： 1 毫升原精液精子数 =5*5*10*1000* 稀
释倍数
精子密度仪
各种家畜精子密度比较
40 30 20 10 0 牛 羊 猪 马 鸡 亿/ml
细管冻精的制作
人工授精技术
• 输精前的准备 • 输精的要求 • 输精方法
输精前的准备
• 母畜的准备：母畜经发情鉴定后，确定已到输精时间，将 其适当保定，尾巴拉向一侧，清洗消毒外阴。 • 器械准备：输精所用的器械应彻底消毒，用稀释液冲洗后 才能使用。
精子生存时间和生存指数的测定
• 精子生存时间：指精子在某温度下在体外 的总的生存时间。 • 生存指数：将精液在某温度下，每隔8～12 小时检查一次精子活力，直至无活动精子 为止，相邻两次检查的平均活力与间隔时 间的积之和为生存指数。
PH测定
• 正常精液PH： 牛、羊 6.5～6.9、猪、 马 7.4～7.5 • 同种精液PH偏低的，品质较好，PH偏高的 受精率、生活力和保存效果都显著降低。
公畜的采精频率
• 公牛：每周两天，每天两次。 • 公猪、马：宜隔日一次，如果连续两天采 精，要休息2-3天。 • 公羊：每天数次，连续数周。
精液的品质检查
• • • • • 外观检查 精子活力检查 精子密度检查 精子畸形率检查 其他检查
• • • •
精液量 精液色泽 精液气味 云雾状
项目
稀释方法
• 将精液精液与稀释液同处在30℃的环境中。 • 检查精液品质，确定稀释倍数。 • 稀释时，将稀释液沿着精液容器的壁慢慢 加入精液中，同时慢慢转动精液瓶，使之 混匀。 • 如需高倍稀释，应先做3—5倍的低倍稀释。
精液稀释
精液保存
• 常温保存：15—25℃ • 低温保存：0—5 ℃ • 冷冻保存：保存在液氮(-196℃)或干冰(79℃) 中。
在400倍显微 镜下观察 取样检查 镜检
载玻片预温
精液稀释
将生理盐水 与精液等温 后，按1:10 稀释
将恒温加热板放在 载物台上，打开电 源并调整控制温度 至37℃，然பைடு நூலகம்放在 载玻片
活力记录
活力估测
判断视野中直线 前进运动精子所 占的百分率
按"十级一分制"评 分和记录
精子密度检查
• 估测法 • 血细胞计计数法 • 精子密度仪测定
精液的冷冻保存原理
• 玻璃化假说：稀溶液在冰晶化温区（0～－ 60 ℃）易形成冰晶，冰晶为分子有序排列、 形态规则、颗粒较大的固体，可对精子产 生渗压和机械危害。如溶液快速降温，则 形成分子无序排列、颗粒较小的玻璃化固 体，对精子危害小，再以同样的方式升温， 精子即会恢复活力。
细管冻精的生产程序
牛人工授精技术
广西武宣金泰丰农业科技有限公司
人工授精的概念
• 种畜配种：自然交配、人工授精
• 人工授精是指利用器械采取公畜的精液，
经过适当的检查和处理，再用器械把精液
输送到母畜生殖道的适当部位，使之受孕
的配种方法。
人工授精的发展
• • • 试验阶段： 1780年意大利生理学专家司拜伦谨尼 （Spallanzani）第一次进行狗的人工授精。20世纪初 对马试验成功。 实用阶段：在20世纪30年代形成了一套较完整的操作方 法。40～60年代，欧洲多数国家，北美、大洋洲国家及 日本人工授精已相当普及。 冷冻精液阶段： 出现：1949年英国波芝（Polge）对鸡精液冷冻成功。 发展：1950年英国的史密斯（Smith）和波芝研究开发 了牛精液冷冻保存技术。1960年后冷冻精液的人工授精 技术广泛展开。我国的人工授精技术始于50年代（猪）， 但精液冷冻技术70年代才得以推广。
• 精液准备（1）液态保存的精液：轻轻振荡后升温至35℃， 活力不低于0.6 （2）冷冻精液：需先解冻，活力在0.3以上。 • 术者准备：输精人员应穿好工作服，指甲必须剪短磨光， 戴上长臂手套。
输精要求
• 输精时间的确定：母牛发情后9－24h输精 两次，间隔8-12小时。（第一次输精经产 牛在发情后12h左右，初产20h）
例：早9点某经产母牛发情，当晚7－8：30时第一次输精，次日早5 －9时可第二次输精，第二次输精前检查卵泡。
• 细管冻精1支，0.5ml或0.25ml，有效精子 数不少于1000万。
直肠把握子宫颈输精法操作要点
1、冻精的适宜解冻温度：38~39℃ 2、母牛的输精时间：发情开始后8~12小时一次，隔8~12小时一次。 3、适宜的输精部位：子宫颈深部和子宫体内。 4、精液解冻后要尽快输精。 5、精液解冻后要保存在34~36℃下，温度不可波动过大。 6、细管装入枪内后，要检查一下精液是否能从套管外流出。 7、排出宿粪后，先擦洗牛外阴部，再插入输精器。 8、插入输精器时，先斜向上方前进10~15cm ，再水平插入。 9、向子宫颈插入输精器时，要注意两手协同操作。 10、输精器与子宫颈方向要保持一致。 11、注入精液困难时，要适当改变输精器方向或稍后拉，但切忌后退过多。 12、注入精液要缓慢，一般为10秒。 13、注入精液的同时要减缓母牛的努责，防止精液倒流。 14、输精同时要注意保护输精器不受粪便污染。 15、输精完毕后，先撤出输精器后撤出直肠内的手臂。
液氮及其容器
• 液氮的特性：超低温性、易挥发性、抑菌 性。 • 利用液氮：防冻伤、防窒息、防爆炸 • 液氮罐：
液氮罐的构造
液氮罐的使用
• 购买时要检查合格证，查看各部件是否齐 备完好，测定液氮损耗率是否正常。 • 运输液氮要有专门的车辆，防止剧烈振荡。 • 贮存液氮要在专门的室内。 • 当液氮量达容积的1/3时要及时充氮。 • 每年要清洗保养一次
提高受胎率的措施
• 肌注维生素。输精后15～20分钟，肌肉注射维生 素E500毫克，情期受胎率可提高14.4%。在输精 的当天，输精后的第5～6天，各肌注维生素A58 万单位，维生素D310万单位，维生素E500毫克 一次情期受胎率可提高20%。 • 50%～70%葡萄糖溶液加入青霉素和链霉素 100～200万单位，于人工授精6～8小时后注入子 宫体内，对患子宫内膜炎的母牛可提高受胎率 26%～50%。
采精
• 采精的准备 • 采精方法 • 采精频率
采精的准备
• 场地：宽敞、明亮、安静、清结，有消毒 设施和保护栏。 • 台畜：活台畜、假台畜。 • 假阴道：安装调试后具备适宜的温度、压 力、和润滑度。 • 公畜：具备良好的繁殖体况；经过训练； 采精前进行充分的性准备。
采精操作
• • • • 假阴道法： 手握法： 电刺激法： 按摩法：
人工授精的意义
• 充分发挥优秀种公畜的种用价值和配种效能，加 快品种改良步伐。 • 提高母畜的受胎率。 • 防止疾病特别是传染病的传播。 • 克服因家畜体形悬殊造成的配种困难。 • 冷冻精液的应用使种畜的利用不受时间和空间的 限制。 • 是发展繁殖新技术的一项基础措施。
人工授精技术程序
• • • • • 采精 精液品质检查 精液稀释 精液保存 输精
•
•
稀释液的配制要求
• • •
• • •
药物原料应选用化学纯和分析纯制剂。 用具须洗净消毒。 药品用蒸馏水溶解后，要进行过滤和水浴 消毒。 蒸馏水要新鲜。 卵黄要取自新鲜鸡蛋。 最好现用现配，卵黄、奶类、抗生素现用 现加。
稀释倍数的确定
• 一头公牛一次采得鲜精12毫升，经检查精子活力 为0.7，密度为11亿/毫升，如为母牛输精时要求 有效精子数不少于0.1亿，输精量为0.25毫升，本 次采得的精液可为多少头母牛输精？ （1）每毫升原精液中有效精子数：11*0.7＝7.7亿/ 毫升 （2）稀释后每毫升精液中有效精子数：0.1/0.25＝ 0.4亿/毫升 （3）稀释倍数：7.7/0.4＝19.25 取19倍 （4）可配母牛头数：12*19/0.25＝912头
美蓝褪色试验
精液稀释
• • • • • 稀释的目的 稀释液的成分及作用 稀释液的配制方法 稀释倍数的确定 稀释方法
稀释的目的
•
• •
大精液容量，增加了一次采精量的可配母 畜数。 延长精子存活时间。 有利于精液的保存和运输。
稀释液的成分及作用
• • 稀释剂：单纯扩大容量的等渗液。0.9%NaCl、5%葡萄糖。 营养剂：主要提供营养，以补充精子在代谢过程中消耗营养。 （1）奶类：奶粉(脱脂、速溶)10—12%；鲜奶经消毒加入10—20ml。 （2）卵黄，通常加入20%。 （3）糖类，3%葡萄糖，11%蔗糖。 保护剂：主要保护精子免受各种不良外界环境因素的危害。 （1）非电解质或弱电解质：降低精液电解质浓度，常用糖类、氨基 乙酸。 （2）缓冲物质：维持精液的PH，常用柠檬酸盐、酒石酸钾钠、磷 酸二氢钾和三羟甲基氨基甲烷（tris)等。 （3）防冷物质：防止精子发生冷休克，常用卵黄、奶类。 （4）抗冻物质：甘油、二甲基亚砜(DMSO)。 （5）抗菌物质：青霉素、链霉素、氨基苯磺胺。 其他添加剂：激素类、维生素、酶类、染料类、有机酸、精氨酸等。
畸形率的检查
• 畸形精子：头部畸形、颈部畸形、尾部畸 形 • 精子畸形率：精液中畸形精子占总精子数 的百分率。 • 优质精液精子畸形率应小于：牛18%、羊 15%、猪18%、马12%
畸形率的检查
• 取一滴原精液，均匀的涂在载玻片上，干 燥1～2分钟。 • 用96%以上酒精固定2～3分钟。 • 用美蓝或墨水染色1～2分钟。 • 用蒸馏水轻轻冲洗。 • 干燥后镜检，
提高受胎率的措施
• 卵巢机能不全时，肌注0.5%新斯的明2毫升， 连注3次，每次间隔48小时。第3次可同时 注射孕马血清1000国际单位，82.4%的母 牛可恢复机能。 • 对隐性子宫内膜炎的母牛，在发情配种前2 小时，用生理盐水200～500毫升冲洗子宫 之后，注入青霉素40～100万单位，链霉素 100万单位，再适时输精，受胎率可达60% 以上。
其他检查
• • • • • • 顶体异常率 精子生存时间和生存指数的测定 PH测定 美蓝褪色试验 果糖分解试验 精子耗氧量测定
顶体异常率的检查
• • • • • 取鲜精适量，在37℃下用生理盐水稀释。 涂片，干燥，用5%福尔马林固定10分钟。 姬姆萨液染色1.5～2小时。 干燥后用树脂封闭，制成标本。 400～600倍镜检，数500～1000个精子， 计算项体异常率。
提高受胎率的措施
• 发情正常而屡配不孕的母牛：大麦芽120克，当 归、红花、生地、地骨皮各60克，黑豆500～ 1000克，加水熬汤。母牛发情1～3天开始喂药， 每日1剂，连服3剂，第3剂药服完后的第2天配种。 • 按碘片1克、碘化钾3克、蒸馏水6克的比例配成 稀释液，同时取4毫升原液，加200毫升蒸馏水冲 洗子宫。此方法对慢性子宫内膜炎、化脓性子宫 炎、卡他性子宫炎、阴道炎等引起的母牛不孕症 有明显疗效。
每周采精 次数
乳牛
2～6
肉牛
2～6
水牛
2～6
猪
2～5
绵羊
7～25
平均每次 射精量 （ml）
精子活率 （%）
5～10
4～8
3～6
150～ 300
50～80
0.8～1.2
50～75
40～75
60～80
60～80
精子活力检查
• 平板压片法
• 悬滴法
精子活力检查的程序
取10ul放在预温后载玻片中间， 盖上盖玻片
提高受胎率的措施
• 在母牛分娩后的第一、二情期，输精后5～7分钟， 各肌肉注射40～50万单位的催产素一次，受胎率 提高20%。 • 肌肉注射促性腺激素10毫克，受胎率可提高 12%～19.1%：屡配不孕的牛经注射后受胎率提 高26.1%。 • 在母牛分娩后45～60天肌肉注射前列素F两天， 20～25毫升、受胎率可达73%～85%。长期不孕 的牛，皮下注射初奶20毫升和0.5%新斯的明2毫 升，受胎率提高24%。
估测法
• 密：在整个视野中，精子间空隙不明显，看不清 单个精子运动。10亿／ml。 • 中：在整个视野中，精子间空隙明显，可容纳1— 2个精子，3—10亿／ml • 稀：在整个视野中，精子间空隙较大，可容纳数 个精子，1—3亿／ml。
(二)血细胞计数法：
• 在显微镜看清血细胞计数板上的方格： • 稀释精液：用移液管吸取精液50微升置于小试管中，
再吸取3%NaCI溶液450或950微升与精液混匀。
• 镜检：在400倍的显微镜下找出具有代表性的五个
中方格，四角和中间一个或对角线五个，用计数器计 数其中的精子数。
• 计算： 1 毫升原精液精子数 =5*5*10*1000* 稀
释倍数
精子密度仪
各种家畜精子密度比较
40 30 20 10 0 牛 羊 猪 马 鸡 亿/ml