小鼠卵母细胞减数分裂染色体的制备 Preparation of Meiotic Karytype of Mouse Oocyte

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小鼠卵母细胞MII期核(纺锤体)移植后经体外受精正常产仔

小鼠卵母细胞MII期核(纺锤体)移植后经体外受精正常产仔

小鼠卵母细胞MII期核(纺锤体)移植后经体外受精正常产仔王敏康;陈大元;刘冀珑;李光鹏;廉莉;宋祥芬;孙青原【期刊名称】《生殖医学杂志》【年(卷),期】2001(010)003【摘要】目的:为研究和了解细胞核与细胞质的相互作用。

方法:采用3%蔗糖预处理显示及去核法进行昆明白小鼠与C57BL/6小鼠(黑色)之间卵母细胞MII期核(纺锤体)的移植、电融合、体外受精-胚胎移植(IVF-ET)。

结果:经3%蔗糖预处理卵母细胞的去核率达100%。

完成MII期核移植的重构卵母细胞约17.6%完成电融合。

IVF的受精率为82%。

受精卵2-细胞胚胎的发育率为80%~90%,8个1~4细胞胚胎移入两只自然怀孕1 d的寄母小鼠(Km×Km)输卵管,其中1只孕鼠生下3只小鼠,其中2只黑色小鼠为MII期核(纺锤体)移植生产的小鼠。

移植产仔率为25%。

结论:实验结果证明了3%蔗糖预处理显示MII期核(纺锤体)及去核效果可达100%;电融合的重构卵母细胞可完成正常的IVF。

为进行不同年龄和卵龄间的MII期核移植提供了一个模型。

%Objective: To study the interaction between nucleus and cytoplasm.rn Methods: Operation medium containing 3% sucrose was used to pretreatment murine oocytes and meiotic apparatus transfer(MAT) was carried out from C57BL/6 mouse (black) to enucleated Kunming murine oocytes and followed by electrofusion, in vitro fertilization (IVF) and embryo transfer.rn Results: The results showed that the enucleation rate by treating oocytes with 3% sucrose was 100%, 17.6% of reconstructed karyoplasm-recipient cytoplasm pairs fused sucessfully. When the fused oocytes were exposed tospermatozoa from C57BL/6 mice, 9 out of 11 (82%) were fertilized. Among them, eight embryos at one-to four-cell stages were transferred into the oviducts of two synchronous pregnant Kunming strain fosters and one delivered two normal C57BL/6 offsprings.rn Conclusion: This study indicated that MII meiotic apparatus or spindle sustains normal structure and function after micromanipulation and electrofusion. MAT provides a model for further research on the application of this technique to assistant human reproduction.【总页数】7页(P141-147)【作者】王敏康;陈大元;刘冀珑;李光鹏;廉莉;宋祥芬;孙青原【作者单位】云南师范大学生命科学院,;中国科学院动物研究所,;中国科学院动物研究所,;中国科学院动物研究所,;中国科学院动物研究所,;中国科学院动物研究所,;中国科学院动物研究所,【正文语种】中文【中图分类】R339.2【相关文献】1.不同因素对小鼠MII期卵母细胞纺锤体的影响 [J], 崔龙波;周雪莹;崔志峰;黄秀英;孙方臻2.用Polscope观察人类卵母细胞中MII期减数分裂的纺锤体能预测ICSI后胚胎发育能力 [J], 金海霞;孙莹璞3.人MII期卵母细胞纺锤体与正常受精卵早期卵裂的关系 [J], 朱亮;陈士岭;邢福祺;杜建新4.蔗糖预处理去核:一种可靠的无损害小鼠卵母细胞MII期核去除法 [J], 王敏康;刘冀珑;李光鹏;廉莉;陈大元5.小鼠spindlin1蛋白在稳定MII期卵母细胞纺锤体中的作用 [J], 王黎熔;张克梅;毕晔;马慜悦;霍然;周作民;孙青原;沙家豪因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

小鼠减数分裂标本的制备及观察ppt实用资料

小鼠减数分裂标本的制备及观察ppt实用资料

【实பைடு நூலகம்内容】
一、标本制备过程 1. 处死动物,剥离睾丸。2. 取部分睾丸组织,匀浆取上皮细胞悬液。3. 处 滴死片动,物 Gi, em悬剥sa离染液睾色丸加,。镜入检。培养液小瓶,置培养箱内培养24小时。4. 培养终止前4小时, 动2椭、物圆使生 形用殖V油=细4镜加 7胞/3.找π有入a甲出丝b2减分秋(醇a数裂、分水过:b分裂程仙冰别各为时素醋长相、,。酸短着5(半重.径观收3)察:第取一1细次)减胞固数分低定裂渗的。形处8态.变理滴化。。片6,. 1G0i0e0mrspam染离色心,8分镜钟检,。取沉淀。 雌培雄养小 终二鼠止生前、殖4小标细时胞,本减加数的入分秋观裂水模仙察式素对。比 11一00、0000分rrpp12别mm、、离离求心心出精使88使分分用原用钟钟低,,油细倍取取镜沉沉镜胞(1淀淀0找有X。。),出丝高倍减分镜数裂(40X分中)时裂期目镜各相测微时,尺相明每格,确代表着小的重鼠长度观染: 察色第体一数次目4减0数条分。裂的形态变化。 培圆养形终前V止=前4期/34π小Ir:时3(,r为细加半入线径秋)期水仙;素。偶线期;双线期;终变期。 计1甲、算醇精细 :中后原胞冰细、醋期期胞细酸有II胞(::丝核3:分体四同1裂积)分源中的固期公定体染相式。,:排色明列体确小在移鼠染赤向色道 两体数面 极目4上 ;0条;。 末期I: 圆 形 V=4/3πr 3(r为半径)
椭圆形 V动=4物/3π生ab2殖(a、细b分胞别有为长丝、分短半裂径过) 程
取部分睾丸组织,匀浆取上皮细胞悬液。 圆 形 V=4/3πr 3(r为半径) 甲醇:冰醋酸(3:1)固定。 理解小鼠睾丸组织减数分裂标本的制备技术
雌雄小鼠生殖细胞减数分裂模式对比
细线期 双线期
偶线期
粗线期

Spindly小鼠卵母细胞减数分裂博士论文

Spindly小鼠卵母细胞减数分裂博士论文

mSpindly在小鼠卵母细胞减数分裂进程中的定位与功能动物学, 2010,博士【摘要】与在有丝分裂中一样,减数分裂中的纺锤体检验点也是通过抑制后期的起始来保证染色体的精确分离,即使还剩一条染色体没有排列在赤道板上也会产生足够的后期延迟信号来保持纺锤体检验点的活性。

纺锤体检验点信号通路包括Mad1, 2, 3(Mad:mitotic arrest deficient)和Bub1, 2, 3(Bub:budding unperturbed by benzimidazole)蛋白等主要成分。

它们除了构成检验点的主要结构成份之外,还有负责放大检验点信号并调控其他检验点蛋白的活性,如Mps1和Aurora B等。

在多细胞生物中,有另外3种蛋白:ZW10,Rough Deal(Rod)和Zwilch(三者合称为RZZ复合体),也在有丝分裂纺锤体检验点中具有至关重要的作用。

最近,人们认为多细胞生物中的这3种蛋白会形成一种复合体,在募集动粒元件(dynein/dynactin复合体, Mad1和Mad2)到动粒的过程中发挥作用。

Spindly是一种新近才被发现的纺锤体检验点蛋白,它首先是在果蝇的S2细胞中被发现的,它在线虫和人类中的同源蛋白分别被命名为SPDL-1和Hs Spindly... 更多还原【Abstract】 As in mitosis, the spindle assembly checkpoint is ensuring correct segregation of chromosomes or sister chromatids by preventing the onset of anaphase. Even a single misaligned chromosome is sufficient to generate an anaphasewaiting signal to maintain SAC activation and delay the anaphase onset. SAC signal pathway includes Mad1, 2, 3 (Mad for mitotic arrest deficient) and Bub1, 2, 3 (Bub for budding unperturbed by benzimidazole) as major components. Besides these proteins, Mps1 and Aurora B amp... 更多还原【关键词】Spindly;小鼠卵母细胞;减数分裂;【Key words】Spindly;mouse oocyte;meiosis;中文摘要5-8Abstract 8-10缩略语表11-12第一篇文献综述12-31第一章细胞分裂中的纺锤体检验点12-201.1 动粒和动粒蛋白12-151.2 纺锤体检验点信号通路15-20第二章哺乳动物减数分裂过程中的纺锤体检验点及检验点蛋白20-312.1 减数分裂中纺锤体的构成20-222.2 减数分裂中的纺锤体检验点蛋白22-272.3 减数分裂中的纺锤体检验点系统27-292.4 mSpindly 及其同源蛋白29-31第二篇实验研究31-71第三章mSpindly 在小鼠卵母细胞中的表达和亚细胞定位31-593.1 实验目的313.2 实验材料31-383.3 实验方法38-513.4 实验结果及分析51-573.5 讨论57-59第四章mSpindly 在小鼠卵母细胞中的功能研究59-714.1 实验目的594.2 实验材料59-604.3 实验方法60-624.4 实验结果及分析62-674.5 讨论67-71参考文献。

《CentromereproteinF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》范文

《CentromereproteinF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》范文

《Centromere protein F在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》篇一摘要:本文以Centromere protein F(CPF)为研究对象,深入探讨了其在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能。

通过分析CPF在减数分裂染色体行为、纺锤体形成、以及早期胚胎发育的基因表达和细胞周期调控等方面的作用,为揭示其生物学功能提供了重要依据。

一、引言Centromere protein F(CPF)作为染色体上的一种重要蛋白,在细胞分裂过程中起着关键作用。

在小鼠的生殖系统中,CPF不仅影响卵母细胞的减数分裂,还对早期胚胎的发育有重要影响。

本研究旨在通过系统研究CPF的功能,揭示其在卵母细胞减数分裂和早期胚胎发育中的重要作用。

二、材料与方法本研究采用小鼠模型,通过基因敲除、免疫荧光、显微操作、实时PCR等技术手段,对CPF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能进行研究。

三、CPF在小鼠卵母细胞减数分裂中的作用1. 染色体行为与纺锤体形成CPF在卵母细胞减数分裂过程中参与了染色体的行为和纺锤体的形成。

通过免疫荧光实验发现,CPF在纺锤体微管组织中具有重要作用,对于维持染色体在减数分裂过程中的正确排列和分离至关重要。

2. 减数分裂进程的调控CPF对减数分裂进程的调控主要体现在对细胞周期的精确控制上。

通过基因敲除实验发现,CPF的缺失会导致卵母细胞减数分裂进程紊乱,表现为染色体排列异常和第一极体排放异常等现象。

四、CPF对小鼠早期胚胎发育的影响1. 基因表达与细胞增殖CPF在早期胚胎发育中参与了基因的表达与细胞的增殖过程。

实时PCR结果显示,CPF的缺失会导致胚胎发育过程中关键基因的表达异常,进而影响细胞的正常增殖。

2. 胚胎发育的表型变化CPF的缺失会导致早期胚胎发育出现明显的表型变化,如胚胎发育迟缓、囊胚形成障碍等。

这些变化进一步证实了CPF在早期胚胎发育中的重要作用。

《2024年转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》范文

《2024年转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》范文

《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》篇一一、引言近年来,生殖生物学领域对转录因子TFⅡB在卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的作用进行了深入研究。

TFⅡB作为一种关键的转录调控因子,其在基因表达和细胞增殖中发挥着重要作用。

本研究旨在探讨TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育的影响,以期为生殖医学和遗传学领域提供新的理论依据。

二、材料与方法1. 材料本实验选用小鼠作为研究对象,收集其卵母细胞及早期胚胎。

实验所需试剂、耗材等均经过严格筛选和质量控制。

2. 方法(1)卵母细胞的收集与处理:从小鼠卵巢中收集卵母细胞,并进行相应的处理。

(2)转录因子TFⅡB的干预:通过基因敲除、过表达等方法,对卵母细胞中的TFⅡB进行干预。

(3)观察卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育情况:利用显微镜等技术手段,观察并记录卵母细胞的减数分裂过程及早期胚胎的发育情况。

(4)数据分析:采用统计学方法对实验数据进行处理和分析。

三、实验结果1. TFⅡB对卵母细胞减数分裂的影响实验结果显示,TFⅡB的干预对小鼠卵母细胞的减数分裂过程产生了显著影响。

在基因敲除TFⅡB的小鼠卵母细胞中,减数分裂进程受到阻碍,而过表达TFⅡB的卵母细胞则表现出加速的减数分裂过程。

这表明TFⅡB在卵母细胞减数分裂过程中发挥了重要的调控作用。

2. TFⅡB对早期胚胎发育的影响实验结果表明,TFⅡB的干预对早期胚胎的发育也产生了显著影响。

在基因敲除TFⅡB的小鼠中,早期胚胎的发育受到抑制,而过表达TFⅡB的小鼠则表现出更好的胚胎发育潜力。

这表明TFⅡB在早期胚胎发育过程中发挥了重要的促进作用。

3. 数据分析与统计通过统计学分析,我们发现TFⅡB的干预与卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育之间存在显著的相关性。

具体数据详见附表。

四、讨论本研究表明,转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育具有重要影响。

在卵母细胞减数分裂过程中,TFⅡB 发挥了关键的调控作用,其基因敲除会导致减数分裂进程受阻,而过表达则会加速减数分裂过程。

小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察

小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察

Isolation and staining of mouse meiotic metaphasechromosomes小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察xx 2011级生科四班201100140120 同组者:xx【实验目的】1、learn to isolate mouse testes cells and stain with Giemsa.学会分离小鼠睾丸细胞并用Giemsa染液染色2、Observe the number and morphology of mouse chromosomes观察小鼠染色体的数目及形态特征【实验材料】【Reagents】秋水仙素colchicine solution吉姆萨染液Giemsa stains solution生理盐水physiological saline氯化钾溶液KCl solution固定液fixation solution【Tools and equipments】Dissecting tray,beaker,centrifuge tube,microscope,glass slide,pipette,scissors,forceps,copper mesh.解剖盘,烧杯,离心管,显微镜,载玻片,吸管,剪刀,镊子,铜网【实验原理】meiosis is a process of reductional division in which the number ofchromosomes per cell is cut in half. In animals, meiosis always results in the formation of gametes, while in other organisms it can give rise to spores. 减数分裂是细胞分裂染色体数减半的过程,在动物中,减数分裂的结果总是在形成配子,而在其他生物可以产生孢子。

《CentromereproteinF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》范文

《CentromereproteinF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》范文

《Centromere protein F在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》篇一摘要:本文旨在探讨Centromere protein F(CPF)在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能。

通过建立小鼠模型、分析胚胎细胞数据、对比相关生物学行为等方式,全面阐述CPF在这一特殊生命活动过程中的重要作用及其可能涉及的机制。

本研究对于了解哺乳动物生殖过程中的基因调控与遗传学有着重要意义。

一、引言卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育是生物繁殖的关键阶段,在这一过程中,众多遗传因子及蛋白参与了各种复杂的过程,以确保精卵的结合和遗传物质的正确传递。

Centromere protein F (CPF)作为一种与有丝分裂及减数分裂的染色质稳定性紧密相关的蛋白,在生殖过程中起着关键作用。

本研究即围绕CPF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能展开研究。

二、材料与方法1. 实验材料采用小鼠作为实验动物,构建特定基因型的模型,如CPF基因敲除或过表达小鼠模型。

2. 实验方法(1)通过显微操作技术对小鼠卵母细胞进行观察和操作;(2)采用分子生物学技术如PCR、免疫荧光等技术对胚胎细胞的基因和蛋白进行检测和分析;(3)运用统计分析和计算机软件进行数据对比和处理。

三、实验结果与分析1. CPF在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的作用通过观察和分析CPF基因敲除和野生型小鼠的卵母细胞减数分裂过程,发现CPF对于染色体的正确排列和分离具有重要作用。

在CPF缺失的情况下,小鼠卵母细胞的染色体排列紊乱,出现无法正常完成减数分裂的现象。

此外,在过表达CPF的模型中,观察到减数分裂过程更为顺畅。

2. CPF在早期胚胎发育过程中的功能(1)影响胚胎细胞发育的稳定性:在早期胚胎发育中,CPF 能够维持胚胎细胞的稳定状态,对于细胞的增殖和分化有积极影响。

当CPF表达水平发生异常时,如过少或过多,均会导致胚胎发育的异常。

《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》范文

《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》范文

《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》篇一一、引言近年来,生殖生物学领域对于卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育的机制研究取得了显著进展。

其中,转录因子TFⅡB (TFIIB)作为一种重要的真核生物转录因子,其在细胞内基因表达调控过程中扮演着至关重要的角色。

然而,TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育的影响尚未完全明确。

因此,本文将重点研究TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂和早期胚胎发育的生物学作用及机制,为相关研究提供新的理论依据和实验依据。

二、材料与方法2.1 实验动物本实验采用特定品系的小鼠,年龄、体重等指标符合实验要求。

所有实验小鼠均饲养在特定的实验室动物房内,环境温度、湿度等条件稳定可控。

2.2 主要试剂与设备实验过程中需用到各种生物化学试剂、抗体等。

主要设备包括显微镜、荧光定量PCR仪、倒置显微镜等。

2.3 实验方法(1)小鼠卵母细胞的获取与处理;(2)通过基因敲除、过表达等技术手段调节TFⅡB的表达水平;(3)观察不同TFⅡB表达水平下卵母细胞的减数分裂过程;(4)分析早期胚胎发育过程中TFⅡB的表达变化;(5)利用荧光定量PCR、免疫印迹等技术手段检测相关基因的表达水平。

三、实验结果3.1 TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂的影响实验结果显示,在TFⅡB表达水平降低的情况下,小鼠卵母细胞的减数分裂进程受到明显影响,表现为减数分裂停滞、异常卵母细胞比例增加等现象。

而在TFⅡB过表达的情况下,卵母细胞的减数分裂进程得以正常进行,表现出较高的正常卵母细胞比例。

3.2 TFⅡB对早期胚胎发育的影响在早期胚胎发育过程中,TFⅡB的表达水平与胚胎发育质量密切相关。

实验结果显示,在TFⅡB表达水平较低的情况下,早期胚胎的发育质量明显下降,表现为胚胎发育停滞、死亡等现象。

而在TFⅡB表达水平较高的情况下,早期胚胎的发育质量得以显著提高。

3.3 相关基因表达分析通过荧光定量PCR、免疫印迹等技术手段检测相关基因的表达水平,发现TFⅡB的表达水平与一系列与减数分裂和早期胚胎发育相关的基因表达水平密切相关。

动物遗传学教学实验“小鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作”方法

动物遗传学教学实验“小鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作”方法

动物遗传学教学实验“小鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作”方法改进的研究作者:张燕军赖双英苏蕊张文广来源:《科教导刊》2014年第10期摘要“减数分裂期染色体制备实验”是动物遗传学实验课程重要内容。

本文介绍了小鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作的改进方法,通过本方法可制备和观察到大量分散良好、背景清晰、染色体结构紧凑的睾丸细胞减数分裂各期分裂相,得到较好的实验效果。

关键词动物遗传学睾丸细胞减数分裂染色体改进中图分类号:G424 文献标识码:AAnimal Genetics Teaching Experiment "Mouse Testis MeioticChromosome Specimen" Methods ImprovementZHANG Yanjun, LAI Shuangying, SU Rui, ZHANG Wenguang(College of Animal Science, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot, Inner Mongolia 010018)Abstract "Preparation of meiotic chromosomes experiment" is an important part of animal genetics experiment course. This article describes the mouse testis meiotic chromosome specimen of the improved method, can be prepared by this method and observed a large number of well-dispersed, clear background, compact testicular meiotic chromosome structure of each phase of the division, get better experimental results.Key words animal genetics; testicular cells; meiosis; chromosome; improvement遗传学既是一门历史悠久的学科,又是一门发展迅速、实践性很强的学科,研究范围正在不断拓宽和深化,新技术、新方法不断涌现。

小鼠卵母细胞质内注射精子(ICSI)受精产仔

小鼠卵母细胞质内注射精子(ICSI)受精产仔

小鼠卵母细胞质内注射精子(ICSI)受精产仔李子义;周琪【期刊名称】《黑龙江动物繁殖》【年(卷),期】1995(0)4【摘要】1 前言动物显微操作协助受精技术的早期探索始于本世纪60年代,主要用于研究受精的早期事件,如同种和异种配子间膜的融合,卵质的活化以及雌、雄原核的形成等。

在哺乳动物方面,最早的工作是由Uehara和Yanagimachi(1976)完成的。

他们将人和仓鼠的精子注入仓鼠的卵母细胞以确定是否能发育形成原核(Iritani,1991;Ng等,1993)。

在人,早在1988年将精子注入卵胞质(ISCI)就已见到原核形成(Lanzendiorf等,1988)。

【总页数】2页(P18-45)【关键词】卵母细胞;质内注射;精子;小鼠;培养基配制;ICSI;哺乳动物;早期探索;受精技术;显微操作【作者】李子义;周琪【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】S814【相关文献】1.Sr2+辅助卵母细胞激活技术改善卵母细胞胞质内单精子注射受精失败患者的妊娠结局 [J], 钱云;陈娟;聂晓伟;谈勇;美马博史2.卵母细胞内单精子显微注射(ICSI)技术在治疗男性无精子症中的应用研究 [J], 刘伟信;黄萍;王丽3.精子和卵母细胞质量控制对山羊卵胞质内精子注射(ICSI)受精的影响 [J], 周佳勃;吴延光;韩东;刘丽清;谭秀文;刘娜;罗明玖;常仲乐;谭景和4.小鼠卵母细胞质内注射精子(IGSI)受精产仔 [J], 李子义5.在体外受精和卵母细胞单精子显微注射结局中由精子染色质散布试验测得的精子脱氧核糖核酸碎片水平的价值 [J],Muriel;L;Garrido;N;Fernández;J.;L;M.;Meseguer因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》范文

《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》范文

《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》篇一一、引言在生物学的众多研究领域中,转录因子对细胞内基因表达调控起着至关重要的作用。

转录因子TFⅡB作为其中一员,其在卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中扮演着重要的角色。

本文将详细探讨转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育的影响,以期为相关研究提供理论依据。

二、材料与方法1. 材料本实验选用小鼠作为研究对象,所需试剂包括TFⅡB蛋白、相关抗体、培养基等。

2. 方法(1)卵母细胞的收集与处理:从小鼠卵巢中收集卵母细胞,进行必要的处理以备后续实验使用。

(2)细胞培养与转录因子处理:将卵母细胞置于培养基中,分别对实验组和对照组进行TFⅡB蛋白的处理。

(3)观察与记录:通过显微镜观察并记录卵母细胞的减数分裂过程及早期胚胎发育情况。

(4)数据分析:对实验数据进行统计分析,比较实验组与对照组的差异。

三、实验结果与分析1. 卵母细胞减数分裂过程的影响实验结果显示,TFⅡB蛋白处理后的小鼠卵母细胞在减数分裂过程中表现出明显的差异。

实验组卵母细胞的减数分裂进程更加顺利,染色体排列整齐,分裂速度较快。

而对照组则出现了一定程度的减数分裂障碍,染色体排列紊乱,分裂速度较慢。

2. 早期胚胎发育的影响通过观察早期胚胎发育情况,发现实验组胚胎的发育速度和发育质量均优于对照组。

实验组胚胎在移植后,着床率和活胎率均显著提高。

而对照组则表现出一定程度的发育迟缓和发育异常现象。

3. 数据分析与结果解释通过对实验数据进行统计分析,发现实验组与对照组在卵母细胞减数分裂过程及早期胚胎发育方面存在显著差异。

这表明TFⅡB蛋白对小鼠卵母细胞的减数分裂及早期胚胎发育具有重要影响。

我们推测,TFⅡB蛋白可能通过调控相关基因的表达,进而影响卵母细胞的减数分裂进程和早期胚胎的发育质量。

四、讨论与结论1. 讨论本实验研究了转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育的影响,实验结果表明TFⅡB蛋白对卵母细胞的减数分裂进程和早期胚胎的发育质量具有重要影响。

《D4Mil1e调控小鼠雌性配子成熟及早期胚胎发育的机理研究》范文

《D4Mil1e调控小鼠雌性配子成熟及早期胚胎发育的机理研究》范文

《D4Mil1e调控小鼠雌性配子成熟及早期胚胎发育的机理研究》篇一一、引言在哺乳动物生殖生物学中,配子的成熟与早期胚胎发育是生殖过程中至关重要的环节。

D4Mil1e作为一种新近发现的调控因子,其在雌性配子成熟及早期胚胎发育过程中的作用逐渐受到关注。

本文以小鼠为研究对象,深入探讨D4Mil1e在雌性配子成熟及早期胚胎发育过程中的调控机理,以期为人类生殖医学提供理论依据和实践指导。

二、材料与方法2.1 实验动物选用健康的小鼠作为实验动物,按照实验要求进行分组和饲养。

2.2 实验方法(1)配子收集与处理:从小鼠卵巢中收集卵母细胞,分别在有无D4Mil1e干预的条件下进行培养,观察其成熟情况。

(2)胚胎培养与观察:将受精卵在含有不同浓度D4Mil1e 的培养基中进行培养,观察其发育情况。

(3)分子生物学技术:运用PCR、Western Blot等技术检测D4Mil1e相关基因及蛋白的表达情况。

(4)统计学分析:采用SPSS软件对实验数据进行统计分析。

三、实验结果3.1 D4Mil1e对雌性配子成熟的影响实验结果显示,在D4Mil1e的干预下,小鼠卵母细胞的成熟率显著提高,表明D4Mil1e对雌性配子成熟具有积极的调控作用。

3.2 D4Mil1e对早期胚胎发育的影响在含有D4Mil1e的培养基中培养的受精卵,其发育至囊胚阶段的比例明显高于对照组,说明D4Mil1e对早期胚胎发育具有促进作用。

3.3 分子机制探讨通过PCR和Western Blot等分子生物学技术检测发现,D4Mil1e能够上调相关基因及蛋白的表达,从而调控雌性配子成熟及早期胚胎发育。

具体机制可能涉及信号通路的激活、转录因子的表达等方面。

四、讨论本研究表明,D4Mil1e在小鼠雌性配子成熟及早期胚胎发育过程中发挥重要作用。

通过调控相关基因及蛋白的表达,D4Mil1e能够提高卵母细胞的成熟率和受精卵的发育能力。

这一发现为深入了解哺乳动物生殖过程中的调控机制提供了新的思路,也为人类生殖医学提供了理论依据和实践指导。

《CentromereproteinF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》范文

《CentromereproteinF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》范文

《Centromere protein F在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》篇一摘要:本文以Centromere protein F(CPF)为研究对象,深入探讨了其在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能。

通过运用现代分子生物学技术及显微操作技术,本研究对CPF在小鼠生殖细胞内的表达模式、调控机制及其对减数分裂进程和早期胚胎发育的影响进行了详细分析,以期为理解哺乳动物生殖机制及不孕不育等生殖疾病的诊治提供新的理论依据。

一、引言在哺乳动物生殖过程中,卵母细胞的减数分裂及早期胚胎发育是繁殖成功的关键环节。

Centromere protein F(CPF)作为染色体中心粒的主要组成部分,在染色体分离和细胞周期调控中发挥着重要作用。

近年来,CPF在小鼠生殖过程中的作用逐渐受到关注。

本研究旨在探究CPF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能。

二、材料与方法(一)材料本研究选用小鼠为实验动物模型,采用各种相关抗体、培养基以及试剂等。

(二)方法1. 利用免疫荧光、Western blot等技术检测CPF在小鼠卵母细胞及早期胚胎中的表达模式。

2. 通过显微操作技术观察CPF在减数分裂过程中的动态变化。

3. 采用基因敲除、过表达等技术手段,研究CPF对减数分裂进程和早期胚胎发育的影响。

4. 利用统计软件分析实验数据,探究CPF表达与生殖成功的关系。

三、结果与分析(一)CPF在小鼠卵母细胞及早期胚胎中的表达模式实验结果显示,CPF在小鼠卵母细胞及早期胚胎中呈现特定的表达模式。

在减数分裂过程中,CPF的表达水平随细胞周期的进展而发生变化,且在中心粒区域的分布尤为明显。

(二)CPF在减数分裂过程中的动态变化通过显微操作技术观察发现,CPF在减数分裂过程中参与染色体排列和分离等关键步骤,其动态变化与减数分裂进程密切相关。

(三)CPF对减数分裂进程和早期胚胎发育的影响基因敲除和过表达实验表明,CPF的缺失或过表达均会对减数分裂进程和早期胚胎发育产生显著影响。

《CentromereproteinF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》范文

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《Centromere protein F在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》篇一一、引言近年来,关于细胞生物学的研究日益深入,其中,细胞分裂和染色体行为是研究的重要领域。

Centromere protein F(CPF)作为染色体上的一种重要蛋白,在细胞分裂过程中起着关键作用。

本文旨在研究CPF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能。

二、文献综述CPF作为染色体上的关键蛋白,其功能涉及染色体稳定性和细胞分裂过程的调控。

在小鼠的生殖系统中,CPF在卵母细胞的减数分裂和早期胚胎发育过程中起着重要作用。

前人研究表明,CPF的缺失或异常表达会影响卵母细胞的成熟和胚胎的发育。

然而,CPF在此过程中的具体作用机制尚不明确,有待进一步研究。

三、研究方法本研究采用小鼠为研究对象,通过基因敲除、免疫荧光、显微镜观察等技术手段,对CPF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能进行研究。

具体方法包括:1. 构建CPF基因敲除小鼠模型;2. 利用免疫荧光技术检测CPF在卵母细胞中的表达情况;3. 通过显微镜观察CPF对卵母细胞减数分裂过程的影响;4. 分析CPF对早期胚胎发育的影响。

四、实验结果1. CPF在小鼠卵母细胞中的表达情况通过免疫荧光技术,我们发现CPF主要定位于小鼠卵母细胞的染色体上,且在减数分裂过程中表达量有所变化。

在减数分裂前期,CPF的表达量较高,随着减数分裂的进行,其表达量逐渐降低。

2. CPF对小鼠卵母细胞减数分裂过程的影响通过显微镜观察,我们发现CPF对小鼠卵母细胞的减数分裂过程具有重要影响。

在CPF基因敲除的小鼠中,卵母细胞的减数分裂过程出现异常,表现为染色体排列紊乱、纺锤体形成异常等现象。

这些结果表明,CPF在维持卵母细胞减数分裂过程的稳定性中起着重要作用。

3. CPF对早期胚胎发育的影响我们发现CPF对早期胚胎发育也具有重要影响。

在CPF基因敲除的小鼠中,早期胚胎发育受阻,表现为胚胎着床率降低、胚胎发育停滞等现象。

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《Centromere protein F在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》篇一摘要:本文以Centromere protein F(CPF)为研究对象,深入探讨了其在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能。

通过分析CPF在减数分裂染色体行为、纺锤体形成、早期胚胎发育过程中的作用,揭示了CPF在生殖细胞发育中的重要性。

本文采用分子生物学、细胞生物学及遗传学等方法,为研究CPF在生殖细胞发育中的功能提供了新的视角和理论基础。

一、引言Centromere protein F作为一种参与染色体凝聚、姐妹染色单体结合和维持基因组稳定性的关键蛋白,其在减数分裂及早期胚胎发育过程中发挥着至关重要的作用。

在卵母细胞的成熟及胚胎的早期发育中,精确的染色体行为和基因组的稳定性是确保胚胎正常发育的关键因素。

因此,研究CPF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能具有重要的科学意义和潜在的应用价值。

二、材料与方法本研究采用小鼠模型,通过分子生物学、细胞生物学及遗传学等方法,研究CPF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能。

具体包括构建CPF基因敲除小鼠模型,分析CPF缺失对卵母细胞减数分裂的影响;利用显微操作技术观察CPF在纺锤体形成和染色体排列中的作用;通过实时荧光定量PCR和免疫印迹技术检测CPF在早期胚胎发育过程中的表达变化等。

三、结果与讨论1. CPF在减数分裂中的作用本研究发现,CPF在小鼠卵母细胞减数分裂过程中起着关键作用。

CPF的缺失导致减数分裂异常,染色体排列紊乱,无法正常进行后期Ⅰ的分裂活动,影响配子的正常生成。

这一结果证实了CPF在染色体凝聚和姐妹染色单体结合过程中的重要性。

2. CPF与纺锤体形成和染色体排列通过对显微操作技术观察分析发现,CPF在纺锤体形成和染色体排列中起着重要作用。

CPF能够促进纺锤体的形成,并确保染色体在纺锤体上正确排列。

当CPF缺失时,纺锤体形成异常,染色体排列紊乱,进一步验证了CPF在维持基因组稳定性中的重要性。

《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》范文

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《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》篇一一、引言转录因子TFⅡB在生物体的基因表达调控中起着关键作用。

对于小鼠而言,其卵母细胞的减数分裂及早期胚胎发育是生殖生物学领域的重要研究课题。

本文旨在探讨转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育的影响,以期为揭示其作用机制及在生殖医学中的应用提供理论依据。

二、材料与方法1. 材料本实验所需材料包括小鼠卵母细胞、胚胎发育相关试剂等。

所有材料均经过严格筛选和质量控制,确保实验结果的准确性。

2. 方法(1)卵母细胞的收集与处理:从小鼠卵巢中收集卵母细胞,进行相关处理后进行实验。

(2)转录因子TFⅡB的表达调控:通过基因敲除、过表达等方法,调控TFⅡB的表达水平。

(3)减数分裂及早期胚胎发育的观察:利用显微操作技术,观察卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程。

(4)数据分析:采用统计学方法,对实验数据进行处理和分析。

三、实验结果1. TFⅡB对卵母细胞减数分裂的影响实验结果显示,TFⅡB的表达水平对卵母细胞的减数分裂具有显著影响。

在TFⅡB表达降低的小鼠中,卵母细胞的减数分裂进程受到阻碍,导致卵子质量下降;而在TFⅡB过表达的小鼠中,卵母细胞的减数分裂进程加快,但可能伴随异常分裂现象。

2. TFⅡB对早期胚胎发育的影响在早期胚胎发育阶段,TFⅡB的表达水平同样具有重要作用。

实验发现,TFⅡB表达适量的小鼠胚胎发育正常,而TFⅡB表达过高或过低的小鼠胚胎发育异常,表现为胚胎停育、畸形等现象。

3. 数据分析与统计通过统计学分析,我们发现TFⅡB的表达水平与卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育之间存在显著相关性。

具体数据详见附表。

四、讨论本研究表明,转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育具有重要影响。

在卵母细胞减数分裂过程中,TFⅡB 的表达水平需维持在适当范围,以保障正常的减数分裂进程。

同时,在早期胚胎发育阶段,TFⅡB的表达同样至关重要,适量的表达有助于胚胎的正常发育。

小鼠卵母细胞减数分裂细胞极性建立、纺锤体组装和染色体排列的研究

小鼠卵母细胞减数分裂细胞极性建立、纺锤体组装和染色体排列的研究
1.6 总结与展望 ......................................................................................................15
士 第二章 WHAMM 参与小鼠卵母细胞减数分裂纺锤体迁移和不对称 硕 胞质分裂的调控机制 ··························································17 博 2.1 引言 ..................................................................................................................17 学 2.2 材料方法 ..........................................................................................................18
学校编码:10384 学号:24520110154125
密级
博士学位论文

要 小鼠卵母细胞减数分裂细胞极性建立、纺锤 摘 体组装和染色体排列的研究
文 Regulation Mechanism of Cell Polarity, Spindle Assembly 论 and Chromosome Alignment in Mouse Oocytes
门 厦
声明人(签名): 年月日
目录
中文摘要 ···········································································I

《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》范文

《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》范文

《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》篇一一、引言转录因子TFⅡB在生物体的基因表达调控中起着关键作用。

对于小鼠而言,其卵母细胞的减数分裂及早期胚胎发育是生殖生物学的重要研究领域。

本文旨在研究转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育的影响,为深入了解其在生殖过程中的作用提供科学依据。

二、材料与方法1. 材料本实验选用健康成年小鼠作为实验对象,并准备相关试剂与设备。

2. 方法(1)通过基因编辑技术,构建TFⅡB基因敲除小鼠模型。

(2)对野生型和TFⅡB基因敲除型小鼠的卵母细胞进行收集与培养。

(3)观察并记录卵母细胞的减数分裂过程及早期胚胎发育情况。

(4)运用分子生物学技术,检测相关基因的表达水平。

(5)统计分析实验数据,比较两组小鼠在减数分裂及早期胚胎发育过程中的差异。

三、实验结果1. 卵母细胞减数分裂过程在减数分裂过程中,TFⅡB基因敲除小鼠的卵母细胞与野生型小鼠相比,表现出明显的异常。

具体表现为减数分裂进程受阻,染色体排列紊乱,第一极体未能正常排出等现象。

2. 早期胚胎发育情况在早期胚胎发育过程中,TFⅡB基因敲除小鼠的胚胎发育明显迟缓,且发育率显著低于野生型小鼠。

在显微镜下观察发现,敲除组胚胎的细胞分裂速度较慢,细胞数量较少,且部分胚胎出现凋亡现象。

3. 相关基因表达水平通过分子生物学技术检测发现,TFⅡB基因敲除小鼠的卵母细胞中相关基因的表达水平发生改变,与减数分裂及早期胚胎发育相关的基因表达受到抑制。

4. 统计分析通过统计分析实验数据,我们发现TFⅡB基因敲除小鼠在卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中与野生型小鼠存在显著差异(P<0.05)。

四、讨论根据实验结果,我们可以得出以下结论:转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞的减数分裂及早期胚胎发育具有重要影响。

TFⅡB 基因的缺失导致卵母细胞减数分裂进程受阻,染色体排列紊乱,第一极体无法正常排出。

同时,早期胚胎发育过程也受到影响,表现为发育速度降低、细胞数量减少以及部分胚胎出现凋亡现象。

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《Centromere protein F在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》篇一摘要:本文研究了Centromere protein F(CPF)在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能。

通过分子生物学、细胞生物学和遗传学等技术手段,我们深入探讨了CPF在染色体分离、纺锤体形成及早期胚胎发育的关键事件中的作用机制。

本研究不仅为理解减数分裂及早期胚胎发育提供了新的视角,也为CPF在辅助生殖技术中的应用提供了理论依据。

一、引言Centromere protein F(CPF)作为一类重要的染色体蛋白,在真核生物的细胞分裂过程中起着关键作用。

特别是在小鼠的卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中,CPF的定位和功能尤为重要。

然而,CPF的具体作用机制尚不完全清楚。

因此,本研究旨在探讨CPF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能。

二、材料与方法本研究采用小鼠模型,结合分子生物学、细胞生物学和遗传学等技术手段,对CPF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育的作用进行研究。

三、结果与讨论1. CPF在减数分裂中的作用我们首先观察到CPF在小鼠卵母细胞的染色体分离和纺锤体形成过程中的定位变化。

通过免疫荧光和Western blot等方法,我们发现CPF在减数分裂前期主要位于染色体上,而在减数分裂后期则与纺锤体形成密切相关。

这表明CPF在染色体分离和纺锤体形成过程中发挥了重要作用。

进一步的研究表明,CPF的缺失会导致染色体分离异常,纺锤体形成失败,从而影响卵母细胞的成熟和受精过程。

这表明CPF的缺乏将导致胚胎发育失败。

然而,具体机制仍需进一步研究。

2. CPF在早期胚胎发育中的作用通过构建CPF基因敲除小鼠模型,我们观察到CPF在早期胚胎发育中的重要作用。

在胚胎发育过程中,CPF参与了多个关键事件,如胚胎基因表达、细胞周期调控等。

我们发现CPF的缺失会导致胚胎发育受阻,尤其是在胚胎植入前的关键阶段。

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1 . 2中期I 和中期I I 染色体的制备
培养 1-2 小时后,卵母细胞自 8 0 发停滞于第二次减数分裂的中期.用链蛋白酶 E处理去除透明带,将第一 极体去除.以避免极休内染色体的干扰.若要得到第一次减数分裂中期相,可在培养液中加0 p / 秋水仙素 . g 2 ml 使卵母细胞停止在第一次减数分裂的中期. 制备中期I 染色体时,卵母细胞可在双蒸水中低渗处理 3-4 分钟( 0 0 去除透明带的中期I卵母细胞可在 1 I % 的柠檬酸钠中低渗) .用吸卵管吸取低渗较好的卵毋细胞于干净载玻片上,当溶液快干前,在解剖镜下将3: 的 1 甲醇 : 冰醋酸滴人固定,固定几次后更换为 1 I醇 : :1 冰醋酸.空气干燥后,G a1 9染液扣染 3 分钟, I I i (: ) c ms 0 自 来水冲洗数秒.晾干后观察.
①引级 木科生, 工作单位: 现 江苏省如皋市搬经 中学.
2 8

传 HE E I A (e ig 19 R D T S in) 6 B j 9
1卷 8
2结 果 一 讨 论 与
国内有关哺乳动物减数分裂染色体的研究,大多集中在雄性动物 ( ,可能是因为雌性动物的染色体制备相 2 ) 对困难的缘故.本研究的目的就在于建} L ' 一个相对简单易行的卵.: r细胞减数分裂染色体的制各方法r实验结果如 ; I 图1 所示,图 l 为 MI a 晚期的分裂相.表现出2 0对同源染色休相互配对的现象.由于小鼠是端着丝粒染色体, 因而1在分离的十字形的同源染色体配对特别清晰.图 l E b为ME分裂相。表现为姊妹染色单体尚未分离前的2 0 个姊妹染色体的形态.图 l 为第一次减数分裂早中期分裂相的C带图,可见尚存在交叉的终变期染色体和正在 c 分离的同禅染色体.每对同源染色体均有两个若丝粒,着丝粒的个数为 4. 0
过程中各时期染色休的标本,尤其是两次减数分裂中期染色休的制备尤为方便.并通过显示 C带进一步确定染 色休的数目, 可用于研究休外培养条件下各种因家对卵母细胞染色休的影响.
I材 料 与 方 法
1 . 1卵母细胞的获取和体外培养
取 1-2 9 2日龄的雌性昆明系小鼠,用5U/ 1 只孕马血清激索处理以促进卵泡发育.4 8小时后,颈部脱位法
遗传 HE E IA (eig 1( : 2 19 R D T S in) 6 2 8 6 Bj 8 ) 7 9
小鼠卵母细胞减数分裂染色体的制备
李朝军 袁来平① 张锡然 陈宜峰
《 南京师范大学生物系, 南京 209) 107
P eaai o Me t K rtp o Mo s O ct rprt n i i ayye ue ye o f o c f o
制备卵母细胞染色体时,有采用在小离心管低渗、固定 ( ,或在表而皿里低渗、固 ’ 〕 定方法 〔 ,其目的都 ) 5
是防止卵母细胞的丢失,我们在试验发现,山于卵母细胞本身的粘附作用和不同溶剂相的扰动,这些方法还是容 易造成细胞的丢失,所以我们采用低渗后放在载玻片上固定的方法.但是包含卵母细胞的液体,每滴尽量不超过 2 毫米直径.同时,固定时卵母细胞易随液休流动,极易造成染色休的-失.因此,必须等液滴的液休快千、卵 T : 毋细胞刚刚铺展在载玻片上时,用吸卵管滴加固定液.固定过程中不能让其千燥,固定时间宜长些,以去除卵母 细胞浓厚的细胞质.同时,将低渗后的卵毋细胞直接放在载玻片上固定不易造成卵毋细胞的丢失,并可在固定细
胞的地方作 记号 ,便于观 察 .
图 , 小鼠 J 减数分裂中 1 卵N细胞 期 晚期的 分裂相( 、中 1的分裂相( 及早中期分裂相的 C带(( 20 a ) 期 1 b ) ( x ) c 0 )
减数分裂染色休制备对研究减数分裂过程中雌性生琐细胞同源染色休联会,遗传物质交换以及染色体减数 ( 由二倍体减至单倍体) 等现象的规律.以及环境中各种诱变因子对其影响提供了方便, 特别是一些遗传病是由于 减数分裂过程中染色休分离不完全所致.如一些非整倍体的发生等 ( .所以,建立制备卵母细胞染色休方法, ‘ ) 根据卵母细胞减数分裂过程中染色休的变化研究一些染色体病的发病机理具有一定的意义.
P b ihn , . 一 14 u ls i g p 5 p 4 2. 〔 5〕 E c e lu 一 te U, ol 1 8 . yo e ei C l Ge e. 5 : 0-1 6 ih n a b Ru tr B l 1 9 9 C tg n tc l n t 2 1 - 7 . , e , 7 ( 6〕 E c e lu 一 te U, 9 . r mo o s d y S mn r a d h n l AC d . ih na b Ru tr 1 3 Ch o s me T a . 9 o u e AT n C a d y E s Ch p n d al e s L n o . i, D 3 3 3 6 a ma a H l P s, d n V. P . 一 3 . n r o i 2 本文于 1 9 9 5年 1 月 6日 收到 .1 9 1 9 6年 5月 2日修 回 .
哺乳动物的卵母细胞的减数分裂过程中存在两次自发的停滞现象,第一次是在第一次减数分裂前期的双线 期,这一静止期持续很长时间,一 直到动物性成熟后卵母细胞进人发育周期,在促性腺激家的作用下,卵母细胞 的第一次减数分裂才重新启动.完成第一次减数分裂后,又停滞在第二次减数分裂的中期.在精子或化学因素刺
激 作用 完 第二 减数 的 下, 成 次 分裂( . 此, p乳 物的 母 在一 条件 进 养, 制备 数 ) 4 因 对i 动 卵 细胞 定 下 行培 可 减 分裂 l l
L C a jn Ya L iig Z a g i n Ch n fn i ou h n cpn hn Xr a c Yi g e
( io y p r e t ni N r l i ri , nig 0 9) Bo g D at n o Naj g maUnv sy N j 2 07 l e m f n o e t a n 1
1 . 3染色体 C带的制备
取片龄在 I 周左右的染色休玻片标本,3: 的甲醉 : 1 冰醋酸固定液褪色 1 分钟.在 0 m l . o/ 2 L盐酸溶液中
室 温处理3 分钟,除去非酸性蛋白质.蒸馏水清洗后,于5℃的5 0 2 %的B(H: a )水浴中 O 处理6 分钟到8 分钟左
右,于6℃的 2 S 0 x C榕液中处理 2 S 小时,清恍后用3 %的Gi a e 染液染色 1 分钟,观察 ( . ms 5 I )参 考文献
( ) 王子淑编著,18 .人休及动物细胞遗 传学 实验技术, 1 97 成都: 四川 大学出版社. ( 〕 黄天华等,18 .遗传与疾病, () 14 2 97 43: . 7
( 〕 苏瑞珍, 3 何 建,18. 92 科学通报, 72) 12-12. 2(4: 3 54 5
( ) B o d r W t 19 .D vlp n a Boo yT i e i o ) S u d r C l g 4 r w e L e a, 1 e e me tl lg ( hr dt n, n es l e l 9 o i d i a oe
处死小鼠.将卵巢置于M2 培养液中,在实休解剖镜下除去输卵管及附着的 脂肪,用小号针头穿刺有腔卵泡,轻 轻挤压,外面 有卵丘细胞生长完全的卵母细胞从卵泡中 包围 逸出.用玻璃吸卵管将卵母细胞一一移出,置于M2
培养液中,用略小于卵母细胞直径的吸卵管轻轻吹打卵毋细胞。将外而的卵丘细胞去除.将卵母细胞置于覆盖有 石蜡油的微滴中,于3r, O: 7 5 - %C 的溉度饱和培养箱中培养,培养液为DME 4 / 牛血清白蛋白. M+mg l m
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