家兔基础实验操作及注意事项总结
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家兔基础实验操作及注
意事项总结
文件编码(GHTU-UITID-GGBKT-POIU-WUUI-8968)
基本技能操作经验总结(一)家兔的给药、基本手术及相关仪器的初步使用
1.家兔的捉拿
【实验方法】先轻轻打开笼门,勿使其受惊,随后手伸入笼内,从头前阻拦其跑动,一只手迅速抓住兔的颈背部的皮毛,慢慢提起家兔,然后用另一只手轻轻托住臀部,尽量使兔处在舒适、放松的状态。
【注意事项】避免抓住耳朵提拿家兔,这样不但会损伤家兔的耳朵,而且易引起家兔的紧张并激起挣扎和反抗。抓取动物时手法不当,动作过激导致家兔惊吓,产生强烈挣扎而长时间处于激动状态,大脑皮层细胞兴奋阈值增加,肾上腺素的释放,大脑中枢电位频率增高,大脑皮层运动区过度兴奋,导致麻醉效果不佳。
2.家兔的称重与放置
【实验方法】兔笼放置在电子秤上,去皮。将兔子脖子卡住兔笼头端的凹槽,盖上兔笼盖,使兔子呈趴伏状,记录数据。压住兔笼盖和后座,将兔笼转移到操作台准备实验。
【注意事项】兔笼重量提前去皮;尽量避免头尾不对应;时刻注意压住兔笼盖,避免转移途中兔子挣脱。
3.耳缘静脉麻醉
【实验方法】穿刺前准备工作:穿刺前应拔除待穿刺血管部位的兔毛,轻柔或以手指轻弹待穿刺的血管使其充血扩张,或用酒精棉球涂擦待穿刺的血管使血管扩张。
穿刺手法:左手食指和中指夹住静脉的近端,拇指绷紧静脉的远端,无名指及小指垫在下面,右手持头皮针尽量从静脉的远端刺入。若回抽注射器有暗红色血液流出或注射时若无阻力、无隆起现象,说明针头在血管内。移动拇指于针头上以固定针头,放开食指和中指,将药液缓慢注入,然后拔出针头,用手压迫针眼片刻。
注:本实验所用麻醉药——乌拉坦用药剂量为1000 mg/Kg。
【注意事项】1. 进针部位宜选择在耳缘静脉远心端的血管段,若穿刺失败,可向近心端前移一段再进行穿刺;
2.可利用酒精棉球擦拭使耳缘静脉血管扩张,便于操作;
3. 静脉注射必须缓慢(大概每分钟推送5ml ),同时观察家兔肌肉紧张、角膜反射和对皮肤夹捏的反应,当这些活动明显减弱或消失时,应立即停止注射。在注射麻醉药物时,可先用麻醉药物总量的三分之二,密切观察动物生命体征的变化,若已达到预计麻醉效果剩余药液可暂不注射,以避免麻醉过深抑制呼吸中枢导致动物死亡;
4.实验动物的固定
【实验方法】将动物麻醉后,仰卧位固定于手术台上,颈部伸直,口腔与气管成一直线,保持气管畅通。用粗麻绳打类蝴蝶结固定家兔四肢,用棉麻线套住家兔上切牙固定在兔台头端,使家兔四肢和头部伸展并固定。
【注意事项】1.打结最好打利于捆缚的结,避免家兔挣脱。2.尽量使颈部抻直,避免扭曲。
5.清理兔毛
【实验方法】使用弯头兔毛剪剪掉实验部位兔毛。
【注意事项】1.左手捏住要剪的兔毛,方便剪掉后及时清理。注意不要将兔毛掕起,这样容易剪到皮肤和皮下神经,引起兔子的强烈挣扎。2.尽量清理干净,并且避免兔毛乱飞,可在废物桶中加水防止兔毛乱飘。
6.组织切开
【实验方法】1.组织切开的一般原则
(1)根据实验目的要求确定手术切口的部位和大小。如肾切除取左背部斜切口,肠切除取腹正中切口。
(2)根据不同部位的切口采用不同的执刀方法,常用的执刀方法有三种,如图1。
【注意事项】
(1)切开前,应先将切口部位的皮肤(或其他组织)拉紧,使其平坦紧张而固定。
(2)刀刃与切开的组织垂直,以一次切开为佳。
(3)组织要逐层切开,并以按皮肤纹理或各组织的纤维方向切开为佳。
图1执刀方法和组织切开方法
(4)组织的切开处应选择无重要血管及神经横贯的地方,以免将其损伤。
(5)选择切口时,应注意选择易于敷料或导管包扎和固定的部位。避免术后动物活动时被碰撞、磨擦而脱落。
7.组织分离
【实验方法】分离目的在于充分显露深层的组织或血管,便于手术操作。
1.组织分离的一般原则
(1)根据不同部位手术的需要采用不同的分离方法。常用的分离方法有两种:①用刀或剪作锐性分离,用剪割的方式将组织分离。该方法常用于致密组织,如皮肤、韧带、筋膜等的分离。②用止血钳、手指或刀柄等将组织推开或牵拉开的钝性分离。该法多用于皮下组织、肌肉筋膜间隙等疏松组织的分离。
(2)沿正常组织间隙分离。这样易于分离,且出血少,视野干净、清楚。
【注意事项】
(1)肌肉的分离应顺肌纤维方向作钝性分离。若需要横行切断分离,应在切断处上下端先夹两把血管钳,切断后结扎两断端以防止肌肉中血管出血。
(2)神经、血管的分离应顺其平行方向分离。要求动作轻,柔,细心操作,不可避暴,切忌横向过分拉扯,以防断裂。
8.气管内插管
【实验操作】气管插管的目的主要是为了辅助呼吸、测定气道压力、通气量以及描记呼吸曲线等。
⑴气管的暴露和分离切开皮肤后,对肌肉、气管、血管和神经的分离应用止血钳进行钝性分离。钝性分离皮下组织,暴露颈部肌肉,分开颈部正中肌群即可看到气管。在甲状腺下1~处,用止血钳将气管后的软组织稍加分离,在气管下穿二条较粗的结扎线,准备结扎固定气管插管之用。
⑵气管插管在甲状腺以下约1~2 cm处,用手术剪将气管软骨环剪一倒“T”型切口,剪开气管口径约一半以上,用棉签向肺方向擦净气管内分泌物,然后再向肺方向插入气管插管。用已穿好的粗线扎紧后,再在插管的侧管上打结,以防插管脱出。
【注意事项】1.切忌粗暴操作,小心勿伤及甲状腺及气管两侧后方的静脉;
2. 不要在软骨环之间的气管组织切开,因此处血管较多,如仍有出血,可用温湿纱布压拨迫片刻,同时将兔台后部抬高,使兔头位置低下,以防止血液流入气管造成窒息,出血停止后再做插管;
3. 插管前注意检查气管内有无内分泌物,有的话先清理气管后插管;插管后,若气管内分泌物或血液较多,可用一细塑料管从插管的侧管处将液体吸出。
4. 用已穿好的粗线扎紧后,再在插管的侧管上打结,以防插管脱出;
5. 气管插管的过程中应随时注意观察动物的呼吸变化。最好隔一段时间放开被夹闭的Y型管软管,避免人为性呼衰。
9.颈总动脉的分离及插管
【实验操作】沿胸锁乳突肌前缘分离胸骨舌骨肌与胸骨甲状肌之间的结缔组织,在肌缝下找到呈粉红色较粗血管,用手指触之有搏动感,即为颈总动脉。分离颈总动脉时应选在距甲状腺以下较远地方开始,防止将甲状腺前动脉切断,用玻璃分针轻轻分离该动脉与神经之间结缔组织,切勿损伤血管和神经。在分离好的颈总动脉下面穿过两根结扎线,先结扎远心端,再用动脉夹夹闭血管近心端。于远心端结扎线前用眼科剪呈45°角做V型切口,剪开血管管径的1/3~1/2。将准备就绪的动脉导管插入血管2cm~3cm,用备用线将导管与血管牢固结扎并与远心端结扎线连接扎紧,以防导管滑脱出血管。取下动脉夹,可见导管中有动脉回血,并随心跳而搏动。用少许肝素将回血推回血管内,实时观察血压。【注意事项】1. 分离颈总动脉时应选在距甲状腺以下较远地方开始,防止将甲状腺前动脉切断,并且切勿损伤血管和神经。伴行血管的一束神