最新大肠杆菌及其检验
检测大肠杆菌的方法
检测大肠杆菌的方法
检测大肠杆菌的方法包括以下几种：
1. 化学方法：使用化学试剂检测大肠杆菌的生长产物，例如检测β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）或亚硝酸盐的产生。
2. 免疫学方法：使用抗原抗体反应来检测大肠杆菌的存在。
可以通过免疫层析试纸、酶联免疫吸附试验（ELISA）或免疫荧光染色等技术进行检测。
3. 分子生物学方法：使用DNA提取和PCR扩增技术，通过特定基因的检测来确定大肠杆菌的存在。
常用的是检测16S rRNA基因。
4. 血液培养法：将样品接种到含有适合大肠杆菌生长的培养基上，经过一段时间后观察是否有菌落形成。
5. 基于大肠杆菌特定生理和生化特征的传统方法：根据大肠杆菌在营养琼脂培养基上形成金属光泽、产生气泡、使用L-色氨酸作为唯一氮源，以及产生酸和气体等特征来进行初步检验。
这些方法可以单独或结合使用来对大肠杆菌进行检测，并能够提供快速、准确的结果。
大肠杆菌检查新标准
大肠杆菌检查新标准
大肠杆菌（Escherichia coli）是一种广泛存在于自然环境中的细菌，它们在人类和动物的肠道中起着重要的生理作用。
然而，某些菌株可能会引起食物中毒或其他健康问题。
因此，对大肠杆菌的检测和监测至关重要。
近年来，随着食品安全和公共卫生意识的提高，对大肠杆菌的检测标准也在不断更新和提升。
新的检测标准不仅仅是为了更好地保护消费者的健康，也是为了确保食品安全和质量。
新的大肠杆菌检查标准主要包括以下几个方面：
1. 检测方法的改进，传统的大肠杆菌检测方法可能存在一定的局限性，新的标准要求采用更为灵敏和准确的检测方法，如PCR技术、质谱分析等，以提高检测的准确性和可靠性。
2. 检测指标的扩展，除了对大肠杆菌本身的检测外，新的标准还可能要求对大肠杆菌的毒素、耐药性等指标进行检测，以更全面地评估食品的安全性。
3. 检测标准的严格化，新的标准可能会对检测结果的合格标准
提出更为严格的要求，以确保食品中大肠杆菌的含量在安全范围内。
4. 监测频率的增加，针对一些易感染大肠杆菌的食品或环境，
新的标准可能会要求增加监测频率，以更及时地发现和控制潜在的
风险。
总的来说，新的大肠杆菌检查标准的提出，是为了更好地保障
食品安全和公共健康。
只有严格执行这些标准，才能有效地防范大
肠杆菌污染带来的食品安全问题，保障消费者的健康权益。
大肠杆菌的检测及原理
大肠杆菌的检测及原理1.检测原理：大肠菌群是一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。
食品中的大肠菌群数系以100ml(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。
2.仪器设备与器具：2.1 恒温培养箱：36±1℃。
2.2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
2.3 接种针。
2.4 显微镜。
2.5 超净工作台。
2.6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
2.7 天平：感量0.01g。
2.8 灭菌釜。
2.9 培养皿（直径为90mm）、试管，经121℃、30分钟灭菌。
2.10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片3.培养基及试剂：3.1 乳糖胆盐发酵管：按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.2 伊红美兰琼脂平板：按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.3 乳糖发酵管：按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.4 革兰氏染色液。
3.4.1 结晶紫染色液：结晶紫1g95%乙醇20ml1%草酸铵水溶液80ml将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。
3.4.2 革兰氏碘液：碘1g碘化钾2g蒸馏水300ml将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300 ml。
3.4.3 沙黄复染液：沙黄0.25g95%乙醇10ml蒸馏水90ml将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。
3.5 生理盐水。
4.检验程序：检样稀释↓乳糖胆盐发酵管，36±1℃，24±2hr ↓不产气产气↓大肠菌群阴性伊红美兰琼脂平板，36±1℃，24±2hr报告↓ ↓革兰氏染色乳糖发酵管，36±1℃，24±2hr ↓ ↓ ↓G+ G-，无芽孢杆菌产气不产气大肠菌群阴性大肠菌群阴性报告大肠菌群阳性报告5.测定方法：5.1 检样稀释：5.1.1 以无菌操作将检样25ml(或25g)放于含有225ml灭菌生理盐水的灭菌塑料烧杯中，经充分振摇成1：10均匀稀释液。
致病性大肠埃希氏菌及其检验
致病性：（1）致 病因素
LT与ST的比较
特性
分子量 耐热性 免疫原性 B亚单位受 体
致病机理
不耐热肠毒素
耐热肠毒素
较大，73000
较小，1500-5000
不耐热
耐热
有
无
肠黏膜GM1神经节苷酯 肠黏膜GM1神经节苷酯
活化细胞腺苷酸环化酶，活化细胞鸟苷酸环化酶，
细胞内cAMP含量升高， 细胞内cGMP含量升高，
原理：伊红美蓝琼脂平板含伊红和美蓝染料，在此亦作为指示剂。 大肠菌群发酵乳糖造成酸性环境时，故可染上酸性染料伊红，又因 伊红与美兰结合（该两种染料即结合成复合物）使大肠菌群产生带 核心的、有金属光泽的深紫色的（龙胆紫的紫色）阳性菌落，从菌 落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光。在伊红美兰平板上的典 型菌落呈紫黑色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常有金属光泽。 有的由于被检样品影响，亦呈现紫色、粉紫、中心灰紫、无黑心、 湿润等，常为大肠杆菌，均应注意挑选。
革兰氏阴性杆菌
革兰氏 阳性杆 菌
大肠杆菌扫 描电镜照片源自大肠杆菌 透射电镜 照片大肠杆菌革兰氏染色照片
大肠杆菌平 板菌落照片
一、埃希氏菌属生物学特性
生化特性
一．可发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇产酸产气，有些不典型的菌株不发酵或 迟缓发酵乳糖；
二．不同菌株对蔗糖，卫矛醇、水杨苷发酵结果不一致; 三．本菌可使赖氨酸脱鞍、不能使苯丙氨酸脱羧。 四．不产生H2S，不液化明胶，不分解尿素;
二、致病性大肠埃希氏菌的检验
（二）、分离培养
将乳糖胆盐发酵阳性管液与增菌液分别划线接种于麦 康凯或伊红美兰琼脂平板上。 2、于36±1℃培养 18—24小时观察菌落对于污染严重的食品可直接按 划线法接种，不经过增菌过程。不但要注意乳糖发酵 的菌落，同时也要注意乳糖不发酵的菌落。
大肠杆菌检测实验报告
大肠杆菌检测实验报告大肠杆菌检测实验报告引言：大肠杆菌是一种常见的细菌，存在于人体和动物的肠道中。
尽管大肠杆菌在正常情况下对人体无害，但某些菌株可能会引起严重的食物中毒。
因此，对食品和饮用水中的大肠杆菌进行检测至关重要。
本实验旨在通过不同的检测方法，了解大肠杆菌的存在和浓度。
材料与方法：1. 食品和饮用水样本：我们选择了市场上常见的食品和饮用水样本，包括蔬菜、水果、肉类和瓶装水。
2. 大肠杆菌培养基：我们使用了含有大肠杆菌特异性营养物质的培养基。
3. 培养皿和培养试管：用于培养大肠杆菌。
4. 显微镜和染色剂：用于观察和鉴定大肠杆菌。
实验步骤：1. 样本准备：我们将食品和饮用水样本分别取样，并放入培养皿或培养试管中。
2. 培养：将样本放入预先准备好的大肠杆菌培养基中，然后将培养皿或培养试管放入恒温培养箱中，以促进大肠杆菌的生长。
3. 观察：在培养一段时间后，我们使用显微镜观察培养皿或培养试管中的样本。
为了更好地观察大肠杆菌，我们使用染色剂对样本进行染色。
4. 记录：记录观察到的大肠杆菌数量和形态特征。
结果与讨论：通过对不同食品和饮用水样本进行大肠杆菌检测，我们观察到了以下结果：1. 蔬菜和水果样本中的大肠杆菌数量较高。
这可能是因为蔬菜和水果在生长和加工过程中接触到了土壤或污染的水源。
2. 肉类样本中的大肠杆菌数量较低。
这可能是因为肉类在加工过程中经过了高温处理，杀死了大部分的细菌。
3. 瓶装水样本中没有观察到大肠杆菌。
这是因为瓶装水在生产和包装过程中经过了严格的卫生控制。
通过本实验，我们可以得出结论：大肠杆菌在食品和饮用水中的存在是普遍的，但其浓度和数量因样本类型而异。
这提醒我们在选择和处理食品和饮用水时要格外注意卫生和安全。
结论：本实验通过采用大肠杆菌检测方法，对不同食品和饮用水样本进行了分析。
结果表明，大肠杆菌在食品和饮用水中存在普遍，但其浓度和数量因样本类型而异。
这对我们提醒了食品安全和卫生的重要性。
大肠杆菌检测ppt课件
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实验准备（2个样品/组）
培养皿：10套/组 无菌水：10支（9毫升/支） 乳糖胆盐发酵培养基： 100ml 18支试管、5ml/支 伊红美蓝琼脂培养基（EMB）:
200ml 8-10个平板
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下周实验
实验八 化学药剂对微生物生长的影响
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2
完整最新1版100课0 件
3
≥24000
10 30
30 70
40 100
40 70 150
70 140 300
150 300 350
360 710 1500
360 370
440 890
470 1500
1200 1300 3800
2100 2300 3800
3800 4400 4700
13000
24000
样品中大肠菌群系以100mL（g）检样内大 肠菌群最大可能数（MPN)表示。
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细菌学检验程序
细菌总数
水样稀释或不稀释
倾注平板培养 37 ℃ 24小时
样品
大肠菌群
水样稀释或不稀释
第一步------ 初步发酵试验 （乳糖发酵）
37℃ 24小时
菌落计数 （取平均数报告）
第二步------ 平板分离培养 （转种鉴别培养基） 37℃ 24小时 革兰染色镜检
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3.分离培养
将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，置 36℃±1℃温箱内，培养18h—24h，然后取出，观察菌 落形态并做革兰氏染色和证实试验。
4.证实试验
在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落1—2个进行革兰 氏染色，同时接种乳糖发酵管，置36℃±1℃的温箱内 培养24h±2h，观察产气情况。
大肠杆菌检验方法
大肠杆菌检验方法
大肠杆菌(Escherichia coli)是一种革兰氏阴性的厌氧菌，常常被用作指示性微生物来评估食品和水源的卫生质量。
以下是常见的大肠杆菌检验方法：
1. 培养基方法：将样品接种在包含大肠杆菌生长所需营养物质的培养基上，如大肠杆菌选择性琼脂培养基(MacConkey琼脂培养基)和EC培养基等。
大肠杆菌能够利用琼脂中的乳糖发酵产生酸，导致培养基呈现红色或粉红色。
此外，EC 培养基还包含了可以检测大肠杆菌β-葡萄糖苷酶的亚甲基红试剂，如果大肠杆菌存在，则培养基呈现金属光泽。
2. 确认方法：对落有培养基上的鲜艳深色菌落进行进一步确认。
典型的确认方法包括革兰染色、目测观察形态特征、氧化发酵试验和测试产气杆菌酶试验。
3. PCR检测方法：利用聚合酶链反应(PCR)技术，从样品中扩增大肠杆菌特异性基因片段（如16S rRNA基因），然后通过凝胶电泳检测扩增产物。
4. 快速方法：如免疫层析试纸法和光学组织测定法。
免疫层析试纸法利用抗大肠杆菌抗体与大肠杆菌特异性抗原结合生成可视化结果。
光学组织测定法利用大肠杆菌的β-葡萄糖苷酶水解比色底物产生颜色变化。
这些方法都可用于检测大肠杆菌在食品和水源中的存在及其数量。
在进行检验时，应严格遵守相关的操作规程和实验室操作规范，以确保结果的准确性和可靠性。
大肠杆菌检测实验报告
大肠杆菌检测实验报告一、实验目的掌握大肠杆菌的检测方法，了解其在水质检验中的重要性。
二、实验原理1. 大肠杆菌大肠杆菌是一种常见的肠道杆菌，是一类嗜热性、厌氧性以及革兰阴性杆菌。
该菌种常常是肠道菌群的组成部分，同时也是水污染的重要指示菌之一。
（1）标准培养基法经过富营养培养基的生长，大肠杆菌会形成显性和隐性的群体。
这种检测方法适用于水质样本、地球样品以及饮用水。
（2）膜过滤法样品通过过滤器滤过后，将过滤后的膜放入培养基上培养。
这种方法既适合于生物质量较小的样品，也适用于分析浓度高的样品。
（3）MPN法通过使用3组不同浓度的小管，并观察哪个浓度的小管有生长曲线的所有格子都被满足，来计算菌落形成单位的浓度。
可以适用于样品浓度较低的环境。
三、实验操作1. 实验材料大肠杆菌标准菌株、优化阳性对照菌株、培养基、蒸馏水、实验器材、滤纸、吸管、离心机、洗涤液和细胞硬度试剂。
2. 实验步骤（1）制备纯菌液：将大肠杆菌基配合缓冲液跳接种到营养琼脂平板上，并在37℃的恒温培养箱中培养过夜。
将菌落划入脱色水中，通过洗涤和离心的方式，获得纯化的细胞菌悬液。
（2）制备样品：将需要检测的水样分别过滤，过滤膜使用巨孔滤纸。
滤膜被慢慢放在脱色水上U型板中间的孔里，然后浸泡（3）培养过程: 将U型板接入温度为37℃的有氧培养箱内，在24 - 48小时内观察细菌进行生长，并做出相应的计数和检测。
四、实验结果与分析按照实验操作规程进行样品处理和培养后，确认样品中是否存在大肠杆菌。
如果在实验中产生的试样中出现了大肠杆菌生长，且其生长优于阳性对照；或者在某些水样中不能检测出大肠杆菌，说明该水质品质不满足相关规范的要求。
五、实验结论本实验通过不同的大肠杆菌检测方法，较为全面地了解了大肠杆菌的检测方法及其在水质检验中的重要性。
在实验的基础上，我们有理由相信，通过科学准确的操作，人们可以更好地保证饮用水的健全和安全。
大肠杆菌及其检验
3、EMB平板 EMB平板 EMB
取其产气管的培养物划线接种于伊红美蓝(EMB)平 板,36±1℃培养24±2h。 检查平板上有无具黑色中心有光泽或无光泽的典型 菌落。 如有典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个典型菌 落；如无典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个可 疑菌落。用接种针接触菌落中心部位,移种到营养琼 脂斜面上,36±1℃培养18～24h。
三、大肠杆菌的检验方法
1、样品制备 以无菌操作取25 g样品,放入装有225 mL稀释 剂的灭菌均质杯内,于8000 r/min均质1～ 2min,制成1:10样品匀液(也可用灭菌乳钵研 磨的方法代替)。从制备样品匀液至稀释完毕, 全过程不得超过15min。
2、LST和EC初步筛选 LST和EC初步筛选
对每个样品,选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释 液。每个稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白(月 示)(LST)肉汤,每管接种1mL。将接种管置于36±1℃培 养48±2h。 观察试管的产气情况：检查倒管内是否有气泡产生, 用直径为3mm的接种环将所有48±2h内产气的LST肉汤 管培养物移种于EC肉汤管中。将所有接种的EC肉汤管 在30min内放入带盖44.5±0.5℃水浴箱内,培养48±2h。
大肠杆菌及其检 验
一、大肠杆菌的生物学特性
1、简介 大肠埃希氏菌习惯称为大肠杆菌，分类于肠杆菌科， 归属于埃希氏菌属，大肠杆菌为人和动物肠道中的 常居菌，一般多不致病，在一定条件下可引起肠道 外感染。 2、形态与染色 大小0.4～0.7×1～3um,无芽胞,大多数菌株有动力。 有普通菌毛与性菌毛，有些菌株有多糖类包膜，革 兰氏阴性杆菌
3、培养特性 由于此菌合成代谢能力强，在含无机盐、胺 盐、葡萄糖的普通培养基上生长良好。 最适生长温度为37℃，在42-44℃条件下仍能 生长，生长温度范围为15-46℃。
大肠杆菌检验流程
大肠杆菌检验流程
嘿，咱今天就来唠唠大肠杆菌检验流程这事儿哈！你说这大肠杆菌啊，就像个调皮的小捣蛋，看不见摸不着的，可得把它给揪出来才行呢！
咱先得准备好各种家伙什儿，就像战士上战场得拿好武器一样。
什么培养皿啦、培养基啦，都得齐全咯。
然后呢，就该采集样本啦！这就好比去抓小捣蛋的踪迹，得找对地方。
比如从食品啊、水啊这些地方去弄点样本回来。
接着，把样本放到培养基里，就像给小捣蛋找个家，让它能在里面好好待着。
这时候啊，就等着它慢慢长大啦。
培养了一段时间后，咱就得瞪大眼珠子仔细瞧啦！看看有没有可疑的小菌落长出来。
这就跟在一群孩子里找那个最调皮的一样，得有双火眼金睛。
要是发现有像大肠杆菌的菌落，那可别着急下结论哦！还得做进一步的鉴定呢。
就像警察抓小偷，得有确凿的证据才行。
可以做一些生化试验呀，看看它符不符合大肠杆菌的特点。
这可不能马虎，万一弄错了，那不就闹笑话啦！
要是确定了就是大肠杆菌，那可就得重视起来咯！这可不是闹着玩的，万一它在食品里或者水里捣乱，那可会让人生病的呀！
你想想，要是吃了有大肠杆菌的食物，那肚子还不得翻江倒海呀！所以这检验流程可太重要啦，就像给我们的健康上了一道保险。
咱平时生活里可不能小瞧了这些看不见的小东西，得时刻保持警惕。
就像家里进了老鼠，你不把它找出来能安心吗？
总之啊，大肠杆菌检验流程虽然听起来有点复杂，但只要咱一步一步认真去做，肯定能把这个小捣蛋给抓住！咱可不能让它在咱的生活里胡作非为，对吧？大家都要重视起来哦！
原创不易，请尊重原创，谢谢!。
大肠杆菌检验法分析
大肠杆菌检验法分析大肠杆菌能产生B-葡萄糖醛酸昔酶，能把4-甲基散形酮-葡萄糖醛酸昔酶（MUG）分解为4-甲基散形酮，该分解产物在366 nm紫外光激发下，产生灰蓝色荧光，即为大肠杆菌阳性反应；如果没有产生灰蓝色荧光，则为阴性反应。
基于此，采用MUG试剂为底物制成培养基，以快速检查大肠杆菌，同时设空白对照组，并与部颁方法进行比较。
1检验方法1.1菌株大肠杆菌标准株（44102）由中国药品生物制品检定所提供，其余7株大肠杆菌由长春市药品检验所提供。
1.2供试品六味地黄丸、百合固金丸、益坤丸、牛黄上清丸、牛黄清胃丸、金匾肾气丸、银翘解毒丸、人参归脾丸、舒肝丸共9种，均由本院药房提供[1]。
1.3培养基肉汤、肉汤琼脂、胆盐乳糖（BL）增菌液、伊红美蓝（EMB）琼脂等，均按《药品卫生检验方法》制备。
MUG培养基：pH 7.6～7.8，MUG 0.075 g，氯化钙0.05 g，硫酸胺5 g，磷酸二氢钾0.9 g，硫酸锰0.005 g，硫酸氢二钠6.2 g，硫酸锌0.005 g，亚硫酸钠0.04 g，硫酸镁0.1 g，蒸馏水1000 mL，氯化钠10 g，琼脂（斜面培养基用）15 g。
制法：除MUG外，各成分溶解于1000 mL 水中，校正pH，加人MUG溶解后，每管分装5 mL，115℃灭菌15 min。
1.4菌液配制取经36℃培养18～24 h大肠杆菌肉汤培养物，稀释成10-7（含菌50～100个/mL）备用[2]。
1.5供试液制备按部颁方法制成1∶10供试液备用。
1.6部颁方法分别加供试液各10 mL于2瓶胆盐乳糖（BL）增菌液中，其中一瓶菌液（10-7）而混匀，同置36℃培养24 h，按部颁方法检查大肠杆菌，见表1。
1.7取上述2种培养物摇匀分别取0.2 mL，接种在MUG斜面培养基和MUG 液体培养基中，同置36℃培养，观察培养3、5、10、解h后的荧光反应，见表1。
2讨论采用MUG液体培养基，较固体斜面培养基的实验反应灵敏，对认为染菌的检品，一般5～24 h能在紫外光（366 nm）下观察到很强的灰蓝色荧光，即为阳性反应，本次式样认为污染大肠杆菌的8只检品，MUC法均呈阳性，经部颁法确认无误。
实验七大肠杆菌检测
目录
CONTENTS
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 实验总结与注意事项
01 实验目的
了解大肠杆菌的特性
大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，通常与人类肠道共生，但在某些情况下也可能引 起食物中毒和肠道感染。
大肠杆菌有多种类型，其中一些类型对人体有害，如肠产毒素大肠杆菌（ETEC）和 肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）。
采集可能含有大肠杆菌的样品， 如食品、水、土壤等。
样品处理
将采集的样品进行稀释、过滤等 处理，以便后续的增菌培养。
增菌培养
01
将处理后的样品接种在含有选择 性培养基的试管中，进行增菌培 养。
02
在适宜的温度下培养一段时间， 使大肠杆菌得以增殖。
分离培养
将增菌培养后的培养基进行划线分离 ，得到单菌落。
大肠杆菌对热敏感，在适宜的温度下容易繁殖，因此是食品卫生检测的重要指标之 一。
学习并掌握大肠杆菌的检测方法
01
02
03
培养法
通过将样品接种到选择性 培养基上培养，观察菌落 形态和生化反应来鉴定大 肠杆菌。
免疫学方法
利用抗体和抗原的特异性 结合，通过免疫学技术检 测样品中的大肠杆菌抗原 或抗体。
分子生物学方法
对于易燃、易爆、有毒 有害的化学品应妥善保 管，避免发生意外事故。
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THANKS
本实验包括样品采集、增菌培养、分离纯 化、生化鉴定和结果观察等步骤。
实验结果
实验意义
通过本实验，我们成功检测出样品中存在 大肠杆菌污染，并对其进行了分离纯化和 生化鉴定。
本实验对于保障食品安全和水质卫生具有 重要意义，为预防和控制食源性和水源性 疾病提供了科学依据。
实验报告大肠杆菌(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解大肠杆菌的形态特征和生理特性；2. 掌握大肠杆菌的培养和鉴定方法；3. 熟悉微生物实验室的基本操作技能。
二、实验原理大肠杆菌（Escherichia coli）是一种革兰氏阴性杆菌，广泛存在于人类和动物的肠道中。
它是研究细菌生理、遗传、代谢等领域的模式生物。
本实验通过观察大肠杆菌的形态特征，培养和鉴定大肠杆菌，了解其生理特性。
三、实验器材与试剂1. 器材：显微镜、培养箱、无菌操作台、接种环、试管、锥形瓶、吸管、酒精灯、培养皿、pH试纸等。
2. 试剂：LB培养基、无菌生理盐水、无菌水、革兰氏染色液、甲基红、吲哚、硫化氢试剂等。
四、实验步骤1. 大肠杆菌的形态特征观察（1）取一小段大肠杆菌菌落，置于载玻片上；（2）滴加适量生理盐水，用接种环轻轻搅拌；（3）将载玻片置于显微镜下观察，观察菌体的形态、大小、排列等特征。
2. 大肠杆菌的培养（1）将LB培养基倒入锥形瓶中，置于121℃高压蒸汽灭菌锅中灭菌20分钟；（2）待培养基冷却至50℃左右，加入适量的无菌生理盐水；（3）将灭菌后的锥形瓶放入无菌操作台，用无菌吸管取少量大肠杆菌菌落，接种于锥形瓶中的培养基中；（4）将锥形瓶放入培养箱中，37℃培养18小时。
3. 大肠杆菌的鉴定（1）将培养18小时的大肠杆菌菌液，用无菌生理盐水稀释至适当浓度；（2）取适量稀释液，滴加于革兰氏染色液；（3）观察菌体的革兰氏染色结果，判断菌体是否为革兰氏阴性；（4）取适量稀释液，滴加于甲基红试剂、吲哚试剂、硫化氢试剂，观察反应结果，判断菌体是否具有相应的生化特性。
五、实验结果与分析1. 大肠杆菌的形态特征观察在显微镜下观察，大肠杆菌呈短杆状，两端钝圆，大小约为0.5μm×1.0μm，排列呈链状。
2. 大肠杆菌的培养培养18小时后，菌液呈均匀浑浊状，说明大肠杆菌在LB培养基中生长良好。
3. 大肠杆菌的鉴定革兰氏染色结果：菌体呈红色，为革兰氏阴性。
大肠杆菌群检验的实验原理
大肠杆菌群检验的实验原理大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道细菌，广泛存在于人类和动物的肠道中。
大肠杆菌群检验是一种用于研究肠道菌群组成和功能的实验方法。
本文将从实验原理、样本采集、实验步骤、结果解读和临床应用等方面进行详细介绍。
实验原理：大肠杆菌群检验主要通过对肠道中细菌的DNA进行测序和分析来研究菌群组成和功能。
尤其是通过对16S rRNA基因序列进行分析，可以确定细菌的分类学信息，从而了解菌群的组成。
在这个实验中，主要使用PCR扩增和高通量测序技术。
1. 样本采集：在进行大肠杆菌群检验之前，需要采集肠道样本。
常见的采集方法包括粪便、肠黏膜组织和大肠黏膜刷取等。
样本采集要注意无菌操作，避免外源性细菌的污染。
2. 实验步骤：（1）DNA提取：首先需要提取样本中的DNA，这可以通过商业DNA提取试剂盒来完成。
提取的DNA浓度和质量要满足后续PCR扩增和测序的要求。
（2）PCR扩增：通过设计引物，选择16S rRNA基因的特异性区域进行扩增。
PCR反应体系中加入模板DNA、引物、dNTPs和DNA聚合酶。
PCR反应的温度和循环次数通过程序设定。
（3）PCR产物纯化：将PCR扩增产物纯化，去除引物和杂质。
可以使用DNA 凝胶电泳和商业纯化试剂盒来进行纯化操作。
（4）高通量测序：纯化后的PCR产物进行高通量测序，可以采用Illumina MiSeq 或Ion Torrent等测序平台。
测序后得到的数据包括原始测序片段和测序质量值。
3. 结果解读：经过测序平台生成的数据可以通过特定的分析流程进行处理和解读。
首先将原始测序片段进行质控和过滤，去除接头序列和低质量序列。
然后对质控后的测序片段进行聚类和分类，可以使用聚类算法（如CD-HIT和UPARSE）和数据库（如Greengenes和SILVA）来进行分类鉴定。
最后，通过比较分析菌群间的差异，在样本之间实施群落结构和功能的比较。
4. 临床应用：大肠杆菌群检验可以用于研究肠道菌群与人类健康和疾病之间的关系。
大肠杆菌检测国家标准
大肠杆菌检测国家标准
首先，大肠杆菌检测国家标准要求对食品和水质中的大肠杆菌进行定量检测。
这意味着需要准确测量样品中大肠杆菌的数量，以评估其是否超过了安全标准。
这项标准的制定，能够有效地防止因大肠杆菌超标而引发的食品安全事件，保障公众的身体健康。
其次，大肠杆菌检测国家标准要求检测方法的准确性和可靠性。
为了确保检测
结果的准确性，标准明确了检测方法的操作流程、仪器设备的要求以及质控措施等。
这些严格的要求能够保证检测结果的可靠性，为食品生产企业和监管部门提供了科学依据。
此外，大肠杆菌检测国家标准还规定了对检测人员的资质和培训要求。
只有经
过专业培训并取得相应资质的检测人员，才能进行大肠杆菌的检测工作。
这一举措能够保证检测人员具备足够的专业知识和操作技能，提高检测结果的可信度。
除了食品和水质中的大肠杆菌检测，大肠杆菌检测国家标准还对相关产品和设
备进行了规范。
例如，对于用于大肠杆菌检测的培养基、试剂盒、检测仪器等产品，标准对其质量和性能提出了明确的要求，以确保其在检测过程中的有效性和稳定性。
总的来说，大肠杆菌检测国家标准的制定和执行，对于保障食品和水质安全，
预防疾病传播，维护公众健康具有重要意义。
这一标准的实施，不仅能够提高食品生产企业的自律管理水平，也能够为监管部门提供科学依据，有效防范食品安全风险，保障公众的健康权益。
在未来，我们应该进一步完善大肠杆菌检测国家标准，不断提高检测方法的灵
敏度和准确性，加强对检测人员的培训和管理，推动大肠杆菌检测技术的创新和发展，为保障食品和水质安全做出更大的贡献。
大肠杆菌的快速鉴定和穿刺培养实验的研究
大肠杆菌的快速鉴定和穿刺培养实验的研究1 前言大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，周身鞭毛，能运动，无芽孢。
主要寄生在大肠内。
它侵入人体一些部位时，可引起感染，如腹膜炎、胆囊炎、膀胱炎及腹泻等。
人在感染大肠杆菌后的症状为胃痛、呕吐、腹泻和发热。
感染可能是致命性的，尤其是对孩子及老人。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。
因此快速、方便、灵敏的鉴定出大肠杆菌是食品行业的关键。
2、实验方法2.1鉴定实验2.1.1 M试验在无菌条件下，用小砂轮开启安瓶，取待检物0.2ml，接种至安瓶内用无菌棉将安瓶口封盖，置于36±1℃培养5小时~24小时，在365nm紫外灯光下观察有无荧光，同时用未接种的安瓶做对照。
呈现荧光为阳性，简称M阳性；不呈现荧光为M阴性。
样品瓶呈现明显的荧光，为M阳性；对照瓶不产生荧光。
见图一所示。
2.1.2 I试验观察后，沿培养管的管壁加入1-3滴靛基质试液，轻缓摇动，观察液面颜色。
液面出现玫瑰红环为阳性，简称I阳性；呈试剂本色，为I阴性。
样品瓶呈现玫瑰红环，为I阳性，对照瓶呈试剂本色。
见图二所示。
2.2 穿刺实验采用完全培养基，琼脂量在0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%进行穿刺实验琼脂量在0.5%以上的因为培养基硬度较大，限制了自由运动。
见图三所示琼脂加量左边为0.3%，右边为0.5%。
由图三可以看出，左侧试管中沿穿刺线向周围扩散生长，而右侧试管则边缘整齐。
这是因为大肠杆菌为周身鞭毛，其运动向周围扩散生长。
3 结果3.1 鉴定实验结果判断：M阳性、I阳性报告检出大肠杆菌。
通过实验证实M-I实验法对大肠杆菌的鉴定具有快速、方便、灵敏、假阳性少的优点，在食品致病菌快速检验领域具有广泛的应用前景。
3.2 大肠杆菌为周身鞭毛，将大肠杆菌穿刺接种于0.3%的琼脂半固体培养基中，它将沿穿刺线向周围扩散生长。
大肠杆菌的检验注意事项
大肠杆菌的检验注意事项大肠杆菌是一种存在于人和动物的肠道中的细菌，虽然在正常情况下不会对人体造成危害，但一旦进入食物或饮水中，可能引起食源性疾病。
因此，对大肠杆菌的检验显得十分重要。
以下是大肠杆菌检验注意事项。
1. 检验标本的采集：大肠杆菌的检验通常需要使用粪便和食物等标本进行检测。
在采集粪便标本时，应避免混入尿液，最好在清洁的容器中收集。
而对于食物等标本，需要注意避免污染和保存合适。
2. 仪器与设备的维护：对于进行大肠杆菌检验的仪器和设备，需要定期进行维护和保养，以确保其准确性和可靠性。
在使用前需要对仪器进行校准，并在使用过程中进行质控检验。
3. 检验环境的清洁：在进行大肠杆菌检验时，需要确保检验环境的清洁和卫生。
避免交叉污染，减少误差的发生。
4. 检验人员的培训：进行大肠杆菌检验的人员需要接受专业的培训，掌握操作技能和检验流程，了解常见的检验误差和处理方法。
5. 检验流程的规范：在进行大肠杆菌检验时，需要按照标准的检验流程进行，严格遵守操作规程，确保检验结果的准确性和可靠性。
6. 质控的执行：在进行大肠杆菌检验时，需要执行严格的质控程序，包括使用质控品进行校准和验证，监测每一批检验样本的质量控制结果，以及对异常结果的处理和追踪。
7. 结果的解释：对于大肠杆菌检验结果的解释需要慎重，需要结合临床病史和其他相关检验结果进行综合分析，避免误诊或漏诊的发生。
8. 结果的报告：对于大肠杆菌检验结果的报告，需要确保结果准确、清晰、及时，帮助临床医生进行诊断和治疗决策。
综上所述，对大肠杆菌的检验需要严格遵守操作规程和质控要求，确保检验结果的准确性和可靠性，为临床诊断和治疗提供可靠的支持。
大肠杆菌检测方法
大肠菌群及检验一、大肠菌群介绍大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。
调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因.粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多.大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。
大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物,其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外,同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性.大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。
二、大肠菌群检验方法：由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，即：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。
目前国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准.两个标准方法在检测程序上略有不同.（一）国家标准：国家标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。
乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。
36±1℃培养48±2h，观察是否产气.分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。
大肠杆菌检验标准
大肠杆菌检验标准通常包括以下步骤：
采集样品：从待检测的食品、水源等中采集样品。
分离培养：将样品进行分离培养，以获得纯培养物。
初步鉴定：通过形态学、生化反应等方法对培养物进行初步鉴定，确认是否为大肠杆菌。
血清学鉴定：采用血清学方法对初步鉴定结果进行进一步确认，以确定大肠杆菌的血清型。
抗菌药物敏感试验：对分离出的大肠杆菌进行抗菌药物敏感试验，以确定哪些抗菌药物对该菌株有效。
报告结果：将检测结果报告给相关部门或客户，以指导临床治疗或采取相应的卫生措施。
需要注意的是，大肠杆菌检验标准可能因不同的国家或地区而有所差异，具体的检验方法和步骤也可能因不同的标准而有所不同。
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大肠杆菌及其检验大肠杆菌及其检验大肠杆菌的生物学特性•简介：大肠埃希氏菌习惯称为大肠杆菌，分类于肠杆菌科，归属于埃希氏菌属，并且大肠杆菌株ATCC 11775是该属的模式菌种。
附：肠杆菌科各属大肠杆菌的不同菌株间DNA相关性为80%，而与同科的志贺氏菌属（除鲍氏志贺氏菌外）的DNA相关性可达80-87%。
大肠杆菌为人和动物肠道中的常居菌，一般多不致病，在一定条件下可引起肠道外感染。
•形态与染色大小0.4～0.7×1～3um,无芽胞,大多数菌株有动力。
有普通菌毛与性菌毛，有些菌株有多糖类包膜，革兰氏阴性杆菌。
附：有动力是什么意思？请看动力试验。
革兰氏阴性杆菌是什么意思？请看革兰氏染色介绍。
大肠杆菌扫描电镜照片大肠杆菌透射电镜照片大肠杆菌分裂照片最新：大肠杆菌革兰氏染色照片•培养特性由于此菌合成代谢能力强，在含无机盐、胺盐、葡萄糖的普通培养基上生长良好。
最适生长温度为37℃，在42-44℃条件下仍能生长，生长温度范围为15-46℃。
在普通营养琼脂上生长表现3种菌落形态：（1）光滑型：菌落边缘整齐，表面有光泽、湿润、光滑、呈灰色，在生理盐水中容易分散。
（2）粗糙型：菌落扁平、干涩、边缘不整齐，易在生理盐水中自凝。
（3）粘液型：常为含有荚膜的菌株。
此菌兼性厌氧，在有氧条件下生长良好，最适生长pH为6.8-8.0，所用培养基pH为7.0-7.5,若pH值低于6.0或高于8.0则生长缓慢。
附：菌落形态有什么用处？菌落形态学生化反应大部分菌株发酵乳糖产酸产气，并发酵葡萄糖、麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气。
IMViC试验为“+、+、-、-”。
即为典型大肠杆菌。
•抗原构造比较复杂，主要由菌体O抗原、鞭毛H抗原、夹膜K抗原组成。
•抵抗力该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55℃经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。
在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低的粪便中存活更久。
对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感，但易耐药，是由带有R因子的质粒转移而获得的。
致泻性大肠杆菌简介大肠杆菌为人和动物肠道中的常居菌，一般多不致病，在一定条件下可引起肠道外感染。
某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，与人类疾病有关的大肠杆菌，统称为致泻性大肠杆菌（enterovirulent E. coli ）。
一般包括四种：肠毒素性大肠杆菌（ETEC）致病性大肠杆菌（EPEC）出血性大肠杆菌（EHEC）侵袭性大肠杆菌（EIEC）。
（1）肠产毒性大肠杆菌（Enterotoxigenic E. coli,ETEC）：引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度水泻，也可呈严重的霍乱样症状。
腹泻常为自限性，一般2～3天即愈。
营养不良者可达数周，也可反复发作。
致病因素是LT或ST，或两者同时致病。
有些菌株具有定居因子，常见者为O6：K15：H16、O25：K7：H42。
鉴定ETEC主要测定大肠杆菌肠毒素，血清型有一定参考意义。
（2）肠致病性大肠杆菌（Enteropathogenic E.coli,EPEC）:是婴儿腹泻的主要病原菌，有高度传染性，严重者可致死；成人少见。
细菌侵入肠道后，主要在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖。
切片标本中可见细菌粘附于绒毛，导致刷状缘破坏、绒毛萎缩、上皮细胞排列紊乱和功能受损，造成严重腹泻。
EPEC不产生LT或ST。
有人报道，EPEC可产生一种由噬菌体编码的肠毒素，因对Vero细胞（绿猴肾传代细胞）有毒性，故称VT毒素。
VT毒素的结构、作用与志贺氏毒素相似，具有神经毒素、细胞毒素和肠毒素性。
鉴定EPEC可根据临床表现与血清型。
(3)肠侵袭性大肠杆菌（Enteroinvasive E.coli,EIEC）:EIEC的多数菌株无动力，生化反应和抗原结构均近似痢疾杆菌，应予注意。
（4）肠出血性大肠杆菌（Enterohemorrhagic E.coli,EHEC）:引起散发性或暴发性出血性结肠炎，可产生志贺氏毒素样细胞毒素。
EHCO的主要菌型是O157：H7，还可有O26、OⅢ等。
附：肠出血性大肠杆菌O157:H7介绍。
此外，肠粘附性大肠杆菌（Enteroadhesive E.coli,EAEC）也可引起腹泻，但对其发病机理与血清型尚不了解。
EAEC不侵入肠上皮细胞，不产生LT 或ST，也无VT毒素。
唯一特征是具有与Hep-2细胞（人喉上皮细胞癌细胞系）粘附的能力，故也称Hep-2细胞粘附性大肠杆菌。
表：引起急性腹泻的大肠杆菌大肠杆菌的检验方法SN 0169—92出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法GB/T 4789.6—1994 食品卫生微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验以SN标准方法为例，进行说明。
样品制备：以无菌操作取25 g样品,放入装有225 mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000 r/min均质1～2min,制成1:10样品匀液(也可用灭菌乳钵研磨的方法代替)。
稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计,用稀释剂将样品匀液制成一系列十倍递增的样品稀释液,如10**-2、10**-3、10**-4……。
从制备样品匀液至稀释完毕,全过程不得超过15min。
附：这是一种9管MPN法测定方法，什么是MPN法？LST和EC初步筛选：对每个样品,选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。
每个稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤,每管接种1mL。
将接种管置于36±1℃培养48±2h。
观察试管的产气情况：检查倒管内是否有气泡产生,用直径为3mm的接种环将所有48±2h内产气的LST肉汤管培养物移种于EC肉汤管中。
将所有接种的EC肉汤管在30min内放入带盖44.5±0.5℃水浴箱内,培养48±2h。
附：LST肉汤、EC肉汤有些什么？EMB平板：取其产气管的培养物划线接种于伊红美蓝(EMB)平板,36±1℃培养24±2h。
检查平板上有无具黑色中心有光泽或无光泽的典型菌落。
如有典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个典型菌落；如无典型菌落,则从每个平板上至少挑取2个可疑菌落。
用接种针接触菌落中心部位,移种到营养琼脂斜面上,36±1℃培养18～24h。
附：怎样进行平板划线分离？平板划线示例EMB平板原理及照片生化试验：将斜面培养物移种到下列培养基中进行生化试验。
1 色氨酸肉汤：在36±1℃培养24±2h后,加Kovacs氏试剂0.2～0.3mL,上层出现红色为靛基质阳性反应。
附：靛基质试验原理及照片2 MR-VP培养基：在36±1℃培养48±2h。
以无菌操作移取培养物1 mL至13mm×100mm试管中,加5％α-萘酚乙醇溶液0.6mL,40％氢氧化钾溶液0.2mL 和少许肌酸结晶,振摇试管后静置2h,如出现伊红色,为VP试验阳性。
将MR-VP培养物的剩余部分再培养48h滴加5 滴甲基红溶液。
如培养物变红色,为甲基红试验阳性,若变黄色则为阴性反应。
附：MR-VP试验原理及照片3 Koser氏枸椽酸盐肉汤：于36±1℃培养96h记录有无生长。
附：枸椽酸盐利用试验原理及斜面显色照片4 LST肉汤：于36±1℃培养48±2h,观察试管中是否产气。
5 革兰氏染色：取18h营养琼脂斜面培养物作革兰氏染色。
大肠杆菌为革兰氏阴性。
大肠杆菌与非大肠杆菌生化鉴别如下：━━━━━━┳━━━━━━┳━━━━━━┳━━━━━━┳━━━━━━━━━靛基质┃ MR ┃ VP ┃枸椽酸盐┃ 鉴定(型别)━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━━━━＋┃＋┃ －┃ －┃典型大肠杆菌－┃ ＋┃ －┃ －┃非典型大肠杆菌━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━━━━＋┃＋┃－┃ ＋┃典型中间型－┃＋┃ －┃ ＋┃非典型中间型━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━━━━－┃－┃＋┃＋┃典型产气肠杆菌＋┃－┃ ＋┃ ＋┃非典型产气肠杆菌━━━━━━┻━━━━━━┻━━━━━━┻━━━━━━┻━━━━━━━━━如出现上表以外的生化反应类型,表明培养物可能不纯,应重新划线分离,必要时做重复试验。
结果报告：大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢杆菌,发酵乳糖产酸产气,IMViC试验为＋＋－－或－＋－－,再根据LST肉汤阳性管数查MPN表,报告每克(毫升)样品中大肠杆菌MPN值。
致泻性大肠杆菌的检验（GB方法简介）增菌以无菌手续称取检验25g，加在225mL营养肉汤中，以均质器打碎1min或用乳钵加灭菌砂磨碎。
取出适量，接种乳糖胆盐培养基，以测定大肠菌群MPN，其余的移入500mL广口瓶内，于36±1℃培养6h。
挑取1环，接种于1管30mL肠道菌增菌肉汤内，于42℃培养18h。
分离将乳糖发酵阳性的乳糖胆盐发酵管和增菌液分别划线接种麦康凯或伊红美蓝琼脂平板；污染严重的检样，可将检样匀液直接划线接种麦康凯或伊红美蓝平板，于36±1℃培养18～24h，观察菌落。
不但要注意乳糖发酵的菌落，同时也要注意乳糖不发酵和迟缓发酵的菌落。
附：麦康凯琼脂平板照片EMB平板原理及照片生化试验:自鉴别平板上直接挑取数个菌落分别接种三糖铁琼脂(TSI)或克氏双糖铁琼脂(KI)。
同时将这些培养物分别接种蛋白胨水、半固体、pH7.2尿素琼脂、KCN肉汤和赖氨酸脱羧酶试验培养基。
以上培养物均在36℃培养过夜。
TSI斜面产酸或不产酸，底层产酸，H2S阴性，KCN阴性和尿素阴性的培养物为大肠埃希氏菌。
TSI底层不产酸，或H2S、KCN、尿素有任一项为阳性的培养物，均非大肠埃希氏菌。
必要时做氧化酶试验和革兰氏染色。
附：三糖铁琼脂(TSI)原理及照片克氏双糖铁琼脂照片尿素酶试验原理及照片半固体培养基的作用？血清学试验假定试验：挑取经生化试验证实为大肠埃希氏菌的琼脂培养物，用致病性大肠埃希氏菌、侵袭性大肠埃希氏菌和产肠毒素大肠埃希氏菌多价O血清和出血性大肠埃希氏菌O157血清做玻片凝集试验。
当与某一种多价O血清凝集时，再与该多价血清所包含的单价O血清做试验。
如与某一个单价O血清呈现强凝集反应，即为假定试验阳性。
证实试验：制备O抗原悬液，稀释至与Mac Farland3号比浊管相当的浓度。
原效价为1：160～1：320的O血清，用0.5%盐水稀释至1：40。
稀释血清与抗原悬液在10mm×75mm试管内等量混合，做单管凝集试验。
混匀后放于50℃水浴箱内，经16h后观察结果。
如出现凝集，可证实为该O抗原。
附：致泻性大肠杆菌及O血清。
肠毒素试验（产毒素性大肠杆菌）（LT－不耐热肠毒素，ST－耐热肠毒素）1 酶联免疫吸附试验检测LT和ST。