土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4028
土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:UPLC-MS-4028规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体3mL×1瓶(自备)2-8℃保存试剂二液体30mL×1瓶2-8℃保存试剂三粉剂×2瓶-20℃保存试剂四液体60mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂一:甲苯自备。
2、试剂三:临用前取1瓶加入10mL蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂-20℃分装保存4周。
3、标准品:5mmol/L的对硝基苯酚溶液。
产品说明:β-木糖苷酶(EC3.2.1.37,β-XYS)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。
另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。
S-β-XYS催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在400nm处有特征吸收峰,测定400nm光吸收增加速率,可计算S-β-XYS活性。
S-β-XYSP-Nitrophenol-β-D-Xyloside P-Nitrophenol(400nm)注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、30-50目筛、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30-50目筛。
二、测定步骤1、分光光度计预热30min,波长调至400nm,蒸馏水调零。
2、标准溶液的稀释:临用前取20μL5mmol/L的对硝基苯酚溶液,加入980μL试剂二,充分混匀,配制成100μmol/L标准液使用,现用现配。
土壤脲酶活性测定(改良靛酚蓝比色法)
土壤脲酶的测定方法(改良靛酚蓝比色法)一、原理以尿素为底物,经培养后根据脲酶酶促产物--氨(忽略硝化过程造成的氨氮损失)在碱性介质中与苯酚、次氯酸钠作用生成蓝色的靛酚。
该生成物数量与氨浓度成正比。
后即称为靛酚蓝比色法,其结果精确性较高,重现性较好,在脲酶活性测定中的应用最为广泛。
二、试剂1)甲苯1ml/ps注:甲苯易挥发,要在通风条件好的地方操作。
2)5%尿素:称取5g尿素,用水溶至100ml。
10ml/ps3)柠檬酸盐缓冲液(PH6.7):184g柠檬酸和147.5g氢氧化钾(KOH)溶于蒸馏水。
将两溶液合并,用1mol/LNaOH将PH调至6.7,用水稀释定容至1000ml。
20ml/ps注:柠檬酸和氢氧化钾混合时大量放热,需小心缓慢混合,冷却后定容。
4)苯酚钠溶液(1.35mol/L):62.5g苯酚溶于少量乙醇,加2ml甲醇和18.5ml丙酮,用乙醇稀释至100ml(A液),存于冰箱中;27gNaOH溶于100ml水(B液)。
将A、B溶液保存在冰箱中。
使用前将A液、B液各20ml混合,用蒸馏水稀释至100ml。
4ml/ps注:实际配比为:125g苯酚+4ml甲醇+37ml丙酮+25ml乙醇,混合溶解为A液。
54g氢氧化钠溶解为B液,冷却后备用。
A+B,定容至1000ml即得苯酚钠溶液。
苯酚有毒,常温下凝固,不宜称取,需小心。
5)次氯酸钠溶液:用水稀释试剂,至活性氯的浓度为0.9%,溶液稳定。
3ml/ps注:一般次氯酸钠溶液瓶上标注为活性≥5.5%,163.64ml次氯酸钠定容至1000ml。
6)氮的标准溶液:精确称取0.4717g硫酸铵溶于水并稀释至500ml,得到1ml含有0.2mg 氮的标准液;再将此液稀释10倍(吸取5ml标准液定容至100ml)制成氮的工作液(0.01mg/ml)。
二、器材50ml三角瓶,50ml容量瓶,漏斗,25ml试管,定量滤纸,振荡器,分光光度器四、操作步骤1)称取5g过1mm筛的风干土样于50ml三角瓶中,加1ml甲苯,振荡均匀,盖好;注:实际称取2g土。
土壤脲酶活性测定(改良靛酚蓝比色法)
土壤脲酶的测定方法(改良靛酚蓝比色法)一、原理以尿素为底物,经培养后根据脲酶酶促产物--氨(忽略硝化过程造成的氨氮损失)在碱性介质中与苯酚、次氯酸钠作用生成蓝色的靛酚。
该生成物数量与氨浓度成正比。
后即称为靛酚蓝比色法,其结果精确性较高,重现性较好,在脲酶活性测定中的应用最为广泛。
二、试剂1)甲苯1ml/ps注:甲苯易挥发,要在通风条件好的地方操作。
2)5%尿素:称取5g尿素,用水溶至100ml。
10ml/ps3)柠檬酸盐缓冲液(PH6.7):184g柠檬酸和147.5g氢氧化钾(KOH)溶于蒸馏水。
将两溶液合并,用1mol/LNaOH将PH调至6.7,用水稀释定容至1000ml。
20ml/ps注:柠檬酸和氢氧化钾混合时大量放热,需小心缓慢混合,冷却后定容。
4)苯酚钠溶液(1.35mol/L):62.5g苯酚溶于少量乙醇,加2ml甲醇和18.5ml丙酮,用乙醇稀释至100ml(A液),存于冰箱中;27gNaOH溶于100ml水(B液)。
将A、B溶液保存在冰箱中。
使用前将A液、B液各20ml混合,用蒸馏水稀释至100ml。
4ml/ps注:实际配比为:125g苯酚+4ml甲醇+37ml丙酮+25ml乙醇,混合溶解为A液。
54g氢氧化钠溶解为B液,冷却后备用。
A+B,定容至1000ml即得苯酚钠溶液。
苯酚有毒,常温下凝固,不宜称取,需小心。
5)次氯酸钠溶液:用水稀释试剂,至活性氯的浓度为0.9%,溶液稳定。
3ml/ps注:一般次氯酸钠溶液瓶上标注为活性≥5.5%,163.64ml次氯酸钠定容至1000ml。
6)氮的标准溶液:精确称取0.4717g硫酸铵溶于水并稀释至500ml,得到1ml含有0.2mg 氮的标准液;再将此液稀释10倍(吸取5ml标准液定容至100ml)制成氮的工作液(0.01mg/ml)。
二、器材50ml三角瓶,50ml容量瓶,漏斗,25ml试管,定量滤纸,振荡器,分光光度器四、操作步骤1)称取5g过1mm筛的风干土样于50ml三角瓶中,加1ml甲苯,振荡均匀,盖好;注:实际称取2g土。
土壤脲酶活性的测得
靛酚蓝比色法测定土壤脲酶的活性一、实验目的:1. 测定土壤脲酶活性的意义。
2. 掌握测定土壤脲酶活性的原理和方法。
二、实验原理靛酚蓝比色法的基本原理是:被测物浸提剂中的NH4+,在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚反应,生成水溶性染料靛酚蓝,其深浅与溶液中的NH4+-N含量呈正比,线性范围为0.05~0.5mg/l之间。
靛酚蓝反应原理如下: NH3 + OCl——NH2 Cl +OH-三、实验试剂1) 10%尿素:称取10g尿素,用蒸馏水溶至100ml。
2)柠檬酸盐缓冲液(PH=6.7):184克柠檬酸和147.5克氢氧化钾溶于蒸馏水。
将两溶液合并,用1mol/LNaOH将PH调至6.7,用水稀释至1000毫升。
3)苯酚钠溶液(1.35mol/L):62.5克苯酚溶于少量无水乙醇,加2毫升甲醇和18.5毫升丙酮,用无水乙醇稀释至100毫升(A),存于冰箱中;27克NaOH溶于100毫升水(B)。
将AB溶液保存在冰箱中。
使用前将2溶液各20毫升混合,用蒸馏水稀释至100毫升。
4)次氯酸钠溶液:用水稀释试剂至活性氯的浓度为0.9%,溶液稳定。
5)氮的标准溶液(0.1mg/ml):精确称取0.4717克硫酸铵溶于水并稀释至1000ml,得到1ml含有0.1mg氮的标准液。
四、实验过程1.标准曲线的测定吸取10ml氮的标准溶液定容至100ml,摇匀。
从其中分别吸取0,1.00,3.00,5.00,7.00,10.00ml移至50ml比色管中,加水至20ml,再加入4ml苯酚钠,充分混合。
加入3ml次氯酸钠,充分摇荡,放置20分钟,用水稀释至刻度。
将显色液在可见分光光度计上于578nm处,以1cm比色皿进行比色测定,以试剂空白为参比。
以标准溶液氮含量为横坐标,以吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。
2.土样中脲酶活性的测定分别称取2g过1mm筛的风干土样于3个100ml锥形瓶中,向其中加入1ml甲苯,以使土样全部湿润为宜。
土壤脲酶测定
土壤脲酶测定一、实验目的1.了解土壤中脲酶的活性及其对氮素转化的重要作用;2.通过脲酶测定,评估土壤中氮素的转化和利用效率;3.为制定合理的施肥和作物管理措施提供依据。
二、实验原理脲酶是一种能够催化尿素分解的酶,在土壤中起着至关重要的作用。
它能够将尿素分解成氨和二氧化碳,释放出的氨可以被植物吸收利用。
因此,脲酶的活性可以反映土壤中氮素转化的能力。
本实验采用靛酚比色法测定脲酶活性。
该方法基于脲酶催化尿素分解产生的氨与靛酚反应生成靛酚蓝,其颜色深浅与脲酶活性呈正比。
通过比色法可以测定样品中脲酶的相对活性。
三、实验步骤1.样品采集与处理:选取具有代表性的土壤样品,将其风干、磨碎并过筛。
称取适量样品于试管中,加入适量的磷酸盐缓冲液,充分搅拌均匀。
2.实验溶液配制:配制尿素溶液(100mmol/L)和靛酚溶液(0.05mol/L)。
3.对照试验:取一支试管,加入等体积的磷酸盐缓冲液和尿素溶液,充分混合后放置在30℃恒温箱中30分钟。
然后加入靛酚溶液并充分混合,放置10分钟。
最后加入适量碳酸钠溶液,使溶液呈碱性,终止反应。
以靛酚蓝为标准品,在625nm波长下测定吸光度。
4.样品试验:取适量样品于试管中,加入等体积的磷酸盐缓冲液和尿素溶液,充分混合后放置在30℃恒温箱中30分钟。
然后按照对照试验的步骤加入靛酚溶液并测定吸光度。
5.数据记录与处理:记录对照试验和样品试验的吸光度值,计算脲酶活性。
四、结果分析1.对照试验与样品试验吸光度值的差异反映了样品中脲酶的活性。
对照试验中,由于没有脲酶的作用,尿素分解较慢,因此靛酚与氨的反应较慢,吸光度值较低。
而在样品试验中,由于样品中存在脲酶,脲酶催化尿素分解加速,导致靛酚与氨的反应加快,吸光度值较高。
2.通过比较对照试验和样品试验的吸光度值,可以计算出样品的脲酶活性。
具体计算方法为:脲酶活性(mg/g·h)= [(样品吸光度-对照吸光度)/(对照吸光度×时间×样品质量)]×100%。
1.脲酶活性测定 尿素残留量法
脲酶活性测定(尿素残留量法)(Tabatabai,1994)1.原理:通过对新鲜土壤与尿素溶液在37︒C培养5h后测尿素残留量,估计脲酶的活性。
2. 仪器:50ml 容量瓶;培养箱或恒温水浴;沸水浴;分光光度计3. 试剂(所用试剂均为分析纯)1.) 尿素溶液:称取2.0 g 尿素,用700 ml 水溶解,定容1000 ml,低温保存备用。
2.) 氯化钾(2.0 mol L-1)-乙酸苯汞溶液:称1500g氯化钾溶于9L水中,再加入1L 乙酸苯汞(PMA)(称取50mg乙酸苯汞溶入1L水中)。
3.)显色剂:在进行显色反应之前,将25ml 二乙酰一肟和10ml 氨基硫脲加入到500ml 混酸溶液中,即配即用。
(a.二乙酰一肟(DAM):称2.5g二乙酰一肟溶于100ml 水中; b.)氨基硫脲(TSC)溶液:称0.25g 氨基硫脲溶于100ml 水中; c.)混酸溶液:取磷酸(85%)600ml 和浓硫酸20ml,加入到200ml水中,再用水定容至1000ml。
)5.)尿素标准溶液:称干燥过的尿素0.2500g溶于约750ml的氯化钾-乙酸苯汞溶液中,并用该溶液定容至1L。
在冰箱中保存。
配制标准溶液系列:将尿素标准溶液用氯化钾-乙酸苯汞稀释10倍。
分别吸取0,1,2,4,6,8ml 该溶液至50 ml 容量瓶中,并用KCl-PAM 溶液补至10ml。
然后和样品同时加入显色剂30 ml、进行30 min沸水浴及冷却后定容和比色。
4. 步骤称取相当于5g干重的新鲜土样(<2 mm )放置于150 ml 具塞三角瓶中, 加入5 ml 尿素溶液(试剂1), 混匀,塞上瓶塞,在37 ︒C条件下培养5 h. 加入50 ml 的氯化钾-乙酸苯汞溶液,盖上瓶塞后在振荡机上振荡1h后过滤.分析仪上测定(或采用手动方法:吸取滤液1-2ml(最多含200μg尿素)放入50 ml 容量瓶中,并加入氯化钾-乙酸苯汞溶液10 ml 和显色剂30 ml。
土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0120规格:50T/24S产品内容:试剂一:甲苯10mL×1瓶,4℃保存;(自备)试剂二:粉剂×1瓶,临用前加入20mL蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;试剂三:液体65mL×1瓶,4℃保存;试剂四A液:液体2mL×1瓶,4℃保存;试剂四B液:液体8mL×1瓶,4℃保存;临用前将A液倒入B 液中混合,待用;未用完的液体4℃保存一周。
试剂五:液体10mL×1瓶,4℃保存;标准品:液体1mL×1支,1mg/mL氮标准液产品说明:S-UE能够水解尿素,产生氨和碳酸。
土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。
土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
本法以尿素为基质,利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N,生成的蓝色靛酚和氨的浓度成正比。
试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至630nm,蒸馏水调零2、培养试剂名称测定管对照管第1页,共2页风干土样(g)0.250.25试剂一(μL)125125振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置15min试剂二(μL)625蒸馏水(μL)625试剂三(μL)12501250混匀,放入37℃水浴培养24h后,10000g常温离心10min,取上清液。
2、将培养结束的上清液稀释10倍(取0.1mL上清液,加入0.9mL蒸馏水)若吸光值仍大于1.5继续稀释。
3、标准品的准备:吸取适量的标准溶液,稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0μg/ml。
4、测氨量测定管对照管标准管稀释后的上清液或标准液(μL)400400400试剂四(μL)808080试剂五(μL)606060充分混匀,室温放置20min蒸馏水(μL)460460460混匀,630nm处蒸馏水调零,测A值,ΔA=A测定管-A对照管。
土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)活性检测试剂盒说明书 微量法
土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC2995规格:100T/48S 产品内容:试剂一:粉剂×1支,4℃保存。
加入1mL蒸馏水溶解,4℃保存2周。
临用前用蒸馏水稀释400倍,现用现配。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。
临用前加15mL蒸馏水溶解,4℃保存2周。
试剂三:液体15mL×1瓶。
此溶液为饱和溶液,取上清使用即可。
试剂四:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂五:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。
标准品:粉剂×1支,4℃保存。
10mg亚硝酸钠,临用前加入1.45mL蒸馏水配成100μmol/mL的标准溶液。
4℃保存2周。
产品说明:土壤亚硝酸还原酶(Solid-Nitrite reductase,S-NiR)是反硝化作用中的关键酶之一,它是由土壤反硝化细菌产生的一种还原酶类,可将NO 2-还原为NO,它的活性反映了生物降解过程中氮素的转化效率,为氮素转化规律的研究提供一定的依据。
亚硝酸还原酶可将NO 2-还原为NO,使样品中参与重氮化反应生成紫红色化合物的NO 2-减少,即540nm处吸光值的变化可反应土壤中亚硝酸还原酶的活性。
自备实验用品及仪器:可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、30目(或更大)筛、冰和蒸馏水。
测定操作:1、样本处理:新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30-50目筛。
2、操作步骤:(1)可见分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至540nm。
蒸馏水调零。
(2)将标准溶液用蒸馏水稀释为0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125μmol/mL的标准溶液。
(3)加样表:无机质管空白管1对照管测定管标准管空白管2风干土样(g)--0.050.05--蒸馏水(μL)-100100--试剂一(μL)100-100--试剂二(μL)100100100100--混匀后,25℃反应3h试剂三(μL)100100100100--充分震荡30s,10000rpm,4℃,离心10min--上清液(μL)100100100100--标准品(μL)----100-试剂四(μL)100100100100100100试剂五(μL)100100100100100100蒸馏水(μL)-----100充分混匀,室温放置15min后吸取200μL于微量玻璃比色皿或96孔板中测定540nm各管吸光值,分别记为A无机质管、A空白管1、A对照管、A测定管、A标准管和A空白管2,计算ΔA测定=(A无机质管-A空白管1)-(A测定管-A对照管),ΔA标准=A标准管-A空白管2。
土壤几丁质酶活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4040
土壤几丁质酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:UPLC-MS-4040规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体3mL×1瓶(自备)常温保存试剂二液体10mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体18mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体4mL×1瓶2-8℃保存试剂五A粉剂×2瓶2-8℃保存试剂五B液体55mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂一:自备甲苯。
2、试剂三:悬浊液,使用前摇匀。
3、试剂四为饱和溶液,低温(2-8℃)取出可能会有晶体析出,加热使其溶解即可。
4、试剂五:临用前取1瓶加入25mL试剂五B,充分溶解,现配现用。
用不完的试剂2-8℃可以保存4周。
5、标准液:5mg N-乙酰氨基葡萄糖。
临用前加入1mL试剂二配制成5mg/mL的标准溶液,即5000μg/mL的标准溶液,2-8℃可以保存4周。
产品说明:几丁质来源非常丰富,是自然界中仅次于纤维素的第二大类生物高聚物,由于其分解非常缓慢而大量堆积容易造成环境严重污染。
几丁质酶是影响土壤中氮矿化的一种重要的酶,其分解几丁质控制着氮循环的关键步骤。
几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,N-乙酰氨基葡萄糖与碱共热产生的中间化合物可进一步与对二甲氨基苯甲醛反应产生显色物质,该显色物质在585nm处有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。
Chitin Chitinase N-Acetyl Glucosamine OH-Glucose OxazolineGlucose Oxazoline+P-Dimethylaminobenzaldehyde H+585nm 注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
土壤中性磷酸酶(S-NP)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4050
可见分光光度法土壤中性磷酸酶(S-NP)活性检测试剂盒说明书注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:UPLC-MS-4050规格:50T/48S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体21mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1瓶2-8℃保存试剂三液体11mL×1瓶2-8℃保存试剂四粉剂×2支2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前加入50mL蒸馏水充分溶解,2-8℃保存8周;2、试剂四:临用前取1支加入576μL无水乙醇(自备),24μL蒸馏水充分溶解。
试剂变褐色后不能再使用,2-8℃可保存2周;3、标准品:0.5μmol/mL苯酚标准液。
产品说明:土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。
土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响,根据最适pH范围,通常分为酸性、中性和碱性三种类型。
中性环境中,S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,通过测定酚的生成量即可计算出S-NP活性。
Phenyl Disodium Phosphate S-NP Phenol+Na2HPO4Phenol+2,6-Dibromobenzoquinone Chlorimide Alkaline Conditions Indoxyl(660nm)注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水、乙醇、30~50目筛和甲苯(不允许快递)。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比可以例参考文献)1.新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。
土壤脲酶的测定方法
土壤脲酶的测定方法脲酶试验原理:存在于大多数细菌、真菌和高等植物里。
它是一种酰胺酶、能酶促有机物质分子中酶键的水解。
脲酶的作用是极为专性的,它仅能水解尿素,水解的最终产物是氨和碳酸。
土壤脲酶活性,与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效磷含量呈正相关。
根际土壤脲酶活性较高,中性土壤脲酶活性大于碱性土壤。
人们常用土壤脲酶活性表征土壤的氮素状况。
土壤中脲酶活性的测定是以脲素为基质经酶促反应后测定生成的氨量,也可以通过测定未水解的尿素量来求得。
本方法是测定生成的氨量。
试剂:1)甲苯2)10%尿素:称取10g尿素,用水溶至100ml。
3)柠檬酸盐缓冲液(PH6.7):184克柠檬酸和147.5克氢氧化钾溶于蒸馏水。
将两溶液合并,用1mol/LNaOH将PH调至6.7,用水稀释至1000毫升。
4)苯酚钠溶液(1.35mol/L):62.5克苯酚溶于少量乙醇,加2毫升甲醇和18.5毫升丙酮,用乙醇稀释至100毫升(A),存于冰箱中;27克NaOH溶于100毫升水(B)。
将AB溶液保存在冰箱中。
使用前将2溶液各20毫升混合,用蒸馏水稀释至100毫升。
5)次氯酸钠溶液:用水稀释试剂,至活性氯的浓度为0.9%,溶液稳定。
6)氮的标准溶液:a 精确称取0.4717克硫酸铵溶于水并稀释至1000ml,得到1ml含有0.1mg氮的标准液标准曲线绘制:吸取配置好的氮溶液10ml,定容至100ml,即稀释了10倍,吸取1,3,5,7,9,11,13ml移至50ml容量瓶,加水至20ml,再加入4ml 苯酚钠,仔细混合,加入3ml次氯酸钠,充分摇荡,放置20分钟,用水稀释至刻度。
将着色液在紫外分光光度计上于578nm处进行比色测定,以标准溶液浓度为横坐标,以光密度值为纵坐标绘制曲线图。
取新鲜土壤7份,每份30g,装于棕色广口瓶中,先将1,3-二氯丙烯溶于丙酮(定量),6份分别加入不同浓度均为1.5ml的1,3-二氯丙烯,使之在土壤中的浓度分别为1、10、50、100、200、500µg/g,另1份相应加入1.5ml的丙酮作为对照,然后调节土壤的含水量至最大田间持水量的60%(记录此时重量,以便补充水分)。
脲酶(UE)活性检测试剂盒说明书 微量法
脲酶(UE)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC4115规格:100T/48S产品内容:提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存,临用前加3mL蒸馏水充分溶解;试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存;试剂三A液:液体0.4mL×1支,4℃保存;试剂三B液:液体1.6mL×1瓶,4℃保存;临用前将A液倒入B液中混合,待用;试剂四:液体2mL×1瓶,4℃保存;标准品:液体1mL×1支,4℃保存。
1mg/mL氮标准液。
产品说明:脲酶(UE)广泛分布于植物的种子中,也存在于动物的血液和尿液中,某些微生物也能分泌脲酶。
UE 能够水解尿素产生氨和碳酸,对尿素转化起关键作用。
利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N来反应UE活性。
自备实验用品及仪器:可见分光光度计/酶标仪、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
操作步骤:一、样品处理1.组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5-10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液),冰上匀浆后于4℃,12000g离心15min,取上清待测。
2.细胞/细菌:按照细胞/细菌数量(104个):提取液体积(mL)为500-1000:1的比例(建议500万个细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎(功率300w,超声3s,间隔7s,总时间3min);然后4℃,12000g离心15min,取上清置于冰上待测。
3.血清(浆)或其它液体:直接检测。
二、测定操作:1、可见分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至630nm,可见分光光度计蒸馏水调零。
2、将1mg/mL氮标准液用蒸馏水稀释至2μg/mL备用。
3、加样表:试剂名称(μL)空白管标准管测定管对照管样品2020蒸馏水-40试剂一--40-试剂二--8080充分混匀,于37℃反应1h,于EP管中或者96孔板中加入下列溶液反应混合液--8080蒸馏水80-标准液-80试剂三16161616试剂四12121212混匀,室温静止20min。
脲酶活性
随着膨化技术在饲料工业中推广普及,越来越多的饲料生产商在配方中使用膨化大豆粉,与其它蛋白资源一样,大豆的适度熟化非常重要,熟化程度低会含抗胰蛋白酶等营养抑制因子,熟化度过高又会导致氨基酸利用率低。
判断膨化大豆粉是否合格的主要指标是脲酶活性。
脲酶活性是指:在30±5℃和PH值等于7的条件下,每分钟每克膨化大豆分解尿素所释放的氨态氮的毫克数。
脲酶本身无营养意义,但它与抗胰蛋白酶的含量接近,并且遇热变性失活的程度与抗胰蛋白酶相似,因此,尿酶活性用来作为膨化大豆加热是否合适的间接估测指标。
脲酶活性没有负值,最低为0。
在我国现行的国标推荐值为0.3,在美国一般认为以不超过0.2为宜,并且针对日粮中有尿素的反刍动物而言不得超过0.12,当然对于家禽和猪0.3或稍高都可以接受。
国内很多大企业一般均采用0.2。
实验室定量测定脲酶活性的方法较复杂,有滴定法和pH增值法两种,已有研究表明两者对同一样品测得的数值也不相等。
目前国内绝大部分企业都采用快速而简单的简易判定方法定性地估测脲酶活性,一般来说,主要有如下两种方法。
一.液态法1.原理:大豆制品中的脲酶可使尿素分解成氨,会使酚红指示剂改变颜色。
2.试剂2.1尿素:GB696,分析纯。
2.2酚红指示剂2.2.1称取0.1g酚红,加1.43mL0.1mol/L氢氧化钠溶液,在研钵中研磨以促溶解;2.2.2转移至250mL定量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀备用。
3.操作方法3.1取0.2g粉末样品,置于25mL比色管中。
3.2加0.02g尿素,加酚红指示剂2滴,再加水20mL,充分摇匀15s。
3.3记录粉红色出现时间,并根据时间判断尿酶活性,颜色出现时间应少于15min。
颜色出现时间脲酶活性1min 极强1~5min 强5~15min 稍有15min 无同时作空白对照试验。
样品空白(不加尿素)及试剂空白(不加样品),只有上述空白正常时,即酚红指示剂不改变颜色,试验结果才是可靠的。
土壤酶活性测定方法
土壤酶活性测定方法土壤酶活性测定方法一、蔗糖酶: 3,5-二硝基水杨酸比色法1. 试剂配制(1)2N氢氧化钠200mL:称取16g 氢氧化钠,用蒸馏水溶解,定溶于200mL容量瓶中。
(2)3,5-二硝基水杨酸溶液1000mL:称5g二硝基水杨酸,溶于200mL2N氢氧化钠和500mL蒸馏水中,再加300g酒石酸钾钠,用蒸馏水稀释至1000mL(不超过7天)。
(3)1/15M 磷酸氢二钠1000mL:23.867g N a2HPO4·12H2O 溶于1000mL蒸馏水中。
(4)1/15M 磷酸二氢钾1000mL:9.078g KH2PO4溶于1000mL蒸馏水中。
(5)pH5.5磷酸缓冲液100mL:5 mL磷酸氢二钠(1/15M)加95mL磷酸二氢钾(1/15M) (6)8%蔗糖1000mL:称取80g蔗糖,用水溶解,稀释至1000mL。
(7)甲苯。
(8)标准葡萄糖溶液(1mg/mL)1000mL:取少量葡萄糖在真空干燥箱中,于55℃条件下真空干燥至恒重。
然后取1.00g葡萄糖溶于100ml蒸馏水中成标准葡萄糖母液(10mg还原糖/ml)。
取此母液10ml, 用蒸馏水定容至100mL即成标准葡萄糖液(1mg/ml);2. 操作步骤(1)标准曲线绘制:分别取标准葡萄糖液0.4mL,0.8 mL,1.2mL, 1.6mL, 2.0mL,2.8mL, 3.2mL于50 mL比色管中,另取一管做空白对照。
用蒸馏水补足至10mL。
加入3.0mL 3,5-二硝基水杨酸,沸水浴5min,随即在自来水流下冷却。
最后用蒸馏水稀释至50mL,并在分光光度计上于波长508nm处进行比色。
比色后,以光密度值为纵坐标,葡萄糖浓度为横坐标绘制成标准曲线。
(2)土壤蔗糖酶活性测定:称5.00g土样,置于50mL三角瓶中,注入15.0mL 8%蔗糖溶液,5.0mL pH5.5磷酸缓冲液和5滴甲苯。
摇匀混合物后,放入恒温箱,在37℃下培养24h。
土壤脲酶、蔗糖酶、磷酸酶活性的测定
土壤酶活性的测定方法及部分样品配制详细请参考《土壤微生物分析方法手册》,《土壤酶及其研究法》土壤样品采集与制备土壤样品取样后混匀,用于土壤酶活性测定的土壤磨细过2mm筛后,置于4℃冰箱内保存备测。
1.土壤酶活性的测定方法1.1.脲酶采用靛酚蓝比色法方法原理:本法基于以尿素为基质,酶促水解生成的氨与酚类化合物起反应生成蓝色的靛酚,颜色深度与氨含量相关,用于尿酶活性的测定。
操作步骤:取10g风干土,置于100ml三角瓶中,加2ml甲苯,15min后加10ml 10%尿素液和20ml pH6.7柠檬酸盐缓冲液。
摇匀后在37℃恒温箱中培养3h。
按此操作,进行以水代替基质,及无土壤的基质对照测定,过滤后取0.5ml滤液于50ml比色管中,然后按绘制标准曲线显色方法进行比色测定。
氮的标液:精确称取0.4717g硫酸按溶于水并稀释至1000ml,则得1ml含0.1mg氮的标准液。
绘制标准曲线时,可将此液稀释10倍供用。
pH6.7柠檬酸盐缓冲液:用368g柠檬酸溶于600ml水,另取295g氢氧化钾溶于水,再将二种溶液混合,然后用1M的氢氧化钠调节pH到6.7,定容到2L。
苯酚溶液:称取苯酚(C6H5OH)10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。
此试剂不稳定,须贮于棕色瓶中,在4℃冰箱中保存。
次氯酸钠碱性溶液:称取氢氧化钠(化学纯)10g、磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O, 化学纯)7.06g、磷酸钠(Na3PO4·12H2O, 化学纯)31.8g 和52.5g·L-1次氯酸钠(NaOCl,化学纯,即含5%有效氯的漂白粉溶液)10mL 溶于水中,稀释至1L,贮于棕色瓶中,在4℃冰箱中保存。
标线绘制:取稀释的标准液0、l、2、4、6、8、10ml,移于50rnl容量瓶中,然后加入蒸馏水至20mL。
再加4mL苯酸钠溶液和4mL次氯酸钠溶液,随加随摇匀。
土壤酸性蛋白酶活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
土壤酸性蛋白酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC0860规格:50T/24S产品内容:试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入10mL试剂一,沸水浴搅拌溶解后待用;试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入10mL蒸馏水充分溶解待用;试剂四:液体40mL×1瓶,4℃保存;试剂五:液体10mL×1瓶,4℃保存;标准品:液体2mL×1支,0.2μmol/mL酪氨酸溶液,4℃保存;产品说明:土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。
土壤酸性蛋白酶在酸性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。
酸性条件下,土壤酸性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝,在680nm有特征吸收峰。
实验中所需仪器及设备:可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、甲苯、蒸馏水、50目筛(或更小)。
样品处理:新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。
操作步驟:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至680nm,蒸馏水调零。
2、样本测定:试剂名称测定管对照管标准管空白管风干土样(g)0.10.1--试剂一(μL)100100--试剂二(μL)200----混匀后,37℃反应24h,期间振荡5-6次,使土样与反应液充分接触。
试剂三(μL)200200--试剂二(μL)-200--混匀,10000rpm室温离心10min,取上清液--上清液(μL)220220--标准液(μL)--220-蒸馏水(μL)---220试剂四(μL)650650650650试剂五(μL)130130130130混匀,40℃水浴10min,10000rpm室温离心10min,取上清液于680nm下读取各管吸光值A,分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管,计算ΔA测定=A测定管-A对照管,ΔA标准=A标准管-A空白管。
脲酶(UE)活性检测试剂盒说明书
第 1 页,共 3 页脲酶(UE )活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:BC4110规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体30 mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶4℃保存试剂二液体25 mL×1瓶4℃保存试剂三A 液体1 mL×1支4℃保存试剂三B 液体4 mL×1瓶4℃保存试剂四液体5 mL×1瓶4℃保存标准品液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制:1、试剂一:临用前加6mL 蒸馏水充分溶解;2、试剂三:临用前将A 液倒入B 液中混合,待用;3、标准品:1mg/mL 氮标准液。
用蒸馏水稀释至2μg/mL 备用。
产品说明:脲酶(UE )广泛分布于植物的种子中,也存在于动物的血液和尿液中,某些微生物也能分泌脲酶。
UE 能够水解尿素产生氨和碳酸,对尿素转化起关键作用。
利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH 3-N 来反应UE 活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、1mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、组织:按照质量(g ):提取液体积(mL)为 1:5-10 的比例(建议称取约0.1g ,加入1mL 提取液),冰上匀浆后于4℃,12000g 离心15min ,取上清待测。
2、细胞/细菌:按照细胞/细菌数量(104个):提取液体积(mL )为500-1000:1 的比例(建议500万个细胞加入1mL 提取液),冰浴超声波破碎(功率300w ,超声3 s ,间隔7 s ,总时间3min );然后4℃,12000g 离心15min ,取上清置于冰上待测。
土壤酶的测定方法.
一、脲酶测定(苯酚钠-次氯酸钠比色法)脲酶是对尿素转化起关键作用的酶,它的酶促反应产物是可供植物利用的氮源,它的活性可以用来表示土壤供氮能力。
1、试剂配制:(1)pH6.7柠檬酸盐溶液:取368g柠檬酸溶于600mL蒸馏水中,另取295g氢氧化钾溶于水,再将两种溶液合并,用1N氢氧化钠将pH调至6.7,并用水稀释至2L。
(2)苯酚钠溶液:称取62.5g苯酚溶于少量乙醇中,加2mL甲醇和18.5mL丙酮,后用乙醇稀释至100mL(A液),保存再冰箱中。
称取27g氢氧化钠溶于100mL水中(B液),保存于冰箱中。
使用前,取A、B两液各20mL混和,并用蒸馏水稀释至100mL备用。
(3)次氯酸钠溶液:用水稀释制剂至活性氯的浓度为0.9%,溶液稳定。
(4)10%尿素溶液:10g尿素溶于100mL水中。
(5)N的标准溶液:精确称取0.4717g硫酸铵溶于水稀释至1L,则得1mL含0.1mgN 的标液,再将此液稀释10倍制成氮工作液(0.01mg/mL)。
标准曲线绘制:分别取0、0.5、1.5、2.5、3.5、4.5、5.5、6.5mL氮工作液置于25mL刻度试管中,加蒸馏水至10mL,再加2mL苯酚钠溶液和1.5mL次氯酸钠溶液,随加随摇匀,20min 后显色,定容25mL。
1h内再分光光度计上于578nm处比色。
1020304050607000.20.40.62、操作步骤(1)称取2.5g土置于25mL 刻度试管中, 加0.5mL 甲苯处理,加塞塞紧轻摇15min;往瓶中加入2.5mL10%尿素液和5mL 的柠檬酸盐缓冲液(pH6.7),仔细混匀。
在37℃恒温箱中培养3h。
(当脲酶活性为3~80微克NH3-N 时,本法能获得可靠的结果。
若脲酶活性小于3微克,培养时间需增至24h )。
(2)然后用热至38℃的蒸馏水稀释至刻度(甲苯应浮在刻度以上),摇荡,将悬液过滤。
对每一土样,设置用水代替基质的对照。
对整个实验,进行无土壤基质的对照,以检验实验的纯度。
环境化学实验
环境化学实验讲义
南开大学环境科学与工程学院
土壤中的有机物质主要是腐殖物质,它们可 分为三类。一类是不能被碱萃取的胡敏素,另一 类是可被碱萃取,但当萃取液酸化时析出而成为 沉淀物的腐殖酸,第三类是酸化时不沉淀的富里 酸。这些物质成份复杂,分子量不固定,结构单 元上存在各种活性基因。它们在土壤中可以提供 出很大量的阳离子交换能力,而且对重金属污染 物在土壤中有吸附、络合等行为起着重要作用。 土壤存在的这些阳离子可被某些中性盐水溶 液中的阳离子交换。若无副反应时,交换反应可 以等当量地进行。
3、在过滤的间隙时间取两个50ml比色管,各加入 10,00ml 4%硼酸溶液。现将50ml比色管在冷凝管 下,使冷凝管出口尖端插入硼酸溶液中,准备蒸 馏。 4、过滤完毕后,迅速往蒸氨瓶内注入20ml 4N 的 NaOH溶液,立即塞上塞子。接通冷凝水,加热 蒸馏。 5、当馏出液达到50ml左右,停止蒸馏。取下比色 管,将管内接收液定量转入到50ml锥形瓶中加4-5 滴指示剂(甲基红-亚甲基蓝混合液),用0.1N HCL滴定瓶内的氨,滴定到淡紫色为终点。记录 试样和对照消耗的HCL体积V和V0(ml)。
对于脲酶,它能促使尿素水解转化成氨、二氧化 碳,反应如下 :
Ο Η 2 Ν − C − ΝΗ 2 脲酶 2ΝΗ3 +CΟ 2
在土壤中,在pH值为6.5~7.0是脲酶活性最大, 通过测定释放出的NH3量,可以确定脲酶的活性。 土壤中脲酶活性一般以37℃培养48小时每克土壤 释放出的NH3–N毫克数表示。
土壤漆酶(Soil Laccase,SL)试剂盒说明书
第1页,共2页货号: QS2913 规格:50管/48样土壤漆酶(Soil Laccase ,SL )试剂盒说明书可见分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:漆酶(Laccase )是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,广泛分布于真菌和高等植物中,具有较强的氧化还原能力,在纸浆生物漂白,环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。
测定原理:漆酶分解底物ABTS 产生ABTS 自由基,在420nm 处的吸光系数远大于底物ABTS ,测定ABTS 自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。
自备实验用品及仪器:天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、震荡仪,甲苯。
试剂组成和配制:提取液:甲苯50mL×1瓶,4℃保存。
自备。
试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存。
工作液:粉剂×2瓶,4℃避光保存,临用前每瓶加15mL 试剂一溶解。
样本处理:将新鲜土样过40目筛,按照土样质量(g ):提取液体积(mL )为1:5~10的比例(建议称取0.1g 土样,加入1mL 提取液)加入提取液,30℃震荡提取30min ,于4℃,10000g ,离心10min ,取上清置于冰上待测。
测定操作:1. 分光光度计预热30min ,调节波长到420nm ,蒸馏水调零。
2. 取1mL 玻璃比色皿,加入100μL 上清液,再加入600μL 工作液,立即于420nm 处测定吸光值,记为A1。
3. 记录完数据立即将反应液转移至1.5mL 棕色Ep 管,置于震荡仪上,30℃震荡反应5min ,取出反应液立即于420nm 处测定吸光值,记为A2。
△A=A2-A1酶活性计算公式:酶活性定义:每克土壤每分钟氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位(U )。
SL 活性(nmol/min/g )= dA ⨯∆ε×V 反总÷(V 样×W÷V 样总)÷T= 38.9×△A÷W ε:ABTS 毫摩尔消光系数:36L/mmol/cm ;d :比色皿光径,1cm ;V 反总:反应总体积,0.7mL ;V 样:反应中样本体积,0.1mL ;V 样总:加入提取液体积,1mL ; W ,样本质量,g ;T :反应时间,5min注意事项:1. 工作液需临用前配制,并且尽快使用,4℃保存一周,若变色则不能使用。
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土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0120
规格:50T/24S
产品内容:
试剂一:甲苯10mL×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1瓶,临用前加入20mL蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;
试剂三:液体65mL×1瓶,4℃保存;
试剂四A液:液体2mL×1瓶,4℃保存;试剂四B液:液体8mL×1瓶,4℃保存;临用前将A液倒入B 液中混合,待用;未用完的液体4℃保存一周。
试剂五:液体10mL×1瓶,4℃保存;
标准品:液体1mL×1支,1mg/mL氮标准液
产品说明:
S-UE能够水解尿素,产生氨和碳酸。
土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。
土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
本法以尿素为基质,利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N,生成的蓝色靛酚和氨的浓度成正比。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至630nm,蒸馏水调零
2、培养
试剂名称测定管对照管
第1页,共2页
风干土样(g)0.250.25
试剂一(μL)125125
振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置15min
试剂二(μL)625
蒸馏水(μL)625
试剂三(μL)12501250混匀,放入37℃水浴培养24h后,10000g常温离心10min,取上清液。
2、将培养结束的上清液稀释10倍(取0.1mL上清液,加入0.9mL蒸馏水)若吸光值仍大于1.5继续稀释。
3、标准品的准备:吸取适量的标准溶液,稀释至10、8、6、
4、2、1、0.
5、0μg/ml。
4、测氨量
测定管对照管标准管
稀释后的上清液或标准液(μ
L)400400400
试剂四(μL)808080
试剂五(μL)606060
充分混匀,室温放置20min
蒸馏水(μL)460460460混匀,630nm处蒸馏水调零,测A值,ΔA=A测定管-A对照管。
每个测定管设一个对照管。
标准曲线的建立:根据标准管的浓度(y)和吸光度(x,减去浓度为0的空白管),做标准曲线。
脲酶活力的计算:
根据标准曲线,将ΔA(x)带入公式计算测定中样品的浓度(μg/mL)y值。
单位的定义:每天每g土样中产生1μg NH3-N定义为一个酶活力单位。
脲酶活力(U/g土样)=y×10×V反总÷W÷T=80×y
10:稀释倍数;T:反应时间,1d;V反总:反应体系总体积:2mL;W:样本质量,0.25g。
第2页,共2页。