光激化学发光技术介绍45页PPT

合集下载

光激化学发光技术.pptx

光激化学发光技术.pptx
光激化学发光分析技术
光激化学发光(LICA) 新一代化学发光技术
Light Initiated Chemiluminescent Assay
• 以纳米微粒为基础 • 无需固相分离
• 均相化学发光免疫技术
感光微球
发光微球
发光免疫分析 广泛应用于临床定量检测中




















感光 微粒
激光照射 (680nm)
200nm

发光
微粒 发光
(615nm)
结合即发光 不结合不发光
光激化学发光(LICA)
反应原理 • 感光微球
➢ 覆盖感光物质酞箐,包被链霉亲和素
➢ 接受激光照射(680nm),生成高能单线态氧
塑料-活化基团
酞箐(鲁米诺类化学发光物质)
1O2
激光照射(680nm)
酞箐
























20世纪60年代 1977
1982
1983
1990
1993
光激化学发光(LICA) 集多种技术的优秀性能为一体
• 独特信号产生方式(能量转移) 双标记 免分离 荧光素(Eu)
• 纳米固相材料(悬浮性能-动力学-三维立体) • 生物素-亲和素系统(放大效应)
高能单线态氧的产生和传递
1O2
• 1O2 生存时间4微秒

化学发光介绍-PPT

化学发光介绍-PPT
26
肿瘤标志物
组织多肽抗原(TPA) 临床意义:主要见于恶性肿瘤;也可见于急性肝炎、胰腺炎、肝 炎等,但增高程度较轻。 前列腺特异性抗原(PSA) 临床意义:主要见于前列腺癌,是前列腺癌首选和最有应用价值 的肿瘤标志物。前列腺增生、前列腺炎、良性前列腺瘤、肾脏和泌 尿生殖系统疾病时,PSA可轻度升高
乙肝五项标志物的检测 3、HBeAg和HBeAb(HBeAg作为乙肝病毒复制增殖的间接指标) HBeAg阳性:说明病毒复制活跃,传染性强,是乙肝患者具有传
染性指标。可见于急、慢性乙肝和乙肝病毒携带者,如持续阳性, 表明乙肝转为慢性迁延性肝炎 HBeAb 在急性肝炎时,此抗体阳性表明乙肝复制缓解或终止,在慢性肝 炎或肝硬化患者,此抗体阳性说明乙肝病毒DNA与肝细胞发生整 合,提示病情较长,预后不佳。
27
肿瘤标志物
游离前列腺特异抗原(F-PSA)与F-PSA/PSA比值 临床意义:F-PSA 见于前列腺增生和前列腺癌,但前列腺癌增高 程度不如前列腺增生明显。 F-PSA/PSA降低 见于前列腺癌和前列腺增生,但前列腺癌的降低 程度明显高于前列腺增生 前列腺酸性磷酸酶(PAP) 临床意义:见于前列腺癌、前列腺增生,但前列腺癌增高更明显
22
肿瘤标志物
甲胎蛋白(AFP)
临床意义:常见于原发性肝炎、大多数卵巢和睾丸胚胎性肿瘤或 畸胎瘤,生殖腺外生殖细胞瘤,肝母细胞瘤,肝细胞瘤,转移性肝 癌等,也可见于婴幼儿肝炎,肝硬化、急性肝炎、重症肝炎恢复等, 但多为一过性升高,胎盘梗塞、剥离、羊水栓塞、高危妊娠、母儿 血型不合、糖尿病孕妇等血清AFP也升高。
15
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的定量检测
4、HBcAb
阳性:表示既往感染乙肝病毒,如高抗体水平持续存在提示乙肝 病毒可能还在复制,乙肝病毒感染后,此抗体是最早出现的标志 性抗体,持续时间长,并且几乎所有患者均产生抗体,所以此抗 体是流行病学调查指标。

化学发光法技术概要ppt课件

化学发光法技术概要ppt课件
主要实验流程(3)——两步法
样本+试剂1(或试剂1+试剂2),37℃孵育5- 30分钟;
洗涤3-5次,加入试剂3(或试剂3+试剂4), 37℃孵育5-30分钟;
洗涤3-5次; 加入发光底物, 5-15分钟检测。
16
全自动仪器其他要求
样品加量10µl~200 µl,试剂加量50µl~200 µl, 随检测项目不同而有所增减。
化学发光法技术概要 及自动化免疫分析仪 技术要点
科华生物研发中心光免小组 李基
2010.7.14
1
化学发光法反应基本原理
➢ 抗原-抗体反应
抗体能够特异性识别相对应的抗原,并与之结合,这种反 应称之为抗原抗体反应。 抗原-抗体反应具有特异性、敏感性、可逆性等特点。
➢ 酶促底物发光
将检测试剂中的抗原或抗体用碱性磷酸酶(AP)加以标 记,通过发光底物测定相对光子数(RLUs值),来检测 目标抗体或抗原的浓度。
2
化学发光法反应模式
一步法 (15min反应+15min显色)
➢ 夹心法 ➢ 竞争法
两步法 (15min+15min反应+15min显色)
➢ 间接法 ➢ 捕获法
3
一步法:夹心法
4
一步法:竞争法
5
两步法:间接法
6
两步法:捕获法
7化学发光法ຫໍສະໝຸດ 应介质✓ 固相介质:磁珠 ✓ 酶标记物:碱性磷酸酶(AP) ✓ 发光底物:AMPPD
第一个结果报告时间(min )
检测通量(T/hour)
10
68-120
15.6
200
<15.6
1200
18
240
15

常见化学发光技术PPT课件

常见化学发光技术PPT课件
02
它利用化学反应过程中释放的能 量激发发光物质,使其发出特定 波长的光,从而实现物质的检测 。
化学发光技术的原理
当某些物质被某种能量激发时,这些 物质会吸收能量并跃迁至激发态。
在化学发光反应中,通常需要加入特 殊的化学物质作为发光物质,这些物 质在反应过程中被激发并发出光辐射 。
当这些物质从激发态回到基态时,会 以光子的形式释放能量,从而产生光 辐射。
化学发光反应通常比较简单,所需的仪器 设备相对不复杂,操作简便,检测快速。
缺点
背景光干扰
化学发光反应中可能伴随有背景光的产生 ,对检测结果造成干扰,影响检测的准确
性。
特定性不强
某些化学发光反应可能不仅仅与目标物质 发生反应,也可能与其他类似物质发生反
应,导致检测的特异性不够强。
试剂昂贵且不稳定
某些化学发光试剂比较昂贵且容易分解变 质,需要妥善保存,增加了实验成本和难 度。
03
CATALOGUE
化学发光技术的优缺点
优点
高灵敏度
宽线性范围
化学发光技术具有很高的灵敏度,能够检 测到极低浓度的物质,因此在生物医学、 环境监测和食品安全等领域有广泛应用。
该技术线性范围较宽,可以适应不同浓度 的样品检测,减少了样品稀释和浓缩的繁 琐步骤。
非放射性
简单快捷
化学发光反应产生的光子不带电荷,因此 没有放射性污染,对实验人员和环境安全 。
在生物医学研究中的应用
蛋白质组学研究
利用化学发光技术对蛋白 质进行标记和检测,有助 于蛋白质相互作用、定位 和功能研究。
基因表达分析
通过化学发光技术检测基 因表达水平,研究基因调 控和疾病发生机制。
细胞成像与定位
利用化学发光技术对细胞 内分子进行标记和成像, 研究细胞结构和功能。

光激化学发光技术介绍

光激化学发光技术介绍

GG-SA
Biotin-HBcAg
Anti-HBc- FG
检测平台
LiCA SP
• 双加样臂 • 气置换式微量进样泵 • 液面自动检测功能 • 标本、试剂装载
– 100个标本 – 10个试剂位
LiCA HT
• 一次装载300个测试 • 自动高速进样:0.5秒/
孔 • 自动温育、震荡和读数 • 300个测试仅需50分钟
基本包被模式
GG-Streptavidin(SA)
FG- Antibody(Ab)
基本反应模式
biotin-antigen
primary Ab
secondary Ab (or protein A, G, LA)
• 配体-受体 应用类型
• 激酶 • 蛋白-蛋白 • 免疫 • 蛋白酶
TNFa-sTNFR1 配体-受体(1)
LiCA发光原理
• 核心原理是能量的近距离转移 • 转移的介质是高能态离子氧 • 红色激光680nm照射,感光微粒释放离子氧(4微秒),传播直
径200nm,发光微粒(520~618nm),高能级的光 • 反应的基础有赖于两种微粒的相互接近 • 反应体系中,微粒的浓度很低,碰撞机率很低,本底信号微弱
Bioti -TNFa sTNFR1 n
anti-TNFR1 IgG
Protein FG A-
TNFa-sTNFR1 配体-受体(1)
GG-SA
Bioti -TNFa sTNFR1 n
anti-TNFR1 IgG
Protein FG A-
TNFa-sTNFR1 配体-受体(1)
GG-SA
Bioti -TNFa sTNFR1 n
GG-SA
Bioti -anti- TNFa n TNFa

化学发光法的原理技术要点及评价应用 PPT

化学发光法的原理技术要点及评价应用 PPT
• 按分离方法不同分 1.微粒子化学发光免疫测定 2.磁颗粒化学发光免疫测定
第一节 发光与化学发光剂
一、发光 一种物质由电子激发态回复到基态时, 释放出的能量表现为光的发射。
1.光照发光:发光剂经短波长入射光照射后进入激 发态,当回复至基态时发出较长波长的可见光。
2.生物发光:反应底物在荧光素酶的催化下利用 ATP产能,生成激发态的氧化荧光素,后者在回 复到基态时多余的能量以光子形式放出。
技术要点
1.抗原抗体结合反应 将包被McAb的磁颗粒和待 测标本加入到反应管中,标本中待测Ag与磁珠 上Ab结合,再加上AE标记Ab,经过温育,形成 磁珠Ab-Ag-AE标记Ab复合物。
2.分离技术 在电磁场中进行2-3次洗涤后,很快 地将未结合的多余Ag和标记Ab洗去。
3.化学发光反应 经洗涤的磁珠中,加入H2O2和 pH纠正液NaOH,这时AE不需要催化剂即分解并 发光,由集光器接收,经光电倍增管放大,记 录1S内所产生的光子能,其积分与被测物含量
体料是通包微 利过被珠 光用酶强度对标 记 的发抗 光测体 定底而物样抗 本原催直接化进作A M行用P P定而D 量直。接发光,
电化学发光原理图
• 这一过程可在电极表面周而复始地进行 • 产生许多光子,使光信号增强
TPA+●
电极

TPA
R u ( b p y )33 +
R u ( b p y )32 +
常用试剂:吖啶酯(acridinium,AE)
CH 3
N+
- HO 2
CO
O
R
CH 3 N
O CO O
R
CH 3 N
O CO O
+ CO2+ 光

化学发光法技术概要ppt课件

化学发光法技术概要ppt课件

精选ppt
12
各种全自动仪器主要技术参数
HCG Axsym Architect i2000 Architect ci8200 ADVIA Centaur Access Access2 Vidas Dimension Xpand Dimension RXL Immulite Immulite2000 Vitros Elecsys 2010 Elecsys 1010
主要实验流程(3)——两步法
样本+试剂1(或试剂1+试剂2),37℃孵育5- 30分钟;
洗涤3-5次,加入试剂3(或试剂3+试剂4), 37℃孵育5-30分钟;
洗涤3-5次; 加入发光底物, 5-15分钟检测。
精选ppt
16
全自动仪器其他要求
样品加量10µl~200 µl,试剂加量50µl~200 µl, 随检测项目不同而有所增减。
洗涤3-5次; 加入发光底物,5-15分钟检测。
精选ppt
14
全自动仪器实验流程要求(2)要实验流程(2)——一步半法样本+试剂1(或试剂1+试剂2),37℃孵育5- 30分钟;
加入试剂3, 37℃孵育5-30分钟; 洗涤3-5次; 加入发光底物, 5-15分钟检测。
精选ppt
15
全自动仪器实验流程要求(3)
Axsystem: 基于粒子的荧光偏振技术。
Architect系列:基于磁分离的化学发光检测。 拜尔公司
ADVIA Centaur:基于磁分离的化学发光检测。
贝克曼公司
Access系列:基于磁分离的化学发光检测。
生物梅里埃公司
Vidas系列:管式包被的酶促荧光检测。
精选ppt
11

化学发光介绍.ppt

化学发光介绍.ppt
分析诊断试剂发光类型为辉光型。
4
化学发光免疫分析的优势
▪ 灵敏度高
▪ 灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性,其灵敏度 可达 10-22 mol/L ( RIA 为 10 -12 mol/L )。化学发光 免疫分析能够检出放射免疫分析和酶联免疫分析等方法 无法检出的物质,对疾病的早期诊断具有十分重要的意 义。
化学发光介绍
二零零九年元月
1
▪ 化学发光免疫分析方法简介
▪ 化学发光免疫分析
▪ (Chemiluminescence Immunoassay,CLIA)

是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它
具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无
污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分
这些情况的发生,为正确判断病情提供依据。并且目前病毒性肝炎和其他
病因所致的肝病甚多,而且临床症状、体征及肝功能无特殊改变差异,故
只有依靠高灵敏度的病原学鉴别诊断。
10
▪ 1.缩短急性乙肝HBsAg 测定“窗口期” ▪ 2.如病毒发生变异后,表达量较低,常规ELISA测不出抗原,而化
学发光免疫分析定量具有极高的灵敏度,可发现并极有可能同时测定 出HBsAg和HBsAb。 ▪ 3. 可发现低浓度HBsAg携带者。特别是一些群体如医护工作者、病人 家属等,由于长期密切接触,但又非直接经血传播感染成急性乙肝, 而是长期少量感染,并刺激机体产生一定的免疫力,可能呈低浓度感 染,特别应当引起人们的足够重视,密切关注并采取措施防止发展成 乙肝或慢性携带者。
9
▪ 一、化学发光极大地提高了检测灵ห้องสมุดไป่ตู้度

HBsAg是HBV感染的特异标志,HBsAg的出现就可作为乙肝的早期诊

化学发光介绍 ppt课件

化学发光介绍  ppt课件

2、定量测定HBeAg和HBeAb浓度的变化,可以反映病情变化和治疗效果。明确测定 HbeAg向抗-Hbe转换的时期,即表现为HbeAg浓度下降和抗-Hbe浓度升高的过程。高浓 度的HbeAg还可间接提示病毒处于高复制状态,具有较高的传染性。高浓度的抗-Hbe一方 面提示病情的好转,而在某些时候(如肝功能指标很差)可能与肝坏死、肝硬化、肝癌有 关。
缺点
化学发光 放射免疫 酶联免疫 时间分辨 电化学发光
操作简单,成本较低,灵 进口试剂成本较高,国产 敏度较高,试剂较稳定 试剂合理
试剂成本低,灵敏度较高 操作复杂操作简单
灵敏度低,适用于定性和 半定量
灵敏度较高,试剂较稳定 操作复杂,反应时间长, 试剂成本较高
灵敏度较高,试剂较稳定 试剂成本高,仪器维护费 用较高,有本底干扰
收费标准 每月标本量 每年毛收入 每年成本
(元)
(万元)
(万元)
乙肝两对半
180
15*22天
71.28
化学发光免疫仅乙肝五项年净收入总计47.52万元
23.76 每人份60元
年净收入/ 万元(保守
估计)
47.52
乙肝两对半
25
15*22天
9.90
1.19
8.71
每人份3元
酶法试剂乙肝五项年净收入总计 8.71万元
3、性激素系列
(LH,FSH,TSH,E2,PRO,PRL,TES,HC G,B-HCG…)
8、优生优育类
(TOX,CMV,HSVI,HSVII,RUB)
4、甲状腺功能
9、其他类
(T3,T4,FT3,FT4,TSH,TM,TG,TPO…) (ALB,一些药物测试等)
5、糖尿病系列
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

▪ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇

30、意志是一个强壮的盲人,倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
谢谢!
45
光激化学发光技术介绍
51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法, 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常会发现,法律就是这样 一种的 网,触 犯法律 的人, 小的可 以穿网 而过, 大的可 以破网 而出, 只有中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏,庇 护着我 们大家 ;它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿

26、要使整个人生都过得舒适、愉快,这是不可能的,因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭

27、只有把抱怨环境的心情,化为上进的力量,才是成功的保证。——罗曼·罗兰

28、知之者不如好之者,好之者不如乐之者。——孔子
相关文档
最新文档