光激化学发光新一代化学发光 ppt课件
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化学发光原理及检测项目PPT课件
triglycerides2
The Intestines Constipation4 Decreased GI motility4
泛的影响
The Brain
Depression1 Decreased concentration1 General lack of interest1 Impaired fetal intellectual
The Kidneys Decreased function5 Fluid retention and edema5
1. Nemeroff CB. Clinical significance of psychoneuroendocrinology in psychiatry: focus on the thyroid and adrenal. J Clin Psychiatry. 1989;50(suppl):13-20. 2. Klausen IC, Nielsen FE, Hegedüs L, Gerdes LU, Charles P, Faergeman O.Treatment of hypothyroidism reduces low-density lipoproteins but not lipoprotein (a) Metabolism. 1992;41:911-914. 3. Polikar R, Burger AG, Scherrer U, Nicod P. The thyroid and the heart. Circulation. 1993;87:1435-1441. 4. Vassilopoulou-Sellin R, Sellin JH. The gastrointestinal tract and liver in hypothyroidism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:816-820. 5. Moses AM, Scheinman SJ. The kidneys and electrolyte metabolism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:812-815. 6. Emerson CH.Thyroid function and disease in the female. In: Gold JJ, Josimovich JB, eds. Gynecologic Endocrinology. 4th ed. New York, NY:Plenum Publishing Corp; 1987:109-133. 7. Haddow JE, Palomaki GE, Allan WC, et al. Maternal thyroid deficiency during pregnancy and subsequent neuropsychological development of the child. N Engl J Med. 1999;341:549-555.
The Intestines Constipation4 Decreased GI motility4
泛的影响
The Brain
Depression1 Decreased concentration1 General lack of interest1 Impaired fetal intellectual
The Kidneys Decreased function5 Fluid retention and edema5
1. Nemeroff CB. Clinical significance of psychoneuroendocrinology in psychiatry: focus on the thyroid and adrenal. J Clin Psychiatry. 1989;50(suppl):13-20. 2. Klausen IC, Nielsen FE, Hegedüs L, Gerdes LU, Charles P, Faergeman O.Treatment of hypothyroidism reduces low-density lipoproteins but not lipoprotein (a) Metabolism. 1992;41:911-914. 3. Polikar R, Burger AG, Scherrer U, Nicod P. The thyroid and the heart. Circulation. 1993;87:1435-1441. 4. Vassilopoulou-Sellin R, Sellin JH. The gastrointestinal tract and liver in hypothyroidism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:816-820. 5. Moses AM, Scheinman SJ. The kidneys and electrolyte metabolism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:812-815. 6. Emerson CH.Thyroid function and disease in the female. In: Gold JJ, Josimovich JB, eds. Gynecologic Endocrinology. 4th ed. New York, NY:Plenum Publishing Corp; 1987:109-133. 7. Haddow JE, Palomaki GE, Allan WC, et al. Maternal thyroid deficiency during pregnancy and subsequent neuropsychological development of the child. N Engl J Med. 1999;341:549-555.
化学发光ppt课件
47
标记技术
• 标记技术 将化学发光剂的分子与某些分子 结合，直接或间接地测定待测组分。通过 分析被标记物来完成对待测组分的测定。 一些大分子化合物可直接进行标记测定。 分组量较小的组分则常通过与被标记的抗 原抗体特异性结合得到分析。
6
2.化学发光效率和发光强度
化学发光效率：
发射光子的分子数 cl r f 参加反应的分子数
激发态分子数 r 参加反应的分子数 发射光子的分子数 f 激发态分子数
化学效率：
发光效率：
化学效率主要取决于发光所依赖的化学反应本 身；而发光效率则取决于发光体本身的结构和性质， 也受环境的影响。
27
酸性高锰酸钾体系
四价铈 可直接与多 种还原性无机物或者有 机物放生氧化还原反应， 是强氧化性化学发光剂 之一。发光体系虽然简 单，但由于不收Cl-的 影响，更合适水样中有 机物污染的检测。
28
四价铈体系
（1）铈-待测物体系 可用于检测对乙酰氨基酚、色氨 酸。 （2）铈-联苯三酚-氧体系 可检测环境水样中的溶解氧。 （3）Ce4+-SO32--体系 利用某鞋荧光性有机物对其的 增敏作用，可以测定奎宁、奎宁丁、辛可丁、胆汁酸和 多种皮质类固醇、甾族化合物。 （4）Ce4+-RhB（罗丹明B）-还原性待测物体系 用于 测定叶酸、巯嘌呤、维生素C（盐）和噻唑类席夫碱。 （5）Ce4+-Ru（phen）32+（二价钌-邻菲啰啉配合物） 体系 可用于草酸、丙酮酸、维生素C、枸橼酸、酒石酸、 戊二醛和部分氟代喹诺酮衍生物的测定。
25
酸性高锰酸钾 具有很强 的氧化能力，可以与多种 无机物和有机物进行氧化 还原反应，但由于其反应 的发光强度较弱，所以知 道20世纪70年代以后， 伴随着微弱光检测技术的 发展才得到广泛的研究和 应用。
标记技术
• 标记技术 将化学发光剂的分子与某些分子 结合，直接或间接地测定待测组分。通过 分析被标记物来完成对待测组分的测定。 一些大分子化合物可直接进行标记测定。 分组量较小的组分则常通过与被标记的抗 原抗体特异性结合得到分析。
6
2.化学发光效率和发光强度
化学发光效率：
发射光子的分子数 cl r f 参加反应的分子数
激发态分子数 r 参加反应的分子数 发射光子的分子数 f 激发态分子数
化学效率：
发光效率：
化学效率主要取决于发光所依赖的化学反应本 身；而发光效率则取决于发光体本身的结构和性质， 也受环境的影响。
27
酸性高锰酸钾体系
四价铈 可直接与多 种还原性无机物或者有 机物放生氧化还原反应， 是强氧化性化学发光剂 之一。发光体系虽然简 单，但由于不收Cl-的 影响，更合适水样中有 机物污染的检测。
28
四价铈体系
（1）铈-待测物体系 可用于检测对乙酰氨基酚、色氨 酸。 （2）铈-联苯三酚-氧体系 可检测环境水样中的溶解氧。 （3）Ce4+-SO32--体系 利用某鞋荧光性有机物对其的 增敏作用，可以测定奎宁、奎宁丁、辛可丁、胆汁酸和 多种皮质类固醇、甾族化合物。 （4）Ce4+-RhB（罗丹明B）-还原性待测物体系 用于 测定叶酸、巯嘌呤、维生素C（盐）和噻唑类席夫碱。 （5）Ce4+-Ru（phen）32+（二价钌-邻菲啰啉配合物） 体系 可用于草酸、丙酮酸、维生素C、枸橼酸、酒石酸、 戊二醛和部分氟代喹诺酮衍生物的测定。
25
酸性高锰酸钾 具有很强 的氧化能力，可以与多种 无机物和有机物进行氧化 还原反应，但由于其反应 的发光强度较弱，所以知 道20世纪70年代以后， 伴随着微弱光检测技术的 发展才得到广泛的研究和 应用。
化学发光原理及应用ppt课件
Part III. 化学发光法的临床应用
甲状腺功能的免疫分析 糖代谢紊乱的免疫分析 常见肿瘤标志物及其免疫分析 常见传染性疾病的免疫检测
– – –
病毒性肝炎 HIV感染 严重急性呼吸综合征（SARS)
其他免疫检测项目
甲状腺功能的免疫分析
• 甲状腺机能的常见评价指标及其临床
意义 1.甲状腺机能亢进 2.甲状腺功能减退 3.低T3和低T3、T4综合征
C肽
C肽测定用于了解II型糖尿病人是否需要胰岛素治疗，如 果C肽水平较低，葡萄糖刺激反应差，则表示表明立即或 最终需要胰岛素治疗，也可用于评价糖尿病酮症酸中毒病 人的胰岛功能。C肽的另一个重要的临床用途是各种低血 糖病因的鉴别。C肽水平升高科见于轻型糖尿病患者，常 见空腹血糖升高不多者C肽大多高于正常。胰岛素瘤患者， 如血中存在胰岛素抗体，血清C肽大都增高。胰腺肿瘤患 者行胰腺切除后，如血清C肽仍可测出，提示手术未能全 部切除胰腺组织。如果手术后一度阴性，后又称为阳性， 提示肿瘤复发或转移。 在肝硬化时，血浆胰岛素有升高趋势，其原因在于肝脏摄 取和降解胰岛素减少；但空腹血糖正常。
癌胚铁蛋白 糖蛋白 肝 癌胚抗原 糖蛋白 结肠、直肠、胰 腺、肺、乳腺
胰癌胚抗原 糖蛋白 胰腺
鳞状细胞抗 糖蛋白 肺、皮肤、头和 原 颈部
组织多肽抗 细胞角 乳腺、结肠 原 蛋白
CEA
• 原发性结肠癌，患者CEA升高者占45-90%. • 胰腺癌、胆管癌、胃癌、食道癌、肺癌、乳腺癌和泌尿系 •
三、低T3和低T3、T4综合征
• 低T3综合征是一种由于非甲状腺疾病 造成的甲状
腺激素异常，其发生与机体的代谢状态，基础疾 病的性质和严重程度以及外来因素，如用药等有 关。代谢状态差、基础病情加重时其发生率随之 增高；当病情好转、机体健康状况趋于正常时， 低T3状态可自行消失。
《化学发光分析》课件
《化学发光分析》PPT课 件
本课程将介绍化学发光分析的工作原理、分类、常用试剂和仪器、典型实验 操作步骤以及优点和应用。让我们一起探索这一极具活力和创新性的化学分 析技术。
化学发光分析概述
什么是化学发光分析？
化学发光分析是指利用发光剂 （luminophore）与感光器 （photodetector）在光激发条件下 发生发光反应进行分析的技术。
发光机制和原理
发光反应主要包括螯合发光、化学 发光、电化学发光和生物发光，其 基本原理为激发能量从分析物传递 到发光剂。
化学发光分析的分类
化学发光分析主要分为储能法、电 化学发光法、免疫分析法、分子印 迹技术法和气相化学发光分析 （GPCA）等。
优点和应用
快速、敏感、高效
化学发光法具有灵敏度高、特异性强、检测时间短和快速分析等优势，被广泛应用于临床、 食品、环境、药学、安全等领域。
数据统计和分析
4
利用计算机等工具进行数据的整理、计算与 分析，得出结果，并进行结果的验证和确认。
取样
用适当的方法取得样品，并得到有效的样品。
发光检测
激发分析样品使其产生发光，并利用仪器对 其进行检测。
案例分析和总结
CRO公司使用化学发光分析技术加 快药代动力学评估
合同研究组织（CRO）将计划100名志愿者的药代动力 学模拟研究里程碑提前了八个月，其采用了高通量类 似物筛选、高通量药代动力学测定和新一代大规模并 行化药代动力学建模等技术。这些技术包括，化学发 光法作为测定细胞器的特异性标记的方法。
电化学发光分析
电化学发光分析仪（ECL）是用于 电化学发光分析的专用设备，适用 于光谱分析和光度测定等分பைடு நூலகம்。
酶标仪
酶标仪是一种测量酶反应的光度仪 器，通常用于免疫学、生化学等领 域的分析。
本课程将介绍化学发光分析的工作原理、分类、常用试剂和仪器、典型实验 操作步骤以及优点和应用。让我们一起探索这一极具活力和创新性的化学分 析技术。
化学发光分析概述
什么是化学发光分析？
化学发光分析是指利用发光剂 （luminophore）与感光器 （photodetector）在光激发条件下 发生发光反应进行分析的技术。
发光机制和原理
发光反应主要包括螯合发光、化学 发光、电化学发光和生物发光，其 基本原理为激发能量从分析物传递 到发光剂。
化学发光分析的分类
化学发光分析主要分为储能法、电 化学发光法、免疫分析法、分子印 迹技术法和气相化学发光分析 （GPCA）等。
优点和应用
快速、敏感、高效
化学发光法具有灵敏度高、特异性强、检测时间短和快速分析等优势，被广泛应用于临床、 食品、环境、药学、安全等领域。
数据统计和分析
4
利用计算机等工具进行数据的整理、计算与 分析，得出结果，并进行结果的验证和确认。
取样
用适当的方法取得样品，并得到有效的样品。
发光检测
激发分析样品使其产生发光，并利用仪器对 其进行检测。
案例分析和总结
CRO公司使用化学发光分析技术加 快药代动力学评估
合同研究组织（CRO）将计划100名志愿者的药代动力 学模拟研究里程碑提前了八个月，其采用了高通量类 似物筛选、高通量药代动力学测定和新一代大规模并 行化药代动力学建模等技术。这些技术包括，化学发 光法作为测定细胞器的特异性标记的方法。
电化学发光分析
电化学发光分析仪（ECL）是用于 电化学发光分析的专用设备，适用 于光谱分析和光度测定等分பைடு நூலகம்。
酶标仪
酶标仪是一种测量酶反应的光度仪 器，通常用于免疫学、生化学等领 域的分析。
化学发光介绍-PPT
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肿瘤标志物
组织多肽抗原（TPA） 临床意义：主要见于恶性肿瘤；也可见于急性肝炎、胰腺炎、肝 炎等，但增高程度较轻。 前列腺特异性抗原（PSA） 临床意义：主要见于前列腺癌，是前列腺癌首选和最有应用价值 的肿瘤标志物。前列腺增生、前列腺炎、良性前列腺瘤、肾脏和泌 尿生殖系统疾病时，PSA可轻度升高
乙肝五项标志物的检测 3、HBeAg和HBeAb（HBeAg作为乙肝病毒复制增殖的间接指标） HBeAg阳性：说明病毒复制活跃，传染性强，是乙肝患者具有传
染性指标。可见于急、慢性乙肝和乙肝病毒携带者，如持续阳性， 表明乙肝转为慢性迁延性肝炎 HBeAb 在急性肝炎时，此抗体阳性表明乙肝复制缓解或终止，在慢性肝 炎或肝硬化患者，此抗体阳性说明乙肝病毒DNA与肝细胞发生整 合，提示病情较长，预后不佳。
27
肿瘤标志物
游离前列腺特异抗原（F-PSA）与F-PSA/PSA比值 临床意义：F-PSA 见于前列腺增生和前列腺癌，但前列腺癌增高 程度不如前列腺增生明显。 F-PSA/PSA降低 见于前列腺癌和前列腺增生，但前列腺癌的降低 程度明显高于前列腺增生 前列腺酸性磷酸酶（PAP） 临床意义：见于前列腺癌、前列腺增生，但前列腺癌增高更明显
22
肿瘤标志物
甲胎蛋白（AFP）
临床意义：常见于原发性肝炎、大多数卵巢和睾丸胚胎性肿瘤或 畸胎瘤，生殖腺外生殖细胞瘤，肝母细胞瘤，肝细胞瘤，转移性肝 癌等，也可见于婴幼儿肝炎，肝硬化、急性肝炎、重症肝炎恢复等， 但多为一过性升高，胎盘梗塞、剥离、羊水栓塞、高危妊娠、母儿 血型不合、糖尿病孕妇等血清AFP也升高。
15
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的定量检测
4、HBcAb
阳性：表示既往感染乙肝病毒，如高抗体水平持续存在提示乙肝 病毒可能还在复制，乙肝病毒感染后，此抗体是最早出现的标志 性抗体，持续时间长，并且几乎所有患者均产生抗体，所以此抗 体是流行病学调查指标。
肿瘤标志物
组织多肽抗原（TPA） 临床意义：主要见于恶性肿瘤；也可见于急性肝炎、胰腺炎、肝 炎等，但增高程度较轻。 前列腺特异性抗原（PSA） 临床意义：主要见于前列腺癌，是前列腺癌首选和最有应用价值 的肿瘤标志物。前列腺增生、前列腺炎、良性前列腺瘤、肾脏和泌 尿生殖系统疾病时，PSA可轻度升高
乙肝五项标志物的检测 3、HBeAg和HBeAb（HBeAg作为乙肝病毒复制增殖的间接指标） HBeAg阳性：说明病毒复制活跃，传染性强，是乙肝患者具有传
染性指标。可见于急、慢性乙肝和乙肝病毒携带者，如持续阳性， 表明乙肝转为慢性迁延性肝炎 HBeAb 在急性肝炎时，此抗体阳性表明乙肝复制缓解或终止，在慢性肝 炎或肝硬化患者，此抗体阳性说明乙肝病毒DNA与肝细胞发生整 合，提示病情较长，预后不佳。
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肿瘤标志物
游离前列腺特异抗原（F-PSA）与F-PSA/PSA比值 临床意义：F-PSA 见于前列腺增生和前列腺癌，但前列腺癌增高 程度不如前列腺增生明显。 F-PSA/PSA降低 见于前列腺癌和前列腺增生，但前列腺癌的降低 程度明显高于前列腺增生 前列腺酸性磷酸酶（PAP） 临床意义：见于前列腺癌、前列腺增生，但前列腺癌增高更明显
22
肿瘤标志物
甲胎蛋白（AFP）
临床意义：常见于原发性肝炎、大多数卵巢和睾丸胚胎性肿瘤或 畸胎瘤，生殖腺外生殖细胞瘤，肝母细胞瘤，肝细胞瘤，转移性肝 癌等，也可见于婴幼儿肝炎，肝硬化、急性肝炎、重症肝炎恢复等， 但多为一过性升高，胎盘梗塞、剥离、羊水栓塞、高危妊娠、母儿 血型不合、糖尿病孕妇等血清AFP也升高。
15
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的定量检测
4、HBcAb
阳性：表示既往感染乙肝病毒，如高抗体水平持续存在提示乙肝 病毒可能还在复制，乙肝病毒感染后，此抗体是最早出现的标志 性抗体，持续时间长，并且几乎所有患者均产生抗体，所以此抗 体是流行病学调查指标。
化学发光PPT课件
A+B → C*, C* → C+hv 该发光反应的化学发光强度取决于反应速度dp/dt和反应 的化学发光量子效率（ ΦCL ）
ICL（T）= ΦCLdp/dt
常用化学发光试剂
A 鲁米诺（luminol）及其衍生物
（3—氨基—邻苯甲酰肼）
在碱性条件下能被许多氧化剂（例如H2O2,O2,ClO-等）氧化而发 出蓝色光，量子产率介于0.01~0.05之间是一个研究最早，最多，
适用范围广
光激发化学发光特点
高灵敏度 低本底 适用范围广
酶的活性、受体-配体反应、低亲和力的反应、第二信使 水平、DNA、RNA、蛋白质、多肽、碳水化合物、小分 子、大分子
易使用 高通量
光激发化学发光
特点：
2. 低本底 第一，天然荧光寿命小，而发光微粒的稳定发光时间超过1秒，可采取时间分辨模式采 集光信号，也就是在激光器关闭后50-100毫秒采集光信号。 第二，由于LiCA采用680nm红光激发，而红光的能级几乎不可能激发生物样品或微孔 板中的荧光物质，故本底很低。 第三，LiCA发射光的波长比激发光的波长短，能量更高，所以称为化学发光。而荧光 是激发光为高能量的而发射光为低能量的。由于生物体内富有天然的荧光物质，用荧 光法测定生物样品本底会较高，而LiCA检测反其道而行之，采用低进高出，有效降低 本底。
CL基本类型
按反应机理 自身化学发光、 敏化化学发光、电致化学发光 自身发光：是指被测物质为反应物直接参与化学反应， 利用自身化学反应释放的能量激发产物分子的光辐射。 可用反应式表示为：
A+B → C*+D， C* → C+hv
这类最普遍，多数有机物分子在液相中的化学反应属于这一类型
CL基本类型
ICL（T）= ΦCLdp/dt
常用化学发光试剂
A 鲁米诺（luminol）及其衍生物
（3—氨基—邻苯甲酰肼）
在碱性条件下能被许多氧化剂（例如H2O2,O2,ClO-等）氧化而发 出蓝色光，量子产率介于0.01~0.05之间是一个研究最早，最多，
适用范围广
光激发化学发光特点
高灵敏度 低本底 适用范围广
酶的活性、受体-配体反应、低亲和力的反应、第二信使 水平、DNA、RNA、蛋白质、多肽、碳水化合物、小分 子、大分子
易使用 高通量
光激发化学发光
特点：
2. 低本底 第一，天然荧光寿命小，而发光微粒的稳定发光时间超过1秒，可采取时间分辨模式采 集光信号，也就是在激光器关闭后50-100毫秒采集光信号。 第二，由于LiCA采用680nm红光激发，而红光的能级几乎不可能激发生物样品或微孔 板中的荧光物质，故本底很低。 第三，LiCA发射光的波长比激发光的波长短，能量更高，所以称为化学发光。而荧光 是激发光为高能量的而发射光为低能量的。由于生物体内富有天然的荧光物质，用荧 光法测定生物样品本底会较高，而LiCA检测反其道而行之，采用低进高出，有效降低 本底。
CL基本类型
按反应机理 自身化学发光、 敏化化学发光、电致化学发光 自身发光：是指被测物质为反应物直接参与化学反应， 利用自身化学反应释放的能量激发产物分子的光辐射。 可用反应式表示为：
A+B → C*+D， C* → C+hv
这类最普遍，多数有机物分子在液相中的化学反应属于这一类型
CL基本类型
化学发光法检测传染病优秀课件优选ppt资料
第十一页，共48页。
AutolumiS2000微粒子化学发光仪
第十二页，共48页。
第十三页，共48页。
全自动化学发光免疫分析(fēnxī)系统开发及其产业化，在2021 年12月通过国家科学技术委员会的鉴定，鉴定委员会认为：
该项目具有创新 性和自主(zìzhǔ)知识 产权，整体达到国际 先进水平。
❖ 批内、批间的分析重现性。
第二十二页，共48页。
微粒子化学发光试剂(shìjì)的精密度
HCV
1
2
3
4
5
…… Mean SD CV
批内 86.11 86.36 88.40 87.90 86.43 …… 86.27 1.55 1.79%
批间 74.59 73.63 69.64 71.90 71.96 …… 71.01 3.20 4.50%
S1, S2阴性, S3,S4,S5,S6阳性
L1、L2阳性， L3阴性，L4阴性
传统酶免法 特异性
(-/-)20/20 (+/+)3/3
(-/-)20/20 (-/-)15/15 (+/+)9/10
(-/-)15/15 (+/+)9/10
(-/-)15/15 (+/+)14/15
(-/-)29/30 (+/+)29/30 (-/-)18/20 (+/+)20/20 (-/-)20/20 (+/+)10/10
4.91% 2.14%
HBsAg
试剂(shìjì)性能多中心临床评估
HIV
HCV
相关性 显著相关 显著相关
相关系数 0.99 0.93
线性系数 0.98 0.99
AutolumiS2000微粒子化学发光仪
第十二页，共48页。
第十三页，共48页。
全自动化学发光免疫分析(fēnxī)系统开发及其产业化，在2021 年12月通过国家科学技术委员会的鉴定，鉴定委员会认为：
该项目具有创新 性和自主(zìzhǔ)知识 产权，整体达到国际 先进水平。
❖ 批内、批间的分析重现性。
第二十二页，共48页。
微粒子化学发光试剂(shìjì)的精密度
HCV
1
2
3
4
5
…… Mean SD CV
批内 86.11 86.36 88.40 87.90 86.43 …… 86.27 1.55 1.79%
批间 74.59 73.63 69.64 71.90 71.96 …… 71.01 3.20 4.50%
S1, S2阴性, S3,S4,S5,S6阳性
L1、L2阳性， L3阴性，L4阴性
传统酶免法 特异性
(-/-)20/20 (+/+)3/3
(-/-)20/20 (-/-)15/15 (+/+)9/10
(-/-)15/15 (+/+)9/10
(-/-)15/15 (+/+)14/15
(-/-)29/30 (+/+)29/30 (-/-)18/20 (+/+)20/20 (-/-)20/20 (+/+)10/10
4.91% 2.14%
HBsAg
试剂(shìjì)性能多中心临床评估
HIV
HCV
相关性 显著相关 显著相关
相关系数 0.99 0.93
线性系数 0.98 0.99
光激化学发光技术介绍45页PPT
▪ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
▪
30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
谢谢！
45
光激化学发光技术介绍
51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法， 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常会发现，法律就是这样 一种的 网，触 犯法律 的人， 小的可 以穿网 而过， 大的可 以破网 而出， 只有中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏，庇 护着我 们大家 ；它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿
▪
26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
▪
27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
▪
28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
化学发光ppt课件
（1）能快速地释放出足够的能量 （化学发光反应多为氧化还原反应， 激发能与反应能相当，DE=170～300 kJ/mol；发光位于可见光区； （2）化学反应的能量至少能被一种物质所接受并使之生成激发态； （3）激发态分子能够以辐射跃迁的方式返回基态
CL基本原理
在化学发光（chemluminescence, CL）中，由化学反应 产生能的原子或分子由激发态回到基态时所产生的这一 光辐射现象叫化学发光。根据化学发光的强度测定物质 含量的分析方法叫化学发光分析。
常用化学发光试剂
A 鲁米诺（luminol）及其衍生物
（3—氨基—邻苯甲酰肼）
在碱性条件下能被许多氧化剂（例如H2O2,O2,ClO-等）氧化而发 出蓝色光，量子产率介于0.01~0.05之间是一个研究最早，最多，
应用最广泛的发光试剂。 pH 10-12 水溶性好
O
OHale Waihona Puke NH NHNH2O
鲁米诺
NH NH H2N O
逐级放大的化学反应的结果。 感光微粒富含感光化合物，在光照射后每个微粒会释放出60000个/s离 子氧，离子氧作用于发光微粒中的二甲基噻吩衍生物产生大量紫外光完 成第二级放大；紫外光激发包埋在发光微粒中的镧系元素释放光能完成 第三级放大过程。三级梯度放大过程使LiCA的检测限低至10-15摩尔。
低背景 适用范围广
化学发光强度与反应物浓度的关系
化学发光强度与化学反应速度（dp/dt）相关联，而一切 影响反应速度的因素多可以作为建立测定方法的依据。 化学发光反应一般可表示为：
A+B → C*, C* → C+hv 该发光反应的化学发光强度取决于反应速度dp/dt和反应 的化学发光量子效率（ ΦCL ）
ICL（T）= ΦCLdp/dt
CL基本原理
在化学发光（chemluminescence, CL）中，由化学反应 产生能的原子或分子由激发态回到基态时所产生的这一 光辐射现象叫化学发光。根据化学发光的强度测定物质 含量的分析方法叫化学发光分析。
常用化学发光试剂
A 鲁米诺（luminol）及其衍生物
（3—氨基—邻苯甲酰肼）
在碱性条件下能被许多氧化剂（例如H2O2,O2,ClO-等）氧化而发 出蓝色光，量子产率介于0.01~0.05之间是一个研究最早，最多，
应用最广泛的发光试剂。 pH 10-12 水溶性好
O
OHale Waihona Puke NH NHNH2O
鲁米诺
NH NH H2N O
逐级放大的化学反应的结果。 感光微粒富含感光化合物，在光照射后每个微粒会释放出60000个/s离 子氧，离子氧作用于发光微粒中的二甲基噻吩衍生物产生大量紫外光完 成第二级放大；紫外光激发包埋在发光微粒中的镧系元素释放光能完成 第三级放大过程。三级梯度放大过程使LiCA的检测限低至10-15摩尔。
低背景 适用范围广
化学发光强度与反应物浓度的关系
化学发光强度与化学反应速度（dp/dt）相关联，而一切 影响反应速度的因素多可以作为建立测定方法的依据。 化学发光反应一般可表示为：
A+B → C*, C* → C+hv 该发光反应的化学发光强度取决于反应速度dp/dt和反应 的化学发光量子效率（ ΦCL ）
ICL（T）= ΦCLdp/dt
化学发光介绍 ppt课件
2、定量测定HBeAg和HBeAb浓度的变化，可以反映病情变化和治疗效果。明确测定 HbeAg向抗-Hbe转换的时期，即表现为HbeAg浓度下降和抗-Hbe浓度升高的过程。高浓 度的HbeAg还可间接提示病毒处于高复制状态，具有较高的传染性。高浓度的抗-Hbe一方 面提示病情的好转，而在某些时候（如肝功能指标很差）可能与肝坏死、肝硬化、肝癌有 关。
缺点
化学发光 放射免疫 酶联免疫 时间分辨 电化学发光
操作简单，成本较低，灵 进口试剂成本较高，国产 敏度较高，试剂较稳定 试剂合理
试剂成本低，灵敏度较高 操作复杂操作简单
灵敏度低，适用于定性和 半定量
灵敏度较高，试剂较稳定 操作复杂，反应时间长， 试剂成本较高
灵敏度较高，试剂较稳定 试剂成本高，仪器维护费 用较高，有本底干扰
收费标准 每月标本量 每年毛收入 每年成本
(元)
(万元)
(万元)
乙肝两对半
180
15*22天
71.28
化学发光免疫仅乙肝五项年净收入总计47.52万元
23.76 每人份60元
年净收入/ 万元(保守
估计)
47.52
乙肝两对半
25
15*22天
9.90
1.19
8.71
每人份3元
酶法试剂乙肝五项年净收入总计 8.71万元
3、性激素系列
（LH,FSH,TSH,E2,PRO,PRL,TES,HC G,B-HCG…）
8、优生优育类
（TOX,CMV,HSVI,HSVII,RUB）
4、甲状腺功能
9、其他类
（T3,T4,FT3,FT4,TSH,TM,TG,TPO…） （ALB,一些药物测试等）
5、糖尿病系列
光激化学发光技术.pptx
光激化学发光分析技术
光激化学发光（LICA） 新一代化学发光技术
Light Initiated Chemiluminescent Assay
• 以纳米微粒为基础 • 无需固相分离
• 均相化学发光免疫技术
感光微球
发光微球
发光免疫分析 广泛应用于临床定量检测中
时
间
发
荧
分
光
光
酶
辨
直
电
氧
偏
促
荧
接
化
通
振
化
感光 微粒
激光照射 （680nm）
200nm
发光
微粒 发光
（615nm）
结合即发光 不结合不发光
光激化学发光（LICA）
反应原理 • 感光微球
➢ 覆盖感光物质酞箐，包被链霉亲和素
➢ 接受激光照射（680nm），生成高能单线态氧
塑料-活化基团
酞箐（鲁米诺类化学发光物质）
1O2
激光照射（680nm）
酞箐
光
化
学
道
免
学
免
学
发
免
疫
发
疫
发
光
疫
分
光
分
光
试
析
析
验
20世纪60年代 1977
1982
1983
1990
1993
光激化学发光（LICA） 集多种技术的优秀性能为一体
• 独特信号产生方式（能量转移） 双标记 免分离 荧光素（Eu）
• 纳米固相材料（悬浮性能-动力学-三维立体） • 生物素-亲和素系统（放大效应）
高能单线态氧的产生和传递
1O2
• 1O2 生存时间4微秒
光激化学发光（LICA） 新一代化学发光技术
Light Initiated Chemiluminescent Assay
• 以纳米微粒为基础 • 无需固相分离
• 均相化学发光免疫技术
感光微球
发光微球
发光免疫分析 广泛应用于临床定量检测中
时
间
发
荧
分
光
光
酶
辨
直
电
氧
偏
促
荧
接
化
通
振
化
感光 微粒
激光照射 （680nm）
200nm
发光
微粒 发光
（615nm）
结合即发光 不结合不发光
光激化学发光（LICA）
反应原理 • 感光微球
➢ 覆盖感光物质酞箐，包被链霉亲和素
➢ 接受激光照射（680nm），生成高能单线态氧
塑料-活化基团
酞箐（鲁米诺类化学发光物质）
1O2
激光照射（680nm）
酞箐
光
化
学
道
免
学
免
学
发
免
疫
发
疫
发
光
疫
分
光
分
光
试
析
析
验
20世纪60年代 1977
1982
1983
1990
1993
光激化学发光（LICA） 集多种技术的优秀性能为一体
• 独特信号产生方式（能量转移） 双标记 免分离 荧光素（Eu）
• 纳米固相材料（悬浮性能-动力学-三维立体） • 生物素-亲和素系统（放大效应）
高能单线态氧的产生和传递
1O2
• 1O2 生存时间4微秒
光激化学发光-新一代化学发光共36页
66、节制使快乐增加并使享受加强。 ——德 谟克利 特 67、今天应做的事没有做，明天再早也 是耽误 了。——裴斯 泰洛齐 68、决定一个人的一生，以及整个命运 的，只 是一瞬 之间。 ——歌 德 69、懒人无法享受休息之乐。——拉新一代化学发光
11、用道德的示范来造就一个人，显然比用法律来约束他更有价值。—— 希腊
12、法律是无私的，对谁都一视同仁。在每件事上，她都不徇私情。—— 托马斯
13、公正的法律限制不了好的自由，因为好人不会去做法律不允许的事 情。——弗劳德
14、法律是为了保护无辜而制定的。——爱略特 15、像房子一样，法律和法律都是相互依存的。——伯克
光激化学发光技术介绍
GG-SA
Biotin-HBcAg
Anti-HBc- FG
检测平台
LiCA SP
• 双加样臂 • 气置换式微量进样泵 • 液面自动检测功能 • 标本、试剂装载
– 100个标本 – 10个试剂位
LiCA HT
• 一次装载300个测试 • 自动高速进样：0.5秒/
孔 • 自动温育、震荡和读数 • 300个测试仅需50分钟
基本包被模式
GG-Streptavidin（SA）
FG- Antibody（Ab）
基本反应模式
biotin-antigen
primary Ab
secondary Ab (or protein A, G, LA)
• 配体－受体 应用类型
• 激酶 • 蛋白－蛋白 • 免疫 • 蛋白酶
TNFa-sTNFR1 配体－受体(1)
LiCA发光原理
• 核心原理是能量的近距离转移 • 转移的介质是高能态离子氧 • 红色激光680nm照射，感光微粒释放离子氧（4微秒），传播直
径200nm，发光微粒（520～618nm），高能级的光 • 反应的基础有赖于两种微粒的相互接近 • 反应体系中，微粒的浓度很低，碰撞机率很低，本底信号微弱
Bioti -TNFa sTNFR1 n
anti-TNFR1 IgG
Protein FG A-
TNFa-sTNFR1 配体－受体(1)
GG-SA
Bioti -TNFa sTNFR1 n
anti-TNFR1 IgG
Protein FG A-
TNFa-sTNFR1 配体－受体(1)
GG-SA
Bioti -TNFa sTNFR1 n
GG-SA
Bioti -anti- TNFa n TNFa
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博陽診斷
LiCA原理—举例（双抗体夹心法）
感光微粒— 亲和素
生物素Anti-HBs
HBsAg
发光微粒Anti-HBs
激发光 680 nm
激发光 680 nm
＞200nm
不含待测抗原
发射光 610 nm
＜200nm
博陽診斷
LiCA发光原理
➢ 能量的近距离转移 ➢ 转移的介质是单线态氧 ➢ 两种微粒相互接近——200nm
项目 乙型肝炎 乙型肝炎 乙型肝炎
肿瘤 肿瘤 肿瘤 甲状腺
临床评估单位 上海市第一人民医院
北京协和医院 上海市瑞金医院 上海市中山医院 上海市瑞金医院 上海市新华医院 上海市第六人民医院
参比系统 雅培I2000 强生Vitros 国产试剂 罗氏E170 雅培I2000 罗氏e601 西门子Centaur
相关性
相关系数
进口
光激化学发光 LiCA
Light Initiated Chemiluminescent Assay
➢ 是以纳米级高分子微粒为基础，由光激发的一种均 相免洗的化学发光分析技术。具有快速、均相（免 洗）、高灵敏度和操作简便等特点的新一代技术。
➢ 是化学发光免疫分析技术的又一个新的里程碑
博陽診斷
LiCA技术基础 – 两种高分子微粒：感光微粒和发光微粒 – 两种微粒近距离接近。是感光微粒接受 激发光照射释放出单线态氧构成 “氧桥” 传递能量，使发光微粒发出光信号
高通量 易使用 高灵敏度 纳米微粒技术 离子氧传递能量 目标分子多样性
博陽診斷
优势
反应充分 结果精密度高 500 测试/小时
免疫=生化 10-15 mol 提高反应面积和抗体载量 不易受反应环境影响 蛋白质、核酸等
18
工作 原理
性能 参数
LiCA
技术 特点
系统 平台
博陽診斷
LiCA产品平台
LiCA HT 均相发光免疫分析仪
LiCA SP 移液工作站
博陽診斷
LiCA SP 移液工作站
样品臂 枪头架 微孔板
试剂臂 试剂仓
博陽診斷
试管架 废物盒
LiCA微孔板
博陽診斷
未包被任何抗原/抗体 96个反应空杯
LiCA HT 均相免疫发光分析仪
上盖板 托盘
博陽診斷
LiCA项目菜单
甲状腺
T3 T4 FT3 FT4 TSH TSH-3 ATPO ATG
光激化学发光
ight nitiated L hiemCilAuminescence ssay
4G
博陽診斷
工作 原理
性能 参数
LiCA
技术 特点
系统 平台
博陽診斷
免疫标记技术发展
放免
荧光免疫
酶联免疫
80年代
70年代60年代源自国产博陽診斷化学发光 90年代
LiCA（LOCI） 电化学发光 直接化学发光 酶促化学发光
博陽診斷
LiCA原理—两种微粒 感光微粒
发光微粒
➢ 直径：200nm ➢ 包被亲和素 ➢ 红色激光680nm照射
释放单线态氧
博陽診斷
➢ 直径：200nm ➢ 用于包被抗体/抗原 ➢ 接受单线态氧
产生610nm光
LiCA原理—— 单线态氧（能量载体）
单三线线态态氧氧（（激基发态态））
– 半衰期：4μS – 作用距离：200nm
博陽診斷
LiCA性能多中心临床评估（乙型肝炎）
乙肝 HBsAg Anti-HBs HBeAg Anti-HBe Anti-HBc
灵敏度 97.92% 95.98% 95.24% 90.77% 91.54%
N=453,上海第一人民医院； 参比试剂：雅培I2000
博陽診斷
特异性 100% 97.38% 100% 97.21% 98.9%
性激素
BhCG P T FSH LH E2 E3 Prolactin
肿瘤标志物 心肌标志物 新陈代谢
AFP
cTnI
C-peptide
CEA
MyO
Insulin
CA12-5
mCKMB iPTH
CA19-9
BNP
DPD
CA153
NT-proBNP
CA50
hsCRP
CA24-2
CY21-1
fPSA
PSA
NSE
O2-O2-
O2-
• 取样量仅25μl，试剂中有表面活性剂
博陽診斷
LiCA的应用拓展
生命科学的基础研究 新药的筛选
➢ 目200标0-小20分09子年的光激多化样学性发光相关文献
• 蛋白 间接相关 直接相关
•SC核I 酸
10
/
核心期刊
/
4
•糖
博陽診斷
17
LiCA的技术特点与优势
技术特点
均相免疫 免清洗/分离
A
B
dA=200nm
dB=1μm
等质量比表面积 A : B = 5
博陽診斷
LiCA抗体载量优势
Y
Y
LiCA
磁微粒
博陽診斷
LiCA的技术特点
免洗 随机误差 / 交叉污染
➢ 加样品牌
清1准平洗5确台%500 Te测s试ts速/度Hour
大量纯➢➢化孵洗水育涤清洗罗雅管氏培路提升（管一经2e路10般71定济00半i81（（期00年和ee自%免0更640一01换动洗社11换））化/）会免平效分台废益离11870液000 处理
光激化学发光 = 光能→化学能→光能
博陽診斷
工作 原理
性能 参数
LiCA
技术 特点
系统 平台
博陽診斷
LiCA技术特点——均相反应
–均相反应
反应充分 速度更快
酶标板，板式
博陽診斷
磁微粒，微米级，非均相
LiCA微粒，纳米级，类均相
微粒包被
* *
*
*
* *
* **
*
*
博陽診斷
等质量微粒（比表面积）
符合率 99.78% 96.69% 99.59% 95.36% 94.48%
LiCA性能多中心临床评估（肿瘤标志物）
相关性
相关系数
线性系数
AFP
显著相关
0.99
0.74
CEA
显著相关
0.93
0.89
N=200，上海市中山医院 参比试剂：罗氏E170
博陽診斷
LiCA性能多中心临床评估（肿瘤标志物）
i2000
200
CV ＜ 5% 水质➢要孵求育达贝标克快曼速进口原装AD管cxcie昂8纳类s0s贵02米均级相别反需繁成达琐微应本14到00粒技00无包术害环被境标准
➢ 检测
高额隐5性%成本
博陽診斷
LiCA的抗干扰性
• 采用680nm弱能量红光激发
• 单线态氧不易受外界环境因素干扰
O2-
O2-
O2-
SCC
pro-GRP
PG-Ⅰ/Ⅱ
传染性疾病
HBsAg Anti-HBs HBeAg Anti-HBe Anti-HBc Anti-HAV IgM Anti-HBc IgM Anti-HCV Anti-HIV Anti-TP
博陽診斷
24
工作 原理
性能 参数
LiCA
技术 特点
系统 平台
博陽診斷
LiCA 系统的多中心临床评估
LiCA原理—举例（双抗体夹心法）
感光微粒— 亲和素
生物素Anti-HBs
HBsAg
发光微粒Anti-HBs
激发光 680 nm
激发光 680 nm
＞200nm
不含待测抗原
发射光 610 nm
＜200nm
博陽診斷
LiCA发光原理
➢ 能量的近距离转移 ➢ 转移的介质是单线态氧 ➢ 两种微粒相互接近——200nm
项目 乙型肝炎 乙型肝炎 乙型肝炎
肿瘤 肿瘤 肿瘤 甲状腺
临床评估单位 上海市第一人民医院
北京协和医院 上海市瑞金医院 上海市中山医院 上海市瑞金医院 上海市新华医院 上海市第六人民医院
参比系统 雅培I2000 强生Vitros 国产试剂 罗氏E170 雅培I2000 罗氏e601 西门子Centaur
相关性
相关系数
进口
光激化学发光 LiCA
Light Initiated Chemiluminescent Assay
➢ 是以纳米级高分子微粒为基础，由光激发的一种均 相免洗的化学发光分析技术。具有快速、均相（免 洗）、高灵敏度和操作简便等特点的新一代技术。
➢ 是化学发光免疫分析技术的又一个新的里程碑
博陽診斷
LiCA技术基础 – 两种高分子微粒：感光微粒和发光微粒 – 两种微粒近距离接近。是感光微粒接受 激发光照射释放出单线态氧构成 “氧桥” 传递能量，使发光微粒发出光信号
高通量 易使用 高灵敏度 纳米微粒技术 离子氧传递能量 目标分子多样性
博陽診斷
优势
反应充分 结果精密度高 500 测试/小时
免疫=生化 10-15 mol 提高反应面积和抗体载量 不易受反应环境影响 蛋白质、核酸等
18
工作 原理
性能 参数
LiCA
技术 特点
系统 平台
博陽診斷
LiCA产品平台
LiCA HT 均相发光免疫分析仪
LiCA SP 移液工作站
博陽診斷
LiCA SP 移液工作站
样品臂 枪头架 微孔板
试剂臂 试剂仓
博陽診斷
试管架 废物盒
LiCA微孔板
博陽診斷
未包被任何抗原/抗体 96个反应空杯
LiCA HT 均相免疫发光分析仪
上盖板 托盘
博陽診斷
LiCA项目菜单
甲状腺
T3 T4 FT3 FT4 TSH TSH-3 ATPO ATG
光激化学发光
ight nitiated L hiemCilAuminescence ssay
4G
博陽診斷
工作 原理
性能 参数
LiCA
技术 特点
系统 平台
博陽診斷
免疫标记技术发展
放免
荧光免疫
酶联免疫
80年代
70年代60年代源自国产博陽診斷化学发光 90年代
LiCA（LOCI） 电化学发光 直接化学发光 酶促化学发光
博陽診斷
LiCA原理—两种微粒 感光微粒
发光微粒
➢ 直径：200nm ➢ 包被亲和素 ➢ 红色激光680nm照射
释放单线态氧
博陽診斷
➢ 直径：200nm ➢ 用于包被抗体/抗原 ➢ 接受单线态氧
产生610nm光
LiCA原理—— 单线态氧（能量载体）
单三线线态态氧氧（（激基发态态））
– 半衰期：4μS – 作用距离：200nm
博陽診斷
LiCA性能多中心临床评估（乙型肝炎）
乙肝 HBsAg Anti-HBs HBeAg Anti-HBe Anti-HBc
灵敏度 97.92% 95.98% 95.24% 90.77% 91.54%
N=453,上海第一人民医院； 参比试剂：雅培I2000
博陽診斷
特异性 100% 97.38% 100% 97.21% 98.9%
性激素
BhCG P T FSH LH E2 E3 Prolactin
肿瘤标志物 心肌标志物 新陈代谢
AFP
cTnI
C-peptide
CEA
MyO
Insulin
CA12-5
mCKMB iPTH
CA19-9
BNP
DPD
CA153
NT-proBNP
CA50
hsCRP
CA24-2
CY21-1
fPSA
PSA
NSE
O2-O2-
O2-
• 取样量仅25μl，试剂中有表面活性剂
博陽診斷
LiCA的应用拓展
生命科学的基础研究 新药的筛选
➢ 目200标0-小20分09子年的光激多化样学性发光相关文献
• 蛋白 间接相关 直接相关
•SC核I 酸
10
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核心期刊
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4
•糖
博陽診斷
17
LiCA的技术特点与优势
技术特点
均相免疫 免清洗/分离
A
B
dA=200nm
dB=1μm
等质量比表面积 A : B = 5
博陽診斷
LiCA抗体载量优势
Y
Y
LiCA
磁微粒
博陽診斷
LiCA的技术特点
免洗 随机误差 / 交叉污染
➢ 加样品牌
清1准平洗5确台%500 Te测s试ts速/度Hour
大量纯➢➢化孵洗水育涤清洗罗雅管氏培路提升（管一经2e路10般71定济00半i81（（期00年和ee自%免0更640一01换动洗社11换））化/）会免平效分台废益离11870液000 处理
光激化学发光 = 光能→化学能→光能
博陽診斷
工作 原理
性能 参数
LiCA
技术 特点
系统 平台
博陽診斷
LiCA技术特点——均相反应
–均相反应
反应充分 速度更快
酶标板，板式
博陽診斷
磁微粒，微米级，非均相
LiCA微粒，纳米级，类均相
微粒包被
* *
*
*
* *
* **
*
*
博陽診斷
等质量微粒（比表面积）
符合率 99.78% 96.69% 99.59% 95.36% 94.48%
LiCA性能多中心临床评估（肿瘤标志物）
相关性
相关系数
线性系数
AFP
显著相关
0.99
0.74
CEA
显著相关
0.93
0.89
N=200，上海市中山医院 参比试剂：罗氏E170
博陽診斷
LiCA性能多中心临床评估（肿瘤标志物）
i2000
200
CV ＜ 5% 水质➢要孵求育达贝标克快曼速进口原装AD管cxcie昂8纳类s0s贵02米均级相别反需繁成达琐微应本14到00粒技00无包术害环被境标准
➢ 检测
高额隐5性%成本
博陽診斷
LiCA的抗干扰性
• 采用680nm弱能量红光激发
• 单线态氧不易受外界环境因素干扰
O2-
O2-
O2-
SCC
pro-GRP
PG-Ⅰ/Ⅱ
传染性疾病
HBsAg Anti-HBs HBeAg Anti-HBe Anti-HBc Anti-HAV IgM Anti-HBc IgM Anti-HCV Anti-HIV Anti-TP
博陽診斷
24
工作 原理
性能 参数
LiCA
技术 特点
系统 平台
博陽診斷
LiCA 系统的多中心临床评估