高效液相色谱柱使用注意事项
HPLC使用注意事项
HPLC使用注意事项高效液相色谱(HPLC)是一种常用的分析方法,适用于各种样品类型和复杂性。
为了确保HPLC的准确性和可靠性,有一些注意事项需要遵守。
以下是HPLC使用时的一些重要注意事项:1.选择合适的柱:根据所分析样品的性质和分离要求,选择适合的柱型、柱长度和粒径。
柱的性能直接影响到分离效果和峰形。
应定期检查柱的状态,保证柱的稳定性和工作寿命。
2.使用纯净的溶剂:使用优质的溶剂和试剂,避免其中含有杂质和离子,以免对实验结果产生影响。
可以使用反渗透水或高纯度的有机溶剂来制备溶液。
3.准备标准溶液:为了定量分析,准备一系列浓度递增的标准溶液。
确保标准溶液的准确度和精确度,并定期检查标准溶液的品质。
4.样品的准备:样品的准备非常重要,特别是对于复杂的样品,如生物样品。
样品应进行适当的前处理,以去除杂质、浓缩或降低干扰物浓度。
对于有机溶剂不溶的样品,可以使用溶剂萃取、固相萃取或其他样品处理方法。
5.控制流动性:流动性是保证HPLC分析准确性和重复性的关键。
使用适当的流速和流动相,以确保样品在柱中的适当保持时间和效果。
流速过高可能导致峰形变形或样品无法分离。
6.梯度洗脱的选择:在一些复杂的分离中,可以使用梯度洗脱来提高分离效果。
梯度洗脱时,需要根据样品特性和分离要求,选择合适的洗脱曲线和梯度程序。
7.实验参数的记录:在进行HPLC分析时,应详细记录实验参数,如流速、温度、柱型、流动相组成等。
这些参数记录对于结果的追溯和比较具有重要意义。
此外,还应记录任何异常或非典型结果,以便根据这些信息进行排查。
8.清洗和维护设备:定期进行HPLC设备的清洗和维护,以确保设备的正常运行和长期稳定性。
这包括清洗进样器、列室和检测器等部件。
定期更换柱和相关设备,以确保结果的准确性。
9.安全操作:在操作HPLC时,应遵守实验室的安全规范,确保个人安全和设备的安全。
避免使用有毒、易燃或易爆的溶剂,正确处理和处理废液。
10.定期校正和质量控制:定期校正和质量控制是确保HPLC分析准确性和可靠性的重要步骤。
液相色谱柱使用注意事项
液相色谱柱使用注意事项在使用液相色谱柱时,需要注意以下事项以保证柱子的性能和使用寿命。
1.流动相流动相是液相色谱分离的基础,应选择与样品相容、纯度高、稳定性好的流动相。
在使用前,应进行过滤和脱气处理,以避免对柱子造成损害。
2.柱子选择根据不同的样品和分离要求,应选择合适的液相色谱柱。
选择时需要考虑柱子的类型、粒径、孔径、填料等参数。
对于复杂的样品,建议使用具有更强分离能力的反相柱。
3.柱子清洁在使用前,应对液相色谱柱进行清洁,以去除柱子内部的杂质和污染物。
清洁时应使用温和的清洁剂,如甲醇、乙醇等,并避免使用强烈的清洁剂或酸碱溶液。
4.操作温度液相色谱柱应在规定的操作温度下使用。
过高的温度可能导致柱子的性能下降或损坏,而过低的温度则可能导致样品分离效果不佳。
在使用过程中,应密切关注柱温的变化。
5.压力变化压力变化是液相色谱分离的关键参数之一。
在使用过程中,应密切关注压力的变化情况。
若出现压力波动或异常升高,应立即采取措施解决问题,以免对柱子造成损害。
6.流动相流速流动相流速是影响液相色谱分离效果的重要因素之一。
应根据分离要求和样品性质选择合适的流速。
过快的流速可能导致柱子的性能下降或损坏,而过慢的流速则可能导致样品分离效果不佳。
7.样品处理在进样前,应对样品进行处理,以去除杂质和干扰物质。
处理方法包括样品萃取、净化、浓缩等。
处理时应避免对样品造成污染或损失。
8.柱子储存在使用完毕后,应对液相色谱柱进行妥善的储存。
储存时应避免阳光直射、高温、潮湿等不利环境条件。
同时,应定期对柱子进行检查和维护,以保证其性能和使用寿命。
高效液相色谱柱的正确使用 液相色谱操作规程
高效液相色谱柱的正确使用液相色谱操作规程色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。
对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。
关于色谱柱的安装、维护、保色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。
对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。
关于色谱柱的安装、维护、保存以及由色谱柱导致的这样那样的色谱故障也是一门学问。
高效液相色谱柱的正确使用包含:加装保护柱,过滤流动相和样品,净化样品,避免过高的柱压,注意温度和酸碱度,正确及时的冲洗等。
1.加装保护柱保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。
尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污染,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱必不可少的措施。
保护柱填料应与分析柱一致,粒径可较分析柱大。
保护柱属消耗品,经过一定次数的样品分析(5~1次)后,出现柱压显著升高或峰形变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。
2.过滤流动相和样品流动相通常由水或缓冲溶液与有机溶剂混合而成,原则上,所有经过色谱柱的流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有机溶剂用色谱纯级,水用石英亚沸水或其它超纯水时,在能确保水和有机溶剂的质量且没有受到污染时,过滤并无更多实际意义。
当流动相中含有缓冲盐时,则过滤是必要的,如前所述,当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异,夏季一般不超过48h,冬季一般不超过一周)后,在使用前还应重新过滤。
所配制的样品试液在注入流路系统前均要经.45μm(.22μm则更好)孔径滤膜过滤。
要注意区分水系和油系,二者不可混用,以防止滤膜溶解而造成污染。
装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换,以避免滤器因过载而起不到过滤作用。
HPLC使用注意事项
HPLC使用注意事项高效液相色谱(HPLC)是一种广泛应用于分析化学和生物化学领域的分离技术。
在使用HPLC时,以下是一些需要注意的事项:1.选择合适的柱:根据样品性质和分离要求选择适当的柱。
不同的柱材料和填料对样品的分离效果有不同的影响。
2.样品准备:样品的准备对于HPLC分析至关重要。
样品应该是纯净的,不含杂质。
如果有需要,可以通过萃取、浓缩或衍生化等方法对样品进行前处理。
3.流动相的选择:选择合适的流动相对于分离效果也是至关重要的。
流动相可以是各种溶剂或它们的混合物。
对于高效液相色谱来说,通常使用的是有机溶剂如甲醇、乙腈等。
还需要注意一些流动相的pH值,应根据样品的性质来选择。
4.流速和梯度条件:选择适当的流速和梯度条件以满足分离的需求。
流速过高可能会导致柱压升高和分离效果下降。
而流速过低则会降低分离效率。
5.注射量:注射量应根据样品和柱的容量来确定。
一般来说,注射量不宜过大,以免超出柱的容量范围。
6.检测器的选择:根据分析目的选择适当的检测器。
常用的检测器包括紫外可见光检测器、荧光检测器和质谱检测器等。
不同的检测器对不同的化合物有不同的灵敏度和选择性。
7.标定和校准:在进行HPLC分析之前,应该进行标定和校准以确保分析结果的准确性和可靠性。
标准品的选择和制备应严格按照相关的规范进行。
8.维护和保养:定期进行仪器和柱的维护和保养以保证仪器的正常运行。
比如清洗柱、更换柱和检测器的流体以及检查泄漏和杂质等。
9.数据分析和解释:在获得分析数据后,进行相应的数据分析和解释。
对峰进行积分、计算峰面积和峰高度等指标,并与标准品进行比较分析。
10.安全措施:在进行HPLC分析时,应遵守相关的安全操作规程,避免接触有毒和易燃物质。
总之,正确使用HPLC技术需要注意上述方面的事项,以保证分析结果的准确性和可靠性。
通过合理的实验设计和操作,可以获得满意的分离效果和分析结果。
实验室高效液相色谱安全使用及注意事项
实验室高效液相色谱安全使用及注意事项高效液相色谱是一种非常常用的分析技术,广泛应用于化学、生物、医药等领域。
在实验室中使用高效液相色谱需要注意一些安全问题,本文将介绍高效液相色谱的使用方法以及注意事项,以帮助实验室工作者更好地使用高效液相色谱。
一、高效液相色谱的使用方法1. 实验前准备在进行高效液相色谱实验前,需要进行一些准备工作。
首先,要检查设备是否正常工作,包括系统的泵、检测器、进样器、柱等是否工作正常。
其次,要检查试剂的浓度和纯度是否符合要求。
最后,要准备好实验所需的溶液和样品,并按照实验要求进行处理和标记。
2. 操作步骤高效液相色谱的操作步骤包括:样品进样、柱温控制、流动相控制、检测器设置等。
具体步骤如下:(1)样品进样将样品注入进样器中,注意不要超出进样器的容积范围。
(2)柱温控制根据实验要求设置柱温,通常情况下柱温为室温或略高于室温。
(3)流动相控制设置合适的流动相组合和流速,以达到最佳分离效果。
(4)检测器设置根据实验要求选择合适的检测器,比如紫外检测器、荧光检测器等,并设置检测器的参数,如波长、灵敏度等。
3. 实验后处理实验结束后,需要对设备和试剂进行清洗和储存。
首先,要将进样器和柱进行清洗,以避免残留样品和流动相对下一次实验的影响。
其次,要将检测器进行清洗和维护,以保证检测器的正常工作。
最后,要妥善储存试剂和设备,以便下一次实验使用。
二、高效液相色谱的注意事项1. 实验室安全在使用高效液相色谱时,需要注意实验室的安全问题。
首先,要穿戴好实验室所需的防护设备,如实验服、手套、护目镜等。
其次,要保持实验室的整洁和干净,避免化学品的混合和交叉污染。
最后,要遵守实验室的规定和操作程序,以确保实验室的安全。
2. 操作注意事项在进行高效液相色谱实验时,需要注意以下几个方面:(1)样品的选择和准备在选择样品时,要注意样品的性质和纯度,以避免对实验结果的影响。
同时,要进行适当的样品处理和标记,以确保样品的准确性和可靠性。
watersxbridge苯基柱使用说明
watersxbridge苯基柱使用说明摘要:1.介绍watersxbridge 苯基柱2.watersxbridge 苯基柱的使用方法3.watersxbridge 苯基柱的注意事项4.结论正文:一、介绍watersxbridge 苯基柱watersxbridge 苯基柱是一种高效液相色谱柱,采用苯基聚合物填充物,具有良好的分离效果。
该柱具有较高的柱效和稳定性,广泛应用于药物分析、生物化学、环境监测等领域。
二、watersxbridge 苯基柱的使用方法1.安装色谱柱:在安装色谱柱前,需要确保仪器的进样器、检测器等部件均已经正确安装。
然后将色谱柱的一端通过进样器的接口与仪器相连,另一端通过检测器的接口与仪器相连。
2.柱子清洗:在使用色谱柱之前,需要对色谱柱进行清洗,以去除柱子在生产和运输过程中可能残留的杂质。
清洗时,可以使用甲醇或乙腈等溶剂进行冲洗,直到柱子内流出的溶剂无杂质为止。
3.样品进样:在样品进样前,需要将样品溶解在流动相中,并确保样品与流动相的兼容性。
进样时,应避免过高的压力损坏色谱柱。
4.流动相选择:watersxbridge 苯基柱适用于多种流动相,如水、甲醇、乙腈等。
选择流动相时,需要根据样品的性质和分析要求来确定。
5.检测器设置:根据样品的性质和分析要求,选择合适的检测器,如紫外检测器、荧光检测器等。
三、watersxbridge 苯基柱的注意事项1.在使用过程中,要避免色谱柱受到剧烈的震动或摔落,以免损坏柱子。
2.在清洗色谱柱时,应避免使用强酸、强碱等有损柱子性能的溶剂。
3.在进样时,应避免样品中杂质过多,以免堵塞色谱柱。
4.在使用过程中,应定期对色谱柱进行清洗和保养,以延长柱子的使用寿命。
四、结论watersxbridge 苯基柱是一种性能优异的液相色谱柱,广泛应用于各个领域。
高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养
高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养一、高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养1. 注意安全在进行高效液相色谱仪色谱柱的维护和保养时,应注意安全,不要将手放在柱子上或柱子的内部,以免受到电击。
同时,也要注意防止外界的杂质进入柱内,避免影响柱子的性能。
2. 清洁色谱柱首先,使用湿抹布将色谱柱表面清洁干净,然后使用笔刷和溶剂将柱子内壁清洁干净。
清洁完毕后,需要将柱子放置在洁净的空气中,以便完全自然晾干。
3. 保养色谱柱在保养色谱柱时,需要注意柱子的密封,定期检查柱子的密封情况,如果发现柱子有渗漏现象,及时采取措施进行修理。
另外,还需要定期检查柱子的耐压强度,以免因耐压强度不足而造成柱子的破裂。
4. 定期更换色谱柱定期更换色谱柱是高效液相色谱仪色谱柱的保养工作之一。
色谱柱的使用寿命一般为2-3年,随着使用时间的延长,色谱柱的性能会发生变化,从而影响测试结果的准确性。
因此,需要定期更换色谱柱,以保证测试结果的可靠性。
二、色谱柱的存储1. 色谱柱应存放在干燥、无污染的环境中,避免阳光直射,以免受到湿气和污染物的侵害。
2. 色谱柱应放置在室温下,避免高温环境,以免影响色谱柱的性能。
3. 色谱柱应存放在通风良好的环境中,避免过多的湿气,以免影响色谱柱的密封性能。
4. 色谱柱应存放在有足够空间的地方,以免柱子撞击,造成损坏。
5. 色谱柱应存放在牢固的架子上,以免柱子受到重力的影响,造成损坏。
6. 色谱柱应存放在有足够防护措施的地方,以免受到杂质的污染,影响柱子的性能。
三、总结高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养是高效液相色谱仪色谱柱使用的必要措施,既要注意安全,又要注意清洁和保养,定期更换柱子,并且要认真维护存储环境,以确保高效液相色谱仪色谱柱的正常使用。
高效液相色谱仪与色谱柱使用中应注意的事项
高效液相色谱仪与色谱柱使用中应注意的事项答案:色谱柱是高效液相色谱仪的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透粉性,延长柱子的使用寿命非常重要。
因此对高效液相色谱仪色谱柱的维护是关键。
高效液相色谱仪色谱柱是消耗品,因此尽可能地仔细使用会延长色谱柱的寿命。
1、色谱柱使用前注意事项色谱柱的储存液无特殊说明均为评价报告所示的流动相。
在使用前一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
如胺基(NH2)氰基(CN)柱均为正相条件下评价,所以如果使用条件为反相条件时,请用一中介流动相(如异丙醇)。
先置换掉柱内的储存液,然后再应用反相条件对于C18固定相采用的是甲醇-水为评价流动相,若要使用含盐浓度较高的流动相,使用前请用超纯水或甲醇含量相对较低的甲醇-水顶替掉原来的评价流动相,否则会对色谱柱造成极大的伤害,将会明显地减少色谱柱使用寿命。
2、色谱的使用方向高效液相色谱仪色谱柱标签上的箭头所示方向是评价时流动相流动的方向,使用过程相流动的方向也按此方向。
3、流动相流动相中所用的各种有机溶剂要尽可能地使用色谱,或至是分析纯试剂配流动相水Z好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45或0.22m的滤膜过滤一次则更好,这一点对含盐的流动相尤为重要。
另外装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
总之,必须保证所使用的流动相和色谱系统是足够的清洁。
4、样品样品也要尽可能的清洁,同样可选用样品过滤器或样品预处理(SPE柱)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时,如无特殊要求,所有的溶剂和样品应严格脱水。
5、PH值以常规硅胶为基质的键合相填料高效液相色谱柱通常的PH值适用范围是2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界(特别是在8.0≤PH≤10.0时)条件下使用高效液相色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于高效液相色谱仪色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并*置换掉原来所使用的流动相。
液相色谱柱的使用注意事项流动相和样品处理 液相色谱操作规程
液相色谱柱的使用注意事项流动相和样品处理液相色谱操作规程液相色谱柱的使用注意事项:流动相和样品处理 1. 色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特别说明,均为评价报告所示的流动相。
在使用前,确定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是液相色谱柱的使用注意事项:流动相和样品处理 1. 色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特别说明,均为评价报告所示的流动相。
在使用前,确定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很简单析出,堵塞色谱柱。
2. 流动相:1)在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。
流动相确定要使用色谱级别的溶剂。
如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避开细菌产生。
2)流动相使用前需用微孔滤膜过滤,除去流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。
缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避开溶解度变化造成产生新的沉淀。
不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱,以免柱性能损坏(添加5%的有机溶剂冲洗色谱柱,同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。
还可以使色谱柱更简单平衡)。
3)流动相需脱气后使用,可避开因气泡导致的泵和检测器的工作不正常。
假如测试时使用的流动相与色谱柱保存使用的流动相有较大区分,应当使用过度分布的形式进行平衡。
避开由于流动相的蓦地变化造成柱压加添过大或流动相缓冲盐结晶造成对色谱柱和仪器系统的损坏。
正相色谱柱比反相色谱柱需要更长的平衡时间。
4)流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水*好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
假如将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。
另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应当定期清洗或更换。
5)以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0—8.0,BDSC18适合于碱性化合物,PH值适用范围为2.0—10.0、当必需要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立刻用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。
高效液相色谱柱注意事项
高效液相色谱柱注意事项高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分构成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的调配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附—解吸的调配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分别成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
高效液相色谱柱注意事项:1、柱效和保护柱拿到一根新柱时,肯定要先看其使说明,然后测柱效,定期检测柱效,保存在新色谱柱上得到的色谱图,并记录条件,定期检测仪器的谱带展宽。
若应用于在线监测,应对色谱柱供应在线的物理保护和化学保护,例如采取安装在线过滤器,自装填料保护柱和预装保护柱等。
在线过滤器的作用是防止颗粒在柱头累计,优点是基本不影响柱效,在需要高柱效的时候常用,常更换的消耗品是滤芯和垫圈保护柱的作用是防止柱子被化学污染。
缺点是多数保护柱影响色谱柱的柱效,特别是在用微柱时,常用的是普通自装填料的保护柱。
近新出的一些保护柱例如Sentry—guard保护柱,它的特点是高质量、高效填料、加添分析柱效、对脏样品载荷本领大,能延长保护柱的寿命,手可拧紧接头,安装时不需要工具,省时省,可换芯式设计,能采用各种不同的填料,重要适用于特别脏特别多而杂的样品本底,例如生化样品,环境样品和食品等,或者不想做太多的圃相萃取,不想降低柱效果等情况。
2、清洗对所做的样品要有充分的了解,用对该样品洗脱本领强的流动相清洗,对于硅胶柱,先用甲醇洗去极性杂质,然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100—20OraL依次活化,对于键和相柱,一般用甲醇一氯仿一甲醇一水依次冲洗,每种色谱柱有特定的清洗方法,肯定要看其使用说明。
3、存放存放前除掉杂质和盐,采用合适的存放溶剂,避开色谱柱床的干枯,避开机械振动,防止细菌生长,注意存放的温度。
Proteonavi 高效液相色谱柱使用说明书
Proteonavi高效液相色谱柱使用说明书在此,非常感谢您选购我公司的Proteonavi色谱柱。
Proteonavi是采用在多孔球形硅胶填料表面键合丁基(C4)的高性能蛋白质·多肽分析专用色谱柱。
该填料既具有硅胶类填料的高分离能力和耐压性,又具有耐酸性、抑制蛋白质的吸附等特长。
为了能够长期且稳定地使用Proteonavi色谱柱,请在熟读该使用说明书后进行正确使用。
1.色谱柱的使用1.强烈撞击可能会造成色谱柱劣化,请小心谨慎使用。
2.请在压力指示为0时进行色谱柱的安装和拆卸。
3.色谱柱最大使用压为20MPa。
2. 色谱柱的安装1.色谱柱的接头使用了外径1/16英寸配管的螺头(MALE NUT)。
请确保装置的配管接头正确连接,并且锥箍的顶端已插入接头内侧(参照图1)。
2.安装色谱柱之前,请将装置配管内的液体置换成所用的流动相。
※请确认色谱柱出厂时的溶剂(记录在色谱柱附带的报告中),并注意盐析现象等。
3.请按照色谱柱标签上的箭头方向来安装色谱柱。
3.分析3-1流动相1.可用流动相的种类与一般化学键合型硅胶类色谱柱中所使用的流动相相同。
2.Proteonavi的可用pH范围为2~10。
可用pH范围是以保留时间和理论塔板数不会提早减少为评价基准的。
为防止色谱柱的早期劣化,请注意流动相的pH不要超过上述范围。
如果pH发生大幅度的变化,会引起重现性变差、色谱柱提前劣化等问题。
在有机溶剂含量少、色谱柱温度高等条件下,耐酸耐碱性能会降低。
3.请过滤(0.45μm以下滤膜)流动相去除杂质后再进行充分脱气。
4.为防止由异物导致的色谱柱入口处过滤筛板堵塞,建议使用线上过滤器。
5.新色谱柱使用色谱柱报告中标示的流动相封存。
若要置换成含无机盐的流动相,请注意置换程序,不要造成盐析出。
6.使用含有离子对试剂等表面活性剂的流动相,色谱柱的寿命会变短。
7.使用100%水相作为流动相时,根据条件不同,可能会出现寿命极度缩短的情况。
高效液相色谱仪在使用和维护中的注意事项
高效液相色谱仪在使用和维护中的注意事项
一、高效液相色谱仪的使用注意事项
1、使用人在使用前一定要确认当前系统是处于哪种色谱状态;
2、要对流动相系统、进样器等进行排气操作,避免有气泡干扰;正式进样前,要将流动相、色谱柱、检测器等设置好,并进行预平衡,待仪器处于稳定的初始条件下,再开始进样检测;
3、待检测的样品根据仪器的要求一定要保证澄清透明,可选择高速离心或者过滤膜等方式进行净化;
4、进样的顺序建议按照试剂空白、标准系列溶液、试剂空白、样品空白、质控样品、待测样品、试剂空白的顺序进行,以便确认仪器中是否存在干扰待测成分的物质、质控效果等,若待测样品较多,建议在待测样品中间插入质控样品,以确保检测质量;
5、采用梯度洗脱条件检测时,一个样品检测完成之后,一定要确保柱压等条件恢复到初始状态再进行下一个样品的检测;
6、所有检测工作完成后,要对液相系统进行溶剂替换,反相系统建议用甲醇或乙腈保存,包括进样器和液相管路部分,如果使用缓冲盐作为流动相,要用大比例水相将盐冲出,再用纯有机相替换。
使用高效液相色谱仪的注意事项
使用高效液相色谱仪的注意事项
使用高效液相色谱仪的注意事项包括:
1.流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。
2.不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
3.使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子
一小时,然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。
对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20mL以上。
4.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
5.C18柱绝对不能进蛋白样品,血样、生物样品。
6.堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→
单向阀检查并清洗,清洗方法:①以异丙醇作溶剂冲洗;②放在异丙醇中间用超声波清洗;③用10%稀硝酸清洗。
7.气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免
产生气泡。
8.试管的洁净问题:高效液相色谱分析法是一个很灵敏的分析方法,
如果因使用不洁净的试管,便会影响试验结果的准确性。
例如,在用甲醇作溶剂来溶解样品时,所用的小试管是用橡胶塞来做盖子的,因此,在每次进样时,都有一个保留时间固定的干扰峰存在,后经证实,此干扰峰是由甲醇浸泡橡胶塞而溶下的组分所产生,换用玻璃试管后,干扰峰消除。
总之,高效液相色谱仪使用时需要注意以上问题,以保证仪器的正常运转和实验结果的准确性。
液相色谱柱的使用注意事项及再生
液相色谱柱的使用注意事项及再生注意事项:1.柱子的贮存:液相色谱柱在非使用状态下应尽量避免暴露在空气中,空气中的灰尘和湿气会影响柱子的性能和寿命。
因此,柱子应存放在其原始包装中,并防止受潮。
2.近似与探头:在使用之前,必须对柱子和探头进行连接和融合。
在操作中,要确保柱子和探头之间无泄漏,否则会影响分析的准确性。
3.流速控制:流速是液相色谱分析中很关键的一点。
流速过高会导致柱子产生过高的压力,甚至超过其承载能力,从而导致柱子破裂。
因此,在进行液相色谱分析时必须要控制好流速。
4.保持温度稳定:液相色谱柱对温度敏感,温度的变化会影响分离效果。
因此,在液相色谱分析中必须保持柱子的温度稳定。
5.避免样品堵塞:柱子中的微孔会很容易受到样品的堵塞,导致柱子无法正常使用。
因此,必须确保样品中无固体杂质,并且在注射之前先过滤样品,以避免样品堵塞柱子。
柱子再生方法:1.水洗法:将柱子安装在逆相液相色谱系统中,用纯水进行洗脱,如果必要可以加入少量的乙酸、甲酸或其他有机溶剂进行洗脱。
该方法适用于非极性化合物的柱子。
2.有机溶剂洗脱法:将柱子连同柱底栓安装在逆相液相色谱系统中,用纯有机溶剂或者含有有机溶剂的溶液进行洗脱。
该方法适用于极性化合物的柱子。
3.极性液洗法:将柱子置于极性液相溶剂中,如醇类、酸类或含有酸性成分的有机溶剂中进行洗脱。
该方法适用于阴离子柱等需要去除离子物质的柱子。
4.特殊洗脱法:对于一些具有独特功能的柱子,如固体相萃取柱、色譜柱等,可以根据其特殊性质采用相应的洗脱方法。
除了以上的再生方法,还有一些更加复杂的再生方法,如使用酸碱溶液、有机溶剂进行再生等。
用户在使用液相色谱柱时,应根据柱子的具体情况及实际分析样品的特性选择合适的再生方法。
总之,液相色谱柱的正确使用和再生对于高效可靠地进行液相色谱分析具有重要影响。
使用者应严格按照操作规范进行操作,并根据不同柱子的特性进行合适的柱子再生方法,以延长柱子的使用寿命和保证分析的准确性。
waters hss t3色谱柱说明书
waters hss t3色谱柱说明书全文共四篇示例,供您参考第一篇示例:一、引言色谱柱是液相色谱技术中至关重要的部分,它直接影响到色谱分离的效果与结果。
Waters HSS T3色谱柱作为Waters公司的一款重要产品,具有高效分离、优异耐久性和广泛适用性等特点,受到了广泛的关注和应用。
本文将详细介绍Waters HSS T3色谱柱的特点、使用方法以及注意事项,希望能够帮助用户更好地了解和使用该产品。
二、产品特点1. 高效分离:Waters HSS T3色谱柱采用特殊的填料材料和粒径分布,具有优异的分离能力,能够有效解决样品分析中的复杂性和交叉干扰问题。
2. 广泛适用:该色谱柱适用于多种样品类型的分离,包括有机物、药物、生物样品等,具有很强的通用性。
3. 耐久稳定:Waters HSS T3色谱柱具有良好的耐久性和稳定性,能够承受高压和多次重复使用,保证分析结果的可靠性。
4. 高分辨率:由于HSS T3色谱柱的独特设计和材料特性,使得其在保证分离效果的能够提供高分辨率的分析结果,有利于样品成分的准确检测和定量分析。
5. 良好的再生性:Waters HSS T3色谱柱在适当条件下具有良好的再生性能,可以反复使用,延长色谱柱的使用寿命,降低分析成本。
三、使用方法1. 准备工作:在使用Waters HSS T3色谱柱前,应先进行适当的准备工作,包括浸泡、平衡和洗脱等步骤,以确保色谱柱内部的填料材料和介质处于最佳状态。
2. 样品预处理:对于不同类型的样品,需进行相应的预处理工作,如溶解、过滤、稀释等,以确保样品的纯度和适用性,避免对色谱柱造成不必要的损坏或污染。
3. 流动相选择:根据样品类型及分析要求,选择合适的流动相,并根据需要进行适当的调节和混合,以保证在色谱分离过程中的稳定性和有效性。
4. 良好的保养:在使用完成后,应及时对色谱柱进行适当的保养和再生,包括冲洗、干燥、存放等步骤,以保证色谱柱的长期稳定性和再生性能。
高效液相色谱NH2柱安全操作及保养规程
高效液相色谱NH2柱安全操作及保养规程一、NH2柱的使用原理NH2柱是一种液相色谱柱,使用时会采用氨基化的硅胶作为固定相。
由于硅胶表面的官能团是氨基基团,能够与样品中的极性分子发生相互作用,进而对分离进行调节。
二、NH2柱的使用方法1.连接装置安装NH2柱时应连接检测设备,如进样器,检测器等。
连接时,应先连接进样器,再连接检测器。
2.洗涤在第一次使用NH2柱时,需进行洗涤。
使用洗涤液流通2-3个小时后,清空出柱中的洗涤液,然后用纯水进行洗涤,以去除任何残留物。
3.平衡在柱洗干净后,应用该检测方法的溶液和需要分析的溶液对NH2柱进行平衡。
溶液中需要下降等温升级,升温速度不要过快,以避免硅胶固定相表面积损失过大。
4.样品处理样品应先进行过滤或系列化。
如果需要,还可进行脱盐处理。
接下来,可以直接使用这个样品进行连续检测,得到相对准确的定量分析结果。
5.清洗当分析结束后,应立即用纯水进行冲洗,避免任何污渍残留在NH2柱上。
三、NH2柱的保养方法1.不会使用的人员不得安装或拆卸NH2柱;2.应使用安全稳固的操作平台;3.注意检查NH2柱连接的阀门、管道及垫片是否严密;4.避免机械冲击,特别是避免NH2柱连接处遭到打击;5.存放NH2柱时应避免阳光直射,不能暴露在高温、潮湿、有酸性气体或腐蚀性气体的环境中;6.避免NH2柱柱筒陷入液相内,以避免液相侵犯NH2柱内部,导致NH2柱出现问题;7.保持NH2柱表面清洁,避免表面污垢的附着。
四、NH2柱的故障与解决方法NH2柱在使用过程中,可能会出现以下故障情况:1. 柱运行异常问题原因可能是样品处理不当:样品会形成附着在NH2柱表面上的沉淀,导致柱进行正常分离的障碍或减缓。
此时需要对样品进行再次过滤或降温等处理。
2. 样品无法通过柱可能是进样器或检测器出现故障。
需要关闭进样器或检测器,检查柱筒是否存在压力问题,如果发现气泡等问题,需要及时清洗气泡。
3. 封补过强的流量或特別严重的样品陈成很容易出现封补。
常用液相色谱柱使用与维护保养
常用液相色谱柱使用与维护保养液相色谱柱是一种重要的分析仪器,在化学、药物研发、环境科学等领域广泛应用。
正确的使用和维护保养可以延长色谱柱的寿命,提高色谱分离的效果。
一、使用液相色谱柱的注意事项1.选择合适的柱使用液相色谱柱前,需要根据分析目标和样品性质选择适合的柱型和填料。
常用的柱型有反相柱、离子交换柱、正相柱等。
不同的柱具有不同的分离机理和性能,选择合适的柱可以提高分离效果。
2.准备好适当的溶剂系统液相色谱的溶剂系统通常由溶剂A和溶剂B构成。
在使用液相色谱柱之前,需要准备好适当的溶剂系统,并将溶剂通过泵送到色谱柱中。
溶剂的选择应根据柱和样品性质来确定,通常要尽量避免对柱产生腐蚀或损害的溶剂。
3.校准柱的流速在使用液相色谱柱之前,需要对柱进行流速校准。
根据柱的规格和品牌,确定适当的流速范围。
过高或过低的流速都会影响分离效果和柱的寿命。
通常,可以通过控制泵的流速和封堵时间来调整柱的流速。
4.准备样品在使用液相色谱柱进行分析之前,需要准备好样品。
样品可以是纯净物质,也可以是复杂的混合物。
样品的准备和预处理会影响分离效果和柱的寿命。
合适的样品准备方法包括稀释、过滤、目标成分的预处理等。
5.正确设置色谱仪的条件在使用液相色谱柱之前,需要根据柱的特性和样品的性质,正确设置色谱仪的条件。
包括流速、柱温、检测器、梯度和等时并行等。
设置合适的条件可以提高柱的寿命和分离效果。
二、液相色谱柱维护保养1.定期保养色谱柱为了保证液相色谱柱的寿命和分离效果,需要定期进行柱的保养。
在每次使用完柱后,需要冲洗柱,将样品和残留物彻底清除。
冲洗柱时可以使用适当的溶剂或清洗液,根据需要选择正向或反向洗涤。
一般推荐用高纯度的有机溶剂冲洗柱。
2.避免柱的过载和超压过载和超压是液相色谱柱常见的问题。
过高的样品浓度或过高的流速都可能导致浓度过载,产生色谱峰畸变或柱堵塞。
超压则会导致柱的损坏或泄漏。
需要根据柱的规格和样品的性质,控制样品浓度和流速,避免过载和超压。
高效液相操作注意事项
高效液相操作注意事项(1)色谱柱:1、使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书,注意适用范围,如pH值范围、流动相类型等;2、如所用流动相为含盐流动相,反相色谱柱使用后,先用水或低浓度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗。
3、色谱柱在不使用时,应用甲醇冲洗,取下后紧密封闭两端保存.4、不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱;使用过程中注意轻拿轻放。
(2)先以所用流动相冲洗系统一定时间(如所用流动相为含盐流动相,必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相),正式进样分析前30min 左右开启D灯或W灯,以延长灯的使用寿命;(3)溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎,在更换流动相时注意保护,当发现过滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤;(4)实验结束后,一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上,再用甲醇冲洗。
冲洗过程中关闭D灯、W灯;(5)关机时,先关闭泵、检测器等,再关闭工作站,然后关机常见故障排除:1、操作过程若发现压力很小,则可能管件连接有漏,注意检查。
当出现错误警告(各组件指示灯均为红色),一般为漏液,其中一个感应器中已有溶剂,漏液故障排除后,擦干,点击On line操作界面中的Instrument/System Off,然后再点击操作界面中的Instrument/System On即可。
2、连接柱子与管线时,应注意拧紧螺丝的力度,过度用力可导致连接螺丝断裂。
柱接头处易发生漏液,可能情况为接头Fittings中间的管子未和接口处贴紧。
不同厂家的管线及色谱柱头结构有差异,最好不要混用,必要时可使用PEEK 管及活动接头;3、操作过程若发现压力非常高,则可能管路已堵,应先卸下色谱柱,然后用分段排除法检查,确定何处堵塞后解决。
若是保护柱或色谱柱堵塞,可用小流量流动相或以小流量异丙醇冲洗,还可采用小流量反冲的办法(新柱不提倡),若还是无法通畅,则需换柱;4、运行过程中自动停泵,可能为压力超过上限或流动相用完;5、样品瓶中样品较少,自动进样器进样针无法到达液面,可采用调低进样针进样高度的办法,注意设置时不要使进样针碰到瓶底,微量样品分析应使用微量样品瓶;6、自动进样器进样针未与样品瓶瓶口对准时,需重新定位。
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液相色谱柱的使用注意事项及再生
本篇文章来源于液相色谱柱的使用注意事项及再生|科学仪器在线原文链接:/KnowledgeView2034.html
1、色谱柱的使用说明:(1)色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。
在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。
(2)流动相:流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。
另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0,BDS C18适合于碱性化合物,PH值适用范围为2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。
(3)样品:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时,所有的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存(1)反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。
注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
(2)长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现拖尾峰(tailing peak)。
前者少见。
>色谱峰高降低,基线的两个交点间的距离。
W=4σ>峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。
(1)反相柱的再生:依次采用20-30倍的色谱柱体积的甲醇:水=10:90 (V/V),乙腈,异丙醇作为流动相冲洗色谱柱,完成后再以相反顺序冲洗色谱柱。
(2)正相柱的再生:依次以20-30倍色谱柱的体积的正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作为流动相冲洗色谱柱,然后再以相反的顺序冲洗色谱柱。
要注意上述溶剂必须严格脱水。
4、色谱柱在使用过程中易出现的问题和解决办法色谱柱在使用中最常见的问题就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。
但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞及压力传感器故障除外),以下列举了部分常见原因及解决办法:(1)色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染;解决方法:如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染,可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力,或者卸下色谱柱头,将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟,后再用纯水超声
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