高效液相色谱柱ppt课件
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《高效液相》课件
蛋白质分离与纯化
蛋白质分离
高效液相色谱技术可以用于蛋白质的分离和纯化，通过不 同的分离模式和固定相选择，实现对蛋白质的快速分离和 纯化。
蛋白质性质分析
通过高效液相色谱技术可以对蛋白质的性质进行分析，如 蛋白质的分子量、等电点等，为蛋白质的结构和功能研究 提供有力支持。
蛋白质相互作用研究
高效液相色谱技术可以用于研究蛋白质之间的相互作用， 如蛋白质与配体、抑制剂等之间的相互作用，有助于深入 了解蛋白质的功能和作用机制。
原理
利用不同物质在固定相和流动相之间 的分配系数差异进行分离，通过检测 器进行检测，收集各个组分，达到分 析样品组分的目的。
发展历程
01
02
03
04
起源
20世纪初，俄国植物学家茨 维特发明了色谱法。
1940年代
气相色谱法（GC）出现，并 逐渐发展成熟。
1960年代
高效液相色谱法（HPLC）开 始发展，并逐渐取代气相色谱
02
高效液相色谱仪
仪器组成
进样器
将样品注入色谱柱，是 色谱仪的重要部件之一
。
色谱柱
用于分离样品中的各组 分，由固定相和流动相
组成。
检测器
检测色谱柱流出的组分 ，并将其转换为电信号
。
数据处理系统
用于采集、处理和显示 检测器输出的信号。
重要部件介绍
01
02
03
色谱柱填料
常用的填料有硅胶、氧化 铝、活性炭等，根据不同 分离需求选择合适的填料 。
《高效液相》ppt课件
目录
• 高效液相色谱法简介 • 高效液相色谱仪 • 高效液相色谱分离技术 • 高效液相色谱在生物医药领域的应用 • 高效液相色谱实验技术 • 高效液相色谱技术前沿与展望
高效液相色谱-HPLCppt课件.ppt
色谱法的分类
按固定相的形态分:
平面色谱 o 纸色谱
o 薄层色谱
柱色谱
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
色谱法的分类示意图
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
▪ 高压梯度洗脱（高压混合，高压进柱，2个 泵。）
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
▪安捷伦泵：小视频 ▪色谱学堂：泵
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
色谱法原理及分类
什么是色谱法 色谱法溯源 Tswett（茨维特)的实验 色谱法原理 色谱法的分类
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
什么是色谱法
色谱法是一种现代的分离分析方法 1906年正式命名(见诸文献) 20世纪30年代开始广泛研究和应用 高效液相色谱法的广泛应用始于20世纪70年代
1. 紫外—可见光度检测器：
①固定波长：254nm ， 低压汞 灯。
② 可 调 波 长 ： 190 ～ 800mm ， 钨灯，氘灯。
UV
③光电二极管矩阵检测器： 190～700nm。
接色谱柱 石英窗 光电倍增管
废液
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
waters-e高效液相色谱ppt课件
4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用甲醇水溶液冲洗。 5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水冲洗及
保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水极性太强且易长霉。 。 6.开机时，流速和柱压要逐渐增加。 7.要注意柱子的PH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
流动相流出检测器可被送至废液瓶，或按需被收集。 当流动相含有一个分开的化合物谱带，高效液相色谱可以收集含有纯
化的化合物的该洗脱组分，用于进一步分析。
注意高压管路和附件用来连接泵、进样器、色谱柱和检测器单元，形 成流动相、样品和化合物分离谱带的通路。
高 检将效测电器信液连号相接转计换色算为谱机色数谱如据图站 ，何在，工显高示效作屏液上相展色现谱出系来统。单元先记录电信号，再
液相色谱的基本流程图
流动相
进样阀 泵
色谱柱
泵输液 进样
分离
检测器
检测
AB C
DE
G
F
记录
液 液相相流色色动谱谱相实：的验种所类各需及的部配基比分本，参示等数度-意-或亦梯图称度色谱条件
固定相：色谱柱类型及内径、长短 流动相输送系统参数：流速 检测器参数：紫外检测波长，灵敏度等 温度控制 进样量
四元梯度洗脱的溶剂输送动进样系统 柱温箱 液晶显示器 内置的柱塞杆密封垫清洗系统 溶剂瓶托盘 键盘用户界面及软盘驱动器
打开电源至on位置，开机依次接通 2695 分离单元、检测
2器开、机计算机和打印机的电源。接通后，约 20s 仪器开始自
检，约 1min 后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化。
溶 流【剂动M管相en理脱u/气系St确a统tu认s的所】有，准溶进备剂入管“路St都at充us满（溶1 剂），”按屏幕
保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水极性太强且易长霉。 。 6.开机时，流速和柱压要逐渐增加。 7.要注意柱子的PH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
流动相流出检测器可被送至废液瓶，或按需被收集。 当流动相含有一个分开的化合物谱带，高效液相色谱可以收集含有纯
化的化合物的该洗脱组分，用于进一步分析。
注意高压管路和附件用来连接泵、进样器、色谱柱和检测器单元，形 成流动相、样品和化合物分离谱带的通路。
高 检将效测电器信液连号相接转计换色算为谱机色数谱如据图站 ，何在，工显高示效作屏液上相展色现谱出系来统。单元先记录电信号，再
液相色谱的基本流程图
流动相
进样阀 泵
色谱柱
泵输液 进样
分离
检测器
检测
AB C
DE
G
F
记录
液 液相相流色色动谱谱相实：的验种所类各需及的部配基比分本，参示等数度-意-或亦梯图称度色谱条件
固定相：色谱柱类型及内径、长短 流动相输送系统参数：流速 检测器参数：紫外检测波长，灵敏度等 温度控制 进样量
四元梯度洗脱的溶剂输送动进样系统 柱温箱 液晶显示器 内置的柱塞杆密封垫清洗系统 溶剂瓶托盘 键盘用户界面及软盘驱动器
打开电源至on位置，开机依次接通 2695 分离单元、检测
2器开、机计算机和打印机的电源。接通后，约 20s 仪器开始自
检，约 1min 后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化。
溶 流【剂动M管相en理脱u/气系St确a统tu认s的所】有，准溶进备剂入管“路St都at充us满（溶1 剂），”按屏幕
高效液相色谱ppt课件
缺点：使用了两台高压输 液泵，使仪器价格变得更 昂贵，故障率也相对较高， 而且只能实现二元梯度操 作。
精选课件
Tanghui.p2h3a.shzu
第二节 高效液相色谱仪器
四元低压梯度系统结构
只需一个高压泵，混合 就在泵前安装了一个比例 阀中完成。因比例阀是在 泵之前，所以是在常压 （低压）下混合，在常压 下混合易形成气泡，常配 置在线脱气装置，来自于 四种溶液瓶的四根输液管 分别与真空脱气装置的四 条流路相接，经脱气后进 入比例阀，混合后从一根 输出管进入泵体。
(2)GC采用流动相是惰性气体，它对组分没有亲和力，即
不产生相互作用力，仅起运载作用。而HPLC中流动相
可选用不同极性的液体，选择余地大，它对组分可产生
一定亲和力，并参与固定相对组分作用的剧烈竞争。因
此，流动相对分离起很大作用，相当于增加了一个控制
和改进分离条件的参数，这为选择最佳分离条件提供了
极大方便。
7
精选课件
Tanghui.ph7a.shzu
第二节 高效液相色谱仪器
一、流程（process of HPLC）
首先高压泵将贮液器中流动相溶剂经过进样器送入色 谱柱，然后从控制器的出口流出。当注入欲分离的样品时， 流经进样器贮液器的流动相将样品同时带入色谱柱进行分 离，然后依先后顺序进入 检测器，记录仪将检测器 送出的信号记录下来，由 此得到液相色谱图。
它是在经典液相色谱基础上，引入了气相 色谱的理论，在技术上采用了高压泵、高效固 定相和高灵敏度检测器，因而具备速度快、效 率高、灵敏度高、操作自动化的特点。为了更 好地了解高效液相色谱法优越性，现从两方面 进行比较：
2
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第二节 高效液相色谱仪器
四元低压梯度系统结构
只需一个高压泵，混合 就在泵前安装了一个比例 阀中完成。因比例阀是在 泵之前，所以是在常压 （低压）下混合，在常压 下混合易形成气泡，常配 置在线脱气装置，来自于 四种溶液瓶的四根输液管 分别与真空脱气装置的四 条流路相接，经脱气后进 入比例阀，混合后从一根 输出管进入泵体。
(2)GC采用流动相是惰性气体，它对组分没有亲和力，即
不产生相互作用力，仅起运载作用。而HPLC中流动相
可选用不同极性的液体，选择余地大，它对组分可产生
一定亲和力，并参与固定相对组分作用的剧烈竞争。因
此，流动相对分离起很大作用，相当于增加了一个控制
和改进分离条件的参数，这为选择最佳分离条件提供了
极大方便。
7
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第二节 高效液相色谱仪器
一、流程（process of HPLC）
首先高压泵将贮液器中流动相溶剂经过进样器送入色 谱柱，然后从控制器的出口流出。当注入欲分离的样品时， 流经进样器贮液器的流动相将样品同时带入色谱柱进行分 离，然后依先后顺序进入 检测器，记录仪将检测器 送出的信号记录下来，由 此得到液相色谱图。
它是在经典液相色谱基础上，引入了气相 色谱的理论，在技术上采用了高压泵、高效固 定相和高灵敏度检测器，因而具备速度快、效 率高、灵敏度高、操作自动化的特点。为了更 好地了解高效液相色谱法优越性，现从两方面 进行比较：
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高效液相色谱仪优秀PPT
DNA电泳与色谱分析，生 物技术药物纯化及鉴定，生 物标志物色谱分析，蛋白质 组学研究等
紫外检测器
技术参数LC3000B
高压恒流泵
紫外检测器
自动进样器AS3100
普析LC-3000型液相色谱仪
流量范围：0.001-9.999ml/min 最高工作压力：42Mpa 流量精度：±0.5% 流量重复性：RSD≤0.1%（1ml/min）
上海普析LC3000紫外
UV3000紫外检测器性能指标： 波长范围：190-700nm 灯源：氘灯（标准配置），钨灯（可替换） 波带宽度：8nm 波长精度：±1.0 nm 波长重复性：0.2nm 基线噪音：1×10-5AU 基线漂移：2×10-4AU 检测池体积：10ul 外形尺寸：398*149*267 （深*高*宽）
耗样品少。
应用范围广——百分之七十以上的有机化合物可用高效 液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳 定性差化合物的分离分析，显示出优势。
药物分析
中药质量控制，化学药物 质量控制，抗生素质控分析， 生化药质量控制，新型高效 手性药物中手性对映体含量 的测定等
环境污染物分析
大气、水、土壤和食品中的多 环芳烃、多环联苯，阴离子表 面活性剂，有机氯农药、有机 磷农药，除草剂，酚类胺类、 黄曲霉毒素等污染物的分离与 测定
食品质量分析
食品质量分析
高效液相色谱仪适用于高沸点不易挥发的、分子量大、极性不同的有机物的定性和定量分析。
自动进样器AS3100
农药残留，兽药残留；防腐剂、 高标准的关键部件
关键部件世界知名品牌原装进口，泵头采用钛合金材质，更加耐腐蚀高温 ； 应用范围广——百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分 析，显示出优势。
紫外检测器
技术参数LC3000B
高压恒流泵
紫外检测器
自动进样器AS3100
普析LC-3000型液相色谱仪
流量范围：0.001-9.999ml/min 最高工作压力：42Mpa 流量精度：±0.5% 流量重复性：RSD≤0.1%（1ml/min）
上海普析LC3000紫外
UV3000紫外检测器性能指标： 波长范围：190-700nm 灯源：氘灯（标准配置），钨灯（可替换） 波带宽度：8nm 波长精度：±1.0 nm 波长重复性：0.2nm 基线噪音：1×10-5AU 基线漂移：2×10-4AU 检测池体积：10ul 外形尺寸：398*149*267 （深*高*宽）
耗样品少。
应用范围广——百分之七十以上的有机化合物可用高效 液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳 定性差化合物的分离分析，显示出优势。
药物分析
中药质量控制，化学药物 质量控制，抗生素质控分析， 生化药质量控制，新型高效 手性药物中手性对映体含量 的测定等
环境污染物分析
大气、水、土壤和食品中的多 环芳烃、多环联苯，阴离子表 面活性剂，有机氯农药、有机 磷农药，除草剂，酚类胺类、 黄曲霉毒素等污染物的分离与 测定
食品质量分析
食品质量分析
高效液相色谱仪适用于高沸点不易挥发的、分子量大、极性不同的有机物的定性和定量分析。
自动进样器AS3100
农药残留，兽药残留；防腐剂、 高标准的关键部件
关键部件世界知名品牌原装进口，泵头采用钛合金材质，更加耐腐蚀高温 ； 应用范围广——百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分 析，显示出优势。
《高效液相色谱仪》课件
《高效液相色谱仪》ppt课件
目 录
• 高效液相色谱仪简介 • 高效液相色谱仪的组成和工作原理 • 高效液相色谱仪的操作流程 • 高效液相色谱仪的维护与保养 • 高效液相色谱仪的实验技术与应用实例
01
高效液相色谱仪简介
定义与特点
定义
高效液相色谱仪是一种分离和分 析复杂混合物中各组分的仪器， 基于物质在固定相和流动相之间 的分配差异实现分离。
。
食品工业
用于检测食品中的添加剂、农 药残留和营养成分等。
高效液相色谱仪的发展历程
起源
20世纪50年代初，基于经典液 相柱色谱的原理，开发出了高
效液相色谱法。
发展
20世纪60年代，出现了填充柱 和柱切换技术，提高了分离效 率。
革新
20世纪70年代，出现了高效微 粒固定相和新型检测器，提高 了灵敏度和选择性。
流动相的纯化和过滤
确保流动相的纯度和清洁度，以避免对色谱柱和检测器造成污染。
流动相的脱气
使用真空脱气法或超声波脱气法去除流动相中的气泡，以避免对色 谱分离造成干扰。
色谱柱的安装与选择
安装色谱柱
按照仪器说明书正确安装色谱柱 ，确保密封性和稳定性。
色谱柱的选择
根据样品的性质和分离要求，选择 合适的色谱柱类型和规格。
检测器对流出的组分进行 检测，并将信号记录下来 ，形成色谱图。
高效液相色谱仪的分离原理
分配原理
组分在固定相和流动相之 间的分配平衡是实现物质 分离的基础。
吸附与解吸平衡
组分在固定相上的吸附与 流动相中的溶解度差异导 致分离。
分子间作用力
分子间的相互作用力（如 范德华力、氢键等）影响 组分的吸附与解吸平衡。
物的分子结构和化学键信息。
目 录
• 高效液相色谱仪简介 • 高效液相色谱仪的组成和工作原理 • 高效液相色谱仪的操作流程 • 高效液相色谱仪的维护与保养 • 高效液相色谱仪的实验技术与应用实例
01
高效液相色谱仪简介
定义与特点
定义
高效液相色谱仪是一种分离和分 析复杂混合物中各组分的仪器， 基于物质在固定相和流动相之间 的分配差异实现分离。
。
食品工业
用于检测食品中的添加剂、农 药残留和营养成分等。
高效液相色谱仪的发展历程
起源
20世纪50年代初，基于经典液 相柱色谱的原理，开发出了高
效液相色谱法。
发展
20世纪60年代，出现了填充柱 和柱切换技术，提高了分离效 率。
革新
20世纪70年代，出现了高效微 粒固定相和新型检测器，提高 了灵敏度和选择性。
流动相的纯化和过滤
确保流动相的纯度和清洁度，以避免对色谱柱和检测器造成污染。
流动相的脱气
使用真空脱气法或超声波脱气法去除流动相中的气泡，以避免对色 谱分离造成干扰。
色谱柱的安装与选择
安装色谱柱
按照仪器说明书正确安装色谱柱 ，确保密封性和稳定性。
色谱柱的选择
根据样品的性质和分离要求，选择 合适的色谱柱类型和规格。
检测器对流出的组分进行 检测，并将信号记录下来 ，形成色谱图。
高效液相色谱仪的分离原理
分配原理
组分在固定相和流动相之 间的分配平衡是实现物质 分离的基础。
吸附与解吸平衡
组分在固定相上的吸附与 流动相中的溶解度差异导 致分离。
分子间作用力
分子间的相互作用力（如 范德华力、氢键等）影响 组分的吸附与解吸平衡。
物的分子结构和化学键信息。
高效液相色谱法培训PPT课件
注意事项与常见问题解答
样品处理注意事项
01
避免样品污染、损失或变质，确保处理过程的准确性和可重复
性。
常见问题及解决方法
02
针对样品处理过程中可能出现的问题，如回收率低、干扰物质
多等，提供相应的解决方法。
安全与防护
03
注意有毒有害试剂的使用安全，做好个人防护和环境保护工作。
04 方法开发与优化策略
梯度洗脱程序设计思路
初始比例确定
根据待测组分的极性差异，选 择合适的初始流动相比例。
梯度斜率设置
根据组分的分离情况，调整梯 度斜率，使各组分在合适的保 留时间内洗脱出来。
梯度时间设置
确保梯度洗脱过程中，各组分 能够充分分离，同时避免过长 的分析时间。
梯度曲线类型
根据实际需求选择合适的梯度 曲线类型，如线性梯度、凹形
梯度或凸形梯度等。
方法验证内容及标准
精密度
准确度
通过添加回收率试验，验证方法 的准确度，确保测定结果可靠。
考察方法的重复性和中间精密度， 确保测定结果的稳定性。
线性范围
确定方法的线性范围，确保待测 组分浓度在该范围内时，测定结 果准确可靠。
专属性
考察方法对待测组分的选择性， 确保其他共存物质不干扰测定。
长期稳定性
考察样品在规定的储存条件下放置一定时间后的稳定性，以确定 样品的保质期和储存条件。
方法学考察
对分析方法本身进行稳定性考察，包括方法的耐用性、重复性和 中间精密度等指标的评估。
质量控制图绘制和应用
质量控制图绘制
根据长期稳定性考察数据，绘制质量控 制图，包括平均值、标准差和控制限等 指标。
VS
发展历程及应用领域
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这种色谱柱可用于大规模复杂样品的分离和制备，由于制备型色谱柱体 积和重量都较大，使用过程中必须小心。这种色谱柱的两端结构完全一致， 故用户可以自行确定色谱柱的入口和出口；一旦确定入口和出口后，使用过 程中非特殊原因不要颠倒，否则易造成两端填料同时污染，不利于维护。
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材料与化学化工学院
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2 色谱柱填料 与固定相
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二 色谱柱填料与固定相
2.1 柱填料特性 2.2 硅胶微粒 2.3 多孔聚合物 2.4 键合硅胶 2.5 新型HPLC固定相
2.5.1 高稳定性化学键合硅胶固定相 2.5.2 有机-无机杂化基质固定相
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2.2 硅胶微粒
硅胶及键合硅胶是开发最早、研究深入、应用广泛的HPLC固定相，这主
要是基于硅胶基质良好的物理特性与完善的制备工艺。
大多数硅胶微粒的机械强度很高，可保证填充床长时间在很高的操作压
力下工作，柱效保持稳定。同时，由于硅胶表面存在活性硅羟基，能够通过
表面化学修饰引入种类繁多的、具有不同官能团的键合相。
色谱柱的类型 1.1
1.2
一般色谱柱的结构
1.3
一般制备柱的结构
1.4
液相色谱锥形柱与锥尾柱
径向色谱柱 1.5
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1.1 色谱柱的类型
• 按照分离规模及色谱 柱的几何参数可以分为： 制备柱、分析柱、微型 柱等。 • 按照色谱柱中流动相 的流向不同可分为：纵 向柱、径向柱、锥形柱 等，通常在无特殊说明 的情况下所说的色谱柱 皆指纵向柱，径向柱和 锥形柱一般在制备色谱 中应用。
筛板是色谱柱中非常重要的部分，它的主要作用是封闭色谱柱的两头， 防止填料微粒流失，一般是用具有特定粒度的不锈钢或者镍粉末在模型中烧结 而成，颗粒间隙即为筛板的孔，筛孔应小于填料的直径，一般5 μm和3 μm的 微粒分别用2 μm和0.45 μm孔径的筛板。
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1.3 一般制备柱的结构
样品容量
2.5g 600mg 150mg 25mg 0.2～7mg 0.05～0.2mg 50～500μg 1～50μg ≤1μg
5
1.2 一般色谱柱的结构
HPLC色谱柱大多是用内壁经高度抛光处理的直不锈钢管，不锈钢可用于 所有有机溶剂与大多数水性缓冲液。但是含氯的流动相会缓慢的腐蚀不锈钢材 质（尤其在低PH值时）所以使用该类型流动相时应小心。也有用玻璃、玻璃衬 里不锈钢与塑料制作的商品柱，用于可能与不锈钢发生反应的特殊样品。
高效液相色谱柱
姓名： 专业：
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目录
CONTENT
第一章
第二章
色谱柱的结 色谱柱填料 构与特征 与固定相
第三章
第四章
色谱柱的装 填、性能指
标
色谱柱常见 问题分析
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1 色谱柱的结 构与特征
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一 色谱柱的结构与特征
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2.1 柱填料特性
无机基质
固定相基质 有机基质
氧化硅、氧化 铝、氧化锆等 无机氧化物
聚羟基甲基丙烯酸丙 酯、聚乙烯醇等亲水 性聚合物；葡萄糖、 纤维素等软胶
优点：机械强度高、溶胀 性小、耐高压、可通过表 面改性引入多种功能基满 足HPLC分离需要。缺点： 表面性质复杂，容易导致 溶质分子非特征性吸附
综合考虑柱效、反压和寿命等方面因素，目前约5μm粒径固定相在分析 型HPLC中应用最为广泛，1.5 ～ 3μm左右的多孔或无孔微粒在快速分离中 显示出较为明显的优势。粒度分布范围越窄，填充色谱柱床的稳定性越好、 柱效越高，同时压力降最小，一般要求粒度分布范围不超过平均值的± 50 ％。
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未修饰硅胶表面化学性质随制备和处理条件不同而变化。水柱 半制备柱 常规柱 细内径柱
微柱 毛细管柱
纳米柱
柱内径 （mm）
101.6 50.8 25.4
9 4.6 2.1 0.8～1.0 0.1～0.5 ≤0.5
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流动相流速
960ml/min 240ml/min 61ml/min 11ml/min 0.5～2.0ml/min 0.2～0.4ml/min 25～60μl/min 1～15μl/min ≤1μl/min
优点：化学稳定性好， 同时表面化学性能比较 均一，缺点：但其他方 面较无机基质较差。
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2.1 柱填料特性
目前HPLC分析中常用的几种填料类型主要包括：全多孔微球、薄壳型微 球、灌注色谱填料等。其中由于全多孔微球填料很好的兼顾柱效、样品容量、 使用寿命、灵活性等众多理想的性质，因此应用最为普遍。薄壳型微球仅适 于分析性HPLC。灌注色谱填料非常适于蛋白质等大分子的制备分离，但用于 小分子分析分离较少。
锥尾柱：在制备液相色谱中，色谱柱内径较大，而连接管线的内径较小， 从大直径直接过渡到小直径，流体易产生涡流分散和局部滞留，柱效降低.锥 型柱尾内径逐渐减小，避免了上述问题，很多的制备色谱柱都采用锥 型柱尾.
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1.5 径向色谱柱
径向色谱柱采用径向流动技 术，样品和流动相沿径向流动 （而不是如传统色谱柱即轴向色 谱柱，样品和流动相是从柱的一 端流向另一端），可以从柱的周 围流向柱圆心，也可以从柱圆心 流向柱的周围。一般结构的径向 柱中，通常采用从柱的周围流向 柱圆心的方式。
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1.4 液相色谱锥形柱与锥尾柱
锥形柱：与传统的圆柱形柱不同，锥形柱是内径渐变的，导致流动相的线 速度在柱内加速运动。内径渐变小的加速度为正，反之则反。制备级色谱的进 样量一般是过载运行，导致分离效率下降，产品的纯度受到损失.样品的质量 过载通常在色谱柱的人口处发生，在样品沿色谱柱向下流动过程中，由于流动 相在色谱柱中对样品的稀释效应， 质量过载情况会逐步减弱.大入口锥型柱由 于柱子入口处截面积较大，在柱容积相同的条件下，对样品的负载能力大于圆 柱型柱，在相同的进样量时，柱效损失较小。