--高效液相色谱法ppt课件
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《高效液相》课件
蛋白质分离与纯化
蛋白质分离
高效液相色谱技术可以用于蛋白质的分离和纯化，通过不 同的分离模式和固定相选择，实现对蛋白质的快速分离和 纯化。
蛋白质性质分析
通过高效液相色谱技术可以对蛋白质的性质进行分析，如 蛋白质的分子量、等电点等，为蛋白质的结构和功能研究 提供有力支持。
蛋白质相互作用研究
高效液相色谱技术可以用于研究蛋白质之间的相互作用， 如蛋白质与配体、抑制剂等之间的相互作用，有助于深入 了解蛋白质的功能和作用机制。
原理
利用不同物质在固定相和流动相之间 的分配系数差异进行分离，通过检测 器进行检测，收集各个组分，达到分 析样品组分的目的。
发展历程
01
02
03
04
起源
20世纪初，俄国植物学家茨 维特发明了色谱法。
1940年代
气相色谱法（GC）出现，并 逐渐发展成熟。
1960年代
高效液相色谱法（HPLC）开 始发展，并逐渐取代气相色谱
02
高效液相色谱仪
仪器组成
进样器
将样品注入色谱柱，是 色谱仪的重要部件之一
。
色谱柱
用于分离样品中的各组 分，由固定相和流动相
组成。
检测器
检测色谱柱流出的组分 ，并将其转换为电信号
。
数据处理系统
用于采集、处理和显示 检测器输出的信号。
重要部件介绍
01
02
03
色谱柱填料
常用的填料有硅胶、氧化 铝、活性炭等，根据不同 分离需求选择合适的填料 。
《高效液相》ppt课件
目录
• 高效液相色谱法简介 • 高效液相色谱仪 • 高效液相色谱分离技术 • 高效液相色谱在生物医药领域的应用 • 高效液相色谱实验技术 • 高效液相色谱技术前沿与展望
高效液相色谱-HPLCppt课件.ppt
色谱法的分类
按固定相的形态分:
平面色谱 o 纸色谱
o 薄层色谱
柱色谱
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
色谱法的分类示意图
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
▪ 高压梯度洗脱（高压混合，高压进柱，2个 泵。）
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
▪安捷伦泵：小视频 ▪色谱学堂：泵
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
色谱法原理及分类
什么是色谱法 色谱法溯源 Tswett（茨维特)的实验 色谱法原理 色谱法的分类
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
什么是色谱法
色谱法是一种现代的分离分析方法 1906年正式命名(见诸文献) 20世纪30年代开始广泛研究和应用 高效液相色谱法的广泛应用始于20世纪70年代
1. 紫外—可见光度检测器：
①固定波长：254nm ， 低压汞 灯。
② 可 调 波 长 ： 190 ～ 800mm ， 钨灯，氘灯。
UV
③光电二极管矩阵检测器： 190～700nm。
接色谱柱 石英窗 光电倍增管
废液
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
waters-e高效液相色谱ppt课件
4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用甲醇水溶液冲洗。 5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水冲洗及
保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水极性太强且易长霉。 。 6.开机时，流速和柱压要逐渐增加。 7.要注意柱子的PH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
流动相流出检测器可被送至废液瓶，或按需被收集。 当流动相含有一个分开的化合物谱带，高效液相色谱可以收集含有纯
化的化合物的该洗脱组分，用于进一步分析。
注意高压管路和附件用来连接泵、进样器、色谱柱和检测器单元，形 成流动相、样品和化合物分离谱带的通路。
高 检将效测电器信液连号相接转计换色算为谱机色数谱如据图站 ，何在，工显高示效作屏液上相展色现谱出系来统。单元先记录电信号，再
液相色谱的基本流程图
流动相
进样阀 泵
色谱柱
泵输液 进样
分离
检测器
检测
AB C
DE
G
F
记录
液 液相相流色色动谱谱相实：的验种所类各需及的部配基比分本，参示等数度-意-或亦梯图称度色谱条件
固定相：色谱柱类型及内径、长短 流动相输送系统参数：流速 检测器参数：紫外检测波长，灵敏度等 温度控制 进样量
四元梯度洗脱的溶剂输送动进样系统 柱温箱 液晶显示器 内置的柱塞杆密封垫清洗系统 溶剂瓶托盘 键盘用户界面及软盘驱动器
打开电源至on位置，开机依次接通 2695 分离单元、检测
2器开、机计算机和打印机的电源。接通后，约 20s 仪器开始自
检，约 1min 后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化。
溶 流【剂动M管相en理脱u/气系St确a统tu认s的所】有，准溶进备剂入管“路St都at充us满（溶1 剂），”按屏幕
保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水极性太强且易长霉。 。 6.开机时，流速和柱压要逐渐增加。 7.要注意柱子的PH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
流动相流出检测器可被送至废液瓶，或按需被收集。 当流动相含有一个分开的化合物谱带，高效液相色谱可以收集含有纯
化的化合物的该洗脱组分，用于进一步分析。
注意高压管路和附件用来连接泵、进样器、色谱柱和检测器单元，形 成流动相、样品和化合物分离谱带的通路。
高 检将效测电器信液连号相接转计换色算为谱机色数谱如据图站 ，何在，工显高示效作屏液上相展色现谱出系来统。单元先记录电信号，再
液相色谱的基本流程图
流动相
进样阀 泵
色谱柱
泵输液 进样
分离
检测器
检测
AB C
DE
G
F
记录
液 液相相流色色动谱谱相实：的验种所类各需及的部配基比分本，参示等数度-意-或亦梯图称度色谱条件
固定相：色谱柱类型及内径、长短 流动相输送系统参数：流速 检测器参数：紫外检测波长，灵敏度等 温度控制 进样量
四元梯度洗脱的溶剂输送动进样系统 柱温箱 液晶显示器 内置的柱塞杆密封垫清洗系统 溶剂瓶托盘 键盘用户界面及软盘驱动器
打开电源至on位置，开机依次接通 2695 分离单元、检测
2器开、机计算机和打印机的电源。接通后，约 20s 仪器开始自
检，约 1min 后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化。
溶 流【剂动M管相en理脱u/气系St确a统tu认s的所】有，准溶进备剂入管“路St都at充us满（溶1 剂），”按屏幕
高效液相色法分离芳香烃ppt
在环境监测中的应用前景
污染源监测
高效液相色谱法可以用于监测工业废水和废 气中的芳香烃，了解污染源的排放情况。
生态风险评估
通过高效液相色谱法对环境中的芳香烃进行检测， 可以评估其对生态系统的风险，为环境保护提供科 学依据。
土壤和地下水监测
高效液相色谱法可以用于监测土壤和地下水 中的芳香烃，了解环境污染的程度和范围。
03
高效液相色谱法分离芳香烃的 实验条件
流动相的选择
总结词
流动相的选择对芳香烃的分离效果具 有重要影响。
详细描述
流动相的选择应考虑芳香烃的溶解度、 分离效率和实验操作条件。常用的流 动相包括有机溶剂和水，应根据芳香 烃的性质和分离要求进行选择。
固定相的选择
总结词
固定相的选择对芳香烃的分离效果具有关键作用。
实验结果的应用
01
质量控制
过程优化
03
科学研究
通过高效液相色谱法分离芳香烃， 可以控制产品的质量，确保产品 的纯度和一致性。
根据实验结果，可以优化分离条 件和参数，提高分离效率和效果。
高效液相色谱法分离芳香烃在化 学、生物学等领域有广泛的应用， 为科学研究提供有力支持。
06
高效液相色谱法分离芳香烃的 优缺点
高效液相色谱法在芳香烃分离中的应用
芳香烃是一类具有芳香性结构的烃类化合物，在化学工业、医药、染料等 领域具有广泛应用。
高效液相色谱法在芳香烃分离中具有较高的分离效率和准确性，能够快速 分离和纯化各种芳香烃。
通过选择合适的固定相和流动相，高效液相色谱法可以实现对芳香烃的精 细分离和纯化，为后续的制备和应用提供高质量的原料。
流动相选择
根据待分离芳香烃的性质 选择合适的流动相，流动 相应具有良好的化学稳定 性和分离效果。
高效液相色谱法教学精【全】ppt课件
§1-3 色谱柱的分离效率
一、塔板理论 塔板理论认为: 一根柱子可以分为n
段，每段内组分在两相间迅速达到平衡， 把每一段称为一块理论塔板。
设柱长为L，理论塔板高度为H，则
H=L/Ｎ
Ｎ为理论塔板数。
理论塔板数一N
①色谱峰对称 ： N 16(tR )2
说明：
tW
a. 在给定的操作条件下，N几乎相同
三、高效液相色谱法的特点
高压: 以液体作为流动相，液体流经色谱柱时，
受到阻力较大 必须对流动相施加高压。 一般可达到150～300kg／cm2， 甚至可达700kg／cm2以上。
高速:
分析时间较经典液相色谱少得多（交 换速度快），一个复杂样品的分析仅需几 分钟到几十分钟。
高效:
气相色谱的分离效能很高，高效液相 色谱的柱效则更高（化学键合相），一般 约可达 6000理论塔板／米
②一定色谱条件下，对k’有差异的组
分，则柱效愈高，分离效果愈好。
塔板理论的特点和不足：
(1)当L一定时，N 越大(H 越小)，被测组
分在柱内被分配的次数越多，柱效越 高，所得色谱峰越窄。 (2)柱效不能表示被分离组分的实际分离
效果：如两组分的分配系数K 相同，
无论该色谱柱的柱效多大，都无法 分离。
① 柱效较高，ΔK(分配系数)较大，完全分离。 ② ΔK 不是很大，柱效较高，峰较窄，基本分离。 ③ 柱效较低，ΔK 较大，但分离的不好。 ④ ΔK 小，柱效低，分离效果更差。
一．分离度的数学表达式：
Rs
2(tR 2 tR1 ) W2 W1
2(tR 2 tR1 )
1.699 [Y1/ 2(2) Y1/ 2(1) ]
于世林编著)
第一章 高效液相色谱法基本原理 §1－1 概述 一、色谱法
高效液相色谱法培训PPT课件
注意事项与常见问题解答
样品处理注意事项
01
避免样品污染、损失或变质，确保处理过程的准确性和可重复
性。
常见问题及解决方法
02
针对样品处理过程中可能出现的问题，如回收率低、干扰物质
多等，提供相应的解决方法。
安全与防护
03
注意有毒有害试剂的使用安全，做好个人防护和环境保护工作。
04 方法开发与优化策略
梯度洗脱程序设计思路
初始比例确定
根据待测组分的极性差异，选 择合适的初始流动相比例。
梯度斜率设置
根据组分的分离情况，调整梯 度斜率，使各组分在合适的保 留时间内洗脱出来。
梯度时间设置
确保梯度洗脱过程中，各组分 能够充分分离，同时避免过长 的分析时间。
梯度曲线类型
根据实际需求选择合适的梯度 曲线类型，如线性梯度、凹形
梯度或凸形梯度等。
方法验证内容及标准
精密度
准确度
通过添加回收率试验，验证方法 的准确度，确保测定结果可靠。
考察方法的重复性和中间精密度， 确保测定结果的稳定性。
线性范围
确定方法的线性范围，确保待测 组分浓度在该范围内时，测定结 果准确可靠。
专属性
考察方法对待测组分的选择性， 确保其他共存物质不干扰测定。
长期稳定性
考察样品在规定的储存条件下放置一定时间后的稳定性，以确定 样品的保质期和储存条件。
方法学考察
对分析方法本身进行稳定性考察，包括方法的耐用性、重复性和 中间精密度等指标的评估。
质量控制图绘制和应用
质量控制图绘制
根据长期稳定性考察数据，绘制质量控 制图，包括平均值、标准差和控制限等 指标。
VS
发展历程及应用领域
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（2）由于液体的扩散性比气体的小105倍，因此，
溶质在液相中的传质速率慢，而在气相色谱中 气体的传质速率要快得多。
2020/6/28
（3）液相色谱能完成难度较高的分离工作
①气相色谱的流动相载气是色谱惰性的，而在 液相色谱中流动相液体也与固定相争夺样品分子， 为提高选择性增加了一个因素。
②液相色谱固定相类型多，作为分析时选择余 地大；而气相色谱并不可能的。
定量计算方法存入存储器中，需用时调出直接使用。
2020/6/28
2020/6/28
三、影响分离的因素 1. 固定相及分离柱
气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色 谱，其选用原则与气相色谱一样。
选择合适的固定相，降低填料粒度可显著提高 柱效，但在高效液相色谱中，分离柱的制备是一项 技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。
2020/6/28
小结
综上所述，高效液相色谱法是吸取了气 相色谱与经典液相色谱的优点，具有高柱 效、高选择性、分析速度快、灵敏度高、 重复性好、应用范围广等优点。
目前高效液相色谱法已被广泛应用于分 析对生物学和医药上有重大意义的大分子 物质，例如蛋白质、核酸、氨基酸、多糖 类、植物色素、高聚物、染料及药物等物 质的分离和分析。
选择短柱、细内径提高分析速度；
研制高效柱填料是一活跃领域。
2020/6/28
2. 流动相及流动相的极性
（1）可显著改变组分分离状况的流动相选择在液相色谱 中显得特别重要。 液相色谱的流动相又称为：淋洗液，洗脱 剂。
（2）亲水性固定液常采用疏水性淋洗液，即淋洗液的极 性小于固定相的极性，称为正相液液色谱法，极性柱也称正 相柱。
主要部件之一，包括贮液装置、高压输液泵、过滤器、脱 气装置等 高压输液泵压力：150～350×105 Pa。 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（<10μm），液 体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高 速是高效液相色谱的特点之一。 基本要求：
应具有压力平稳、脉冲小、流量稳 定可调、耐腐蚀等特性
2020/6/28
选择流动相时应注意的几个问题：
（1）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累 积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。
（3）若淋洗液的极性大于固定液的极性，则称为反相液 液色谱，非极性柱也称为反相柱。组分在两种类型分离柱上 的出峰顺序相反。
2020/6/28
流动相组成
流动相按组成不同可分为单组分和多组分； 按极性可分为极性、弱极性、非极性； 按使用方式有固定组成淋洗和梯度淋洗。 常用溶剂: 己烷、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈、水。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流动相 的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。
高效液相色谱法比起经典液相色谱法的最大优 点在于高速、高效、高灵敏度、高自动化。
例如对氨基酸分离，用经典色谱法需用20多小 时才能分离出20种氨基酸；而用高效液相色谱法，只 需lh之内即可完成。
又如用25cm×0.46cm的Lichrosorb－ODS(5μ) 的柱，采用梯度洗脱，可在不到0.5h内分离出尿中 104个组分.
其结构如图所示：
2020/6/28
(4) 高效分离系统
色谱分离系统包括色谱柱、固定相和流动相。色谱 柱是其核心部分，柱体为直型不锈钢管，内径1～6 mm，柱长5～40 cm。 发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
2020/6/28
(5) 高效液相色谱检测器
紫外光度检测器（UVD）：最小检测量10-9g·mL-1， 对流量和温度的波动不敏感，可用于梯度洗脱。
一、高效液相色谱法的特点
特点：高压、高效、高速 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。
2020/6/28
1．高效液相色谱法与气相色谱法比较
（1）应用范围不同
气相色谱仅能分析在操作温度下能气化而不 分解的物质。据统计只有大约20%的有机物能 用气相色谱分析；而液相色谱适合分子量较大、 难气化、不易挥发或对热敏感的物质、离子型 化合物及高聚物的分离分析，大约占有机物的 70 ~ 80%。
高效液相色谱法的仪器设备费用昂贵， 操作严格，这是它的主要缺点。
2020/6/28
二、流程及主要部件
1.流程
高压输液系统 —— 进样系统 —— 分离系统—— 检测系统 —— 数据处理系统
2020/6/28
2020/6/28
Agilent 1100 LC的主要部件
2.主要部件
(1) 高压输液系统
最常用的检测器。
2020/6/28
光电二极管阵列检测器
光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特 定波长，计算机快速处理，三维立体谱图，如图所示。
2020/6/28
（6） 数据处理系统
色谱工作站的功能：
• 色谱参数的选择和设定； • 自动化操作仪器； • 色谱数据的采集和存储，并作“实时”处理； • 对采集和存储的数据进行后处理； • 自动打印，给出一套完整的色谱分析数据和图谱。 • 同时也可把一些常用色谱参数、操作程序，及各种
2020/6/28
(2) 梯度淋洗装置
外梯度: 利用两台高压输液泵，
将两种不同极性的溶剂按一 定的比例送入梯度混合室， 混合后进入色谱柱。
内梯度: 一台高压泵, 通过比例
调节阀,将两种或多种不同 极性的溶剂按一定的比例抽 入高压泵中混合。
2020/6/28
(3) 进样装置
流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六 通阀进样装置，也可配备自动进样装置。
第二章
高效液相色谱法
一、高效液相色谱法 的特点
二、流程及主要部件 三、影响分离的因素 四、高效液相色谱法
的主要分离类型
2020/6/28
液相色谱仪（1）
2020/6/28
液相色谱仪（2）
2020/6/28
液相色谱仪（谱仪（4）
2020/6/28
液相色谱仪（5）
2020/6/28
③ 液相色谱通常在室温下操作，较低的温度， 一般有利于色谱分离条件的选择，而气相色谱一 般都在较高温度下进行的。
（4）液相色谱中制备样品简单，回收样品也比较容 易，而且回收是定量的，适合于大量制备。但液相色 谱尚缺乏通用的检测器，仪器比较复杂，价格昂贵。
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2．高效液相色谱法与经典液相色谱法比较
溶质在液相中的传质速率慢，而在气相色谱中 气体的传质速率要快得多。
2020/6/28
（3）液相色谱能完成难度较高的分离工作
①气相色谱的流动相载气是色谱惰性的，而在 液相色谱中流动相液体也与固定相争夺样品分子， 为提高选择性增加了一个因素。
②液相色谱固定相类型多，作为分析时选择余 地大；而气相色谱并不可能的。
定量计算方法存入存储器中，需用时调出直接使用。
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三、影响分离的因素 1. 固定相及分离柱
气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色 谱，其选用原则与气相色谱一样。
选择合适的固定相，降低填料粒度可显著提高 柱效，但在高效液相色谱中，分离柱的制备是一项 技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。
2020/6/28
小结
综上所述，高效液相色谱法是吸取了气 相色谱与经典液相色谱的优点，具有高柱 效、高选择性、分析速度快、灵敏度高、 重复性好、应用范围广等优点。
目前高效液相色谱法已被广泛应用于分 析对生物学和医药上有重大意义的大分子 物质，例如蛋白质、核酸、氨基酸、多糖 类、植物色素、高聚物、染料及药物等物 质的分离和分析。
选择短柱、细内径提高分析速度；
研制高效柱填料是一活跃领域。
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2. 流动相及流动相的极性
（1）可显著改变组分分离状况的流动相选择在液相色谱 中显得特别重要。 液相色谱的流动相又称为：淋洗液，洗脱 剂。
（2）亲水性固定液常采用疏水性淋洗液，即淋洗液的极 性小于固定相的极性，称为正相液液色谱法，极性柱也称正 相柱。
主要部件之一，包括贮液装置、高压输液泵、过滤器、脱 气装置等 高压输液泵压力：150～350×105 Pa。 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（<10μm），液 体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高 速是高效液相色谱的特点之一。 基本要求：
应具有压力平稳、脉冲小、流量稳 定可调、耐腐蚀等特性
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选择流动相时应注意的几个问题：
（1）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累 积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。
（3）若淋洗液的极性大于固定液的极性，则称为反相液 液色谱，非极性柱也称为反相柱。组分在两种类型分离柱上 的出峰顺序相反。
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流动相组成
流动相按组成不同可分为单组分和多组分； 按极性可分为极性、弱极性、非极性； 按使用方式有固定组成淋洗和梯度淋洗。 常用溶剂: 己烷、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈、水。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流动相 的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。
高效液相色谱法比起经典液相色谱法的最大优 点在于高速、高效、高灵敏度、高自动化。
例如对氨基酸分离，用经典色谱法需用20多小 时才能分离出20种氨基酸；而用高效液相色谱法，只 需lh之内即可完成。
又如用25cm×0.46cm的Lichrosorb－ODS(5μ) 的柱，采用梯度洗脱，可在不到0.5h内分离出尿中 104个组分.
其结构如图所示：
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(4) 高效分离系统
色谱分离系统包括色谱柱、固定相和流动相。色谱 柱是其核心部分，柱体为直型不锈钢管，内径1～6 mm，柱长5～40 cm。 发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
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(5) 高效液相色谱检测器
紫外光度检测器（UVD）：最小检测量10-9g·mL-1， 对流量和温度的波动不敏感，可用于梯度洗脱。
一、高效液相色谱法的特点
特点：高压、高效、高速 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。
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1．高效液相色谱法与气相色谱法比较
（1）应用范围不同
气相色谱仅能分析在操作温度下能气化而不 分解的物质。据统计只有大约20%的有机物能 用气相色谱分析；而液相色谱适合分子量较大、 难气化、不易挥发或对热敏感的物质、离子型 化合物及高聚物的分离分析，大约占有机物的 70 ~ 80%。
高效液相色谱法的仪器设备费用昂贵， 操作严格，这是它的主要缺点。
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二、流程及主要部件
1.流程
高压输液系统 —— 进样系统 —— 分离系统—— 检测系统 —— 数据处理系统
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Agilent 1100 LC的主要部件
2.主要部件
(1) 高压输液系统
最常用的检测器。
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光电二极管阵列检测器
光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特 定波长，计算机快速处理，三维立体谱图，如图所示。
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（6） 数据处理系统
色谱工作站的功能：
• 色谱参数的选择和设定； • 自动化操作仪器； • 色谱数据的采集和存储，并作“实时”处理； • 对采集和存储的数据进行后处理； • 自动打印，给出一套完整的色谱分析数据和图谱。 • 同时也可把一些常用色谱参数、操作程序，及各种
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(2) 梯度淋洗装置
外梯度: 利用两台高压输液泵，
将两种不同极性的溶剂按一 定的比例送入梯度混合室， 混合后进入色谱柱。
内梯度: 一台高压泵, 通过比例
调节阀,将两种或多种不同 极性的溶剂按一定的比例抽 入高压泵中混合。
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(3) 进样装置
流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六 通阀进样装置，也可配备自动进样装置。
第二章
高效液相色谱法
一、高效液相色谱法 的特点
二、流程及主要部件 三、影响分离的因素 四、高效液相色谱法
的主要分离类型
2020/6/28
液相色谱仪（1）
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液相色谱仪（2）
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液相色谱仪（谱仪（4）
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液相色谱仪（5）
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③ 液相色谱通常在室温下操作，较低的温度， 一般有利于色谱分离条件的选择，而气相色谱一 般都在较高温度下进行的。
（4）液相色谱中制备样品简单，回收样品也比较容 易，而且回收是定量的，适合于大量制备。但液相色 谱尚缺乏通用的检测器，仪器比较复杂，价格昂贵。
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2．高效液相色谱法与经典液相色谱法比较