薄层色谱-偶氮苯
薄层色谱与偶氮光化异构实验
4、比移值（Rf）：
5、偶氮苯的光化异构化
N
Rf =
Hale Waihona Puke 溶质的最高浓度中心至原点中心的距离 溶剂前沿至原点中心的距离
N
h 活化分子
+
N
N
三、试剂、仪器
偶氮苯，苯或环己烷，硅胶板、层析缸
N
N
顺式
反式
四、实验内容与步骤
1、薄层板的制备（学习了解，本实验取用已经制备好的薄层板）。 ①薄层材料：吸附剂（硅胶、氧化铝）、支持剂（硅藻土、纤维素）、粘合剂（煅石膏等）。 ②薄层板的制备法（铺板）：平铺法和浸渍法。 ③薄层板的活化：（温度，时间）。 2、点样 离底边约1cm处用铅笔画一条起始线，用毛细管吸偶氮苯在直线上点1个样点，后置于254nm的 紫外灯下照射0.5h，取出后再在起始线上另点一个偶氮苯的样点。 （要求：毛细管直径≤1mm，斑点要小（<2mm），不能刺破薄层，点样间距1-1.5cm）。 3、展开： 把点好样品的薄层板放入展开剂为1，2-二氯乙烷（或者苯）的层析缸中展开。 （要求：上行法、溶剂不能浸过样点，并了解如何选择展开剂）。 4、显色： 取出样板，观察记录斑点的位置。 （要求：了解其他的显色方法如荧光法、碘蒸气法和试剂显色法）。
5、 Rf值的计算：斑点中心到原点的距离 / 溶剂前沿到原点的距离。 6、实验结果的表达： 按比例把展开的薄层板画在实验记录本上，并标明样品名称、展开剂和斑点的Rf值，标明 顺式偶氮苯和反式偶氮苯的位置。
溶剂的前沿
Rf= b
a b
=[0.2～0.8]
a
起始线 0.5-1cm
中国海洋大学 有机化学实验
薄层色谱及偶氮苯的光化异构
一、实验目的
1、了解色谱法（薄层层析）的原理和应用。 2、掌握薄层层析的操作方法。 3、学习偶氮苯的光化异构化反应的原理和产物的鉴定
偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析本科教学实验的改进
目能够达到理想的教学效果，本研究对偶氮苯顺反
异构体薄层色谱分析方法进行了改进优化。
１ 实验材料
１．１ 器具与仪器
３ 讨论
图 ２ 偶氮苯顺反异构体薄层色谱图
本研究在传统的偶氮苯顺反异构体薄层色谱分
玻璃层析缸（ 含磨砂玻璃盖） ；硅胶板（ ＧＦ２５４ 、厚
析方法基础上，结合教学实践对实验方法进行了以
（ 河北医科大学 药学院， 河北 石家庄 ０５００１７）
摘 要： 基于药学专业分析化学本科实验教学实践， 对偶氮苯顺反异构体的薄层色谱分析方
法进行改进。 利用偶氮苯的光化学性质， 通过紫外光照处理样品， 使偶氮苯产生顺式异构体；
通过选用市售硅胶板产品， 减少了实验材料浪费， 并提高了实验效率； 为降低实验危害， 使
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ； ｔｒａｎｓ－ｃｉｓ ｉｓｏｍｅｒ； ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ； ｕｎｄｅｒｇｒａｄｕａｔｅ ｔｅａｃｈｉｎｇ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
薄层色谱法（ ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＴＬＣ） 是
会转变为顺式构型（ 见图 １ 所示） ［３］ 。 两种异构体
Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ
ａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ ｔｒａｎｓ － ｃｉｓ ｉｓｏｍｅｒｓ ｆｏｒ ｕｎｄｅｒｇｒａｄｕａｔｅ ｔｅａｃｈｉｎｇ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
ＦＵ Ｙａｎ， ＬＩ Ｃｈｅｎｇ， ＬＩ Ｌｉ － ｍｅｉ， ＳＵＮ Ｘｉａｏ － ｈｕｉ
，具有
较容易进行分离，偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析
将固定相均匀涂铺在具有光洁表面的玻璃、塑料或
偶氮苯的制备ppt课件
三、实验步骤
在干燥的100mL圆底烧瓶中，加入1.9mL（0.018mol） 硝基苯，46.5mL（1.1mol）甲醇和一小粒碘，装上球 形冷凝管，振荡反应物。加入1g除区氧化膜的镁屑， 反应立即开始，保持反应正常进行，注意反应不能太 激烈，也绝不能停止反应。待大部分镁屑反应完全后， 再加入1g镁屑，反应继续进行，反应液由淡黄色渐渐 变成黄色，等镁屑完全反应后，加热回流30min左右， 溶液呈淡黄色透明状。趁热将反应液在搅拌下倒入 70ml冰水中，用冰醋酸小心中和至pH为4~5，析出澄 红色固体，过滤，用少量水洗涤固体，固体用50%乙 醇重结晶。得到约1g产品，纯反式偶氮苯为澄红色片 状晶体，熔点68.5℃ 。
偶氮苯的制备及其光化异构化
10学时
1
实验目的
了解偶氮苯的制备及光学异构的原理。 掌握薄层色谱分离异构的方法。
2
实验原理
偶氮化合物具有各种鲜艳的颜色，多数偶 氮化合物可用作染料，称为偶氮染料，它 们是染料中品种最多、应用最广的一类合 成染料。
偶氮化合物：N原子是以sp2杂化,偶氮化合 物存在顺反异构体可发生还原反应,例如： 重氮基中间断开，生成两波 长有关。当用波长为365nm的紫外线照射 偶氮苯的苯溶液时，生成90％以上的热力 学不稳定的顺式异构体；若在日光照射下， 则顺式异构体仅稍多于反式异构体。反式 偶氮苯的偶极距为0，顺式偶氮苯的偶极距 为3.0D。两者极性不同，可借薄层色谱把 它们分离开，分别测定它们的值。
3
制备偶氮苯最简便的方法是用镁粉还原溶 解于甲醇中的硝基苯。反应为：
4
硝基化合物易被还原，可在酸性还原系统中 （Fe、Zn、Sn和盐酸）或催化氢化为胺。
硝基苯在酸性条件下用Zn或Fe为还原剂还原， 其最终产物是伯胺。
薄层色谱分离偶氮苯和苏丹实验报告
薄层色谱分离偶氮苯和苏丹实验报告一、实验目的1、掌握薄层色谱的基本原理和操作方法。
2、学习使用薄层色谱分离偶氮苯和苏丹混合物。
3、了解影响薄层色谱分离效果的因素。
二、实验原理薄层色谱（Thin Layer Chromatography，TLC）是一种快速、简便、灵敏的分离分析技术。
它基于混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，从而实现分离。
在本实验中，偶氮苯和苏丹是两种结构和性质不同的化合物。
偶氮苯为芳香族化合物，苏丹为偶氮类染料。
选择合适的展开剂，使它们在薄层板上的迁移速度不同，从而达到分离的目的。
三、实验仪器与试剂1、仪器玻璃板（5×20cm）层析缸点样毛细管紫外灯喷雾器2、试剂偶氮苯苏丹硅胶 G羧甲基纤维素钠（CMCNa）石油醚乙酸乙酯四、实验步骤1、制备薄层板将 3g 硅胶 G 置于研钵中，加入 7mL 05% CMCNa 溶液，充分研磨均匀。
将调好的硅胶糊倒在洗净的玻璃板上，用玻璃棒均匀涂布，使其成为厚度约 025mm 的均匀薄层。
水平放置，在室温下晾干后，置于 110℃烘箱中活化 30 分钟，取出备用。
2、点样用毛细管分别吸取少量偶氮苯和苏丹的溶液，在距薄层板一端 1cm 处，轻轻点样，使样点直径不超过 2mm，每次点样后，用电吹风冷风档吹干，重复点样 2-3 次。
3、展开在层析缸中加入适量的展开剂（石油醚：乙酸乙酯＝ 9:1），将点好样的薄层板放入层析缸中，使展开剂液面低于样点。
盖好层析缸盖，让展开剂自下而上展开。
当展开剂前沿上升至距板顶端 1cm 左右时，取出薄层板，用铅笔标记展开剂前沿的位置，用电吹风吹干。
4、显色将展开后的薄层板置于紫外灯下观察，偶氮苯和苏丹会呈现出不同颜色的斑点。
5、计算比移值（Rf 值）用尺子测量样点中心至展开剂前沿的距离（a）和样点中心至原点的距离（b），计算 Rf 值：Rf ＝ a ／ b 。
五、实验结果与分析1、实验结果偶氮苯的 Rf 值约为 07，苏丹的 Rf 值约为 04。
实验一 偶氮苯顺、反异构体的薄层色谱分离
1cm
六、装置图
h
h2 h1
福州大学 分子设计与合成研究中心
七、操作规程
1.偶氮苯的光化异构化
将溶有1g偶氮苯的100ml石油醚分成两部分，一 部分放在小样品瓶中并用黑纸包好避免阳光照射。另 一部分样品放在培养放在培养皿中，用汞灯产生波长 为365nm的紫外光照射1h备用。
实验二 二苯甲醇的制备 实验三 亲核取代反应—亲核试剂竞争
实验四 苯甲酰苯胺制备
实验五 邻氨基苯甲酸制备 实验六 呋喃甲醇和呋喃甲酸
实验七 三苯甲醇制备及其性质
福州大学 分子设计与合成研究中心
实验一 偶氮苯顺、反异构体的 薄层色谱分离
福州大学 分子设计与合成研究中心
一、实验目的
(1)了解掌握薄层色谱的原理及方法。
福州大学 分子设计与合成研究中心
八、 操作要点
1、薄板涂层时要均匀、不要太厚。否则斑点分离效果不好。
2、薄板涂好后静置和活化时间要够，否则板易裂，且斑点
无法分开。 3、划起始线时，要轻，不要刺破薄层。 4、点样毛细管粗细要合适，直径约0.5mm。斑点直径一般 不超过2mm，样点过大，易造成拖尾、扩散等现象，
以致不容易分开。
福州大学 分子设计与合成研究中心
5、薄层板浸入展开剂不能超过点样线，否则样品不在薄板上 分离而直接进入展开剂。 6、要分离的物质极性越大，吸附力越强，但Rf值却越小。展 开剂极性越大，则洗脱力越大，Rf值越大。 7、取出薄板后，马上用铅笔在展开剂上升前沿处划一记号， 否则呈现的前沿很快消失，无法记录展开剂前沿至原点中心 距离，而无法计算比移值。
福州大学 分子设计与合成研究中心
四、实验原理
反应式
hv N N N N
实验二 偶氮苯及其衍生物综述
3．展开
将展开剂5mL倒入层析缸中，盖上盖子让 层析缸内蒸气饱和5min～10min。将点好样品 的薄层板放入层析缸中进行展开。点样线必须
保持在液面之上。当展开剂升到距薄层顶端
1cm左右时，取出薄层板，用铅笔轻轻划出前
沿线，在空气流通处晾干。
4． Rf值的计算 分别计算出偶氮苯及对-二甲氨基偶
实验二 偶氮苯及其衍生物 的分离及鉴定(薄层色谱)
【实验目的】
1．掌握薄层色谱的原理及其特点。 2．熟悉薄层板的制备方法。 3．了解薄层色谱的显色方法。
【实验原理】
薄层色谱（薄层层析）是在柱色谱和纸色 谱的基础上发展起来的一种微量、快速而又操 作简便的色谱法。与柱色谱与纸色谱相比，薄 层色谱具有分离效率高、灵敏度高、应用面广 以及层析后可用各种方法显色等优点。 薄层色谱法在有机化学中的主要用途为： 1．确证两个化合物是否相同；2．测定混合物 中组分数目；3．监控合成反应的进程；4．监 控柱层析分离的有效程度。 薄层色谱可用着定性分析外，还可与比色 法相配合起来作定量分析。
③ 对于一般的定性实验，用载玻片
（7.5cm×2.5cm）制成的硬板完全可以获得满意
的结果。
④ 制备所用的薄层板必须表面光滑、清洁。若
所用薄层板有油污的部位会发生吸附剂涂不上去 或薄层易剥落的现象。 ⑤ 偶氮苯的参考Rf值：0.6；对-二甲氨基偶氮 苯的参考Rf值：0.2。
【思考题】
1．根据本次实验，在展开剂（四氯化碳：氯 仿=7：3）比例条件下进行偶氮苯和对-二 甲氨基偶氮苯薄层色谱时，若增加展开剂 中四氯化碳的量，你认为二者的Rf值将有 何变化？为什么? 2．在薄层色谱法中，主要有哪些显色方法?
【实验步骤】
1． 薄层板的制备
苏丹红、苏丹黄、偶氮苯的薄层层析
苏丹红、苏丹黄、偶氮苯的薄层层析一、苏丹红(Sudan Red)苏丹红是一种常用的红色染料，被广泛应用于食品、化妆品、药品、指甲油等业界，能够赋予产品艳丽的色泽。
然而苏丹红也被认为是致癌物质之一。
为了避免食品安全问题，许多国家和地区禁止苏丹红的使用。
在分析检测方法方面，薄层层析技术是一种比较简单、快捷、经济的方法。
下面是针对苏丹红的薄层层析过程：试料：苏丹红试剂：正洁净丙酮、橄榄油(甘油)、硅胶G工具：薄层层析板、层析罐、玻璃棒、显色剂方法：1.将硅胶G加入根据需要加入橄榄油(甘油)加至湿润状态。
2.将硅胶G加至薄层层析板上。
3.将湿润硅胶G平均的铺置于薄层层析板上，待干燥。
4.取适量的苏丹红加入正洁净丙酮中，使其完全溶解（尽量不要加多）。
0.2克左右即可。
5.将Sudan Red加入到上一步得到的层析板中。
6.晾干后，将层析板塞于等温层析罐中，上面加入适量的正洁净丙酮，将罐盖好。
7.将等温层析罐放入直线扫描层析仪中，使其等温30-60分钟。
8.测定苏丹红的吸收峰，记录其波长和相对强度。
9.采用显色剂可更加准确的测定吸收峰的波长和相对强度，进而进行定量分析。
苏丹黄是一种荧光亮黄色的有机颜料，被广泛用于染料、涂料、食品、饮料等多个领域，亦为一种致癌物质。
因此，人们对其分析检测越来越重视。
下面是苏丹黄的薄层层析方法：试剂：苯酚，四氯化碳1.取得薄层层析板，并在上面用硅胶G均匀的抹上一层。
2.将苯酚和四氯化碳混合，其配比为1：1，得到的混合溶液为显色剂。
3.将苏丹黄与混合溶液按需要的含量混合，制成样品溶液。
4.将样品溶液放在层析板边缘上，慢慢靠近层析板中心。
5.用含四氯化碳小槽将薄层层析板放入液面中，控制好溶液高度。
6.让样品溶液慢慢上升，进行层析分离。
7.分离结束后，将层析板晾干。
8.将晾干的层析板放入紫外灯下进行检测，通过温和化学反应，苏丹黄将被氧化，产生出淡黄色的荧光。
9.将层析板放入显色剂中，用显色剂复过程进行检测，最后根据相对迁移率计算定量分析。
薄层色谱分离偶氮苯
薄层色谱是在被洗涤干净的玻板（10×3cm左右）上均匀的 涂一层吸附剂（如硅胶），待干燥、活化后将1cm处的起点线
上，凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸 入深度为0.5cm。展开剂由下往上展开过程中，溶质在固 定相（硅胶）和流动相（展开剂）交换分配，溶质也随着 展开剂由下向上展开，溶质的极性大小决定了它被固定相 （硅胶）吸附的大小。极性越大，被吸附越大，上升就慢， 极性越小，随展开剂上升就越快，从而极性不同的化合物 得以分开。
薄层色谱是在被洗涤干净的玻板103cm左右上均匀的涂一层吸附剂如硅胶待干燥活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内浸入深度为05cm
薄层色谱分离偶氮苯
一、实验目的 学习薄层色谱的一般原理和方法 二、实验原理
色谱法是分离、提纯和鉴定有机化合物的重要方法，有着 极其广泛的用途。 色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的 吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它亲和作用性能 的差异，使混合物的溶液流经该物质时进行反复的吸附或 分配等作用，从而将各组分分开。流动的混合物溶液称为 流动相；固定的物质称为固定相（可以是固体或液体）。
反式极性低于顺式，在薄层中被硅胶吸附小，随 展开剂上升快，顺式极性大，被硅胶吸附大，随 展开剂上升慢。故展开一段时间后，顺反异构体 得以分开。
Rf (顺式) ＜Rf(反式)
三、操作步骤 1、薄板制备与活化 2、点样 先用铅笔在距薄层板一端1cm处轻轻划一横线作为起始线， 然后用毛细管吸取样品(偶氮苯)，在起始线上小心点样 （两样点相距1.5ｃｍ），斑点直径一般不超过2mm。 3、展开： 薄层色谱的展开，需要在密闭容器中进行。为使溶剂蒸 气迅速达到平衡，可在展开槽内衬一滤纸。常用的展开 槽有：长方形盒式和广口瓶式。
偶氮苯薄层实验报告
一、实验目的1. 掌握薄层色谱的基本原理及其在有机物分离中的应用。
2. 学习并掌握偶氮苯的薄层色谱分离方法。
3. 了解偶氮苯的物理化学性质及其在实验中的表现。
二、实验原理薄层色谱（TLC）是一种用于分离和鉴定有机化合物的方法。
其基本原理是利用混合物中各组分对吸附剂的吸附能力不同，当展开剂流经吸附剂时，有机物各组分会发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前，而吸附力强的组分则滞后，从而实现分离。
物质被分离后在图谱上的位置，常用比移值Rf表示。
偶氮苯（C6H5N2）是一种有机化合物，具有顺式（Z）-反式（E）-异构体。
顺式偶氮苯的偶极距大，极性强，反式偶氮苯的偶极距为零，极性小。
因此，在薄层色谱中，两种结构的物质会分开，并具有不同的Rf值。
三、实验仪器与药品1. 仪器：硅胶薄层板、点样器、层析缸、紫外灯、比色计等。
2. 药品：偶氮苯标准品、无水乙醇、环己烷、乙酸乙酯等。
四、实验步骤1. 准备薄层板：将硅胶薄层板置于层析缸中，用无水乙醇润湿，使硅胶充分吸附在板上。
2. 点样：用点样器蘸取少量偶氮苯标准品，点于薄层板下端2.0cm处，标记为原点。
3. 展开剂选择：根据文献报道，选择环己烷与乙酸乙酯的混合溶剂或环己烷与乙醇的混合溶剂作为展开剂。
4. 展开实验：将薄层板放入层析缸中，加入适量展开剂，使溶剂前沿距离薄层板顶约1.0cm。
待溶剂前沿上升至预定位置后，取出薄层板，晾干。
5. 检测：用紫外灯照射薄层板，观察偶氮苯的斑点位置和颜色。
6. 测量Rf值：用比色计测量原点至偶氮苯斑点中心的距离和原点至溶剂前沿的距离，计算Rf值。
五、实验结果与分析1. 实验结果：在紫外灯照射下，薄层板上出现两个明显的斑点，分别对应顺式和反式偶氮苯。
2. Rf值计算：根据实验数据，顺式偶氮苯的Rf值为0.45，反式偶氮苯的Rf值为0.65。
3. 结果分析：实验结果表明，薄层色谱法可以有效地分离偶氮苯的顺式和反式异构体。
偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析本科教学实验的改进
偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析本科教学实验的改进
改进偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析本科教学实验
随着现在科研方面的发展，大学教师和学生们都期望通过课堂实验来认识科学，而偶氮苯
顺反异构体薄层色谱分析已成为本科教学的实验基础，目的是帮助学生对数据分析有更深
刻的理解，研究并归纳经验数据。
为了优化偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析本科教学实验，需要提出一些改进措施。
首先，
需要扩展实验的范围，让学生通过实验获取更多的知识，如探究不同液体中不同物质对薄
层色谱的影响等。
其次，在给学生讲解薄层色谱分析方法时，应多次给予实例，给学生带
来更多活动内容，让学生更加熟悉实验内容。
另外，可以通过研究和讨论等方式，使学生
更深入地学习和了解偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析，对科学知识作出更深入的解析。
同时，建议将该实验分为实验一和实验二两部分，分别专门进行实验测试和数据分析，以
便教师和学生掌握教学实验的要点。
教师也可以将实验数据录制成视频，供学生随时参考
调阅。
此外，教师还可以提出一些小组活动，激励学生一起思考，以求在实验中得出有利的结论。
这些小组活动可以是专题研究、报告设计、数据分析等形式，增加学生探究热情，实现实
验知识的深入学习和研究。
考虑到偶氮苯顺反异构体薄层色谱分析本科教学实验的特殊性，为了改进该课程的教学质量，在教学实验中加入上述改进措施，可以起到课堂激励学生，更好地吸引学生参与课堂
实验，加深学生对实验室理论知识的理解。
实验六薄层色谱分离偶氮染料
实验六薄层色谱分离偶氮染料一、实验目的：⑴了解薄层色谱的基本原理和应用。
⑵掌握薄层色谱法的操作步骤和方法。
二、基本原理：见本章2.5.2三、仪器与药品⑴仪器玻璃片（可用显微镜载玻片）毛细管层析缸（可用带塞的锥形瓶）⑵药品A.1％偶氮苯的四氯化碳溶液B.0.01％对二甲基偶氮苯的四氯化碳溶液C.A与B的混合液四氯化碳氯仿四、操作步骤：⑴薄层板的制备薄层板制备的好坏，是实验成败的关键，薄层应尽可能牢固［1］、均匀、厚度以0.25－1mm为宜。
铺层方法有平铺法和倾注法。
本实验采用倾注法：称取1.5g硅胶G[2]于50小烧杯中，加入约3蒸馏水，用玻璃棒轻轻搅匀（注意不要剧烈搅拌，以防将气泡带入匀浆，影响薄层质量）。
然后迅速将匀浆倾注在两块洗净、晾干的载玻片上。
用食指和拇指拿住玻片两端，前後左右轻轻摇晃，使流动的匀浆均匀地铺在玻璃片上，且表面光洁平整。
晾干后放入烘箱加热活化，调节烘箱缓缓升温至110℃恒温半小时，取出放在干燥器中备用。
⑵点样在离薄层板1.5cm处，用铅笔轻轻画出一条直线，在一块板上点A和C，另一块板上点B和C。
点样时应选择管口平齐的玻璃毛细管，吸取少量样品液体，轻轻接触薄层板。
如果一次点样不够，可等溶剂挥发后再点数次，但控制样品点的扩散直径不超过3mm。
⑶展开以3：2的四氯化碳、氯仿混合液为展开剂［3］，倒入层析缸内（液层厚度0.5mm）。
将点好样品的两块薄层板放入缸内，点样一端在下（注意样品点必须在展开剂液面之上）。
盖好缸盖，此时展开剂沿着薄层板上升，当展开剂前沿上升到距顶端1cm左右时取出薄层板。
尽快用铅笔标出前沿位置。
晾干。
本实验所用样品本身有颜色，故无需显色。
⑷R f值的计算量出从原点到展开剂前沿以及到各色斑中心的距离。
按2.5.2的公式计算R f值，并鉴别各色斑属于何种物质。
五、附注［1］要得到粘结较牢的薄层板，玻片一定要洗干净，一般先用肥皂洗净，自来水、蒸馏水冲洗，必要时用酒精擦洗，洗净后只拿切面。
实验3薄层色谱分离偶氮苯和邻-硝基苯胺
实验六 薄层色谱分离偶氮苯和邻-硝基苯胺[实验目的]1.了解薄层色谱的基本原理及其用途；2. 熟练掌握薄层色谱的操作方法。
[实验原理]薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC 表示，又称薄层层析，属于固－液吸附色谱。
薄层色谱是在被洗涤干净的玻板（10×3cm 左右）上均匀的涂一层吸附剂或支持剂，带干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm 处的起点线上，凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm 。
待展开剂前沿离顶端约1cm 附近时，将色谱板取出，干燥后喷以显色剂，或在紫外灯下显色。
记下原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离，计算比移值（R f ）：[实验装置]毛细管点样 色谱展开[课前预习]薄层色谱[实验样品]（1）小型展开槽一只，载玻片（2.5 cm×7.5 cm ）6块，研钵，烘箱，直尺，毛细管。
（2）硅胶H （200目），羧甲基纤维素纳，蒸馏水。
（3）1 %偶氮苯的1,2-二氯乙烷溶液。
（4）1 %邻硝基苯胺的1,2-二氯乙烷溶液。
（5）混合样液：由（3）和（4）两种溶液等体积混合而成。
（6）展开剂：1,2-二氯乙烷与环已烷的等体积混合液。
[操作步骤]（1）配制CMC 溶液：按照每克羧甲基纤维素钠100 mL 蒸馏水的比例在圆底烧瓶中配料，加入几粒沸石，装上回流冷凝管，在石棉网上加热回流至完全溶解，用布氏漏斗抽滤。
也可在配料后用力摇匀，放置数日后直接使用。
（2）调浆：称取适量的硅胶H 于干净研钵中，按照每克硅胶H 2.5～3 mL 溶剂的比例加入CMC 溶液，立即研磨，在半分钟内研成均匀的糊状。
R f =溶质的最高浓度中心至原点中心的距离（3）制板：将已经洗净烘干的载破片水平放置在台面上，用干净牛角匙舀取糊状物倒在载玻片上，迅速摊布均匀。
如不均匀，可轻敲载玻片侧沿使之流动均匀。
一般不可再加入糊状物，否则会形成局部过厚。
苏丹红、苏丹黄、偶氮苯的薄层层析
苏丹红、苏丹黄、偶氮苯的薄层层析苏丹红、苏丹黄、偶氮苯的薄层层析⼀、实验⽬的1.掌握薄层⾊谱的基本原理与薄层板的制备；2.掌握薄层层析的操作⽅法。
⼆、实验原理薄层层析是⼀种微量、快速的层析⽅法。
它不仅可以⽤于纯物质的鉴定，也可⽤于混合物的分离、提纯及含量的测定。
薄层层析的原理：利⽤混合物中各组分在某⼀物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它亲和作⽤性能的差异，使混合物的溶液流经该物质时进⾏反复的吸附或分配等作⽤，从⽽将各组分分开。
当温度、硅胶板、流动相等实验条件固定时，某化合物的⽐移值就是⼀个特定的常数，因此可做定性分析的依据，⽐移值Rf是表⽰⾊谱图上斑点位置的⼀个数值，它可⽤下式计算。
有时鉴定也经常采⽤标准样品在同样条件下作对⽐实验。
Rf=a/b式中：a—溶质的最⾼浓度中⼼⾄样点中⼼距离；b—溶剂的前沿⾄样点中⼼的距离。
良好的分离，⽐移值应在0.15～0.75之间，否则应该调换展开剂重新展开。
影响⽐移值的因素很多，如温度、展开剂等。
因此它虽然是每个化合物的特性常数，但由于实验条件的改变⽽不易重复。
所以在鉴定⼀个具体化合物时经常采⽤⼰知标准试样在同样条件下作对⽐实验。
三、物理常数四、实验仪器与药品层析缸载玻⽚研钵药勺台秤 500ml烧杯 10ml量筒称量纸铅笔格尺羧甲基纤维素钠CMC 硅胶GF254 苏丹红苏丹黄偶氮苯三氯甲烷蒸馏⽔五、实验装置图层析缸三⽤紫外分析仪六、实验步骤1、薄层板的制备（1）准备薄层载玻⽚实验⽤薄层载玻⽚为7.5× 2.5cm的载玻⽚，⽔洗，⼲燥。
取⽤时应⽤⼿指接触载玻⽚的边缘，避免指印沾污载玻⽚的表⾯，否则吸附剂将难于铺在载玻⽚上。
（2）制备4‰羧甲基纤维素钠(CMC)⽔溶液在1000ml中加⼊500ml蒸馏⽔，在搅拌下，加⼊2.0g羧甲基纤维素钠固体粉末，搅拌促使其溶解，放置1-2h，使其完全溶解，使⽤前⽤⽔泵减压过滤得CMC⽔溶液。
制成的CMC ⽔溶液要粘稠均匀，不得带CMC团块。
薄层分离偶氮苯实验报告
一、实验目的1. 掌握薄层色谱（TLC）的基本原理和操作方法。
2. 熟悉偶氮苯在薄层色谱中的分离过程。
3. 学习利用比移值（Rf）对分离效果进行评价。
二、实验原理薄层色谱是一种用于分离混合物中各组分的方法。
其原理是利用混合物中各组分在固定相和流动相之间不同的分配系数，使得各组分在固定相上的移动速度不同，从而实现分离。
本实验采用薄层色谱法分离偶氮苯，利用硅胶作为固定相，不同溶剂作为流动相，通过比移值（Rf）判断分离效果。
三、实验仪器与药品1. 仪器：薄层色谱板、点样器、层析缸、铅笔、吹风机、紫外灯等。
2. 药品：偶氮苯、硅胶、氯仿、正己烷、乙酸乙酯、甲醇等。
四、实验步骤1. 薄层板的制备：称取适量硅胶，加入少量水，调成糊状，均匀涂布在5cm×15cm的玻璃板上，待其自然干燥后，置于105℃烤箱中活化30分钟，取出冷却后备用。
2. 点样：用点样器取适量偶氮苯溶液，滴加在薄层板下端2cm处，作为原点。
3. 展开剂的选择：根据偶氮苯的极性，选择合适的溶剂作为展开剂。
本实验采用氯仿、正己烷、乙酸乙酯、甲醇等溶剂进行实验。
4. 展开过程：将涂有样品的薄层板放入层析缸中，加入适量展开剂，使展开剂液面高于原点，密封层析缸，待溶剂前沿达到预定位置后取出薄层板。
5. 观察与拍照：将薄层板置于紫外灯下观察，记录各组分的位置，用铅笔标记。
将薄层板置于拍照设备下拍照，以便后续分析。
6. 比移值（Rf）计算：测量各组分斑点中心到原点的距离（S）和溶剂前沿到原点的距离（D），根据公式Rf=S/D计算比移值。
五、实验结果与分析1. 偶氮苯在氯仿、正己烷、乙酸乙酯、甲醇等溶剂中的分离效果较好，Rf值在0.2-0.8之间。
2. 通过比较不同溶剂的分离效果，发现氯仿和正己烷的分离效果较好，Rf值较稳定。
3. 偶氮苯在薄层色谱中的分离过程符合实验原理，各组分在固定相和流动相之间发生吸附、解吸过程，从而实现分离。
六、实验结论1. 薄层色谱法可以有效地分离偶氮苯，为后续分析提供基础。
偶氮苯(借鉴类别)
化学与环境学院有机化学实验报告实验名称薄层层析【实验目的】1.学习薄层层析的基本原理和分离鉴别有机化合物的操作方法。
2.了解值Rf值的意义及计算。
【实验原理】（包括反应机理）1、薄层层析的原理和柱层析一样，属于固一液吸附层析的类型。
通常是把吸附剂放在玻璃板上成为一个薄层，是为固定相，以有机溶剂作为流动相。
实验时，把要分离的混合物滴在薄层析的一端，用适当的溶剂展开，当溶剂流经吸附剂时，由于各物质被吸附的强弱不同，就以不同的速率随着溶剂移动。
展开一定时间后，让溶剂停止流动，混合物中各组分就停留在薄层析上显示出一个个色斑的色谱图。
若各组分无色，可喷洒一定的显色剂使之显色。
它是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。
2、最典型的薄层色谱法是在一块洗净干燥的玻璃片上均匀铺上一薄层吸附剂，制成薄层板。
用毛细管将样品溶液点在起点处，把此薄层板置于盛有溶剂的容器中，待溶液到达前沿后取出，晾干，显色，测定色斑的位置。
由于层析是在薄层板上进行，故称为薄层层析。
记录原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离，计算此移值（R f）：R f = 溶质的最高浓度中心至原点中心的距离/ 溶剂前沿至原点中心的距离混合物中各物质在薄析上随溶剂移动的相对距离称为比移值（R f值）。
3、在一定条件下，各物质具有一定的R f值。
不同物质在相同条件下，具有不同的R f值。
因此，可利用R f值对物质进行定性鉴定。
但物质的R f值常因吸附剂的种类和活性，薄层的厚度，展开剂及温度等的不同而异。
所以在鉴定的样品时，常用已知成分作对照试验，在同一个薄层板上进行层析，然后通过R f值的比较，对物质作定性鉴定。
根据斑点的面积大小和颜色的深浅的标准物的对照下还可进行定量。
4、偶氮苯的常见形式是反式异构体，反式异构体在紫外光或日光照射下，有一部分转化为较不稳定的顺式异构体。
薄层色谱分离偶氮苯.
一、实验目的 学习薄层色谱的一般原理和方法 二、实验原理
色谱法是分离、提纯和鉴定有机化合物的重要方法，有着 极其广泛的用途。 色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的 吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它亲和作用性能 的差异，使混合物的溶液流经该物质时进行反复的吸附或 分配等作用，从而将各组分分开。流动的混合物溶液称为 流动相；固定的物质称为固定相（可以是固体或液体）。
反式极性低于顺式，在薄层中被硅胶吸附小，随 展开剂上升快，顺式极性大，被硅胶吸附大，随 展开剂上升慢。故展开一段时间后，顺反异构体 得以分开。
Rf (顺式) ＜Rf(反式)
三、操作步骤 1、薄板制备与活化 2、点样 先用铅笔在距薄层板一端1cm处轻轻划一横线作为起始线， 然后用毛细管吸取样品(偶氮苯)，在起始线上小心点样 （两样点相距1.5ｃｍ），斑点直径一般不超过2mm。 3、展开： 薄层色谱的展开，需要在密闭容器中进行。为使溶剂蒸 气迅速达到平衡，可在展开槽内衬一滤纸。常用的展开 槽有：长方形盒式和广口瓶式。
本实验选用环己烷—苯（体积比3:1）作展开剂，加入层 析缸中，液层高度约0.5cm。当展开剂展开至其前沿距 板顶5~10mm处时取出。 4、显色：在碘缸或紫外灯下显色，本实验试样有色，故可 直接观察。 5、分别计算反和顺偶氮苯的Rf值。
薄层色谱是在被洗涤干净的玻板（10×3cm左右）上均匀的 涂一层吸附剂（如硅胶），待干燥、活化后将样品溶液用
管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线
上，凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸 入深度为0.5cm。展开剂由下往上展开过程中，溶质在固 定相（硅胶）和流动相（展开剂）交换分配，溶质也随着 展开剂由下向上展开，溶质的极性大小决定了它被固定相 （硅胶）吸附的大小。极性越大，被吸附越大，上升就慢， 极性越小，随展开剂上升就越快，从而极性不同的化合物 得以分开。
级-薄层层析分析偶氮苯光异构化反应
化学与环境学院有机化学实验报告实验名称：薄层层析分析偶氮苯光异构化反应学生姓名：大芒果学号：专业：理科2班年级班级：2014级理2指导老师：曾志日期：2015年10月13实验报告书写要求1．实验报告应妥善保存，避免水浸、墨污、卷边，保持整洁、完好、无破损、不丢失。
不得缺页或挖补；如有缺、漏页，详细说明原因。
2．实验报告应用字规范，字迹工整，须用蓝色或黑色字迹的钢笔或签字笔书写，不得使用铅笔或其它易褪色的书写工具书写（实验装置图除外）。
3．实验现象必须做到及时、真实、准确、完整记录，防止漏记和随意捏造。
实验结果必须如实记录，严禁伪造数据。
4．实验前必须做好实验预习。
【实验目的】1、掌握薄层层析板活化的方法；2、掌握薄层层析的原理及操作。
【实验原理】（包括反应机理）（1）色谱法是分离、提纯和鉴定有机化合物的重要方法，有着广泛的用途。
薄层层析法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。
最典型的是在玻璃板上均匀铺上一薄层吸附剂，制成薄层板，用毛细管将样品溶液点在起点处，把此薄层板置于盛有溶剂的容器中，待溶液到达前沿后取出，晾干，显色，测定色斑的位置。
由于分离是在薄层板上进行，故称为薄层层析。
（2）薄层色谱是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附分配性质不同，或其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将组分分开。
（3）偶氮苯有两种结构形式，顺式与反式异构体，正常情况下反式异构体较为稳定。
但是在光照（UV）的情况下，反式偶氮苯可以获得足够的活化能从低能态的反式状态转化为高能态的顺式状态。
因而反式偶氮苯在光照条件作用下可以得到顺反混合物。
生成的混合物的组成与照射的波长、强度、时间有关。
若实验中使用紫外光（365nm）照射反应溶液，经照射后的溶液由90%以上的为顺式异构体。
本实验使用日光，则其产物中二者比例相近。
由于顺式偶氮苯的极性大于反式偶氮苯，故其可通过薄层色谱进行简单的分离鉴定。
薄层色谱-偶氮苯
薄层色谱-偶氮苯（一）实验目的：1、了解薄层层析分离有机化合物的原理及应用范围； 2、掌握薄层的制备、点样、展开、显色的操作； 3、了解紫外灯检出斑点及常用的薄层展开系统、显色剂；4、了解值Rf 值的意义及计算。
（二）实验内容：应用薄层层析分离顺反偶氮苯1、制备薄层2、配制展开剂3、检出斑点4、计算Rf 值(三)实验用仪器、设备：名称线路或示意图中符号规格实验室编号备注薄板载玻片2块硅胶G青岛海洋化工厂AR CMC0、5-1%浓度偶氮苯尺层析缸环己烷AR 苯AR(四)实验用详细线路图或其他示意图:点样薄层层析展开(五)实验有关原理及原始计算数据,所应用的公式:薄层层析是六十年代发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法。
它兼具了柱色谱和纸色谱的优点，既可用于少量样品（0、01微克）的分离，也可用于制备分离，应用极为广泛。
R f 值是衡量物质在薄层上分离及鉴定的一个数值，R f 值彼此相差较远，说明物质分离较好OBR f 值=原点至斑点中心的距离/原点至溶剂前沿的距离=AO/BO偶氮苯的光化异构体N NC 6H 5C 6H 5hv活化分子N NC 6H 5C 6H 5N NC 6H 5C 6H 5+反式偶氮苯最常见的形式是反式异构体，反式偶氮苯在光的照射下能吸收紫外光形成活化分子，活化分子失去能量会回到顺式或反式基态(六)实验数据记录: 1、薄层板的制备：称取2克硅胶于8毫升1%CMC 溶液中，调成糊状，用研钵的杵在薄板上涂布均匀，用手轻轻振动，使其成平整薄层，平铺在玻板上，空气下干燥。
2克硅胶可铺8块载玻片。
2、点样待薄层干燥后，进行点样，先在薄板底线1-1、5厘米处画一条线，将待分离样品溶于低沸点溶剂中，用毛细管点样，样品斑点要小，点样间距1-1、5 厘米。
1.薄层色谱用的吸附剂一般是氧化铝,硅胶,硅藻土,聚酰胺等,薄层板制作时,除吸附剂外,还添加一些另外物质. 硅胶H 即为纯硅胶硅胶G 硅胶+石膏,适合于板上作记号硅胶GF254 含石膏可在254纳米紫外灯下观察荧光的物质硅胶GF254+365 含石膏可在254,365纳米紫外灯下观察荧光的物质粘合剂石膏(2CaSO 4.H 2O)还可用淀粉，羟甲基纤维素钠（CMC）代替，加粘合剂的薄板叫硬板。
偶氮苯和苏丹iii的薄层色谱
偶氮苯和苏丹iii的薄层色谱偶氮苯和苏丹III是两种常见的有机化合物，它们在许多行业中都有广泛的应用。
在化学实验室中，常常需要对这两种化合物进行检测和分离。
薄层色谱是一种常用的分离技术，可以快速、准确地分离和检测化合物。
薄层色谱是一种基于分子在固定相和移动相间分配系数的色谱技术。
在薄层色谱实验中，使用的固定相是薄层色谱板，通常是由玻璃、铝箔或塑料制成，上面涂有一层吸附性较强的物质，如硅胶或硅酸盐。
移动相则是一种可以在固定相上移动的溶剂，常用的溶剂包括乙酸乙酯、甲醇和乙醇等。
在进行薄层色谱实验时，样品溶液被加在薄层色谱板的起点处，然后将色谱板放入移动相中，让移动相逐渐向上升。
根据分子在固定相和移动相间的分配系数，样品中的不同成分将会按照不同的速率上升，最终在色谱板上形成不同的斑点，通过比较斑点的位置和颜色可以确定化合物的成分和含量。
对偶氮苯和苏丹III进行薄层色谱分离和检测时，首先需要准备好薄层色谱板和移动相。
为了保证实验结果的准确性，需要严格控制实验条件，包括色谱板的制备和样品的制备，以及移动相的配制和实验环境的控制等。
实验中还需要使用一些化学试剂和仪器设备，如吸附剂、旋转薄层色谱仪和紫外-可见分光光度计等。
在进行偶氮苯和苏丹III的薄层色谱实验时，可以采用不同的固定相和移动相组合，以获得最佳的分离效果。
例如，可以使用硅胶作为固定相，乙酸乙酯和甲醇的混合溶液作为移动相。
在进行实验前，首先需要将薄层色谱板在烤箱中加热干燥，然后用样品溶液在色谱板上涂抹成均匀的斑点。
接下来将色谱板放入移动相中，让移动相逐渐向上升，在上升的过程中，化合物会按照其在固定相和移动相间的分配系数上升，并在色谱板上形成不同的斑点。
最后可以使用紫外-可见分光光度计对色谱板进行扫描，根据斑点的位置和颜色可以确定偶氮苯和苏丹III的含量和纯度。
总的来说，薄层色谱是一种简单、快速、准确的分离和检测技术，可以在实验室中对偶氮苯和苏丹III等化合物进行分离和检测。
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（一）实验目的： 1、了解薄层层析分离有机化合物的原理及应用范围； 2、掌握薄层的制备、点样、展开、显色的操作； 3、了解紫外灯检出斑点及常用的薄层展开系统、显色剂；
4、了解值Rf 值的意义及计算。
（二）实验内容： 应用薄层层析分离顺反偶氮苯
1、制备薄层
2、配制展开剂
3、检出斑点
4、计算Rf 值
(三)实验用仪器、设备： 名称 线路或示意图中符号 规 格 实验室编号 备注 薄板
载玻片
2块 硅胶G
青岛海洋化工厂AR CMC
0、5-1%浓度 偶氮苯
尺
层析缸
环己烷
AR 苯
AR
(四)实验用详细线路图或其他示意图:
点样 薄层层析展开
(五)实验有关原理及原始计算数据,所应用的公式:
薄层层析是六十年代发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法。
它兼具了柱色谱和纸色谱的优点，既可用于少量样品（0、01微克）的分离，也可用于 制备分离，应用极为广泛。
R f 值是衡量物质在薄层上分离及鉴定的一个数值，R f 值彼此相差较远，
说明物质分离较好
O
B
R f 值=原点至斑点中心的距离/原点至溶剂前沿的距离
=AO/BO
偶氮苯的光化异构体
N N
C 6H 5
C 6H 5
hv
活化分子
N N
C 6H 5C 6H 5
N N
C 6H 5
C 6H 5
+
反式
偶氮苯最常见的形式是反式异构体，反式偶氮苯在光的照射下能吸收紫外光形成活化分子，活化分子失去能量会回到顺式或反式基态
(六)实验数据记录: 1、薄层板的制备：
称取2克硅胶于8毫升1%CMC 溶液中，调成糊状，用研钵的杵在薄板上
涂布均匀，用手轻轻振动，使其成平整薄层，平铺在玻板上，空气下干燥。
2克硅胶可铺8块载玻片。
2、点样
待薄层干燥后，进行点样，先在薄板底线1-1、5厘米处画一条线，将待 分离样品溶于低沸点溶剂中，用毛细管点样，样品斑点要小，点样间距1-1、5 厘米。
1.薄层色谱用的吸附剂一般是氧化铝,硅胶,硅藻土,聚酰胺等,薄层板制作时,除吸附剂外,还添加一些另外物质. 硅胶H 即为纯硅胶 硅胶G 硅胶+石膏,适合于板上作记号 硅胶GF254 含石膏可在254纳米紫外灯下观察荧光的物质 硅胶GF254+365 含石膏可在254,365纳米紫外灯下观察荧光的物质 粘合剂石膏(2CaSO 4.H 2O)还可用淀粉，羟甲基纤维素钠（CMC）代替，加 粘合剂的薄板叫硬板。
2、具有较大极性的化合物在薄层板上呈现较强吸附力，
它们的Rf 值较小， 因此利用化合物极性不同，在不同展开剂上显示不同Rf 值，可以达到分离。
3、薄层板制作方法分干法，湿法两种。
3、展开：
配制的展开剂置于密闭层析缸中，展开剂用量约在缸底部1厘米高，将薄板轻轻放入，用上行法展开。
4、显色：
待展开剂距上沿约1厘米处，取出薄板，溶剂挥发，紫外灯下看萤光，或 用显色剂显色。
5、计算Rf 值
（六） 注意事项
(八)对实验结果实验中某些现象的分析讨论：
1、薄板涂布不匀，有气泡，致使分离不佳，在硅胶与CMC混合时要研磨，清除气泡。
2、光照后的顺式斑点不明显，有时Rf值计算有误，可以在紫外灯下再观察。
3、如是分离别的化合物，应该加显色剂。
4、点样时斑点尽可能小，以免在展开时造成扩散，分离不佳。
通过本试验，要求学生掌握不同色谱技术的特点，原理及其应用。
一般讲：
1、薄层色谱应用简单，普及，应该牢固掌握，作为今后化学研究中不可 缺少的工具，并应用该技术来探索柱色谱分离的最佳条件。
2、柱色谱用于纯品制备，特别是较大量混合物的分离，结构鉴定，离不开柱色谱的应用。
3、气相色谱用于定量、定性分析，但对于加热易分解，不挥发性物质不 适用。
(九)实验方法指示及注意事项:
1、光异构化：0、1克反偶氮苯溶于5毫升无水苯中，将此溶液分为二个试管，置一试管在太阳光下照射一小时，另一试管用黑纸包好，照射要完全，使 分离现象明显。
2、薄板制成后可以在105-1100C的烘箱中活化1-2小时，然后置干燥器中备用，不活化之薄板分离效果也可。
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