过敏原检测方法

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WAO White Book on Allergy2011-2012: Executive Summary
Diagnosis begins with a detailed medical history and physical examination.
The identification of a temporal association between symptoms and allergen exposure constitutes the basis for further testing
皮肤实验结果解释
• 如果病史提示敏感性 还有皮肤实验结果阳性 然后与抗原相关的可能性极强 • 如果病史不提示敏感性 皮肤实验结果阳性 • 病史提示敏感性 、抑郁药 • ： • • • • 帕特深 变态反应性疾病 人民卫生出版社 2004 在高强度的自然暴露中观察患者
皮肤实验结果阴性
1 回顾患者用药情况，抗组胺
• 舌下试验（sublingual test ） G.Pfeiffer 数十年一直用此法进行 诊断 • 食物激发试验（food provocation test ） ，亦称为白细胞减少指数 试验
其他检查
• 影像学诊断：包括胸部透视和摄片 、支气管造影、鼻窦X线摄影、胃 肠造影、B超、CT、核磁共振等。 • 治疗性诊断：某些病例经各种检查 仍无法确认时，可使用对变态反应 有良效的药物（如肾上腺素、2 受体兴奋剂、抗组织胺类药物及肾 上腺皮质激素类药物等），进行试 探性治疗。
• Clinical suspicion is confirmed by means of investigation of IgE antibodies in vivo (skin tests) or in vitro. • Skin tests should include relevant llergens and the use of standardized allergen extracts. • In vitro testing is especially useful when skin test results do not correlate with the history or cannot be performed.
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过敏性疾病研究的历史
• 20世纪人们用动物抗血清治疗烈性传染病时发现 “血清 病” • 1906年奥地利医生Clemens von Pirquet发表“Allersie‖( 变态反应)一文，开拓了变态反应临床和实验研究新领域 • 1963年Gell及Coombs根据变态反应病的机理和特点， 将其分为四型 • 1966年石坂夫妇发现了速发型变态反应中的IgE抗体 • 1967年Johansson从骨髓瘤病人中分离到纯化的IgE并进 行了其分子结构的研究
过敏性疾病与临床检测
河南省人民医院呼吸科 王思勤
2012年9月7日
临床常见过敏性疾病有过敏性鼻炎、哮 喘、荨麻疹、湿疹、食物过敏及过敏性休 克等。 近年来，过敏性疾病的发病率呈上升趋 势，国内医学界对这种疾病日益重视，其 实验室诊断也得到充分发展。
2016/11/18
Name of presentation
过敏性疾病的触发因素 ----过敏原（变应原）
过敏性疾病常见的过敏原包括：
• 药物（如引起过敏性休克的青霉素类、多粘菌 素、吗啡、某些造影剂或阿斯匹林） • 粉尘螨、真菌（如曲霉属和青霉属的霉菌、以 及交链孢霉和枝孢霉等） • 花粉（包括蒿属、豚草、树、牧草和杂草的花 粉）、其他吸入过敏原（如引起哮喘的蚕丝、 皮毛、羽毛、屋尘） • 食物（如引起食物过敏的牛奶、鸡蛋、花生、 豆类、坚果、鱼、虾、肉类、贝类和谷物） • 化工材料（如造成接触性皮炎的油漆、甲醛、 乳胶、香料和染料等）

灵敏度
91%
特异度
准确率
93%
92%
Reference: Eriksson NE. Allergy 1990;45:285-292 Crobach M.J. et al. Allergy 1994;49:170-176
Fx5食物过敏原过筛试验
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包括6种最常见的食物变应原 —— 鸡蛋白、牛奶、小麦、花生、大豆、鱼 检测结果直接、客观 高灵敏度：89％ 高特异度：96％
Eugene G Weinberg, MB ChB. The allergic march. CME 2010; 28(2).
明确过敏原，阻止过敏进程
•儿童早期，明确过敏原，进而 规避过敏原，可阻止过敏进程， 改善患儿生活质量
Eugene G Weinberg, MB ChB. The allergic march. CME 2010; 28(2).
如何过筛过敏性疾病
推荐的检测组合 TPF： T-IgE + Phadiatop + Fx5
过敏原检测流程
临床病史
T-IgE+Phadiatop+fx5
Phadiatop阳性
螨、宠物、真菌系列
三个花粉系列IgE检测
过敏原检测流程
临床病史
T-IgE+Phadiatop+fx5
fx5阳性
分别测定单价特异性IgE
食谱分析
ImmunoCAPTM系统 ——体外过敏原诊断金标准
• 检测结果真实、可靠，重复性好；为临 床提供客观的实验室指标 • 灵敏度高，特异性好；减少漏诊、误诊 • 全自动化，减少实验工作量，提高检测 效率 • 检测结果全定量，指导临床脱敏治疗和 儿童早期诊断 • 完善的检测项目，600多种过敏原和80 多种组分过敏原，充分满足临床和科研 需要
检测原理： 荧光酶联免疫分析 法 FEIA 荧光酶底物比显色底 物的灵敏度高10-
• ImmunoCAP固相载体抗原吸附能 力是纸片法的3倍；是试管法的 150倍。
ImmunoCAPTM全面的检测项目
总IgE 特异性IgE

过筛试验 单价S-IgE检测 多价S-IgE检测 组分过敏原诊断
2回顾其他引起假阴性实验原因如 劣质的实验材料和技术不恰当 3在高强度自然暴露中观察患者 4 进行激发试验（很少做）
sIgE 体外检测和皮试的比较
– 不受患者皮肤条件的影响
– 不受患者药物治疗的影响
– 不受操作者技术的影响
– 符合WHO标准
ImmunoCAP 全自动 、体外过敏原特异性 IgE检测、全定量血液测定
定量结果分级标准及临床意义：
0级 1级 2级 3级 4级 5级 6级 < 0.35 ≥0.35 ≥ 0.7 ≥ 3.5 ≥ 17.5 ≥ 50 > 100 未检出变应原，无过敏 可疑或轻度过敏 中度过敏 重度过敏 特重度过敏 特重度过敏 特别严重之过敏
全定量检测特异性IgE——ImmunoCAP
L. Soderstrom, G. Lilja, M. P. Borres, and C. Nilsson。Allergy 2011; 66: 1058–1064.
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特异性IgE（Specific IgE, SIgE）
如果对某种过敏原过敏，血清中便存在 针对该过敏原的S-IgE 。

单价S-IgE检户尘螨 d2 粉尘螨 i6 蟑 螂 f1 鸡蛋白 f2 牛 奶
常见的多价S-IgE
mx1（m1,m2,m3,m6） mx2 （m1,m2,m3,m5,m6,m8） hx2 （h2,d1,d2,i6）
Diagnosis and Identification of Causative Allergens
• Confirmation of allergy and identification of causative allergens are crucial to correctly manage allergic diseases • Precise diagnosis allows the implementation of therapies oriented to the etiologic factors of allergic diseases, such as environmental measures and immunotherapy
的过敏症状，此现象被称为“过敏进程”
过敏进程
•过敏性疾病的临床症状以一个典型的顺序 出现在儿童期，并持续数年的自然进程
Eugene G Weinberg, MB ChB. The allergic march. CME 2010; 28(2).
Progression of the allergic march
t11（梧桐）
d1（屋尘螨） d2（粉尘螨） m6（交链孢霉）
e1（猫毛皮屑）
f1（蛋白） f2（牛奶） h1
昆虫/毒液：i6（蟑螂） 药物：
c1（青霉素G） 职业性过敏原等：k82（乳胶）
特异性IgE（sIgE）结果判断
• 检测范围：0.35 － 100 kUA/l • 高灵敏度：89% 高特异性：91%
嗜酸性粒细胞阳离子蛋白 ECP（评估气道炎症状态） IgG & IgG4（评价特异性免疫治疗的反应） 类胰蛋白酶（严重过敏反应的标记物） 自身免疫性疾病诊断
总IgE（Total IgE )
测定患者血清中总IgE抗体的含量
• IgE是介导 I 型变态反应的抗体，血清IgE水平升高提示机体可 能患有变态反应性疾病。但是，总IgE不一定是过敏， 过敏者 总IgE也不一定高，过敏与否主要取决于sIgE的存在。 影响总IgE的因素 – 遗传、年龄、性别、种族 – 吸烟、寄生虫感染
过敏性疾病的临床诊断
• 临床症状、病史 • 体检及临床试验
• 实验室检查
过敏体质是导致变态反应的内因 • 父母双方均有变态反应病者，或父母一 方有变态反应者，子代患变态反应的机 率较高 • 父母双方均无变态反应病者，子代的发
病机率少，一旦发病，临床表现较轻，
持续时间较短
过敏进程
•食物过敏和特应性皮炎在出生早期发病率较 高，而呼吸道过敏性疾病在儿童期发病率较 高。伴随着儿童年龄增长，过敏性疾病的表 现会发生阶段性变化，各系统次序出现不同
特应性变应原及可能诱因的回避 是治疗的基本原则
如何明确过敏性疾病的过敏原？
过敏性疾病的诊断
•详细的病史
•体检及临床试验
询问病史
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家族过敏史 既往过敏史
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既往发生过敏时的临床表现
季节和室内/外变化
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疑似过敏原种类、接触频率、接触量、接触时间
生活环境、工作环境、精神压力的影响
其它因素
体内试验
通常过敏性疾病是
由IgE介导的I 型变态反应所涉及的疾病
也有例外，比如一些药物（如多粘 菌素、吗啡、某些造影剂或阿斯匹 林）引起的过敏性休克。
IgE
• Ⅰ型变态反应的特点是反应迅速 、强烈、消退亦快，通常不遗留组 织损伤，也称为速发型超敏反应 • 有明显的个体差异及时令性。 • 好发于呼吸、消化、皮肤等系统 。特征性病理变化以水肿，分泌物 增多，平滑肌痉挛，嗜酸细胞增多 为主
• 特异性IgE测定有时也称为“过敏 原测定” • 特异性IgE的检测主要是酶免疫分 析
• 根据标记酶指示底物的不同分为： 荧光酶免疫分析（如ImmunoCAP
体内试验和体外试验的比较
皮肤试验 原理和意义 根据皮肤风团反应推测 技术因素的影响 较大 结果判定 有主观因素 药物影响 假阴性 皮肤划痕征 假阳性 安全性 相对安全 敏感性 高 特异性 高 设备要求 简单、易普及 价格 低 操作者的选择 技术熟练经验丰富的护士 sIgE 检测 对过敏原 sIgE 的直接检测 较小 客观指标 无 无 绝对安全 高 较皮肤试验高 需要一定的设备和条件 高 具有一定专业知识的实验人员
过筛试验
吸入性过敏原过筛试验 （Phadiatop） 食物过敏原过筛试验（Fx5） 儿童吸入性过敏原过筛试验 （Phadiatop Infant）
超过600种的过敏原和80种以上 的组分过敏原
草类花粉：
w6（艾蒿） w22（葎草）
树木花粉：
螨类： 微生物： 动物皮毛： 食物： 屋尘：
• 贴斑试验（patch test ） • 点刺试验（prick test ）或挑刺试验 （puncture test ） • 皮内试验（intradermal test 或 intracutaneous test ） • 眼结膜试验（conjunctiva test） • 鼻粘膜激发试验（nasal mucosa provocation test）或抗原鼻内滴入 试验（灌输测试）
过筛试验
• 吸入性过敏原过筛试验 （Phadiatop） • 食物过敏原过筛试验（Fx5） • 儿童吸入性过敏原过筛试验 （Phadiatop Infant）
Phadiatop®吸入性过敏原过筛试验
• 含有95%常见吸入性过敏原
• 筛查是否吸入性变应原过敏 • 临床准确率 > 90% 21项研究，超过2700个病例