糖酵解的水平与大量生理过程和病理生理过程相关联

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细胞糖酵解水平检测新技术推广

糖酵解是葡萄糖在无氧条件下分解为乳酸的过程,全程在细胞质中进行。糖酵解和线粒体有氧呼吸是细胞中两种主要的产能途径。大部分细胞都能在这两种途径中动态切换,以适应不同的代谢环境。例如机体在缺氧情况下会通过加强糖酵解满足能量需求,而大部分肿瘤细胞即使在有氧条件下仍以糖酵解为主要供能方式。可以说,糖酵解的水平与大量生理过程和病理生理过程相关联。

江苏省医药动物实验基地新增XF糖酵解压力测试盒,通过配合XF分析仪检测,可以快速测量评估细胞糖酵解水平的三个重要参数:糖酵解、糖酵解能力和糖酵解储备,从而对细胞的代谢进行评估。检测原理和系统流程如下;同""细胞有氧呼吸检测”一样,XF糖酵解压力测试也需要进行预实验,测定合适的细胞细胞密度与对应的抑制剂剂量。详情可咨询86862102,王蕴博士。

江苏省医药动物实验基地

2013.5.28

初始阶段,细胞在不含葡萄糖的糖酵解检测培养液中培养,记录ECAR值。

首先注入葡萄糖(10mM),细胞开始摄取葡萄糖,通过糖酵解途径分解为乳酸,产生ATP和质子。质子排出到培养液使其酸化,ECAR快速增加。此葡萄糖诱导的反应记录为基础条件下的糖酵解。

随后注入ATP合酶抑制剂寡霉素。寡霉素抑制线粒体ATP的产生,使产能途径完全切换为糖酵解,导致的ECAR增加揭示了细胞的糖酵解能力。

最后注入2-DG(一种葡萄糖类似物),通过和糖酵解途径的第一个酶葡萄糖己糖激酶竞争性结合抑制糖酵解,导致ECAR下降。也同时证实实验中ECAR的产生是来自于糖酵解。糖酵解能力和糖酵

解的差值定义为糖酵解储备。

在注入葡萄糖之前的ECAR被认为是来自于非糖酵解酸化,包括CO2(来自于TCA循环和其他生化途径)的产生伴随其水化为碳酸和碳酸氢根,同时释放出质子。

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