液相串联质谱检测方法前处理总结.doc.deflate

首先，作为质检员，不但要掌握专业的检测知识，还需要认真仔细，才能发现问题，找出问题，解决问题。所以这三个月培训使我受益匪浅。在检验之前，要学会读懂相关的检验标准，并能融会贯通到实际当中去，并且要做好操作，及时的发现及纠正检验过程中存在的问题。

其次，经过实习，我认为这有助于提高自己的综合素质，全面发展了自己。古语说得好：流水不腐，户枢不蠹。我在大学期间一直学习食品质量安全与检测专业及相关知识。实习这段时间，我又对各种检测项目等基础知识有了一个清晰的认识。也是对自己专业知识的重新认识和深化，这也是干好这项工作的业务基础。

再次，我认为自己培养了该职务所必须的素养和品质。质检工作要求质检员的敬业精神比较强，工作认真负责，勤勤恳恳，任劳任怨，干一行，爱一行，专一行。尤其是严明的组织纪律性、吃苦耐劳的优良品质、雷厉风行的工作作风，这是干好一切工作的基础。同时思想上也要求比较活跃，接受新事物比较快，爱学习、爱思考、爱出点子，工作中注意发挥主观能动性，超前意识强，这有利于开拓工作新局面。其他的如办事稳妥，处世严谨，在廉洁自律信奉诚实、正派的做人宗旨，能够与人团结共事，而且具有良好的协调能力上更应该严格的要求自己，这是做好一切工作的保证，也是新人能够更快地进入质检员角色，开展工作的前提和保障。实习期间这些方面的要求都有所提高，可谓受益匪浅。

前处理总结

第一部分瘦肉精的检测

一尿样

1试剂：乙腈（色谱纯）、乙腈水（10+90）（所用水为超纯水）

2器材：50ml离心管、移液枪（200ul、1ml、10ml）、冷冻离心机、超声波清洗器、旋转蒸发仪、迷你震荡器、25ml蒸馏瓶、1ml针管、0.22um有机滤膜。

3实验步骤：

吸2ml尿样于2ml离心管中备用→从尿样中吸取500ul于50ml离心管中→加10ml乙腈→涡旋→离心（6000r/min、5min）→上清液转移入25ml蒸馏瓶中40℃水浴减压蒸干→加2ml乙腈水（10+90）定容后超声溶解→1ml针管吸取0.6-0.7ml 用0.22um有机滤膜过滤→上机。

4理解要点：

1）:样品稀释倍数为4

2）:加入乙腈提取之前需要加入标100ul（10ng/ml）,目的是看回收率。

二瘦肉精国标法

1 试剂：0.03mol/L盐酸溶液、甲醇、甲醇氨水（95+5）、氨水乙酸乙酯（3+97）、乙腈水（10+90）、0.2mol/L乙酸钠溶液（称取16.4g溶于1L水中，用冰醋酸调节PH值至5.20）、β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酸酯酶、同位素标、标准品。

2 器材：电子天平、50ml离心管、10ml离心管、移液枪（200ul、1ml、10ml）、冷冻离心机、超声波清洗器、旋转蒸发仪、迷你震荡器（平行振荡器）、25ml蒸馏瓶、MCX固相萃取柱、固相萃取装置、1ml针管、0.22um有机滤膜。

3 实验步骤:

1）称取样品2.00g(±0.02g) →加标100ul（10ng/ml）→加10ml乙酸钠→加200ul β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酸酯酶→涡旋→超声15min→37℃恒温孵育16小时→离心（6000r/min、5min）→上清液倒入离心管A中→下层残渣再加入10ml 乙酸钠重复涡旋、超声、离心步骤，上清液合并入离心管A中→过滤上清液于另一离心管中→吸取10ml滤液过MCX固相萃取柱

2）过柱子顺序：加甲醇1管→加蒸馏水1管→加0.03mol/L盐酸溶液1管→加10ml样夜→加蒸馏水1管→加甲醇1管→减压抽干→加5ml甲醇氨水（95+5）和5ml氨水乙酸乙酯（3+97）→减压收集于10ml离心管→转移入25ml蒸馏瓶中40℃水浴减压蒸干→加1ml乙腈水（10+90）定容后超声溶解→1ml针管吸取0.6-0.7ml用0.22um有机滤膜过滤→上机。

3）要点与理解；

①每个加入标100ul（10ng/ml）的目的是看回收率，选取样品加标品100ul （10ng/ml）也是看回收率。

②加酶是为了更好地提取莱克多巴胺。

③乙酸钠调PH值至5.20时，提取效果最好，用冰乙酸调PH值，可避免引入其他杂质离子。用10ml样液过柱子，1ml乙腈水定容为了和质量相约分，直接出结果，减少换算麻烦。

④过柱子是用0.03mol/L盐酸溶液是提供一个酸性环境，使其更好地吸附克伦特罗。

⑤先加甲醇是为了活化萃取柱，最后再加甲醇是洗脱杂质。甲醇氨水（95+5）和氨水乙酸乙酯（3+97）的作用是洗脱有效成分。

三瘦肉精反向萃取法（对于骨汤、肉馅等含油比较高的样品）

1试剂：10%碳酸钠溶液（m/v）、乙酸乙酯，2%甲酸乙腈水、2%甲酸乙腈水饱和正己烷。

2器材：电子天平、50ml离心管、移液枪（200ul、1ml、10ml）、冷冻离心机、超声波清洗器、旋转蒸发仪、迷你震荡器（平行振荡器）、50ml蒸馏瓶、1ml针管、0.22um有机滤膜。

3实验步骤：称取样品2.00g(±0.02g) →加标100ul（10ng/ml）→加2ml10%碳酸钠溶液→涡旋→加8ml乙酸乙酯涡旋震荡2min→超声提取10min→离心（6000r/min、5min）→吸取上清液于50ml蒸馏瓶中→下层残渣再加入6ml乙酸乙酯提取一次，合并上清液于50ml蒸馏瓶中→40℃水浴减压蒸干→加2%甲酸乙腈水饱和正己烷（肉馅加5ml,骨汤、香精加10ml）,和2ml 2%的甲酸乙腈水→超声溶解→转移入50ml离心管中→离心（6000r/min、5min）→1ml针管吸取下层溶液约1ml用0.22um有机滤膜过滤→上机。

4 要点与理解：

1）加碳酸钠溶液是提供一个碱性环境，便于乙酸乙酯提取。每个加入标100ul （10ng/ml）的目的是看回收率，选取样品加标品100ul（10ng/ml）也是看回收率。

2）用饱和正己烷，是为了除去油性杂质。用2%甲酸乙腈水去饱和正己烷是为了和定容试剂保持一致，避免引入其他杂质离子。定容试剂中加入2%甲酸是为了提供一个酸性环境，便于提取克伦特罗，同时和上机流动相保持一致。

3）对于复检样品，超声提取时间可以适当延长。

4）此方法还可以把两次提取液合并于离心管中，分两次加5ml盐酸溶液