牛血清蛋白简介
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
基本信息
【词条中文名称】牛血清白蛋白【词条拼音名称】Níuxuèqīng báidànbái
牛血清白蛋白
【词条英文名称】Bovine albumin 【词条英文别名】Bovine serum albumin 【词条分类性质】名词词组,偏正词组【词条适用范围】医学领域,药学领域【CAS 数字登录号】9048-46-8
BSA简介
BSA结构
CAS号:9048-46-8
英文名称:Bovine albumin
英文同义词:nhsa;BSA-C;AC-BSA;ALBUMIN, PIG;albumenpowder;SERUM ALBUMIN;ACETYLATED BSA;BSA ACETYLATED;Bovine albumin;BSA, METHYLATED
中文名称:牛血清白蛋白
中文同义词:蛋白粉;牛白蛋白;卵蛋白粉;血清蛋白;血清白蛋白;牛血蛋白质;复合氨基酸;牛血清蛋白;牛血清白蛋白;血清白蛋白(牛)
CBNumber: CB5107573
分子式:N/A
英文别名:Bovine serun albumin
化学性质
储存条件: 2-8°C
溶解度: PBS: >40 mg/mL
form : lyophilized powder
Merck : 13,8542
稳定性:Stable. Incompatible with strong oxidizing agents and strong acids. Refrigerate.
EPA化学物质信息:Albumins, blood serum(9048-46-8)
用途
1、用于生化研究、遗传工程和医药研究
2、用作医药保健食品、调味品
3、维持渗透压、pH缓冲、载体作用
生产方法
以牛血为原料分离出血清,用硫酸铵分级沉淀后,经辛酸处理精制而得。
贮存方法
每10g加100ml水进行溶解,或用PBS溶解也可,视用途而决定。
然后分装成小支。
若不使用防腐剂可贮存在零下20或30摄氏度的恒温柜中,若使用防腐剂(如0.1%叠氮化钠)则可贮存在零上4摄氏度的环境下。
一般可存放数月不变质。
防腐剂可能对牛血清白蛋白的效果造成影响,应慎用。
结构与作用
成分结构
牛血清中的简单蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。
等电点4.8。
含氮量16%,含糖量0.08%。
仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。
白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。
白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。
血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。
在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。
牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种球蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430 kDa,等电点为4.7。
牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot中作为Blocking agent。
它是牛血清中的简单蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。
等电点4.8。
含氮量产品16%,含糖量0.08%。
仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。
白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。
白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。
血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。
在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。
BSA的作用
BSA一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。
加入BSA后,它可能起到“保护”或“载体”作用,不少酶类添加BSA后能使其活性大幅度提高。
不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。
对
多数底物DNA而言,BSA可以使酶切更完全,并可实现重复切割。
在37℃,酶切反应超过1h时,BSA可以使酶更加稳定,因为在不含BSA的反应缓冲液中,许多限制性内切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。
而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。
BSA在内切酶的缓冲液的作用
1.BSA是酶的稳定剂,防止酶的分解和非特异性吸附;
2.BSA能减轻有些酶的变性,能减轻有些不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性的至于作用机理我不是很清楚,可能是因为它结构中有17个二硫键,和一个巯基,巯基的化学反应很活泼,二硫键有抗氧化还原的作用,因此可与多种阳离子,阴离子和小分子结合;
3.BSA能防止酶吸附到管壁而损失。
图表
成分与结构
牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种球蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为
电场対超感牛血清白蛋白截留率的影响
66.430 kDa,等电点为4.8。
牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot中作为Blocking agent。
它是牛血清中的简单蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。
等电点4.8。
含氮量16%,含糖量0.08%。
仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。
白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。
白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。
血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。
在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。
牛血清白蛋白就是我们常说的BSA.
牛血清蛋白的说明
牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别,它不是一定的,而是多聚物的,有的地方测试
牛血清白蛋白分子式
数据为70 000,这一数据是在做PCR的时候使用的数据。
牛血清白蛋白是血液中的主要成分(38g/100ml),分子量68kD,等电点4.8,含氮量16%,含糖量0.08%,仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。
白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。
白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。
血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。
在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。
牛血清蛋白溶液可以作为测量蛋白质含量的标准曲线用。
一般买回来的牛血清蛋白是细小片状的乳白色粉末。
牛的血清蛋白也以铁为基本原料。
牛血清蛋白(BSA)的作用
BSA一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。
加入BSA后,它可能起到“保护”或“载体”作用,不少酶类添加BSA后能使其活性大幅度提高。
不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。
对多数底物DNA而言,BSA可以使酶切更完全,并可实现重复切割。
在37℃,酶切反应超过1h时,BSA可以使酶更加稳定,因为在不含BSA的反应缓冲液中,许多限制性内切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。
而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。
牛血清蛋白的用途
1、特纯级牛血清蛋白用途:用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂,生化试验等。
性状:淡黄色干燥粉末
2、无脂肪酸牛血清蛋白用途:用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂,尤其适用于容易受脂肪酸影响的产品和试验。
性状:淡黄色干燥粉末
3、无蛋白酶牛血清蛋白用途:用于酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂,尤其适合血液脂类的诊断试验、脂类诊断试剂及对纯度要求高的产品。
性状:淡黄色干燥粉末
4、细胞培养级牛血清蛋白用途:无血清培养基的蛋白添加剂,供细胞培养使用。
性状:淡黄色干燥粉末白蛋白
牛血清蛋白的测定
一、标准曲线
[1]一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。
因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。
二、蛋白质含量测定方法
1. 凯氏定氮法
2. 双缩脲法
3. Folin-酚试剂法
4. 紫外吸收法
5. 考马斯亮蓝法
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作
一、试剂
1. 考马斯亮蓝试剂:考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,雍蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。
最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G—250,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。
2. 标准蛋白质溶液:纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。
二、器材
1. 722S型分光光度计使用及原理。
2. 移液管使用。
三、标准曲线制作步骤
试管编号0 1 2 3 4 5 6 100ug/ml标准蛋白(ml)0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.15mol/L NaCl (ml)1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 考马斯亮蓝试剂(ml)5 5 5 5 5 5 5 摇匀,1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色3、以A595nm为纵坐标,标准蛋白含量为横坐标(六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug),在坐标轴上绘制标准曲线。
(1)、利用标准曲线查出回归方程。
(2)、用公式计算回归方程。
(3)、或用origin作图,测出回归线性方程。
即A595nm=a×X( )+6 一般相关系数应过0.999以上,至少2个9以上。
(4)、绘图时近两使点在一条直线上,在直线上的点应该在直线两侧。
四、蛋白质含量的测定
样品即所测蛋白质含量样品(含量应处理在所测范围内),依照操作步骤1操作,测出样品的A595nm,然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。
一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间,所以上述样品如果A595nm值太大,可以稀释后再测A595nm 值,然后再计算。
五、注意事项
1. 玻璃仪器要洗涤干净。
2. 取量要准确。
3. 玻璃仪器要干燥,避免温度变化。
4. 对照:用被测物质以外的物质作空白对照。