牛的牛血清白蛋白残留检测酶联免疫分析(ELISA)

合集下载

ELISA法检测疫苗中残余牛血清蛋白含量的方法学验证

ELISA法检测疫苗中残余牛血清蛋白含量的方法学验证董小曼;田博;杨冰;潘殊男;栗妍;沈淑琴;王晋【期刊名称】《现代仪器与医疗》【年(卷),期】2006(012)006【摘要】为验证ELISA法检测病毒性疫苗中残余牛血清蛋白方法的可靠性,由2个部门对12个样品进行4人连续3天的验证.结果表明:4人连续3天的12次检测结果均满足牛血清白蛋白ELISA法(BSP-ELISA法)标准曲线成立的条件,建立合格标准曲线的成功率为100%;对5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL浓度的牛血清白蛋白(BSP)标准品,不同实验人员间测定结果的变异系数在2.87%～6.33%之间,精密度较好;回收率在92.9%～103.1%之间,说明不同人的测定结果准确度高.分别采用该方法与已上市的牛血清白蛋白试剂盒对7种疫苗中100个样品的残余BSP含量进行检测,二者的检测结果合格符合率为100%,用该方法对已上市的检测BSA试剂盒中的4个标准品进行检测,回收率在90.0%～117.1%,检测灵敏度为2.5ng/mL,表明BSP-ELISA法可以敏感、准确地定量检测BSA,可用于目前我公司疫苗制品中残余牛血清白蛋白的质量控制.【总页数】5页(P21-25)【作者】董小曼;田博;杨冰;潘殊男;栗妍;沈淑琴;王晋【作者单位】北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.ELISA法检测干细胞溶液中残留牛血清白蛋白含量 [J], 宛莹;聂德志;贲亮;黄若洋2.ELISA法检测组织工程产品中残留牛血清蛋白含量 [J], 方玉;冯晓明;奚廷斐;杜晓丹;陈震3.三种检测猪瘟疫苗中牛血清蛋白含量的ELISA试剂盒的性能对比 [J], 曹玉美;方茜;陆江;孙如水;孙龙4.应用ELISA竞争法检测疫苗制品中残余的牛血清白蛋白 [J], 李长贵;周铁群;王剑锋;邱平5.检测疫苗残余牛血清ELISA试剂的质量控制 [J], 潘殊男;刘保奎因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

品检中的兽药残留检验方法

品检中的兽药残留检验方法兽药残留是指兽药在兽体内或畜禽产品中残留的化学物质。

合理使用兽药可以预防和治疗动物疾病，提高畜禽养殖效益。

然而，如果兽药残留超过安全标准，可能对消费者健康造成潜在风险。

因此，兽药残留的检验方法在品检中显得尤为重要。

兽药残留检验方法是确定畜产品中兽药残留水平的关键步骤。

本文将介绍一些常用的兽药残留检验方法，并讨论其原理和应用。

高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS）是目前应用广泛的兽药残留检验方法之一。

该方法基于高效液相色谱（HPLC）和质谱联用仪（MS），通过对样品进行分离和定性分析，可以快速、准确地检测多种兽药残留物。

HPLC-MS方法具有高选择性、高灵敏度和高分辨率的特点，适用于不同类型的兽药残留物检测。

酶联免疫吸附测定法（ELISA）是一种基于免疫学原理的兽药残留检测方法。

该方法利用特异性抗体与兽药残留物结合，形成特异性抗原-抗体复合物，并通过酶作用产生颜色反应，从而定量检测兽药残留物的含量。

ELISA方法具有简单、快速、便捷的特点，适用于大规模的兽药残留检测。

气相色谱-质谱联用法（GC-MS）也是常用的兽药残留检验方法之一。

该方法利用气相色谱和质谱联用仪对样品进行分离和定性分析，可以检测挥发性兽药残留物和半挥发性兽药残留物。

GC-MS方法具有高分辨率、高灵敏度和高准确性的特点，适用于多种兽药残留物的分析。

快速液相色谱法（UPLC）也是兽药残留分析中常用的检测方法之一。

与传统的液相色谱相比，UPLC具有更高的分离效率、更短的分析时间和更低的溶剂消耗量。

因此，UPLC是一种高效、准确和经济的兽药残留检验方法。

综上所述，兽药残留检验方法在品检中起着重要的作用。

通过合理选择和应用适当的检验方法，可以快速、准确地检测畜产品中的兽药残留物。

这有助于确保畜产品的质量安全，保护消费者的健康。

未来，随着科技的进步，兽药残留检验方法还会不断发展和完善，以应对不断变化的兽药种类和畜产品需求。

ELISA法检测疫苗中牛血清残留量的适用性研究

收稿日期:2006-01-23;修回日期:2006-04-06作者简介:潘殊男(1974-),男,硕士,助理研究员,主要从事检测方法研究。

E L I S A 法检测疫苗中牛血清残留量的适用性研究潘殊男,杨冰,刘保奎,董小曼(北京天坛生物制品股份有限公司,北京100024)摘　要:为了验证E L I S A 法对病毒性疫苗中残余牛血清蛋白检测的适用性,用牛血清蛋白E L I S A 测定法与牛血清白蛋白E L I S A 测定法、牛血清I g G -E L I S A 测定法对麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液、洗涤后病毒收获液以及多种成品疫苗中的残余牛血清蛋白含量进行了测定。

结果显示,麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液中牛血清白蛋白含量依次为I g G 含量的70.5倍、65倍、84.3倍,洗涤后病毒收获液中两者比值分别为4.2、1.8和8.1;牛血清白蛋白E L I S A 法和牛血清蛋白E L I S A 法均能检测出疫苗中牛血清白蛋白,但前者测不出牛血清I g G ,而后者可准确检测牛血清I g G 。

牛血清蛋白E L I S A 测定法可同时检测牛血清白蛋白和牛血清I g G ,更适用于疫苗残余牛血清蛋白含量的测定。

关键词:牛血清;E L I S A ;适用性中图分类号:R 446.61文献标识码:A文章编号:1005-5673(2006)03-0023-04I n v e s t i g a t i o no na p p l i c a b i l i t y o f E L I S Ai nd e t e c t i o no f r e s i d u a l b o v i n e s e r u m c o n t e n t s i nv i r a l v a c c i n e s P A NS h u -n a n ,Y A N GB i n g ,L I UB a o -k u i ,e t a l .(B e i j i n gT i a n T a nB i o l o g i c a l P r o d u c t s C o .,L T D ,100024,C h i n a )A b s t r a c t :T o v a l i d a t e t h e a p p l i c a b i l i t y o f E L I S Ai nd e t e c t i o n o f r e s i d u a l b o v i n e s e r u mc o n t e n t s i n s o m e v i r u s v a c c i n e s ,b y w h i c hi n c l u d e d m e a s u r e m e n t o f r e s i d u a l p r o t e i n s f r o m b o v i n e s e r u m i nc u l t u r e s b e f o r e w a s h i n g a n dh a r v e s t e d c u l t u r e s a f t e r w a s h i n g i n p r e p a r a t i o no f v a c c i n e s f o r m e a s l e s ,m u m p s a n d r u b e l l a .T h r e e k i n d s o f E L I S Am e t h o d s c o u l d b e u s e d i nd e t e c -t i o no f b o v i n e s e r u mp r o t e i n s ,b o v i n e s e r u ma l b u m i n a n d b o v i n e I g Gr e s p e c t i v e l y .T h e r e s i d u a l c o n t e n t s o f b o v i n e s e r u ma l -b u m i n a r e 70.5、65a n d 84.3f o l d s a s t h o s eo f b o v i n e I g Gi n v i r u s c u l t u r e s b e f o r ew a s h i n gi nm e a s l e s ,m u m p s a n dr u b e l l a v a c c i n e s ,w h e r e a s a f t e r w a s h i n g i nh a r v e s t e d c u l t u r e s t h e r a t i o s o f b o t ho f t h e ma r e r e d u c e d t o 4.2,1.8a n d 8.1f o l d s r e -s p e c t i v e l y .B o v i n e s e r u mp r o t e i n s -E L I S Ac a nb e u s e di nd e t e c t i o no f B S Aa n db o v i n eI g G i nah i g h l y s e n s i t i v ew a y ,b u t B S A -E L I S A i s o n l y c o n d u c t e d o n d e t e r m i n a t i o n o f B S A .T h e f o r m e r i s m o s t a p p l i c a b l e t h a n t h e o t h e r t w o o n d e t e c t i n g r e s i d -u a l b o v i n e s e r u m a l l e r g e n si nv i r u s v a c c i n e s ,b e c a u s eB S A a n db o v i n eI g G a r eb o t hp r i m a r yr e s i d u a l a l l e r g e n si nt h e s e p r e p a r a t i o n s .K e yw o r d s :B o v i n e s e r u m ;E L I S A ;A p p l i c a b i l i t y 《中国生物制品规程》2000年版规定,疫苗中残余的牛血清蛋白残留量不得超过50n g /m l 〔1〕。

ELISA法检测组织工程产品中残留牛血清蛋白含量

ｄｔｃｉｇｒｓｄａＳｎＴｅｅｔｅｉｕｌＢＡｉＥＭＰ，ａｄｔｎｅｔａｅｔｅｅｆｃｓｏｉｓｎｒｔｃｌｏｅｕｉｇｒｓｄａＡｉＥｎｓｎｏｉｖｓｉｔｈｆｔｆｒｎｉｇｐｏｏｏｎｒｄｃｎｅｉｕｌＢＳｎＴＭＰ．ｇｅｓＭａｅｉｌｎｅｈｄＴｒｅｋｎｓｏＥＭＰｓｄｉｈｓｓｕｙｗｅｅｉｓｅｅｇｎｅｅｏｅｉｓｅｅｇｎｅｅｅｄｎｔｒａｓａｄｍｔｏｓｈｅｉｄｆＴｓｕｅｎｔｉｔｄｒ：ｔｕｎｉｅｒｄｂｎ，ｔｕｎｉｅｒｄｔｎｏｓｓａｄｔｓｅｅｇｎｅｅｏｅｌｓｏ．Ｔｅｉｎｉｕｎｉｅｒｄｃｒａｔｍａｓｎｒｈｍｍｅｓｎｏａｈｐｏｕｔｓｐｅａｅｆｒｔｅｒｎｉｇｐｏｅｕｅａｃｒｉｇｔｒｉｆｅｃｒｄｃｒｐｒｄａｔｈｓｎｒｃｄｒｃｏｄｎｏｏｗａｅｉ
论著・
ＥＩＡＬＳ法检测组织工程产品中残留牛血清蛋白含量
方玉冯晓明奚廷斐陈震杜晓丹
【要】目的摘
探讨定量检测牛血清白蛋白（ｕｅｕｌｕｎＢＡ）Ｂｌｓｒｍａｍｉ，Ｓ酶联免疫试剂盒用于组织工程医疗产品（ｄｃｌｌｂＭｅｉａ
明显减少。论（）试剂盒适用于组织工程医疗产品中ＢＡ残留量的检测。２对于组织工程医疗产品而言，同的结１该Ｓ（）不清洗程序对ＢＡ的残留量有非常明显的影响。生产商应根据其预期用途制定有效的清洗程序，在说明书中给予足够Ｓ并

牛弹性蛋白酶(Elastase)酶联免疫分析

牛弹性蛋白酶（Elastase）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定牛血清，血浆及相关液体样本中弹性蛋白酶（Elastase）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛弹性蛋白酶（Elastase）水平。

用纯化的牛弹性蛋白酶（Elastase）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入弹性蛋白酶（Elastase），再与HRP标记的弹性蛋白酶（Elastase）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的弹性蛋白酶（Elastase）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中牛弹性蛋白酶（Elastase）浓度。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

酶联免疫吸附试验(ELISA)基本原理

SOP_13-1 酶联免疫吸附试验（ELISA）基本原理与注意事项一、基本原理1、包被1.1、固相载体的要求（1）、结合抗体或抗原的容量大（2）、抗体或抗原牢固地固定在其表面（3）、不影响免疫反应性（4）、利于反应充分进行（5）、固相方法简便易行，快速经济1.2、固相载体的材料：聚笨乙烯1.3、包被coating将抗原或抗体结合于固相载体。

1.4、封闭blocking用1%～5%的牛血清白蛋白或5%～20%小牛血清消除固相载体表面未结合的位点，消除非特异性吸附。

2、反应加入待测抗体或抗原和酶标抗原或抗体。

标记酶的要求：(1)、活性高(2)、性质稳定(3)、专一性强(4)、酶催化底物的显色信号易于判断和测量(5)、方法敏感，重复性好，简单易行(6)、酶的底物易于配制保存，酶及底物价廉常用酶辣根过氧化物酶HRP（ELISA中应用最为广泛的标记用酶）3、洗涤使结合在固相上的抗原抗体复合物与未结合的分离。

4、底物显色HRPDH2+H2O2—————→D+2H2OH2O2为受氢体，HRP对受氢体的专一性很高。

供氢体DH2习惯上被称为底物，底物有多种。

常用底物：四甲基联苯胺TMB四甲基联苯胺TMB是ELISA中应用最广泛的底物。

TMB反应后显蓝色，加酸终止反应后变为黄色,测定波长450nm ，稳定，无致癌性。

二、常用方法与原理1、双抗体夹心法方法：用已知抗体包被，加入待检血清，再加酶标抗体，加底物显色应用：二价或二价以上的较大分子抗原测定乙型肝炎表面抗原、甲胎蛋白、HCG等2、双抗原夹心法原理：类似双抗体夹心法操作步骤：类似双抗体夹心法应用：乙型肝炎表面抗体3、竞争法（测抗原）方法：用已知抗体包被，加入待测血清，再加酶标抗原，酶标抗原与待检物竞争与包被物结合。

加底物显色。

应用：用于只有一个抗原决定簇的小分子半抗原（药物、激素等）4、竞争法（测抗体）原理：类似检测抗原的竞争法应用：乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)和乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的检测5、间接法方法：用已知抗原包被，加入待测血清，再加酶标的抗人IgG（抗抗体或二抗）加底物显色。

酶联免疫分析技术在兽药残留检测中的应用

量越大、分子结构越复杂则免疫原性越强。兽药大多
应，生成抗体（抗原）一待测抗原（抗体）一酶标记抗体是小分子物质。属于半抗原．因此通常要与分子量较成有色产物．待测抗原（抗体）的定量与有色产物量大的载体（一般为蛋白质）偶联，形成兽药——载体蛋白结合物免疫原，即形成完全抗原。相同大小的分
测试手段相结合而建立的一种超微量的测定技术。目前已广泛应用于临床医学、兽医学、生物学等领域。ＥＬＩＳＡ检测技术具有操作简单、前处理简化、检测快速、准确、敏感、成本低、容量大，并可同时进行
大批量样品检测等优点．这种学科交叉技术正逐渐成为兽药残留检测的一个热点
０ｃｔｏｂｅｒ２０１３
酶联免疫分析技术在兽药残留检测中的应用
张泽英
（武汉生物工程学院食品工程系，武汉４３０４１５）
摘要：介绍了酶联免疫吸附分析方法的原理、类型以及在兽药残留检测中的关键技术环节和国内外应用现状，讨论了酶联免疫吸附分析技术应用于兽药残留检测所存在的问题和发展前景。
湖北畜牧兽医
要环节理想的免疫半抗原一方面应尽量具备与待测物有类似的化学特征．另一方面与载体连接后应尽量保证该特征结构最大程度地被免疫活性细胞识
隔臂 ” ），目前大多数学者认为．较适宜的间隔臂长度为４－６个碳链长度（０．５～０．８ｎｍ）．能较好的突出与

牛的牛血清白蛋白残留检测酶联免疫分析(ELISA)

牛的牛血清白蛋白残留检测酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定牛血清，血浆及相关液体样本中类牛血清白蛋白残留检测的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛的牛血清白蛋白残留检测水平。

用纯化的牛的牛血清白蛋白残留检测抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入类牛血清白蛋白残留检测，再与HRP标记的类牛血清白蛋白残留检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的类牛血清白蛋白残留检测呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中牛的牛血清白蛋白残留检测浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品：2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

牛血清白蛋白残留量测定

附录VIII F 牛血清白蛋白残留量测定法
本法系用酶联免疫法测定供试品中牛血清白蛋白（BSA）含量量，以判断供试品中BSA残残留量是否符合规定的检测方法。

以牛血清白蛋白标准品为标准，采用直线回归方法计算供试品中牛血清白蛋白含量。

供试品溶液的制备供试品如为冻干剂型，检测前应按标示量复溶后震荡混匀，室温静置30分钟，检测前应再次震荡混匀。

供试品如为液体剂型可直接用于检测。

采用试剂盒提供的供试品稀释液稀释供试品，供试品应至少进行两个稀释度测定，每个稀释度做双孔平行测定。

测定BSA含量的容器具应专用，防止实验室中BSA污染。

干扰试验制备溶液A（供试品溶液倍比稀释）、B（供试品溶液和30ng/ml 的内控标准品等量混合）和C（30ng/ml的内控标准品倍比稀释）。

其中，供试品溶液BSA含量高于试剂盒测定范围中点时，两倍稀释后制备溶液A和B。

溶液A、B可倍比稀释测定，溶液C应多孔测定，并在试验间均匀添加。

测定法按试剂盒说明书进行。

试剂盒标准品的吸光度值（A值）、内控参考品测定值、标准品线性相关系数、双孔测定吸光度值（A值）均应在试剂盒要求范围内，试验有效。

以试剂盒提供的标准品吸光度值（A值）和浓度制定标准曲线，根据供试品的A值计算供试品中BSA含量，按试剂盒说明书要求判定最终结果。

供试品测定时，低稀释度A值明显低于高稀释度A值时可能存在HOOK效应或操作失误，需重试或调整稀释倍数进行检测。

首次应用该试剂盒的供试品应进行干扰试验。

干扰试验中B－A值应在C值测定的95％可信区间内。

牛血清白蛋白

牛血清白蛋白1. 引言牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin，简称BSA）是一种来源于牛血浆的重要蛋白质。

BSA在生命科学研究、药物开发和生物技术等领域具有广泛的应用。

本文将介绍牛血清白蛋白的物理特性、生化功能以及常见的应用领域。

2. 物理特性2.1 分子结构牛血清白蛋白是一种单链蛋白质，由583个氨基酸残基组成。

其分子量约为66.5 kDa。

BSA的分子结构是球状的，具有3个域，其中一个是脂肪酸结合域。

BSA的最大吸收波长为280 nm。

2.2 热稳定性BSA在不同温度下的热稳定性是其广泛应用的重要特点之一。

通常情况下，BSA可以在室温下稳定存储。

当温度升高时，BSA的热稳定性会降低。

3. 生化功能3.1 结合能力BSA具有结合能力，可以与多种物质发生特异性的结合作用。

例如，BSA可以结合药物、脂肪酸、金属离子等。

这种结合能力可以用于药物输送系统的设计和生物分离技术的开发。

3.2 缓冲作用BSA可以作为缓冲液中的稳定剂，维持溶液的pH值在一定范围内。

BSA具有良好的缓冲性能，可以稳定酶和其他蛋白质在实验过程中的活性。

3.3 抗氧化性BSA具有抗氧化性，可以中和自由基和氧化物质，减少氧化应激对细胞和组织的损害。

这种性质使得BSA可以应用于抗氧化剂的研究和开发。

4. 应用领域4.1 细胞培养BSA在细胞培养基中起到重要的作用。

它可以提供细胞所需的营养物质和能量，促进细胞的生长和增殖。

同时，BSA还可以在细胞培养过程中稳定细胞的内环境，提高细胞培养的成功率。

4.2 免疫学研究BSA在免疫学研究中常被用作抗原或抗体的稀释剂和扩增剂。

它可以提供稳定的背景信号，并促进抗原与抗体的结合反应。

此外，BSA还可用于免疫印迹、酶联免疫吸附试验等实验技术。

4.3 生物分离技术BSA在生物分离技术中广泛应用。

例如，利用BSA的结合能力，可以将目标分子从混合物中特异性地吸附到BSA固相材料上，实现目标分子的纯化和富集。

应用酶免疫方法检测生物制品中残余牛血清白蛋白含量

应用酶免疫方法检测生物制品中残余牛血清白蛋白含量周铁群;陈震;强东【期刊名称】《中国生物制品学杂志》【年(卷),期】2004(17)3【摘要】目的应用酶免疫方法检测生物制品中残余牛血清白蛋白(BSA)含量。

方法制备高亲和力、高纯度的抗BSA单克隆抗体作为包被抗体,高纯度、高效价的兔抗BSA多克隆抗体为酶标抗体,采用ELISA夹心方法,以系列含量的BSA溶液作为标准,制备标准曲线,对样品中所含BSA进行定量。

结果优化了酶免疫反应条件,标准曲线线性范围内r≥0.98,经验证,该方法对BSA的最低检测限为2.5ng/ml。

分别检测5、10、30 ng/ml含量的BSA时,试验内(n=11)和试验间(n=3)测定的变异系数分别为2.3％-4.9％和4.0％-6.1％;回收率均值分别为104％、123％和109％。

未见该方法与人、马、猪血清白蛋白之间的交叉反应。

结论该法敏感度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于生物制品的质量控制。

【总页数】4页(P171-174)【关键词】ELISA夹心法;生物制品;牛血清白蛋白;定量检测;质量控制【作者】周铁群;陈震;强东【作者单位】中国药品生物制品检定所;无锡博生医用生物技术开发有限公司【正文语种】中文【中图分类】R392-33【相关文献】1.应用酶联免疫法检测组织工程骨牛血清白蛋白残余量的实验研究 [J], 邹文焘;刘广鹏;孙剑;崔磊2.探析酶联免疫试剂盒对牛尿液与牛血清中盐酸克伦特罗含量的检测 [J], 蔡展生;曾国耀3.酶免疫方法在牛血清白蛋白含量检测中的应用 [J], 王虹4.应用ELISA竞争法检测疫苗制品中残余的牛血清白蛋白 [J], 李长贵;周铁群;王剑锋;邱平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

ELISA法检测组织工程产品中残留牛血清蛋白含量

ELISA法检测组织工程产品中残留牛血清蛋白含量方玉;冯晓明;奚廷斐;杜晓丹;陈震【期刊名称】《组织工程与重建外科杂志》【年(卷),期】2008(4)1【摘要】目的探讨定量检测牛血清白蛋白(Bull serum albumin,BSA)酶联免疫试剂盒用于组织工程医疗产品(Medical products of tissue engineering,TEMPs)残留BSA检测的适用性,以及清洗程序对产品BSA残留量的影响.材料和方法检测了三种组织工程医疗产品(组织工程骨、组织工程肌腱以及组织工程角膜贴片)中BSA 的残留量,并比较了经不同清洗程序清洗后角膜贴片中残留BSA含量.结果 (1)组织工程骨、组织工程肌腱以及组织工程角膜贴片中BSA残留量分别为31.8ng/ml,4.9 ng/ml和低于2.5 ng/ml,且测定值与其稀释倍数呈正相关;(2)生理盐水及无血清的MEM培养基平均OD值与试剂盒中零浓度标准品接近,表明生理盐水或无血清MEM作为样品浸提介质对最终的实验结果无明显影响;(3)样品复孔比均小于1.24,符合试剂盒有效性要求.经清洗程序2处理后,角膜贴片中残留BSA较清洗程序1明显减少.结论 (1)该试剂盒适用于组织工程医疗产品中BSA残留量的检测.(2)对于组织工程医疗产品而言,不同的清洗程序对BSA的残留量有非常明显的影响.生产商应根据其预期用途制定有效的清洗程序,并在说明书中给予足够的阐述.【总页数】3页(P12-14)【作者】方玉;冯晓明;奚廷斐;杜晓丹;陈震【作者单位】100050,北京市,中国药品生物制品检定所医疗器械质量监督检验中心;100050,北京市,中国药品生物制品检定所医疗器械质量监督检验中心;100050,北京市,中国药品生物制品检定所医疗器械质量监督检验中心;100050,北京市,中国药品生物制品检定所医疗器械质量监督检验中心;100050,北京市,中国药品生物制品检定所医疗器械质量监督检验中心,病毒三室【正文语种】中文【中图分类】Q813.1+3【相关文献】1.ELISA法检测疫苗中残余牛血清蛋白含量的方法学验证 [J], 董小曼;田博;杨冰;潘殊男;栗妍;沈淑琴;王晋2.ELISA法检测干细胞溶液中残留牛血清白蛋白含量 [J], 宛莹;聂德志;贲亮;黄若洋3.组织工程医疗产品中残留牛血清白蛋白的检验常见问题 [J], 方玉;冯晓明;奚廷斐4.ELISA 法检测水产品中硝基呋喃代谢物残留见解 [J], 梁娟;于盟盟;韩梅;魏海英;孟霞5.三种检测猪瘟疫苗中牛血清蛋白含量的ELISA试剂盒的性能对比 [J], 曹玉美;方茜;陆江;孙如水;孙龙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

牛血清白蛋白V (Elisa专用)

北京索莱宝科技有限公司
牛血清白蛋白V（Elisa专用）
货号：A7940
保存：2-8℃
产品特点：
高纯度，低干扰，低背景；几乎检测不到IgG、内毒素、酶和蛋白酶活性；来源的可溯性；闭环生产，使污染最小化和重复性最大化；良好的溶解性/过滤性易于使用；按照FDA的化学原料药cGMPs要求生产；来源不含任何病毒。

产品描述：
牛血清白蛋白，标准级，新西兰来源。

适用范围：
对蛋白酶敏感的免疫分析，如RIA，EIA荧光，化学发光分析；蛋白标准品，稀释液；蛋白，结合物和酶稳定剂；核酸杂交分析；细胞培养。

检测指标及数值：
第1页，共1页。

酶免疫方法在牛血清白蛋白含量检测中的应用

学术论坛439酶免疫方法在牛血清白蛋白含量检测中的应用王虹（青岛易邦生物工程有限公司，山东青岛 266114）摘要：本文将制作准备高纯度和亲和力的抗牛血清白蛋白（BSA）的单个克隆抗体，来作为此次研究的包被抗体，将高效价和纯度的兔抗（BSA）的多克隆抗体，作为此次研究的酶标抗体，利用酶免疫（ELISA）夹心方法，将一体系含量数值的BSA 溶液，作为此次的应用研究标准，制定标准化的曲线，对准备的实验样品中的BSA 展开定量，来着重分析酶免疫方法在生物制品中残余牛血清白蛋白含量检测中的有效应用。

关键词：酶免疫（ELISA）夹心方法；生物制品；牛血清白蛋白当前，我国各种类生物制品当中检测残余牛血清蛋白的方法，主要运用的有两种，其一是“反向间接血凝法”，其二是“放射免疫法”[1]。

这两种检验方法都有着不稳定的特性，而且操作起来比较繁复。

在国外许多国家对其运用是酶免疫方法，为了更好的跟上全球发展脚步，本文将运用酶免疫（ELISA）夹心法，对生物制品当中残余的BSA 展开定量分析研究，并对ELISA 夹方法的各方面特性进行验证。

1 生物制品的具体含义在上世纪五十年代中对与生物制品的定义是，由微量生物以及其代谢产物外毒素等，人类血液与动物血液和各自组织以及动物毒素等等物质一同制造的，为了有效预防和治疗所用的一种制品[2]。

之后，伴随着生物技术的不断发展和进步，尤其是人类基因研究工程、细胞研究工程以及蛋白质研究工程等等生物技术的诞生，使得生物制品涵盖范围得到了扩大，最主要的展现在现代化各类生物制品的具体内容得到了拓展，包含了医疗诊断以及治疗所利用到的细胞因子与抗体、人源与异源组织以及人体细胞与人类基因。

目前，对于生物制品的具体定义已经转变为，由动物毒素、微生物、生物各类组织以及寄生虫作为第一原材料，运用现代化生物学科技对其进行分离纯化性制备，且采用现代化生物学科技与现代化分析科技把控过程中产物和最终成品质量制作而成的“生物活性制剂”[3]。

牛β羟丁酸BHBA酶联免疫分析ELISA

牛β羟丁酸BHBA酶联免疫分析ELISA 牛β-羟丁酸（BHBA）酶联免疫分析（ELISA）是一种常用的实验方法，用于测定牛血清或乳汁中BHBA的浓度。

本文将详细介绍ELISA的原理、操作步骤和相关注意事项，并探讨其应用于牛BHBA的测定。

1.原理ELISA是一种基于免疫反应的定量和定性分析方法，其原理基于抗原与抗体间的特异性结合。

该方法通过在固相（通常是微孔板）上固定抗原，然后与样品中的抗体结合，再与特异性的酶标记二抗结合，最后通过添加底物使酶发生化学反应，以测定抗原或抗体的浓度。

2.操作步骤步骤一：样品制备将牛血清或乳汁样品离心，去除悬浮的颗粒物。

然后按照实验所需的比例将样品稀释成合适的浓度。

步骤二：固相涂覆取出微孔板，将酶标板孔涂覆剂加入孔底，孔涂覆剂的种类可根据实验需求而定，一般为牛蛋白。

孔涂覆剂形成的蛋白质层能够固定抗原，使其与抗体特异结合。

步骤三：抗原包被将稀释后的样品加入孔中，与孔涂覆剂共同孵育，使抗原与酶标记二抗结合。

步骤四：洗涤用缓冲液对孔中的液体进行洗涤，从而去除非特异性结合物。

步骤五：酶标记加入特异性的酶标记二抗，与抗原结合，形成抗原-酶标记二抗复合物。

步骤六：再洗涤用缓冲液对孔中的液体进行洗涤，从而去除非特异性结合物。

步骤七：底物添加加入底物，底物与酶发生化学反应，可以通过生成可测量的信号（如颜色反应）来进行定量或定性分析。

3.注意事项-在进行ELISA实验时，应注意洗涤步骤的频率和缓冲液的浓度，以确保去除非特异性结合物的同时，不会导致特异结合复合物的脱离。

-确保样品的稀释倍数适当，以避免过度稀释或浓缩对实验结果的干扰。

-在进行酶标记二抗时，应根据实验需求选择合适的抗原和酶标记二抗，以确保特异性结合和化学反应的发生。

-操作过程中要注意洁净环境和避光，以避免外界因素对实验结果的影响。

-对于一些需要定量测定的ELISA实验，同时应加入标准品，以建立标准曲线，并根据标准曲线计算出样品中的抗原或抗体浓度。

bsa残留质量标准_概述及解释说明

bsa残留质量标准概述及解释说明1. 引言1.1 概述在食品和药品行业中，生物制品的使用广泛且不可避免。

其中，牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin，简称BSA）是一种常见的生物制品之一。

然而，在应用BSA的过程中，其残留质量标准成为了一个备受关注的话题。

本文将对BSA残留质量标准进行概述及解释说明。

1.2 文章结构本文共分为五个章节，包括引言、BSA残留质量标准的重要性、BSA残留质量标准的制定过程、BSA残留质量标准解释说明及执行措施概述以及结论。

每一章节都将深入探讨相关内容，并提供详细解读和解释。

1.3 目的本文旨在全面介绍和解释BSA残留质量标准，包括其重要性以及相关制定过程、解释说明和实施措施等方面。

通过此文可以加深读者对于BSA残留质量标准的理解，并为相关行业从业人员提供指导意见和参考建议。

以上就是文章“1. 引言”部分内容的详细清晰撰写。

2. BSA残留质量标准的重要性2.1 BSA的定义BSA（Bovine Serum Albumin）是一种从牛血清中提取出的蛋白质，它被广泛应用于食品和药品行业。

BSA具有良好的溶解性、稳定性和活性，可以作为生物制剂工艺中的重要添加剂或评价指标。

由于其广泛的用途，确保BSA残留在合理范围内对食品和药品安全至关重要。

2.2 BSA在食品和药品中的应用BSA在食品和药品中有多种应用。

在食品工业中，BSA常用于肉制品、乳制品、面粉等产品的加工过程中。

它可以改善产品质地、增加保水性并提高营养价值。

同时，BSA还可用于检测分析方法开发以及制备验证等实验研究。

在药品领域，BSA常被用作注射剂等生物制剂的辅助成分。

此外，作为生物制药产品工艺控制指标，BSA也起到了重要作用。

因此，在食品和药品行业中合理限制和控制BSA残留是必要的。

2.3 对BSA残留质量标准的需求和原因制定BSA残留质量标准的需求源于以下几个方面。

首先，保障食品和药品安全。

合理限制BSA残留有助于减少潜在的食品污染风险和药品不良反应，确保人们消费到安全可靠的产品。

ELISA法检测疫苗中残余牛血清蛋白含量的方法学验证

维普资讯
研究报告
ＥＩＬＡ法检测疫苗中残余牛血清蛋白含量的方法学验证Ｓ
董小曼田博杨冰潘殊男栗妍沈淑琴王晋
ｌ京天坛生物制品股份公司北京北１０２００４）
摘要为验证ＥＡ法检测病毒性疫苗中残余牛血清蛋白方法的可靠性，２个部门Ｕｓ由对１２个样品进行４人连续３天的验证。结果表明：４人连续３天的１２次检测结果均满足
１材料与方法
１１材料和仪器．
以ＢＰＳ含量（ｇｍ）ｎ／Ｌ为横坐标，Ａ值（两孔均值）为
纵坐标，绘制标准曲线。
２】
维普资讯
曩代仅嚣（Ｗｍｏｅｎｎｔ．ｒ．ｎＷＷ．ｄｒｉｒｏｇｏ）ｓｓ
９．％～１．％，００１７１检测灵敏度为２５ｇｍ，明ＢＰ— ＬＳ．ｎ／Ｌ表ＳＥＩＡ法可以敏感、准确地定量检测ＢＡ，Ｓ可用于目前我公司疫苗制品中残余牛血清白蛋白的质量控制。关键词牛血清ＢＡＳＥＩ法学验证ＳＢＰＬＳＡ
为国内企业提供一个方法学验证的参考。
２０００无锡博生生物技术开发公司）麻疹疫苗、０６２１；风疹疫苗、腮腺炎疫苗、麻疹一风疹联合疫苗、麻疹
一
腮腺炎一风疹联合疫苗、地鼠肾细胞乙型脑炎疫
Hale Waihona Puke 苗、ｅ细胞乙型脑炎灭活疫苗（Ｖｒｏ北京天坛生物制
１３１０．％之间，明不同人的测定结果准确度高。分别采用该方法与已上市的牛血清白蛋说白试剂盒对７种疫苗中１０个样品的残余ＢＰ含量进行检测，０Ｓ二者的检测结果合格符合