线粒体的染色方法(红色荧光)
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据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。 染色后立即进行分析。
1、 染色工作液配制： 根据样本数量，用染料稀释液将 BBcellProbeTM M11 荧光染料 100 倍稀释，再用相 应的培养基或者 HBSS 缓冲液 20-400 倍稀释（对于后续需要做固定或透化的样本， 20-100 倍稀释），配制成染色工作液。
线粒体染色试剂盒
BBcellProbeTM-红色荧光
货号：BB-44113
试剂盒储存条件： 2-8℃保存。
试剂瓶开盖后各组份按要求条件保存。
试剂盒组成：
产品组份
BB-44113-1
规格 试剂 A：BBcellProbeTM M11 染料
500-1000 T 100 ul
试剂 B：染料稀释液
10 ml
产品号 BB-4104 BB-4105 BB-4106 BB-4107 BB-4108 BB-4112 BB-4123 BB-4137 BB-4132
www.beibokit.com
www.bestbio.com.cn
-4-
咨询邮箱：bestbio@163.com
电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
质量控制： 贝博对每批产品进行严格测试以确保产品质量一致。
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-1-
咨询邮箱：bestbio@163.com
电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
知识产权： 贝博 TM BBcellProbeTM 系列试剂盒及其使用方法包含专有技术。
试剂盒。 除 了 针 对 线 粒 体 的 BBcellProbeTM M 系 列 荧 光 染 色 产 品 ， 贝 博 还 可 以 为 您 各 种
BBcellProbeTM N 系列、E 系列、G 系列和 BBcellProbeTM L 系列细胞膜、细胞质、细胞核、 溶酶体、内质网等细胞亚结构荧光染色试剂盒，以及钙离子、钠离子、神经细胞等各种荧光
产品说明书
注意事项： ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管 底，避免开盖时试剂损失。 ● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。 ● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 ● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清 洗并彻底清除残留清洁剂。 ● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
产品号 BB-4101 BB-4102 BB-4201 BB-4202 BB-4203 BB-4204 BB-4131 BB-4133 BB-4122
产品 细胞周期检测试剂盒 JC-1 线粒体膜电位试剂盒 Caspase 3 活性检测试剂盒 Caspase 8 活性检测试剂盒 Caspase 9 活性检测试剂盒 Caspase 10 活性检测试剂盒 细胞凋亡形态学检测试剂盒 Rhodamine 123 染色试剂盒 AO/EB 双染试剂盒
2、 细胞染色 2.1 对于贴壁细胞
1）培养皿/培养板准备细胞样本。 2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量 37℃预热的含探针工作液。于
生长状态下孵育 15 分钟～45 分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实 验优化）。
【注】: 也可以将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
相关产品：
产品 Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 Annexin V-EGFP/PI 凋亡试剂盒 MTT 细胞增殖及毒性检测试剂盒 CCK-8 细胞增殖毒性检测试剂盒 WST-1 细胞增殖毒性检测试剂盒 MTS 细胞增殖与毒性检测试剂盒 Hoechst33342/PI 双染试剂盒 DAPI 染色试剂盒 细胞存活率检测试剂盒
产品更新： 贝博会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的 版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说 明书，可能是不同的版本。 需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全： 使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如 果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
染色试剂盒产品。
试剂盒以外自备试剂和仪器
● PBS ● HBSS
● 离心机
● 荧光显微镜/激光共聚焦显微镜
www.beibokit.com
www.bestbio.com.cn
-2-ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
咨询邮箱：bestbio@163.com
电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
BBcellProbeTM M 系列探针是一种细胞渗透型的对活细胞中的线粒体体进行选择性染色 的一类新型荧光染料，该系列探针可以选择性标记线粒体，包含标记线粒体的弱巯基反应性
的氯甲基官能团。只需简单孵育细胞，即可穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。可有效
标记活细胞。一旦线粒体被染色后，还能根据后续实验的需求进行固定（醛类固定剂如甲醛） 和透化（醛类去污剂如 Triton X-100），探针依然维持在细胞内。
/ 599nm。或者进行后续的固定和透化步骤。
【注】: 对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经细胞粘合剂处理过的盖玻片上，然后使用类似于 贴壁细胞的方法进行染色。 如果需要盖玻片上固定化的细胞，那么可在铺片前可以先用多聚赖氨酸（poly-D-lysine） 包被载玻片或盖玻片。 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
-3-
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本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
产品说明书
1）离心，吸除上清。 2）利用 37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育 30 分钟～2 小时（具
体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。 3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。 4）置于荧光镜下观察。或流式细胞仪、荧光酶标仪检测。最大激发/发射波长为 579
3、固定和透化： 1）染色结束后，利用培养液或缓冲液清洗细胞； 2）小心吸走清洗液。换用新鲜配制且预热的含 2-4%甲醛的缓冲液或培养液进行细 胞固定。经验证，本染料 MitoTracker® Red CMXRos 由含 3.7%甲醛的完全培养 液于 37℃孵育内皮细胞 15min 能起到良好的固定效果。 3）清洗细胞：吸除固定液，用适当缓冲液冲洗细胞数次。 4）细胞透化（可选）： ICC 等实验需要细胞要做透化，可将已固定的细胞直接加入含有去污剂如 Triton X-100 的缓冲液中孵育。透化结束后，用缓冲液清洗细胞即可进行后续 ICC 实验。 一般用含 0.2% Triton X-100 的 PBS 孵育细胞 10 分钟可以达到良好的透化效果。 还可利用预冷的丙酮透化 5 分钟，之后用 PBS 清洗细胞。经验证，即使后继没 有进一步的抗体标记，丙酮透化处理也可降低背景信号。
使用说明书
1
各组份储存条件： 染料-20℃避光保存；避免反复冻融； 稀释液 2-8℃保存。
有效期： 六个月。
BB-44113-2 1000-2000 T
200 ul 20 ml
1
产品说明书
V2.16
组份编号 44113A 44113B
※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制： 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
虽然传统的线粒体荧光探针如 TMR 和罗丹明 123，也能很容易的聚集在功能线粒体上， 但是一旦线粒体膜电位丧失即会被洗掉，从而在一些需要细胞进行醛类固定或者包含线粒体 能量状态影响因子的实验中，使其应用大受限制，而 BBcellProbeTM M 系列探针不受线粒体 膜电位影响。
BBcellProbeTM M 系列线粒体探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色 标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针，贝博还可以提供绿色、蓝色、橙色等颜色的染色
3）利用新鲜培养基替换上述染色液。
【注】: 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
4）荧光显微镜（含合适滤片）或流式细胞仪、荧光酶标仪下观察。最大激发/发射 波长为 579 / 599nm。或者进行后续的固定和透化步骤。
2.2 对于悬浮细胞
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www.bestbio.com.cn
【注】: 也可以直接用相应的培养基或 HBSS 等缓冲液稀释 M11 染料母液至所需浓度。 建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，每次使用一管，试剂-20℃避光 冻存，一年稳定。 开始实验前，使用培养基或 HBSS 缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。工作浓度为根据 不同细胞的预实验结果确定的最佳工作浓度，一般染色终浓度 2000-40000 倍稀释。 为了降低过度加载染料导致的潜在背景和线粒体毒性，在不影响实验结果的前提下应尽可 能低浓度染色。另外，浓度过高也可能造成非特异性染色，对其他细胞结构进行染色。 工作液现配现用。 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓 度。
技术支持： 产品技术问题可发邮件至 bestbio@163.com 咨询。 如果您有任何关于产品性能或者新应用和技术的建议，欢迎您随时联系我们。
产品简介： 贝博 TM BBcellProbeTM M11 线粒体染色试剂盒是利用 BBcellProbeTM M 系列探针进行线
粒体特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的 BBcellProbeTM M11 线粒体染色探针为红色荧光标 记的线粒体探针，具有 579/599nm 的最大激发/发射波长。本品适合双标实验，因其红色荧 光与其他的绿色荧光探针具有良好的分辨率。
产品说明书
使用方法：
使用注意事项： M11 染色液为 DMSO 溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意
需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使 DMSO 溶液集中于管底。 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根
1、 染色工作液配制： 根据样本数量，用染料稀释液将 BBcellProbeTM M11 荧光染料 100 倍稀释，再用相 应的培养基或者 HBSS 缓冲液 20-400 倍稀释（对于后续需要做固定或透化的样本， 20-100 倍稀释），配制成染色工作液。
线粒体染色试剂盒
BBcellProbeTM-红色荧光
货号：BB-44113
试剂盒储存条件： 2-8℃保存。
试剂瓶开盖后各组份按要求条件保存。
试剂盒组成：
产品组份
BB-44113-1
规格 试剂 A：BBcellProbeTM M11 染料
500-1000 T 100 ul
试剂 B：染料稀释液
10 ml
产品号 BB-4104 BB-4105 BB-4106 BB-4107 BB-4108 BB-4112 BB-4123 BB-4137 BB-4132
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质量控制： 贝博对每批产品进行严格测试以确保产品质量一致。
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本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
知识产权： 贝博 TM BBcellProbeTM 系列试剂盒及其使用方法包含专有技术。
试剂盒。 除 了 针 对 线 粒 体 的 BBcellProbeTM M 系 列 荧 光 染 色 产 品 ， 贝 博 还 可 以 为 您 各 种
BBcellProbeTM N 系列、E 系列、G 系列和 BBcellProbeTM L 系列细胞膜、细胞质、细胞核、 溶酶体、内质网等细胞亚结构荧光染色试剂盒，以及钙离子、钠离子、神经细胞等各种荧光
产品说明书
注意事项： ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管 底，避免开盖时试剂损失。 ● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。 ● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 ● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清 洗并彻底清除残留清洁剂。 ● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
产品号 BB-4101 BB-4102 BB-4201 BB-4202 BB-4203 BB-4204 BB-4131 BB-4133 BB-4122
产品 细胞周期检测试剂盒 JC-1 线粒体膜电位试剂盒 Caspase 3 活性检测试剂盒 Caspase 8 活性检测试剂盒 Caspase 9 活性检测试剂盒 Caspase 10 活性检测试剂盒 细胞凋亡形态学检测试剂盒 Rhodamine 123 染色试剂盒 AO/EB 双染试剂盒
2、 细胞染色 2.1 对于贴壁细胞
1）培养皿/培养板准备细胞样本。 2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量 37℃预热的含探针工作液。于
生长状态下孵育 15 分钟～45 分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实 验优化）。
【注】: 也可以将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
相关产品：
产品 Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 Annexin V-EGFP/PI 凋亡试剂盒 MTT 细胞增殖及毒性检测试剂盒 CCK-8 细胞增殖毒性检测试剂盒 WST-1 细胞增殖毒性检测试剂盒 MTS 细胞增殖与毒性检测试剂盒 Hoechst33342/PI 双染试剂盒 DAPI 染色试剂盒 细胞存活率检测试剂盒
产品更新： 贝博会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的 版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说 明书，可能是不同的版本。 需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全： 使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如 果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
染色试剂盒产品。
试剂盒以外自备试剂和仪器
● PBS ● HBSS
● 离心机
● 荧光显微镜/激光共聚焦显微镜
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BBcellProbeTM M 系列探针是一种细胞渗透型的对活细胞中的线粒体体进行选择性染色 的一类新型荧光染料，该系列探针可以选择性标记线粒体，包含标记线粒体的弱巯基反应性
的氯甲基官能团。只需简单孵育细胞，即可穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。可有效
标记活细胞。一旦线粒体被染色后，还能根据后续实验的需求进行固定（醛类固定剂如甲醛） 和透化（醛类去污剂如 Triton X-100），探针依然维持在细胞内。
/ 599nm。或者进行后续的固定和透化步骤。
【注】: 对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经细胞粘合剂处理过的盖玻片上，然后使用类似于 贴壁细胞的方法进行染色。 如果需要盖玻片上固定化的细胞，那么可在铺片前可以先用多聚赖氨酸（poly-D-lysine） 包被载玻片或盖玻片。 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
-3-
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电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
产品说明书
1）离心，吸除上清。 2）利用 37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育 30 分钟～2 小时（具
体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。 3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。 4）置于荧光镜下观察。或流式细胞仪、荧光酶标仪检测。最大激发/发射波长为 579
3、固定和透化： 1）染色结束后，利用培养液或缓冲液清洗细胞； 2）小心吸走清洗液。换用新鲜配制且预热的含 2-4%甲醛的缓冲液或培养液进行细 胞固定。经验证，本染料 MitoTracker® Red CMXRos 由含 3.7%甲醛的完全培养 液于 37℃孵育内皮细胞 15min 能起到良好的固定效果。 3）清洗细胞：吸除固定液，用适当缓冲液冲洗细胞数次。 4）细胞透化（可选）： ICC 等实验需要细胞要做透化，可将已固定的细胞直接加入含有去污剂如 Triton X-100 的缓冲液中孵育。透化结束后，用缓冲液清洗细胞即可进行后续 ICC 实验。 一般用含 0.2% Triton X-100 的 PBS 孵育细胞 10 分钟可以达到良好的透化效果。 还可利用预冷的丙酮透化 5 分钟，之后用 PBS 清洗细胞。经验证，即使后继没 有进一步的抗体标记，丙酮透化处理也可降低背景信号。
使用说明书
1
各组份储存条件： 染料-20℃避光保存；避免反复冻融； 稀释液 2-8℃保存。
有效期： 六个月。
BB-44113-2 1000-2000 T
200 ul 20 ml
1
产品说明书
V2.16
组份编号 44113A 44113B
※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制： 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
虽然传统的线粒体荧光探针如 TMR 和罗丹明 123，也能很容易的聚集在功能线粒体上， 但是一旦线粒体膜电位丧失即会被洗掉，从而在一些需要细胞进行醛类固定或者包含线粒体 能量状态影响因子的实验中，使其应用大受限制，而 BBcellProbeTM M 系列探针不受线粒体 膜电位影响。
BBcellProbeTM M 系列线粒体探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色 标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针，贝博还可以提供绿色、蓝色、橙色等颜色的染色
3）利用新鲜培养基替换上述染色液。
【注】: 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
4）荧光显微镜（含合适滤片）或流式细胞仪、荧光酶标仪下观察。最大激发/发射 波长为 579 / 599nm。或者进行后续的固定和透化步骤。
2.2 对于悬浮细胞
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【注】: 也可以直接用相应的培养基或 HBSS 等缓冲液稀释 M11 染料母液至所需浓度。 建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，每次使用一管，试剂-20℃避光 冻存，一年稳定。 开始实验前，使用培养基或 HBSS 缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。工作浓度为根据 不同细胞的预实验结果确定的最佳工作浓度，一般染色终浓度 2000-40000 倍稀释。 为了降低过度加载染料导致的潜在背景和线粒体毒性，在不影响实验结果的前提下应尽可 能低浓度染色。另外，浓度过高也可能造成非特异性染色，对其他细胞结构进行染色。 工作液现配现用。 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓 度。
技术支持： 产品技术问题可发邮件至 bestbio@163.com 咨询。 如果您有任何关于产品性能或者新应用和技术的建议，欢迎您随时联系我们。
产品简介： 贝博 TM BBcellProbeTM M11 线粒体染色试剂盒是利用 BBcellProbeTM M 系列探针进行线
粒体特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的 BBcellProbeTM M11 线粒体染色探针为红色荧光标 记的线粒体探针，具有 579/599nm 的最大激发/发射波长。本品适合双标实验，因其红色荧 光与其他的绿色荧光探针具有良好的分辨率。
产品说明书
使用方法：
使用注意事项： M11 染色液为 DMSO 溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意
需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使 DMSO 溶液集中于管底。 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根