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(白细胞使用溶血剂,是为了三分类或五分类时,使一部分白细胞内细胞质缩小,
改变原来形态;另外的白细胞不改变原来形态;而血红蛋白使用溶血剂,将彻底
破坏白细胞及红细胞)
3.定量方法小结: 使用场所
标本计数
方式 浮球式定量器 水式定量器 注射式定量器 流量=流速X时间
自动试剂分注 (稀释液、溶血剂)
DP方式 注射式
血液
血清 血 浆 蛋白质
凝固因子 血小板 血 球 白细胞 红细胞
血饼
B.血液的功能
1.搬运氧气至全身; 2.进行人体免疫功能; 3.阻止血液外流;
血液学.
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二.各论
A. 红细胞(RBC)
1。红细胞的形态及功能
红细胞模型图
形 态:扁平板状,中央凹陷,平均直径7-8µm 内 含:血红蛋白(HGB),富含铁份,容易氧化,携带氧气至全身。
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血液学基础
一.总论
A.血液的成分
血浆成份 血清成份
血小板
白细胞 血饼
红细胞
加入抗凝剂,离心作用 血液自然凝固 后,静放30分钟情况
红细胞
红细胞
红细胞
直径:18-25 µm
直径:12-18 µm
直径:9-12 µm
直径:8-10µm
有 RNA 留下
细胞质:浓青色
细胞质:青色
细胞质:青灰色
细胞质:赤橙色
有核小体
无核小体
血红蛋白合成
成熟红细胞
分裂
红细胞由骨髓中生成,有细胞核,细胞核在分裂过程中密度越来越大,体积越来越小.此时 的红细胞为幼稚细胞,分布于骨髓中.在静脉血中只留有网状红细胞及成熟红细胞,网状红细胞 含量不超过 1%.网状红细胞内有 RNA 留下.检测中,用一般试剂可区分幼稚细胞与成熟细胞, 用特殊试剂可区分网状红细胞与成熟细胞. 3. 异常举例:
一·血球计数器主要检测项目
进行CBC分析:WBC,RBC,HCT,HGB,PLT MCV,MCH,MCHC
二·基本原理:
A.粒子检出原理:
1。Ohm’s法则(DC检出法、电气抵抗变化检出): E(电压)=I(电流)*R(电阻) 由于血液内各种细胞及颗粒的大小不同,加压后电阻大小也不同,然后转换成脉 冲信号输出,即可得知数量、大小等数据。 适用:白细胞、红细胞、血小板的数量、形态及分类 装置:
稀释倍率
RBC
DC(电阻)检测方式 稀释液
25000-50000
WBC
DC(电阻)检测方式 稀释液、溶血剂
250-500
PLT
DC(电阻)检测方式 稀释液
25000-50000
HGB
比色方式
稀释液、溶血剂
250-500
z 半自动简单的血球计数器只是一种试剂(WBC 、HGB 兼用)
z WBC 三分类以上的机器大部分 WBC 与 HGB 所用溶血剂不同
比色分析法: 1.装置:
灯泡
光电变换
标本
滤光器
受光器
Hgb 多少影响 Hgb 浓度,影响光透过的强度,最后通过光电变换即可测定 Hgb 浓度. ①空白结果(Blank); ②标本结果(Sample); ③实际结果(Real)=(Sample - Blank);
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D.定量方法:
6.其他指标列举: W-SCR(白细胞小型细胞率), W-LCR(白细胞大型细胞率) , W-MCR(白细胞中型细 胞率), W-SCC(白细胞小型细胞数), W-LCC(白细胞大型细胞数), W-MCC (白细胞中型细 胞数), , P-LCR(血小板小型细胞率), MPV(平均血小板容积) , RDW(红细胞分布曲线宽度) , PDW(血小板分布曲线宽度)
C. 血小板(PLT)
1。作 用:阻止出血 特 征:容易凝结(不稳定性) 正常值:15万──40万/µL 止血过程: 血小板在血管内壁附着; 相宜凝结 止血后产生血塞,以后慢慢溶解
2.异常举例: 再生不良性贫血:血小板数量少,或者血小板附着力差.可进行成份输血.
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血球计数器基本原理
血液学.
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2. 激光散乱光荧光检出方式(Flowcytemetry): 装置:
优点:适宜于各种细胞的分析,应用广泛,例如白细胞五分类(需用特殊试剂). 缺点:激光如果用半导体产生,则输出强度较低;如果用 Gas Laser 产生,则使用寿
命较短,更换后调整麻烦.以上两种情况将导致成本上升. 3. 交流(电阻)检出方式:
4.注射式定量器:(绝对定量) 优点:马达转速控制简单,流速、定量都可改变.多用于高档仪器微量定量. 缺点:成本高,密封引起的磨损问题不易解决,需要定期维修保养。
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E.血液定量方法
1.旋转阀SRV(Sample Rotor Valve):
优点:故障率低.血液吸引管内的一点点堵塞不影响定量,由于取的是中段血, 血液定量很稳定.
功 能:搬运氧气
特 点:细胞内无核,柔软,可进入比本身直径更小的毛细血管。
正常值:400-600万/µL 2.红细胞的成熟:
红 血 球 系 前红细胞 干 细 胞
嗜碱性 多染性 正染性 脱核 网状红细胞
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G.小结
1. RBC , WBC , PLT , HGB , MCV , MCH , MCHC 的主要机能 、正常值范围及计算公式:
项目
主要机能
正常值
计算公式
RBC
搬运氧气
400-600 万/µl
───
WBC
免疫
4000-9000/µl
───
PLT
阻止出血
15-40 万/µl
B.白细胞(WBC)
1. 白细胞的分类、形态及成份
分 类: 二分类
淋巴球 其他白细胞
三分类
淋巴球 嗜中性球 其他白细胞
五分类
淋巴球 单核球
颗粒球
嗜中性球 嗜酸性球 嗜碱性球
五分类中各种白细胞百分比含量: 淋巴球 :20%- 40% 单核球 :2%- 10% 嗜中性球:40%- 60% 嗜酸性球:7%以下 嗜碱性球:1%以下
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F. 红细胞的主要公式:
1.MCV(平均红细胞容积)
MCV(fl) = Hct(%)
×10
Rbc(×106/µL )
2.MCH(平均红细胞血红蛋白浓度)
MCH(pg) = Hgb(g/dL)
×10
Rbc(×106/µL )
3.MCHC(平均红细胞中血红蛋白容积浓度)
MCHC(g/dl)= Hgb(g/dL) ×1000
Hct(%)
4.三项指标标准数值范围: MCV: 80 - 100 fL MCH: 28 - 32 pg MCHC: 32 - 36 g/dL
5.异常举例: ①MCV 高,MCHC 低 可能 Hct 高
②MCV 正常,MCHC 高 可能 Hgb 高 可能稀释倍率太大,导致 Hct 及 Rbc 都降低.
离心器
l1 用计算板
l2
100% 45%
0%
2.用血球计数器检测 HCT: Hct 值=(红血球总体积/血液总体积)* 100% = A *Σhk 将标本 5 万倍稀释后,通过检测器孔时,产生信号波,将信号波的大小加总,乘以一常 数,即得 Hct 的值
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C.HGB 浓度的测定原理:
1.浮球式定量器(东亚专利):(绝对定量)
优点:检出器小孔有微量堵塞不影响结果; 缺点:定量不可改变 2.水式定量器:(绝对定量) 优点:成本低,检出器小孔有微量堵塞不影响结果。 缺点:内壁水位下降时,可能遗留水滴,易导致稀释倍率、传感器失误,结果不如浮球式 准确.
3.吸引量=流速 * 时间:(相对定量) 优点:成本很低 缺点:由于流速不能保证,因此极易影响吸引量的准确性.
缺点:血液样品有浪费,需要血液量较多,制作成本高.
2. 注射式: 优点:马达转速控制简单,流速、定量都可改变,用于微量血液定量,需要血液 量较少,成本低. 缺点:密封问题较难解决,2-3 年需更换密封装置.
3. 薄膜泵(DP 方式): 优点:耐用,稳定,4-5 年也不需更换; 缺点:不容易控制容积,需正、负压,成本较高.
缺铁性贫血:由于血红蛋白内铁份不足所致,红细胞呈小型。 溶血性贫血:红细胞于内部膨化,导致细胞膜破裂,红细胞呈大型。 恶性贫血 :由于细胞内缺乏维生素B12导致细胞核不能成熟,细胞呈大型
有核红细胞。 再生不良性贫血:由于遗传原因,骨髓造血量少,导致红细胞、血小板、白细
胞等数量少。
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输血后,红细胞粒度曲线可能如图所示, 有2个顶部,应该视为正常现象。
2· 血小板粒度分布曲线分析:
正常血小板粒度分布曲线
有小灰尘(2~ 3μ)时,粒度分布曲线
血液学.
血小板凝集时,粒度分布曲线
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3.白细胞粒度分布曲线
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此图为小型红细胞对血小板曲线干扰曲 线图,机器可以认为 A 为 PLT,B 为 RBC,由 于 C 为 RBC,D 为 PLT,C 不一定等于 D,因此, 机器所示数值不一定准确,这时候最好用 手工方法检查.
A:白细胞二分类时,粒度分布曲线; B:白细胞三分类时,粒度分布曲线;
白细胞三分类时,需要使用特殊溶血剂,以 减少单核球的细胞质,及降低核的密度,故 MONO 位于 LYMP 与 NEUT 之间.此图为没有用 特殊溶血剂的粒度分布曲线,不易进行三分 类.
血小板凝集时,对淋巴曲线干扰较大
血液学.
当溶血不良,肝病及婴儿血液时,曲线 乱七八糟
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血液分析仪
A.血液分析仪的异常发现限度
机器
异常报告
正常报告
手工
异常
真正异常(TP)
假伪正常(FN)
正常
假伪异常(FP)
真正正常(TN)
T:True(真)
F:False(伪)
P:Positive(异常,阳性)
N:Negative(正常,阴性)
注:1.手工指由专家确认的手工检测结果;
血液定量
注射式 SRV 旋转阀
血液学.
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H. 粒度分布曲线分析
1·红细胞粒度分布曲线分析:
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A :MCV 正常时,红细胞的粒度曲线,此 时,曲线最大值约为90fL;
B:贫血时,由于红细胞内缺乏HGB, 红细胞小型,使曲线左移;
C:当有大量未成熟红细胞在静脉血中 时,红细胞大型,曲线右移;
2.要尽量减少假伪正常与假伪异常的检测结果;
3.假伪正常与假伪异常都应该尽量低但两者调整方法有矛盾.
4.假伪正常数量应尽量低(5%以下),可通过提高仪器灵敏度实现,但这时 FP
更高.
5. 假伪异常可稍高(大约30%),通过降低仪器灵敏度实现,但这时 FN 更高;
6. 假伪正常数值高,检测员忽视异常结果的可能性增加,导致误诊的可能性;
───
Hgb
吸收氧气及铁分 11-18g/dl
───
MCV
------
80-100 fl
Hct/Rbc
MCH
------
28-32 pg
Hgb/Rbc
MCHC
------
32-36 g/dl
Hgb/Hct
2.RBC , WBC , PLT , HGB 的检测方式、使用试剂及稀释倍率:
项目
检测方式
使用试剂
装置:以交流电作为输入信号. 优点:可得到细胞内核的信息,颗粒上的情报(信息),维修率低,不需精密的(光
线)调整。 缺点:制造困难,要求波的信号稳定;不易得到细胞的外部大小信息.
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B.HCT 体积测定原理:
1.手工检测 HCT 红血球容积—毛细管法
内径:1mm 长度:10cm 吸入检体
血液学.
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2. 白细胞的功能 产生人体免疫机能,直接攻击外来细菌或产生抗体抗源反应。 正常值:4000──9000/µL
单核球
侦察
直接攻击
细菌
情报通信
T 型淋巴球(细胞性免疫) B 型淋巴球(体液性免疫)
包围
产生
抗体
* 嗜酸性球协助产生抗体
3。异常举例: 艾滋病:患者体内无淋巴球。 白血病:患者体内白细胞数量增加但功能不正常(恶性增殖)。 异常 :正常情况下,静脉血中幼稚细胞量极少,当异常时,幼稚细胞量增加,当 大于1%时,应马上检查。
形态: (普通染色)
淋巴球
直径 7-17µm

近似球形
细胞质 淡青色
颗粒 赤紫色
粗大
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形态
单核球
15-20µm 凹陷倾向 青灰色 赤紫色 微细 多数
嗜中性球
12-15µm 杆状 淡橙色 橙褐色 微细 多数
嗜酸性球
13-1m8µ 分节 淡青色 赤橙色 粗大 充满
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嗜碱性球 10-15µm
不整形 淡褐色 暗紫色 大小都有 核上也有
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