高中生物 必修3 血球计数板使用及相关计算
高中生物血细胞计数板的计算方法
高中生物血细胞计数板是一种用来测定血液中白细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜酸细
胞数量的实验工具。
它的使用方法如下：
1. 首先，将血液样品滴入放射形板的中央洞中，约为30ul；
2. 然后，把放射形板放入放大镜下，以100X的倍率，把血液样品均匀地涂抹在板上；
3. 用10X的倍率来计数，把细胞分类，并把细胞数量记录下来；
4. 把所有细胞数量相加，乘以几何系数，得到总细胞数量；
5. 最后，把计算出来的结果，即总细胞数量，除以血液样本所滴入的体积，即可得到
血液中的细胞密度。
高中生物血细胞计数板的使用，为血液细胞检测提供了一种简便、快速、准确的方法，能够快速测定血液中的细胞种类及其比例，并为临床诊断提供重要的指导意义。
血球计数板计算方法
血球计数板计算方法
血球计数板是一种用于血液分析的仪器，可以用来测定红细胞数量、白细胞数量和血小板数量等。
其计算方法如下：
1.计算红细胞计数：在血球计数板的左侧，依次数两个大格子，每个大格子有25个小格子，每个小格子的面积是1/16个平方毫米。
将视野放大到40倍，使用显微镜对红细胞进行计数，记录在四个角落中的红细胞数量，并求平均值。
然后将平均值乘以20，即可得到每升血液中的红细胞数量。
2.计算白细胞计数：与计算红细胞计数类似，但是在视野中选择较深的区域，数出100个白细胞，并求平均值。
然后将平均值乘以200，即可得到每升血液中的白细胞数量。
3.计算血小板计数：在血球计数板的中央，有一列小的正方形格子，每个格子的边长为1/25毫米。
数出10个小正方形中的血小板数量，并求平均值。
然后将平均值乘以4000，即可得到每升血液中的血小板数量。
需要注意的是，使用血球计数板进行血液分析时，需要经过专业的培训和实践经验，才能得到准确的结果。
高中生物 关于血球计数板的使用及问题讨论
关于血球计数板的使用及问题讨论《培养液中酵母菌种群数量的动态变化》是新课标教材“必修3：稳态与环境”中的学生分组实验，该实验通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，尝试建构种群增长的数学模型并用数学模型解释种群数量的变化，说明制约种群个体数量变化的种群外部环境因素和种群内部因素。
在该实验中，需要测定酵母菌细胞数量。
测定细胞数目的方法有显微镜直接计数法、平板菌落计数法、光电比浊法等，教材采用的是较为简便、快速、直观的显微镜直接计数法。
因此，学会使用血球计数板进行准确计数，是该实验成功与否的关键。
虽然不同版本的教材推荐使用的血球计数板的规格不同，人教版建议使用2mm×2mm×0.1mm方格，苏教版推荐使用1mm×1mm×0.1mm方格，但是血球计数板的使用原理和方法是相同的。
笔者通过近年来对该实验的摸索，对血球计数板的使用和命题方面存在的一些问题进行了分析总结。
一、血球计数板的使用原理显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上（又称计菌器），于显微镜下直接计数，然后推算出含菌数的一种方法。
血球计数板是常用的计菌器之一。
血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。
方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室。
这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其容积为0.1mm3，即1mm×1mm×0.1mm方格的计数板；大方格的长和宽各2mm，深度为0.1mm，其容积为0.4mm3，即2mm×2mm×0.1mm方格的计数板。
在血球计数板上，刻有一些符号和数字(见图一)，其含义是：XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格；0.1mm为盖上盖玻片后计数室的高；1/400mm2表示计数室面积是1mm2，分400个小格，每小格面积是1/400 mm2。
血球计数板的使用方法
血球计数板的使用方法
血球计数板是一种用于测量血液中各种血球数量的实验室工具。
下面是使用血球计数板的一般步骤：
1. 准备工作：
- 清洁血球计数板：使用酒精或其他适当的清洁剂将血球计
数板彻底清洁，并确保完全干燥。
- 准备血液样本：采集血液样本，并将其置于抽血管中。
2. 充填血液样本：
- 将橡胶管连接至抽血管的一端，并将另一端放入含有适当
稀释液（例如乙醇，盐水等）的试管中。
- 轻轻压抽血管，让血液与稀释液混合，确保样本适当稀释。
3. 填充计数室：
- 将计数室的一角放入混合好的血液样本液中。
- 逐渐放松手指，使液体自然充满整个计数室。
4. 观察计数室：
- 使用显微镜，在10倍或40倍放大倍数下观察计数室的血
球图像。
- 记录计数室内的血球数量。
5. 计算血球数量：
- 将计数室中各种血球的数量进行计算和统计。
- 根据计数室内的面积和深度，计算总血球数量。
- 可以使用计数室所覆盖的血球数量与已知的面积，以得出
总血球数量的近似值。
6. 清洗和储存：
- 使用适当的清洁剂彻底清洗计数室，确保无血液残留。
- 将计数室储存在干燥，洁净的地方，以防止污染和损坏。
请注意，使用血球计数板可能需要一定的实验室训练和技巧，以确保准确性和可靠性。
在进行血液分析时，应遵循实验室的操作指南和安全规定。
血球计数板的计数方法
血球计数板的计数方法
血球计数板是一种常用的实验仪器，用于计算血球数量。
具体的计数方法如下：
1. 准备工作：首先，确保血球计数板干净，无污染。
可用洗涤剂和双蒸水进行清洗和冲洗，然后用无纹纸巾擦干。
2. 取血样：使用无菌针头采集一定量的血液样本，通常使用的样本量为0.02毫升。
3. 加样：将血液样本滴入血球计数板的计数区。
滴落的血液应均匀地分布在计数区的每个小方格内。
4. 观察：视觉放大镜或显微镜的帮助下，通过目镜观察计数区的血球数量。
5. 计数：随机选择若干个小方格，计算这些方格中血球的数量。
一般使用的计数面积为3个或4个方格。
6. 计算：将所选方格中的血球数量相加，然后乘以血球计数板的稀释倍数和倒干涉系数。
根据计算公式，可得出血球的浓度，常用单位为每立方毫米的血液中血球的数量。
7. 结果：将最终计算出的血球浓度记录下来，并报告给相关的医务人员或研究人员。
使用血球计数板进行血球计数时，需要严格按照操作规程进行，
避免出现污染或操作错误。
在完成计数后，要及时清洗血球计数板，以备下次使用。
血球计数板计算公式
血球计数板计算公式
血球计数板是医学实验室常用的微生物检测仪器，它可以对血液中的红细胞、白细胞、血小板进行快速、准确的检测。
为了使计算结果更加准确，还需要利用计数板计算公式来计算各种血球的浓度。
血球计数板计算公式是一种计算血液中红细胞、白细胞、血小板浓度的方法，它采用血液分析仪读出的血球计数结果，根据一定的计算公式来计算各种血球的浓度。
具体的计算公式如下：
1、红细胞浓度（RBC）= 红细胞计数（RBC）× 10^6/抽血量（ml）
2、白细胞浓度（WBC）= 白细胞计数（WBC）× 10^9/抽血量（ml）
3、血小板浓度（PLT）= 血小板计数（PLT）× 10^9/抽血量（ml）
RBC：红细胞 WBC：白细胞 PLT：血小板
在计算时，还需要将单位换算成相应的国际单位，即每升血液中的红细胞浓度（RBC）为10^12/L，白细胞浓度（WBC）为10^9/L，血小板浓度（PLT）为10^9/L。
有了这个计算公式，医生就可以利用血液分析仪读出的血球计数结果，对血液中的红细胞、白细胞、血小板进
行快速、准确的浓度检测，有效诊断患者的疾病情况，为患者治疗和管理提供科学依据。
血球计数板计算公式的正确使用也有助于预防医疗事故的发生，避免患者在治疗过程中出现不尽如人意的后果。
因此，在使用血球计数板计算公式进行血液检测时，医生应当注意计算公式的正确使用，以保证检测结果的准确性。
血球计数板使用
（2）酵母菌常被用来探究细胞呼吸的方式，是因为它 在有氧和无氧条件下都能生存（属于兼性厌氧菌） 。
（3）血球计数板的计数室长和宽各为1mm，深度为0.1mm， 其中25×16型的血球计数板计数室以双线等分成25个中方格 ，每个中方格又分成16个小方格。一般计数时选取的中方格 位于计数室的 四个角和中央的五个中方格 。下图1表示的 是其中一个中方格的情况，对该中方格中的酵母菌进行计数 的结果是 24 个。如果计数的几个中方格中的细胞平均数 为20个，则1mL培养液中酵母菌的总数为 5×106 个。
三、血球计数板的使用注意事项
• 1．每天定时取样计数，记录数据。
• 2．从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震 荡几下，这样使酵母菌分布均匀。
• 3．如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培 养液进行稀释以便于酵母菌的计数。 具体方法是：摇匀试管，取1mL酵母菌培养液，加入成倍 的无菌水稀释，稀释n倍后，再用血球计数板计数，所得 数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4—5个酵母细胞为 宜。特别是在培养后期的样液需要稀释后计数。
B.对酵母菌计数时，用吸管吸取培养液滴满血球计数板的 计数室及其四周边缘，轻轻盖上盖玻片后即可镜检
C.在叶绿体色素提取实验中，研磨绿叶时应加一些有机 溶剂，如无水乙醇等
D.检测试管中的梨汁是否有葡萄糖，可加入适量斐林试 剂后，摇匀并观察颜色变化
1．（7分）酵母菌是探究细胞呼吸方式、种群数量变化的理 想实验材料。血球计数板是酵母菌计数的常用工具。结 合所学知识，回答下列问题：
• 2．加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专 用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻 片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防 止产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖 玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去；
血球计数板的使用(有图指导)
血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的•玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台•中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面，刻有一个方格网•方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用•这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm 3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造；它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16 X 25=25 X 16=40个小方格组成，见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1) 用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数•(2) 样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数，以每小方格内含有4-5 个酵母细胞为宜，一般稀释10倍即可.(3) 将血球计数板用擦镜纸擦净，在中央计数室上加盖专用的厚玻片.(4) 将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘，使菌 液缓缓渗入，多余的菌液用吸水纸吸取，捎待片刻，使酵母菌全部沉降 到血球计数室内.(5) 计数时，如果使用16格X 2格规格的计数室，要按对角线位，取左上 右上，左下，右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25 格X 1格的计数板，除了取其4个对角方位外，还需再数中央的一个中 格(即80个小方格)的酵母菌数.LJ L I.--—■ ■V ■ ■ \ ——hft ■ S ■ ■ * *■ ■ * - ■ . ntV R « ■ fl p- 1 d L W 1龊兀石的片敦了 血球片散板的恂适(6) 当遇到位于大格线上的酵母菌，一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7) 对每个样品计数三次，取其平均值，按下列公式计算每1ml菌液中3.计算公式(1) 16格X 2格的血球计数板计算公式：酵母细胞数/ml=100 小格内酵母细胞个数/100 X 400稀释倍数(2) 25格x16格的血球计数板计算公式：酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80 X 40X稀释I倍数4•血球计数板的清洁血球汁数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇，无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥•通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物•若不干净, 则必须重复清洗直到干净为止.。
血球计数板的使用-图文
对每个样品计数三次，再取其平均值。
N1=(n1-1+n1-2)/2 N2=(n2-1+n2-2)/2 N3=(n3-1+n3-2)/2
N=(N1+N2+N3) /3
N1=(n1-1+n1-2)/2
计数一个样品要从两个计数室中计得的平 均数值来计算。
n1-1
n1-2
N1=(n1-1+n1-2)/2
x个 = N/(5×16) ×16×25个
1cm3
(1mm × 1mm × 0.1mm÷1000)cm3
x = N/(5×16) ×16×25个× 1cm3 × 1000÷ (1mm × 1mm × 0.1mm)
=50000 N
②用血球计数板对藻细胞进行计数 的方法与步骤：
ⅰ检查计数室 先用显微镜对计数板的计数室进行镜检是否干净
如果规格为25格×16格的计数板统计计数池中央 大方格内四角及中央中格内(即80个小方格)的单 胞藻数，并记录。
计数时，小心移动载物台，从上到下，由左及右 又由右及左依次计数各小格内的细胞数。一般可 采取“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则 处理。凡压方格的上线和左线的细胞，统一算此 方格内的细胞，而压方格的下线和右线的细胞， 统一不算此方格内的细胞。
。若有污物，则需用清水清洗，吹干，用擦镜纸 擦拭干净。
盖玻片使用前浸在75%的酒精溶液中，使用时用 眼科镊取出，放在滤纸上吸水，用擦镜纸擦拭干 净。
将盖有盖玻片的计数板放在显微镜的载物台上， 调焦，用低倍镜找到计数区检查是否干净。
从试管中吸出培养液进行计数之前，要将 试管轻轻震荡几下，这样使单胞藻分布均 匀，防止单胞藻凝聚沉淀，提高计数的代 表性和准确性，求得的培养液中的单胞藻 数量误差小。
血球计数板计算公式图文
血球计数板计算公式图文血球计数板是一种用于测定血液中各种血细胞数量的仪器，它能够帮助医生诊断疾病和监测治疗效果。
在使用血球计数板进行血细胞计数时，需要按照一定的计算公式来计算出最终的结果。
本文将介绍血球计数板的计算公式，并详细解释如何使用这些公式进行计算。
血球计数板计算公式主要涉及到红细胞计数、白细胞计数和血红蛋白浓度的计算。
下面将分别介绍这三种计算的公式及其使用方法。
1. 红细胞计数的计算公式。
红细胞计数是指在一定体积的血液中红细胞的数量，通常以每升血液中的红细胞数来表示。
血球计数板上的红细胞计数是通过显微镜观察视野中的红细胞数量来进行测定的。
计算红细胞计数的公式如下：红细胞计数（每升）=（红细胞计数室内视野总计数）/（红细胞计数室内视野数）×10000。
在使用这个公式进行计算时，首先需要在显微镜下观察红细胞计数室内视野的总计数，然后再除以红细胞计数室内视野的数量，并乘以10000，即可得到红细胞计数的结果。
2. 白细胞计数的计算公式。
白细胞计数是指在一定体积的血液中白细胞的数量，通常以每升血液中的白细胞数来表示。
血球计数板上的白细胞计数也是通过显微镜观察视野中的白细胞数量来进行测定的。
计算白细胞计数的公式如下：白细胞计数（每升）=（白细胞计数室内视野总计数）/（白细胞计数室内视野数）×10000。
与红细胞计数类似，计算白细胞计数时也需要在显微镜下观察白细胞计数室内视野的总计数，然后再除以白细胞计数室内视野的数量，并乘以10000，即可得到白细胞计数的结果。
3. 血红蛋白浓度的计算公式。
血红蛋白浓度是指在一定体积的血液中血红蛋白的浓度，通常以每升血液中的血红蛋白含量来表示。
血球计数板上的血红蛋白浓度是通过血红蛋白计数仪器来进行测定的。
计算血红蛋白浓度的公式如下：血红蛋白浓度（g/L）=（血红蛋白计数室内视野总计数）/（血红蛋白计数室内视野数）×100。
在使用这个公式进行计算时，需要在血红蛋白计数仪器上观察血红蛋白计数室内视野的总计数，然后再除以血红蛋白计数室内视野的数量，并乘以100，即可得到血红蛋白浓度的结果。
高中生物 必修3 血球计数板使用及相关计算
5．对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上 的菌体数，一般可采取“数上线不数下线，数左线不数右 线”的原则处理，另两边不计数。
6．计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算， 对每个样品可计数三次，再取其平均值。
7．血球计数板的清洁 血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗 后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇、无水乙醇、 丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是 否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直 到干净为止。
血球计数板的使用方法步骤
1．镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。 若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数；
2．加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的 盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘， 让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生气泡， 多余培养液可用滤纸吸去；
3．计数。稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降到 计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下 找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。
1．每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计 数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。
2．从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡 几下，这样使酵母菌分布均匀，求得的培养液中的酵母菌数 量误差小。
例2、 检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法 检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管 吸ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余 液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳 液体的总体积为0．1 mm3。
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个 小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 ▲个／mL。 （参考答案：5n×105 ）
血球计数板的计数方法
血球计数板的计数方法血球计数板是一种用于计数血液中各种细胞数量的仪器。
它是由一块玻璃板和一根计数棒组成的。
玻璃板上有许多小方格，每个小方格的大小和深度都是固定的。
计数棒是一根细长的棒状物，一端有一个小圆球，可以吸取血液样本。
使用血球计数板进行计数时，需要按照一定的步骤进行操作。
需要准备好血液样本。
通常情况下，血液样本是从患者的静脉中抽取的。
抽取血液时需要注意卫生和安全，避免感染和交叉感染的发生。
抽取的血液样本需要用抗凝剂进行处理，以防止血液凝固。
接下来，需要将血液样本放在计数棒上。
将计数棒的小圆球轻轻地放在血液样本上，让血液自然吸入计数棒中。
吸入的血液量应该是适量的，不要过多或过少。
过多的血液会使计数棒上的血液过于密集，难以进行计数；过少的血液则会导致计数不准确。
然后，需要将计数棒上的血液样本滴在玻璃板上。
将计数棒的小圆球轻轻地触碰玻璃板上的小方格，让血液样本自然滴落在小方格中。
每个小方格中应该只有一滴血液，不要让血液溢出或者混合在其他小方格中。
接着，需要进行计数。
使用显微镜观察玻璃板上的小方格，计数板上的小方格通常是由9个大方格组成的。
在显微镜下，可以看到每个小方格中的血细胞数量。
根据每个小方格中的血细胞数量，可以计算出每个大方格中的血细胞数量。
最后，根据每个大方格中的血细胞数量，可以计算出整个计数板中的血细胞数量。
在进行计数时，需要注意以下几点：1. 计数时需要仔细观察，避免漏计或重复计数。
2. 计数时需要按照一定的规律进行，避免出现计数错误。
3. 计数时需要注意计数板上的各种细胞数量，包括红细胞、白细胞、血小板等。
4. 计数时需要注意计数板上的各种细胞形态和大小，以便进行鉴别诊断。
5. 计数时需要注意计数板上的各种细胞分布情况，以便进行统计分析。
血球计数板是一种非常重要的医疗仪器，它可以帮助医生进行血液检查和诊断。
使用血球计数板进行计数时，需要仔细操作，遵循一定的规律，以保证计数的准确性和可靠性。
血球计数板的计算公式
血球计数板的计算公式
在进行血球计数时，需要针对红细胞、白细胞和血小板进行单独的计数。
下面将详细介绍每个计算公式。
1.红细胞计数：
红细胞计数是指在血球计数板中计算出每升血液中红细胞的数量。
下面是计算红细胞计数的公式：
红细胞计数（每升）=（N/中央大格数）×10^12
其中，N为中央大格中红细胞的平均个数。
2.血红蛋白浓度：
血红蛋白浓度是指在每升血液中的血红蛋白量。
下面是计算血红蛋白浓度的公式：
血红蛋白浓度（克/升）=（M/中央大格数）×10^15
其中，M为中央大格中血红蛋白的平均个数。
3.血细胞比容：
血细胞比容是指红细胞体积与总血液体积之比。
通常使用红细胞比容指数（HCT）进行计算，下面是计算HCT的公式：
HCT=（红细胞体积/总血液体积）×100
4.白细胞计数：
白细胞计数是指在血液中计算出每升血液中白细胞的数量。
下面是计算白细胞计数的公式：
白细胞计数（每升）=（W/中央大格数）×10^9
其中，W为中央大格中白细胞的平均个数。
5.血小板计数：
血小板计数是指在血液中计算出每升血液中血小板的数量。
下面是计算血小板计数的公式：
血小板计数（每升）=（P/中央大格数）×10^9
其中，P为中央大格中血小板的平均个数。
需要注意的是，以上公式中的中央大格数可以通过显微镜观察和手动计数得出，然后使用适当系数进行修正。
为了获得准确的结果，通常需要计数多个中央大格，并取平均值。
血球计数板的使用方法
血球计数板的使用方法与计算一、计数室的两种规格计数室分为两种规格：2mm×2mm 1mm×1mm ，但计数室厚度均为0.1mm2mm×2mm方格的计数 2mm×2mm表示计数室的边长，即一个大方格的边长。
所以计数区的总体积为0.4mm3。
1mm×1mm方格的计数 1mm×1mm表示计数室的边长，即一个大方格的边长。
所以计数区的总体积为0.1mm3。
计数室通常也有两种规格：一种是16×25型，即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是25×16型，即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。
但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。
右图是25×16型：二、血球计数板的使用方法1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释，以每小格的菌数可数，通常４－５个为度。
计算出的结果要乘以稀释倍数。
2．取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。
3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
先盖盖玻片，再加悬液 4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。
将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。
由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。
5．计数时若计数区是由16×25个中方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个中方格（即4×25=100小格）的菌数。
如果是25个中方格组成的计数区，除数上述四个中方格外，还需数中央1个中方格共5个中方格（5×16=80小格） 6. 为了保证计数的准确性，避免重复计数和漏记，在计数时，对沉降在格线上的细胞的统计应计相邻两条边。
血细胞计数板计数方法及公式
血细胞计数板计数方法及公式下面将详细介绍血细胞计数板的计数方法及相关的公式。
一、准备工作：1.准备好血液样品：迅速取血液样品，一般采用患者的静脉血，因为静脉血液的成分更为稳定。
将血液样品加入适量的稀释液中，常用的稀释液有伊城液和吐温液等。
2.拿出一块血细胞计数板：血细胞计数板有两个组成部分，一个是红细胞计数板，另一个是白细胞计数板。
一般情况下，我们会使用红细胞计数板进行血细胞计数。
3.准备显微镜和计数板显微镜片：显微镜是用来观察血细胞计数板中细胞数量的工具。
计数板显微镜片上有横向和纵向的方格，每个小方格都有固定的尺寸。
二、计数方法：1.调整显微镜：先将显微镜放在目视位置，然后调整出满足观察血细胞计数板的清晰图像。
通过调整目镜和近物镜的位置，确保目标细胞在显微镜视野的中心区域。
2.选择计数板区域：在血细胞计数板中选择一个区域进行计数，应尽量选择相对均匀的区域。
计数板中的小方格可以根据需要选择计数的数量。
通常，我们选择九个小方格，并计算它们中细胞数量的平均值。
3.计数细胞数量：使用显微镜在所选区域内计数细胞的数量。
红细胞计数时只计数在上、左边线和板心线上的细胞，不计数在下、右边线上的细胞；白细胞计数时只计数在上、右边线和板心线上的细胞，不计数在下、左边线上的细胞。
4.计算细胞数量：根据计数得到的细胞数量和所选计数的小方格数量，可计算出血液样品中细胞的浓度。
三、计算公式：血液中各种细胞的数量可以通过血细胞计数板的计数结果来计算。
以下是常用的计算公式：1.红细胞计数（RBC）：RBC (cells/μl) = (细胞计数/小方格数) × 稀释倍数2.白细胞计数（WBC）：WBC (cells/μl) = (细胞计数/小方格数) × 稀释倍数× 视野因数3.血红蛋白浓度（Hb）：Hb (g/dl) = (所选小方格内红细胞的平均数× 见识之因数) × 稀释倍数× 104. 血小板计数（Plt）：Plt (cells/μl) = (细胞计数/小方格数) × 稀释倍数× 恒定因素4.平均红细胞容积（MCV）：MCV (fl) = Hb (g/dl) / RBC (cells/μl)5.平均红细胞血红蛋白含量（MCH）：MCH (pg) = Hb (g/dl) / RBC (cells/μl)以上公式中，"细胞计数"是通过显微镜计数得到的细胞数量，"小方格数"是选择的计数板中的小方格数量，"稀释倍数"是将血液样品稀释到适宜浓度的倍数，"视野因数"、"常量因数"和"平均红细胞表面积"等是根据实验条件和仪器进行校正的常数。
关于血球计数板的使用及相关问题
个小方格细胞总数 ×400×10000×稀释倍数血球计数板的构造（三）（25×16） 二、血球计数板的使用方法步骤 1．镜检计数室。
在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。
若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数； 2．加样品。
将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生气泡，多余培养液可用滤纸吸去； 3．计数。
稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后，先在低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。
三、血球计数板的使用注意事项 《培养液中酵母菌种群数量的动态变化》实验是一个历时较长（7天左右）的实验，事前一定要做好周密的计划，定程序、定时间、定人员。
每天采用抽样检测法使用血球计数板对酵母菌进行计数，在计数时应从以下几方面注意。
1．每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。
2．从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几下，这样使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚沉淀，提高计数的代表性和准确性，求得的培养液中的酵母菌数量误差小。
3．如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养液进行稀释以便于酵母菌的计数。
具体方法是：摇匀试管，取1mL 酵母菌培养液，加入成倍的无菌水稀释，稀释n 倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘以稀释倍数。
以每小方格内含有4—5个酵母细胞为宜。
特别是在培养后期的样液需要稀释后计数。
4．活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时，即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为1个酵母细胞。
5．对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数，一般可采取“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则处理，另两边不计数。
计数时，如果使用16格×25格规格的计数室，要按对角线位，取左上、右上、左下、右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数；如果规格为25格×16格的计数板，除了取其4个对角方位外，还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。
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3．计数。稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降到 计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下 找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。
1．每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计 数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。
2．从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡 几下，这样使酵母菌分布均匀，求得的培养液中的酵母菌数 量误差小。 3．如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养 液进行稀释。具体方法是：摇匀试管，取1mL酵母菌培养液， 加入成倍的无菌水稀释，稀释n倍后，再用血球计数板计数， 所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4—5个酵母细胞 为宜。
血球计数板的使用方法步骤
1．镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。 若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数； 2．加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用 的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边 缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生 气泡，多余培养液可用滤纸吸去；
7．血球计数板的清洁 血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗 后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇、无水乙醇、 丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是 否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直 到干净为止。
例1、通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若 计数室为1mm×1mm×0.1mm方格，由400个小方格组 成，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 ▲ 后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有 5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 ▲ 个。 （参考答案：稀释；2×10）
例3、（2008江苏高考31．） （4）在整个实验过程中，直接从静置的培养瓶中取培 养原液计数的做法是错误的，正确的方法是 ▲ 和 ▲ 。 （5）实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板 的做法是错误的，正确的方法是 ▲ 。 （参考答案（4）摇匀培养液后再取样 样液稀释后再 计数（5）浸泡和冲洗）
例2、 检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法 检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管 吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余 液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳 液体的总体积为0．1 mm3。
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个 小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 ▲个／mL。 （参考答案：5n×105 ）
4．活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时， 即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半菌应当计数同侧相邻两边上 的菌体数，一般可采取“数上线不数下线，数左线不数右 线”的原则处理，另两边不计数。 6．计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算， 对每个样品可计数三次，再取其平均值。