生化仪的临床应用
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➢更换试剂或是批号不同时应该校准后 再用。
➢室内质量控制出现异常波动或 偏移好 时，此项目应该重新校正。
➢仪器更换部件或是大修过以后所有项 目均应该矫正一次。
19
分析仪的校准
【校准方法】 校准物的选择： 1.两点法校准：多数非酶类的检测使用两点校
准，其曲线应该是过原点的一条直线。 2.多点校准:应用一定梯度的校准液进行校准，
双波长：干扰物的光吸收会出现光散射或是 非特异性光吸收
主波长：待测物特定的吸收波长 副波长：干扰物在主波长的吸收与副波长的
吸光率越接近越好如：己糖激酶法检测GLU， 为了消除Hb的干扰选择340/380nm
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温度与分析时间
【分析温度】 一般设定在体温（370C) 【分析时间】 1终点法：一般是选择开始的时间（即选择实际与样本
仪器校准：波长、温度、加样量、空 白吸光度（一般由厂家来完成）
项目校准：是常规工作进行的，也就 是我们所说的调标。
基质效应：样本校准物处于相同的条 件下进行
校准物的选择：应该溯源的国际或国 家的参考方法
附：不允许用定值质控品代替校准物质。
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分析仪的校准
【校准频率】
➢系统校准：若是封闭系统则校准周期 可以长一些，若是开放系统校准频率 应该高一点。
双波长的作用：消除背景干扰
11
连续监测法
1.一步法：酶的检测底物就是所检测的 物质
Ea
Ei
2.酶偶联反应：s1+s2——p1+p2——
p3+p4
Ea：辅酶
Ei：指示酶
12
比浊法
检测物质对光的散射或透射强度， 测定的是浊度而非比色，可用于终点 分析，也可用于动态分析。 ➢化学比浊：血清中K、Na离子的检测 ➢免疫比浊：透射比浊/散射比浊，透射 比浊采用终点法，自动生化仪最常用， 一般用作特定蛋白的检测，如：载脂 蛋白、急时相蛋白、药物，而散射比 浊用的仪器是特制的。
【工作原理】 以人工操作的工作模式，用机械臂代替人工手臂的工
作，按设定的程序完成各项操作
【特点】
样品与试剂有固有的试剂或样本反映盘，个项目在各
自的反应杯中独立进行。
6
分离式模式图
7
干片式
【仪器类型】 ➢ 反射光度法：对试纸条上反应区通过反射光
光度法进行判别。
➢ 胶片涂层分析：把试剂片置于多层涂膜的反 应片上进行检测，可检测一个到几十个项目 项目
➢ 袋式分析仪：将时间与样本同时置于反应袋 中反映完毕将袋中物做成比色物质来检测
【特点】 液相反应在固相载体上进进行，化学、
光学、酶学、计算、于一身，操作简单检测 速度快，适于急诊或床前检测。
8
性能评价
【自动化程度：根据实验室的规模来制 定
【分析效率】根据工作量及样本的多少 来确定选择仪器的反应速度。
1
内容
了解生化分析仪的分类 常用的分析方法 生化仪的参数设置 生化仪的校准 质量控制 使用常见问题 维护与保养
2
生化分析仪的分类
➢ 按反映装置的结构 连续流动式（空气分段系统与非分段系统 离心式 分离式：目前最广泛的应用于临床 干化学法干片式 ➢ 按自动化程度分全自动与半自动 ➢ 按检测项目可分单通道与多通道 ➢ 按仪器的复杂程度可分小型、中型、大型
根据所做的项目及仪器的方法来 设定终点法、动力学法（上升或下降）
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波长
吸收曲线的低谷是空白波长，吸光度大而且 平的波长为分析波长；若使用光栅或单色光 器，光路采用后分光，波长更准确。
单波长：测定体系中含有一种组分或待测组 分的吸收波长与其他共存的物质的吸收波长 无重叠，有几个吸收峰的物质一般选择最大 吸收峰或是吸收峰处吸光度随波长变化较小 的的波长
3
连续流动式
【结构】 样品盘、比例表、混合器、透析器 【工作原理】
通过电脑来控制比例泵，将样本和实际注入到连 续的管道系统中，在一定温度下完成混合、去干 扰、保温、比色测定，经信号放大、运算处理最 后显示结果并打印 【仪器特点】
在检测过程中，样品与样品之间需要用空气进行 隔离，或是用空白试剂缓冲液/惰性液来隔离 • 空气分段系统：防止交叉污染 • 非空气分段系统试剂分段系统，每一次进样必须 在前一样品检测完毕才能开始，不能连续一次进 样。
多数是免疫透射比浊检测使用，由于其线性 较差，所以选择多点校准。 3.因数校准：酶类检测应用较多，近年来推出 的酶类标准品也可以采用两点校准。
【应用范围】根据检测项目来选择 【准确度与精密度】越高越好 【试剂的开放程度】开放程度越高灵活
性越大，但是系统的稳定性稍差
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常用的分析方法
终点法 连续监测法 比浊法 均相酶免疫分析
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终点法
单点检测：使用一种或是两种试剂， 检测反应到达终点时的吸光度如-ALB、 TP等
两点法：又称固定时间法，使用双试 剂或単试剂，如苦味酸测肌酐
4
离心式
【结构】 ✓ 加样：样品盘、吸样臂、试剂臂和电子控制部分 ✓ 分析单元：离心转盘、温控器、光学系统、信息
处理与显示系统。 【工作原理】
先将样品和试剂分别置于转盘相应的凹槽内， 在离心力的作用下，样品和试剂被甩到转盘外的 比色槽内并相互混合繁盛反应，一定时间后进行 比色。 【仪器特点】
反应器就是转盘，整个分析过程的每一步骤 几乎同时完成，分析速度快，适合同一项目的批 量检测。
的混合瞬间，这样可以除去实际与样本的空白）结 束时间一般以反应达终点时的时间来计算
ΔA=A2-A1 A2：终末吸光度 A1：初始吸光度 2.动态分析时间：选定读数的起始点。也就是说延迟
时间按后开始，结束时间一定要在线性反应期内。 计算按下公式：
ΔA/min=(A末-A始)/(T末-T始)
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分析仪的校准
5
分立式
【结构】 样品处理系统：模仿人工操作，识别样品与试剂加入
到反应器中，，有试剂盘，样品架、加液器、和搅拌器 等 ➢ 光学系统：光源、分光、比色、和信号拣流
➢ 温控系统：保持反应体系的温度恒定，有水浴、空气浴 和液相流动恒温系统
➢ 清洗：吸、注、擦：吸走废液-注入洗涤液或水、擦干杯 内壁
➢ 计算机处理系统：识别样品与试剂并完成样品与试剂的 加入与混合，最终处理计算数据并打印。
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全自动生化仪参数
样品与试剂量的设置 检测方法 波长 温度 分析时间 校正方法
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样品与试剂的量与方法
【样品与试剂量】 以手工法按比例缩减 根据仪器的特性确定加样量范围，最
小反应体积等情况自行设计 考虑到检测的灵敏度与线性范围，
试剂与样本量需要的多少是衡量一台 仪器品质的重要指标 【检测方法】
➢室内质量控制出现异常波动或 偏移好 时，此项目应该重新校正。
➢仪器更换部件或是大修过以后所有项 目均应该矫正一次。
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分析仪的校准
【校准方法】 校准物的选择： 1.两点法校准：多数非酶类的检测使用两点校
准，其曲线应该是过原点的一条直线。 2.多点校准:应用一定梯度的校准液进行校准，
双波长：干扰物的光吸收会出现光散射或是 非特异性光吸收
主波长：待测物特定的吸收波长 副波长：干扰物在主波长的吸收与副波长的
吸光率越接近越好如：己糖激酶法检测GLU， 为了消除Hb的干扰选择340/380nm
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温度与分析时间
【分析温度】 一般设定在体温（370C) 【分析时间】 1终点法：一般是选择开始的时间（即选择实际与样本
仪器校准：波长、温度、加样量、空 白吸光度（一般由厂家来完成）
项目校准：是常规工作进行的，也就 是我们所说的调标。
基质效应：样本校准物处于相同的条 件下进行
校准物的选择：应该溯源的国际或国 家的参考方法
附：不允许用定值质控品代替校准物质。
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分析仪的校准
【校准频率】
➢系统校准：若是封闭系统则校准周期 可以长一些，若是开放系统校准频率 应该高一点。
双波长的作用：消除背景干扰
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连续监测法
1.一步法：酶的检测底物就是所检测的 物质
Ea
Ei
2.酶偶联反应：s1+s2——p1+p2——
p3+p4
Ea：辅酶
Ei：指示酶
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比浊法
检测物质对光的散射或透射强度， 测定的是浊度而非比色，可用于终点 分析，也可用于动态分析。 ➢化学比浊：血清中K、Na离子的检测 ➢免疫比浊：透射比浊/散射比浊，透射 比浊采用终点法，自动生化仪最常用， 一般用作特定蛋白的检测，如：载脂 蛋白、急时相蛋白、药物，而散射比 浊用的仪器是特制的。
【工作原理】 以人工操作的工作模式，用机械臂代替人工手臂的工
作，按设定的程序完成各项操作
【特点】
样品与试剂有固有的试剂或样本反映盘，个项目在各
自的反应杯中独立进行。
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分离式模式图
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干片式
【仪器类型】 ➢ 反射光度法：对试纸条上反应区通过反射光
光度法进行判别。
➢ 胶片涂层分析：把试剂片置于多层涂膜的反 应片上进行检测，可检测一个到几十个项目 项目
➢ 袋式分析仪：将时间与样本同时置于反应袋 中反映完毕将袋中物做成比色物质来检测
【特点】 液相反应在固相载体上进进行，化学、
光学、酶学、计算、于一身，操作简单检测 速度快，适于急诊或床前检测。
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性能评价
【自动化程度：根据实验室的规模来制 定
【分析效率】根据工作量及样本的多少 来确定选择仪器的反应速度。
1
内容
了解生化分析仪的分类 常用的分析方法 生化仪的参数设置 生化仪的校准 质量控制 使用常见问题 维护与保养
2
生化分析仪的分类
➢ 按反映装置的结构 连续流动式（空气分段系统与非分段系统 离心式 分离式：目前最广泛的应用于临床 干化学法干片式 ➢ 按自动化程度分全自动与半自动 ➢ 按检测项目可分单通道与多通道 ➢ 按仪器的复杂程度可分小型、中型、大型
根据所做的项目及仪器的方法来 设定终点法、动力学法（上升或下降）
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波长
吸收曲线的低谷是空白波长，吸光度大而且 平的波长为分析波长；若使用光栅或单色光 器，光路采用后分光，波长更准确。
单波长：测定体系中含有一种组分或待测组 分的吸收波长与其他共存的物质的吸收波长 无重叠，有几个吸收峰的物质一般选择最大 吸收峰或是吸收峰处吸光度随波长变化较小 的的波长
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连续流动式
【结构】 样品盘、比例表、混合器、透析器 【工作原理】
通过电脑来控制比例泵，将样本和实际注入到连 续的管道系统中，在一定温度下完成混合、去干 扰、保温、比色测定，经信号放大、运算处理最 后显示结果并打印 【仪器特点】
在检测过程中，样品与样品之间需要用空气进行 隔离，或是用空白试剂缓冲液/惰性液来隔离 • 空气分段系统：防止交叉污染 • 非空气分段系统试剂分段系统，每一次进样必须 在前一样品检测完毕才能开始，不能连续一次进 样。
多数是免疫透射比浊检测使用，由于其线性 较差，所以选择多点校准。 3.因数校准：酶类检测应用较多，近年来推出 的酶类标准品也可以采用两点校准。
【应用范围】根据检测项目来选择 【准确度与精密度】越高越好 【试剂的开放程度】开放程度越高灵活
性越大，但是系统的稳定性稍差
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常用的分析方法
终点法 连续监测法 比浊法 均相酶免疫分析
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终点法
单点检测：使用一种或是两种试剂， 检测反应到达终点时的吸光度如-ALB、 TP等
两点法：又称固定时间法，使用双试 剂或単试剂，如苦味酸测肌酐
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离心式
【结构】 ✓ 加样：样品盘、吸样臂、试剂臂和电子控制部分 ✓ 分析单元：离心转盘、温控器、光学系统、信息
处理与显示系统。 【工作原理】
先将样品和试剂分别置于转盘相应的凹槽内， 在离心力的作用下，样品和试剂被甩到转盘外的 比色槽内并相互混合繁盛反应，一定时间后进行 比色。 【仪器特点】
反应器就是转盘，整个分析过程的每一步骤 几乎同时完成，分析速度快，适合同一项目的批 量检测。
的混合瞬间，这样可以除去实际与样本的空白）结 束时间一般以反应达终点时的时间来计算
ΔA=A2-A1 A2：终末吸光度 A1：初始吸光度 2.动态分析时间：选定读数的起始点。也就是说延迟
时间按后开始，结束时间一定要在线性反应期内。 计算按下公式：
ΔA/min=(A末-A始)/(T末-T始)
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分析仪的校准
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分立式
【结构】 样品处理系统：模仿人工操作，识别样品与试剂加入
到反应器中，，有试剂盘，样品架、加液器、和搅拌器 等 ➢ 光学系统：光源、分光、比色、和信号拣流
➢ 温控系统：保持反应体系的温度恒定，有水浴、空气浴 和液相流动恒温系统
➢ 清洗：吸、注、擦：吸走废液-注入洗涤液或水、擦干杯 内壁
➢ 计算机处理系统：识别样品与试剂并完成样品与试剂的 加入与混合，最终处理计算数据并打印。
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全自动生化仪参数
样品与试剂量的设置 检测方法 波长 温度 分析时间 校正方法
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样品与试剂的量与方法
【样品与试剂量】 以手工法按比例缩减 根据仪器的特性确定加样量范围，最
小反应体积等情况自行设计 考虑到检测的灵敏度与线性范围，
试剂与样本量需要的多少是衡量一台 仪器品质的重要指标 【检测方法】