实验2 药物对小鼠的袪痰作用

实验 远志对小鼠的祛痰作用

小鼠气管酚红法

【目的】

1．学习用酚红呼吸道排泌试验来筛选祛痰药的方法。

2．观察远志和氯化铵对小鼠气管酚红排泌量的影响。

【原理】 给小鼠腹腔注射指示剂酚红后，后者可以部分地从气管分泌排出。远志能增强呼吸道的分泌功能，从而相应增加酚红的排泌量。经碳酸氢钠溶液灌洗气管后，使灌洗液显色，用分光光度计检测OD 值，查得酚红的排泌量，从而检验药物的祛痰作用。

【材料】

1．动物 昆明种小鼠，清洁级，雌雄兼用。

2．器材 天平与砝码、注射器（1ml ）、5号针头、7号针头、小鼠灌胃器、手术剪、眼科剪、眼科镊、蛙板、蛙钉、橡皮泥、丝线、试管、721型分光光度计。

3．药品 1g/ml 远志水煎液、氯化铵50 mg/ml 、0.005g/ml 酚红溶液、5%碳酸氢钠溶液、1mol/L 氢氧化钠溶液、生理盐水。

0.005g/ml 酚红溶液的配制：酚红0.5g ，以1mol/L NaOH 5ml 溶解，加生理盐水至100ml 。

【方法】

取6只小鼠随机分为三组，称重、标记。分别灌胃给0.2 ml/10g 远志水煎液、氯化铵溶液和生理盐水。30min 后，分别腹腔注射酚红溶液0.1ml/10g 。30min 后，处死动物，解剖分离气管，于喉头下将磨平的7号针头插入气管约0.3cm ，用丝线结扎固定后，用1ml 注射器抽取碳酸氢钠溶液0.5ml ，通过针头来回灌洗呼吸道3次，最后1次将灌洗液抽出注入试管中。上述操作连续3次，共冲洗9次，抽得灌洗液约1.2~1.5ml ，置于试管中，离心，用721型分光光度计、波长546nm ，读取吸收度OD 值。在标准曲线上查对相应的酚红浓度，比较给药组、对照组气管段酚红排泌量的差别。

【结果】

汇总全班实验结果，进行检验统计分析。

远志对小白鼠气管段酚红排泌量的影响（ _

x ±s ） 组 别

剂量（g/kg ） 动物数 OD 值 气管酚红排泌量（µg/ml ） 远志水煎液组

氯化铵溶液组

生理盐水对照组

【讨论】

【结论】

【注意事项】

1．酚红必须准确注入腹腔内。

2．解剖操作及针头插入气管时应避免损伤血管，以免血液混入灌洗液而干扰比色。

3．必须按时处死动物，及时灌洗；事先应掌握好个体间给药间隔。

4．灌洗操作应轻盈连贯，抽得灌洗液量应一致。