活性污泥中菌胶团及生物相地观察
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----------------------------------- 活性污泥中菌胶团及生物相的观察
一、实验目的
1. 观察活性污泥(或生物膜)的微生物种类及性状。
2. 测定污泥沉降比及活性污泥(或生物膜)中动物的数目。
3. 初步判断污水处理的运行状况是否正常。
二、实验原理
活性污泥中生物相较复杂,以细菌,原生动物为主。还有真菌、后生动物等。某些细菌能分泌胶粘
物质形成菌胶团,进而组成污泥絮绒体(绒粒)。
三、实验材料
1. 活性污泥(或生物膜)取自污水处理厂曝气池
2. 其他量简(100mL,载玻片,盖玻片,滴管,镊子,计数板等。
3. 仪器显微镜
采用厚玻璃割成9cm长,4cm宽的长方形,玻璃厚度以0.3〜0.4cm为宜。利用氢氟酸腐蚀法,使玻板中央刻上10X 10=100个小方格,小方格的大小没有严格规定,只要一片大号盖玻片能盖格子有余和便于在显微镜下计数就可以了。用大号盖玻片切成宽约0.7cm的玻条,用阿拉伯树胶粘在计数用的小方格的
四周,便呈一周凸起的边框。这样,就制成了一块微型动物计数板。
四、实验方法
1. 测污泥沉降比(SV30
肉眼观察,取曝气池的混合液置于100mL量筒内,直接观察活性污泥在量筒中呈现的絮绒体外观及沉降性能。
2. 观察活性污泥生物相
(1)制备水浸片取活性污泥混合液1〜2滴于载玻片上,加盖玻片制成水浸标本片。
(2)低倍镜观察观察生物相的全貌,要注意污泥结构松紧程度,菌胶团和丝状菌的比例及生长状
况,观察微型动物的种类及活动状况。
①污泥絮粒
污泥絮粒性状是指污泥絮粒的形状、结构、紧密度及污泥中丝状菌的数量。镜检时可把近似圆形的
絮粒称为圆形絮粒,与圆形截然不同的称为不规则形状絮粒。絮粒中网状空隙与絮粒外面悬液相连的称为开放结构;无开放空隙的称为封闭结构。絮粒中菌胶团细菌排列致密,絮粒边缘与外部悬液界限清晰的称为紧密的絮粒;边缘界线不清的称为疏松的絮粒。
②丝状微生物
活性污泥中的丝状菌数量是影响污泥沉降性能最重要的因素。当污泥中丝状菌占优势时,可从絮粒中向外伸展,阻碍了絮粒间的浓缩,使污泥SV30值和SVI值升高,造成活性污泥膨胀,根据污泥中丝状菌
与菌胶团细菌的比例,可将丝状菌分成如下五个等级:
0级:污泥中几乎无丝状菌存在;土级:污泥中存在少量丝状菌;
+级:存在中等数量的丝状菌,总量少于菌胶团细菌;
+ +级:存在大量丝状菌,总量与菌胶团细菌大致相等;
+ ++级:污泥絮粒以丝状菌为骨架,数量超过菌胶团而占优势。
(3)高倍镜或油镜观察
鉴别丝状微生物的种类,常见丝状微生物的形态特征如下:
①球衣菌
由许多圆柱形细胞排列成链,外面包围一层衣鞘。
②贝氏硫菌
具无色而宽度均匀的丝状体,与球衣菌不同的是外面无衣鞘,各丝状体分散不相连接,丝状体由圆
柱形细胞紧密排列而成,有时可见硫粒。
③发硫菌
由细胞排列成丝状体,具薄鞘,但一般镜检时不可见,其丝状体基部有吸盘,可使菌体固着于基质上生长。
④霉菌
霉菌菌丝有隔膜和直分枝,而且较丝状细菌的丝状体粗。
(4)鉴定动物种类在高倍镜下画出动物种类的形态草图,同时注意观察原生动物的形态特征和运
动方式,如钟虫体是否存在食物泡,纤毛环的摆动情况。
3. 动物的计数步骤如下:
(1 )取活性污泥曝气池混合液盛于烧杯内,用玻棒轻轻搅匀,如混合液较浓,可稀释一倍后观察。
(2)取洁净的滴管一支(滴管每滴水的体积应预先测定),一般可选用一滴水的体积为1/20mL的滴管,吸取搅匀的混合液,加一滴(1/20mL )到计数板的中央方格内,然后加上一块洁净的大号盖玻片,使其四周正好搁在计数板四周凸起的边框上。
(3)用低倍镜进行计数,注意所滴加的液体不一定布满整个100格小方格,计数时,只要把充有污泥混合
液的小方格挨着次序一行行计算即可,若是群体,则需将群体和群体上的个体分别计数。
(4)计算,假定在稀释了一倍的一滴水样中测得钟虫50只,则每毫升活性污泥混合液中含钟虫数应为:
50 只X 20 X 2=2000 只
五、实验报告
1•将镜检和计数结果填入表5-2。
2. 绘出所见原生动物和微型后生动物形态图。
3. 试对污水厂活性污泥质量作岀初步评价。
注意事项:
①如果用油镜观察,最好将污泥絮体制成染色片。
②如无计数板,则可用下法进行计数:
a. 取洗净的滴管一支吸取混合均匀的曝气池混合液或已稀释的混合液,滴1滴在载玻片的中央,以盖
玻片轻轻盖好水滴,要避免玻片内形成气泡。
b. 将标本放在显微镜低倍镜下计数。计数时,先将视野放在盖玻片的右上角(可根据各人的习惯放在另一角)然后移动玻片,视野即可随之从上而下,从右到左通过。
c. 生物滤池和生物转盘上的生物膜形成胶状,浓度大,一般都须稀释后计数,其适当的稀释比可在实践中摸索。
d. 上述计数方法仅适用于原生动物和轮虫,对个体较大的微型动物和线虫等,则须加大计数容量,以
免造成误差。
表5-2 活性污泥的镜检和计数结果
絮体形态圆形、不规则形
絮体结构开放;封闭
絮体紧密度紧密;疏松
丝状菌数量0;±;+;++;+++
游离细菌几乎不见;少;多
优势种动物名称及状态描述
其它动物种名称
每滴稀释液中的动物数每毫升混合液中的动物数