进出口保健食品中育亨宾伐地那非西地那非西力士含量的测定方法

《保健食品中育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非含量的测定方法液相

色谱-质谱/质谱法》编制说明

一、任务来源

本标准是根据国家认监委下达的计划编号为“2009B568”制标任务编写的。本标准由湖南出入境检验检疫局承担研究和起草。

二、研究目的

育亨宾又称痿必治为非激素类药物，最早是从产于西非洲一种植物(Corynante Yohimbe)树皮中提出的一种生物碱,现已有合成品。自古以来育亨宾即在非洲用作催欲药，1900年哥维及苗勒等应用于因神经衰弱所致的阳萎及麻痹性不感症取得疗效，因而用于临床。其药理作用能使血管平滑肌扩张，降低交感神经张力，通过扩张阴茎的动脉，增加阴茎海绵窦血流量；使阴茎勃起，并使中枢性交感神经兴奋。适用于精神性、神经性、血管性及糖尿病性阳痿。是目前较为肯定而且应用最多的一种植物性治疗勃起功能障碍的药品，一般服用剂量为500mg。但育亨宾并不适合正在服用抗忧郁剂的人仕服用﹐也不适合患有肾脏疾病或胃溃疡者服用。此外，服用高剂量的育亨宾可能会导致严重的副作用﹐包括丧失肌肉功能﹐血压升高，忧虑﹐心悸﹐眩晕等。对有些人而言，育亨宾能引起幻觉。某些食物如芝士﹐动物肝脏﹐红酒等﹐也应避免与育亨宾同时进食﹐以免令血压升高。

西地那非俗称伟哥，磷酸二酯酶-5（inhibitor of phosphodiesterase type 5,简写PDE-5）选择性抑制剂,原为一种抗心绞痛的新药，由于其在临床试验中被发现有治疗男性勃起功能障碍（Erectile dysfunction,ED）的作用而改变了研发方向，一般在用药后40 min 见效，剂量为50 mg。与其作用相似的药物还有德国Bayer与葛兰素史克公司联合开发的伐地那非，于2003 年8 月获得FDA 批准在美国上市，此药用后10 min 起效，一般剂量为10 mg，对PDE-5的抑制能力是西地那非的5倍，因而在临床上5、10、20 mg伐地那非的作用相当于25、50、100 mg 西地那非的作用。美国Lilly公司开发的他达拉非，商品名他达那非也获得欧盟批准上市，其对磷酸二酯酶5有更好的选择性，促进阴茎勃起的效果可长达36个小时。他达那非的平均起效时间是16 min。服用量为10-20 mg，建议东方人服用量为25-35 mg。磷酸二酯酶5抑制剂的不良反应主要表现在中枢神经、循环和视觉系统，常见有头痛、面部潮红、焦虑、消化不良、腹部不适、肌痛、骨痛、血尿；循环系统表现为心律失常、心梗、心脏猝死、脑出血、高血压；视觉系统表现为对光敏感、视力模糊、复视、眼肿、眼压高、视物蓝绿。磷酸二酯酶5抑制剂18岁以下的人禁用，对在6个

月内曾发生过心梗、中风、致死性心律失常、低血压或高血压者、不稳定心绞痛者、冠状动脉病和视网膜色素沉着患者慎用。对阴茎畸形者慎用。急性冠状动脉综合征、冠心病明显缺血、心力衰竭、急性心梗、中风、心律失常者忌用。对有出血性疾病或胃溃疡、遗传性色素性视网膜炎、脊髓损伤等中枢神经系统病、盆腔手术或创伤及接受放疗者慎用。当服用较大剂量的西地那非时会引起头痛、消化不良、头晕、皮疹等不良反应，更为严重的是，西地那非能增强硝酸酯类药物的降压能力，与任何一种短效或长效的硝酸酯类药物同时使用时，可能会引起致命性低血压反应，甚至导致突然死亡。

育亨宾、西地那非、伐地那非、他达那非等均为处方药，因此在性保健品中被禁止使用，目前不法保健品厂商为了使产品到达中药难以达到的快速效果，在一些保健食品中加入这些违禁药物，严重威胁了服用者的身体健康，影响出口保健品的信誉。卫生部和中国食品药品管理局等部门多次发文（如《卫生部、国家经贸委、工商总局、药品监督局关于开展保健食品专项整治工作的通知》（卫法监发[2002]172号）要求查处保健食品中添加此类药物的违法行为，因此对保健品中的壮阳违禁药物进行检测具有非常重要的意义。

育亨宾、西地那非、伐地那非和他达拉非化学性质信息见表1。

三、国内外研究现状

目前，国外对西地那非、伐地那非、他达拉非检测方法报道较少[1-4]，且多为单个或两个同时检测的方法，国外报道的较多，有液相色谱-紫外检测法、气相色谱-氢火焰检测法、ESI-HPLC-MS 法及ESI-LC/MS/MS等[5-15]，但对育亨宾的检测鲜有报道，更未见同时检测保健食品中这四种违禁药物的报道，因而该方法具有创新性和现实意义。国内外对西地那非、伐地那非、他达拉非检测方法一览表见表2。

表 1 育亨宾、西地那非、伐地那非和他达拉非的基本化学信息

表2 西地那非、伐地那非、他达拉非检测方法一览表

四、术语（《中国药典2005 年版》）

片剂：系指药物与适宜的辅料压制而成的圆片状或异形片状的固体制剂，抗疲劳保健食品

只要是口服普通片。

胶囊剂：系指药物或叫加有辅料充填于空心胶囊或密封于软质囊材中的固体制剂。抗疲劳

保健食品胶囊剂主要为硬胶囊和软胶囊两类，供口服用。

硬胶囊（通常称为胶囊）：系采用适宜的制剂技术，将药物或加适宜辅料制成粉末、颗粒、小片或小丸等充填于空心胶囊中的胶囊剂。

软胶囊：系将一定量的液体药物直接包封，或将固体药物溶解或分散在适宜的敷形剂中制

备成溶液、混悬液、乳状液或半固体，密封于球形或椭圆形的软质囊材中的胶囊剂。可用滴制

法或压制法制备。软质囊材是由胶囊用明胶、甘油或其他适宜的药用材料单独或混合制成。

口服溶液剂（药酒与口服溶液剂一致）：系制药物溶解于适宜溶剂中制成供口服的澄清液体制剂。

五、方法论证

1、样品制备

本标准方法的样品制备按照《中国药典2005 年版附录I 制剂通则》的取样量及药典相关剂型制备方法进行。对于片剂、胶囊剂进行检测时，最大的取样量均为20 片（粒），口服溶液剂最大的取样量均为10 支。

片剂试样的制备方法：随机取同一批号的供试品20 片，研细（用研钵充分研成粉末状试样）。

硬胶囊试样的制备方法：随机取同一批号的供试品20 粒，倾出内容物，研细（用研钵充分研成粉末状试样）。

软胶囊试样的制备方法：随机取同一批号的供试品20 粒，将内容物全部挤到一离心管中，在混匀器上充分混匀，作为试样。

口服溶液剂试样的制备方法：随机取同一批号的供试品10 支（瓶），取等量体积样品到同一容器中混匀作为试样。

2、试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

2.1 甲醇：液相色谱级。

2.2 乙腈：液相色谱级。

2.3 乙酸：优级纯。

2.4 0.1 %乙酸水溶液∶甲醇混合液：1+1（V/V）。

2.5 育亨宾（yohimbin）CAS号：146-48-5，分子式：C21H26N2O3）标准品纯度大于等于99.0%。

2.6 他达那非（tadalafil，CAS号：171596-29-5，分子式：C22H19N3O4）标准品纯度大于等于99.0%。