实验5淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测讲解

到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制
剂，可以用来降解残留在土壤中的有机
磷农药，与用微生物降解相比，其作用
不需要适宜的（ D ）
A、温度
B、PH
C、水分
D、营养
2、目前，日用化工厂大量生产的酶 制剂，其中的酶大都来自 D A、化学合成 B、动物体内 C、植物体内 D、微生物体内
3.酶的固定方法不包括( D )。 A. 将酶吸附在固体表面上 B．将酶相互连接起来 C．将酶包埋在细微网格里 D．将酶制成固体酶制剂，如加酶洗衣粉 中的酶
在试管中加入1ml可溶性淀粉，再加几滴淀 粉酶柱流出液，保温几分钟后用碘液检验。 如显蓝色，则流出液中没有淀粉酶了。
2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?
可以在高温下使淀粉水解快，而且酶不会因 高温上而失活，所以可在一些需要高温加热 同时又要水解淀粉的反应中使用。
1、研究认为，用固定化酶技术处理污
染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得
用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上，一定浓度的 淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精， 用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色表明水解产 物糊精生成。
淀粉α-淀粉酶 糊精β淀粉酶 麦芽糖糖化淀粉酶 葡萄糖
遇碘显蓝色
遇碘显红色
设备及用品:
5ml塑料注射器50ml, 自行车用气门心及夹子, 注射器架试管,微量离心管3支,烧杯,滴管
Байду номын сангаас
3、酶制剂的优点
在食品、化工、轻纺、医药等领域大规 模使用酶制剂，说明酶制剂使用有很多 优点，你能思考后举出一些吗？
催化效率高、低能耗、低污染等。 酶制剂的使用有缺点吗？
固定化酶:
将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介 质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
固定化的方法:
吸附法、共价偶联法、交联法、包埋法等
实验目的:
1、制备固定化α–淀粉酶 2、进行淀粉水解的测定
使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶，
作用的最适温度为50~75℃；
实验原理：
最适PH为5.5~7.5
第二部分 :酶的应用
直接使用酶缺点:
易失活、难回收、难分离
1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂
固2等、定条溶化件液敏酶中感的优，酶易点难失：回活收；，不能被再次利用，
提高了易生分产离成、本能；反复利用 1、3、酶反既应能后与混反在应产物物接中触，，影又响能产与品产质物量分。离； 2(、难酶分可离以）被反复利用。
5ml注射器 反应柱 固定化酶
气门心 夹子
设备及用品:
5ml塑料注射器50ml, 自行车用气门心及夹子, 注射器架试管,微量离心管3支,烧杯,滴管
材料:
1.a-淀粉酶的固定化:将5mga-淀粉酶溶于4ml蒸 馏水中..再加入5g石英砂,搅拌,30min后装入注 射器中(石英砂体积约4ml).用10倍体积的蒸馏 水洗涤此注射器以除去未吸附的游离淀粉酶,流 速为1ml/min. 2.可溶性淀粉溶液:取50ml可溶性淀粉溶于100ml 热水中,搅拌均匀. 3. 5mmol/L KI-I2溶液：称取0.127g碘和0.83g 碘化钾。加蒸馏水100ml完全溶解后装入滴瓶中
材料:
1.a-淀粉酶的固定化:在烧杯中将 5mgα-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中.由 于酶不纯,可能有些不溶物.再加入 5g石英砂,不时搅拌,30min后装入1 支下端接有气门心并用夹子封住的 注射器中(石英砂体积约4ml).用10 倍体积的蒸馏水洗涤此注射器以除 去未吸附的游离淀粉酶,流速为 1ml/min.
实验步骤:
1.将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴 管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱. 在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入1~2滴KI-I2溶液, 观察颜色.用水稀释1倍后再观察颜色.
滴加淀粉
课后练习：P40
1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中 没有淀粉酶?
固定化酶:
将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介 质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
固定化的方法：
吸附法(吸附在载体上)
交联法(氨乙基纤维为载体用戊 二醛交联再与酶蛋白氨基相联) 包埋法(将酶包埋在凝胶交联后的“格子”中)
共价偶连法(酶的基团与载体共价结合， 从而被固定)
实验6 α–淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
缺点：要有充足的原材料，广泛应用受到限制
实例：在屠宰厂，可以从家畜胰脏中提取 出胰酶；在水果加工厂，可以从菠萝皮中 提取出菠萝蛋白酶
②发酵法——常用方法 定义：通过微生物发酵获得所需要的酶。
优点： 易培养、繁殖速度快、便于大规 模生产。
提取方式：如果是胞外酶，可以从发酵液中直 接提取；如果是细胞内酶，则可将 细胞弄碎再经过提取纯化而得到。
（一）酶制剂
1、酶制剂的概念和种类 ①定义： 含有酶的制品 ②种类： A、液体酶制剂
治疗某些胃病的胃蛋白酶液 B、固体酶制剂 多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶 和脂肪酶
2、酶的生产
① 定义：采用一定的技术直接从动植物或微生
提 物的组织、细胞中将酶提取出来
取 法
优点：简富单的地易区行，具有在应动植用价物值或微生物资源丰