蒲公英抑菌的研究进展

蒲公英抑菌的研究进展

张忠(通讯作者) 张洪峰聂尚芬王乐平陈晨魏亚超（河北省邯郸市中心医院药剂科河北邯

郸056001）

【中图分类号】R969 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）17-0050-03

【关键词】蒲公英抑菌研究进展

蒲公英是一味重要的清热解毒类常用中草药，为菊科植物蒲公英的干燥全草。性寒，味苦、甘，入肝胃二经。具有清热解毒、消肿散结和利尿通淋的功效。常用于治疗乳痈、瘰疬、疔

疮肿毒、咽痛、肺痈、肠痈、目赤、湿热黄疸、热淋涩痛等症。药理试验证明，蒲公英具有

广谱抗菌、保肝利胆、抗内毒素、健胃和免疫促进作用[1,2]。近年来，人们在蒲公英植物种类、化学成分、药理作用、临床应用和开发利用等方面作了大量研究，取得了很大成就。

1蒲公英的抗菌作用

蒲公英具有广谱抑菌作用，对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、螺旋体和病毒均有不同

程度的抑制作用，其中对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和卡他及溶血性链球菌有较强的杀

灭作用[3]。蒲公英的热水煎剂对肺炎双球菌、脑膜炎球菌、白喉杆菌、大肠埃希菌、白色念

珠菌、变形杆菌、痢疾杆菌及绿脓杆菌亦有较强抑制作用[4]。本品煎剂或醇提物对结核杆菌、炭疽杆菌、单纯疙疱疹病毒、ECHOll病毒、钩端螺旋体、各种皮肤真菌和幽门螺杆菌有抑制

作用[5-9]。

蒲公英煎剂对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.5g/mL，溶液用于金黄色葡萄球菌后

形态学、甘露醇发酵、血浆凝固酶试验均无明显改变，说明这些药物在低浓度时主要是抑制

细菌的生长及蛋白质合成。而当药物去掉后细菌仍可生长繁殖，表现出原有形态和生物学特征。蒲公英的最小杀菌浓度(MBC)为1g/ml，可使金黄色葡萄球菌的细胞膨大，细胞壁增厚，

核糖体聚集成块，有的细胞壁破裂，胞质渗出。说明蒲公英的抗菌作用机制一方面是通过抑

制细胞壁合成，另一方面是通过抑制蛋白质和DNA的合成来实现的[10]。吕俊华等用纸片法

抑菌试验证明，100%蒲公英浸出液滤纸片对金黄色葡萄球菌、变形杆菌甲型链球菌和乙型链

球菌均有明显抑菌作用，体外抑菌作用明显[11]。童延清等研究了蒲公英对表皮葡萄球菌、

腐生葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌和变形杆菌的抑制作用[12]。宋学宏等研究表明蒲公

英对强毒株嗜水气单胞菌和温和气单胞菌有一定抑制作用[13]。蒲公英提取物对番茄花叶病

也有抑制作用[14]。

2蒲公英体外抑菌研究常用方法

2.1 药敏纸片法

在普通营养琼脂培养基基础上高压消毒后，冷却至56℃时加上5%～10%无菌脱纤维绵羊血

混匀，倒入培养皿中备用。将细菌用取菌环分别致密接种到血平板培养基上后，以无菌操作

将含蒲公英浸出液的直径0.4cm的滤纸片贴到培养基上后，37℃培养24h观察测量抑菌环直径。此方法是蒲公英抑菌实验中最常用的方法[15]。

2.2 固体稀释法[16]

该方法取不同浓度的蒲公英浸膏稀释液1mL，分别与15mL的热营养琼脂于平皿中混合均匀。凝固后，从各待测菌液中分别取出50μL的菌悬液，均匀涂抹在平皿培养基表面，制成含菌的平板，在相应的温度下培养，观察菌落生长情况并记数。

2.3 管碟法[17]

将200-1000μL的Tip头从尾部约1cm处剪下，剪成中空的小管，灭菌后用无菌的镊子将小

管插在含菌的培养基上，每个平皿分散地插相应个数的小管，加入已灭菌的蒲公英浸膏稀释液，放入培养箱培养，观察抑菌圈直径即可。

2.4 琼脂打孔法[18]

用200-1000μL的Tip头(尾部直径约1cm)的尾部在培养基上对称地打两个孔，在每个孔中加

入150μL的蒲公英汁，然后在平板中央加入20μL的已活化的菌悬液。培养观察菌种的生长

情况，若蒲公英浸膏稀释液完全渗入培养基或有所蒸发，要及时向每个孔中补充相同体积的

蒲公英浸膏稀释液。

2.5 二倍稀释法。

在第一支无菌试管中放入2倍浓度的液体LB培养基1ml，在其余10支试管中放入液体LB 培养基1ml，并取显齿蛇葡萄提取物1ml加入第一支试管中，混合后从中取1ml加入第二支试

管的LB培养基中，再取1ml加入第三支试管中，依次进行二倍稀释，最后一支试管中取1ml

弃去，使每支试管都含有1ml的不同稀释度药液。

在上述含不同稀释度的蒲公英提取物试管中各接种0.1ml适当浓度的试验菌，置35℃恒温箱

中培养24h，观察生长情况，

3两种培养基对蒲公英体外抑菌效果影响

对蒲公英全草水提液与醇提液分别在普通营养培养基和M2H琼脂培养基上进行了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌抑菌作用的观察，比较两种培养基对中药体外抑菌效，结果表明，M2H琼脂

培养基对其抑菌作用的检测效果比普通营养培养基灵敏[19]。

4蒲公英抑菌物质的提取工艺

在以大肠杆菌和沙门氏菌为供试菌的抑菌实验跟踪下，通过单因素实验和正交实验得出，以

大肠杆菌和沙门氏菌为供试菌的情况下[20]，蒲公英最佳提取工艺条件为。以湖北产蒲公英

为原料以70%乙醇为溶剂，按照料液比为1/25(m/均进行投料，100℃水浴条件下回流提取

2.5h。最佳提取条件下的提取率为19.97最佳蒲公英提取物对大肠杆菌的抑菌效果可达

13.15mm，对沙门氏菌为18.74mm。通过实验的结果可以看出，蒲公英提取物对细菌的抑制

效果显著。

5蒲公英不同部位提取物体外抑菌作用的比较

研究结果表明，蒲公英不同部位提取物对大肠杆菌和金葡菌均有一定的抑制作用，全草的效

果优于根，这与刘华等[21]研究的相符，可能是全草和根含有的主要成分不同，全草中绿原酸、黄酮类、有机碱等抑菌成分比根部多，根部主要含有醇类、树脂、橡胶等成分[22]。

不同提取方法制备出的蒲公英全草、根提取物，其中水提醇沉物抑菌效果优于水提物，可能

有机溶剂有利于抑菌成分的析出，75%醇沉物效果优于80%醇沉物，不同浓度的乙醇醇沉出

的成分有一定的差别，乙醇的浓度过大，提取物抑菌效果减弱，表明部分抑菌有效成分损失，但80%醇沉物制备出的注射液具有明显抗炎作用[23]，分析其抗炎有效成分与抑菌有效成分

不相同。该研究得出蒲公英全草提取物比蒲公英根提取物抑菌效果好，水提75%醇沉物抑菌

效果最佳，为蒲公英的临床应用和深入研究提供依据。

6抑菌作用的临床应用

蒲公英是一味重要的常用中草药，在人医和兽医临床都有广泛应用，并积累了丰富的实践经验。中医认为蒲公英具有清热解毒、消肿散结和利尿通淋的功效。用于疔疮肿毒、乳痈、瘰疬、目赤、咽痛、肺痈、肠痈、湿热黄疽和热淋涩痛等。