溶血性链球菌讲义ppt课件
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杆菌肽敏感试验
❖ 取乙型溶血性菌落的浓菌液涂布于血平板上， 用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽 纸片置于上述平板上，36℃培养18-24h，如 有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株 做对照
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结果报告
在 25g(ml）样品中检出或未检出溶血性 链球菌
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谢谢
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原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用，该 酶耐热，100℃50分钟仍可保持活性。 ❖ 链道酶：又称链球菌DNA酶 ❖ 杀白细胞素：能使白细胞失去动力
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抵抗力
❖ 该菌抵抗力一般不强，60℃30min即被杀死 ❖ 对常用消毒剂敏感 ❖ 在干燥尘埃中生存数月 ❖ 乙型链球菌很少有耐药性
溶血性链球菌检验
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分布
❖ 溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于 水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口 腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气 飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污 染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类 进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性 感染部位常成为食品污染的污染源。引起化 脓性感染、中毒性感染、超敏反应性疾病
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生物学性状
1．形态结构 2．培养特性 3．分类 4．生化反应 5. 抵抗力
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形态与染色
❖ 球形或卵圆形，直径0.5～ 1 μm，链状排列， 链长短不一，短者4～8个细胞组成，长者 20～30个
❖ 无芽胞，无鞭毛，培养早期（2~4h）形成透 明质酸的荚膜
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培养特性
❖ 需氧或兼性厌氧 ❖ 营养要求较高，需补充血液、血清、葡萄糖
等 ❖ 在血清肉汤中易形成长链，管底呈长温度为37℃，最适pH为7.4-7.6
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培养特性 ---血平板
❖ 血平板上菌落为灰白色，半透明或不透明， 表面光滑，有乳光，直径约0.5～0.75 mm， 为圆形突起的细小菌落，乙型溶血链球菌 周围有2～4 mm界限分明、无色透明的溶 血圈
❖ 溶血及菌落形态的观察 ❖ 革兰氏染色 ❖ 链激酶试验 ❖ 杆菌肽敏感试验
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链激酶试验 ---原理
致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶(即 溶纤维蛋白酶)，此酶能激活正常人体血液 中的血浆蛋白酶原，使成血浆蛋白酶，而 后溶解纤维蛋白
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链激酶试验 ---方法
吸取草酸钾血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐 水，混匀，加入链球菌18-24h36℃肉浸液肉 汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL ，混 匀，置于36℃水浴10min,血浆混合物自行凝 固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶 解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。同时用 肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳 性的菌株做阳性对照。
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生化反应
❖ 分解葡萄糖，产酸不产气。对乳糖、甘露醇、 水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的 分解能力因不同菌株而异
❖ 一般不分解菊糖，不被胆汁溶解 ❖ 触酶阴性(与葡萄球菌相区别)
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毒素及侵袭性酶
❖ 链球菌溶血素 ❖ 致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素 ❖ 透明质酸酶：又称扩散因子，溶解细胞间质 ❖ 链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶 ，能使血液中纤维蛋白酶
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微生物学检查
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溶血性链球菌检测流程（GB/T4789.11）
25g(ml)样品+225ml无菌生理盐水
葡萄糖肉浸液肉汤 或匹克氏肉汤
36+1 ℃ 24h
血平板 36+1℃ 24h
血平板(分纯培养)
36+1 ℃ 24h
链激酶试验
杆菌肽敏感试验
观察溶血 革兰氏染色
报告
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鉴定步骤
杆菌肽敏感试验
❖ 取乙型溶血性菌落的浓菌液涂布于血平板上， 用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽 纸片置于上述平板上，36℃培养18-24h，如 有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株 做对照
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结果报告
在 25g(ml）样品中检出或未检出溶血性 链球菌
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谢谢
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原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用，该 酶耐热，100℃50分钟仍可保持活性。 ❖ 链道酶：又称链球菌DNA酶 ❖ 杀白细胞素：能使白细胞失去动力
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抵抗力
❖ 该菌抵抗力一般不强，60℃30min即被杀死 ❖ 对常用消毒剂敏感 ❖ 在干燥尘埃中生存数月 ❖ 乙型链球菌很少有耐药性
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分布
❖ 溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于 水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口 腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气 飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污 染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类 进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性 感染部位常成为食品污染的污染源。引起化 脓性感染、中毒性感染、超敏反应性疾病
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生物学性状
1．形态结构 2．培养特性 3．分类 4．生化反应 5. 抵抗力
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形态与染色
❖ 球形或卵圆形，直径0.5～ 1 μm，链状排列， 链长短不一，短者4～8个细胞组成，长者 20～30个
❖ 无芽胞，无鞭毛，培养早期（2~4h）形成透 明质酸的荚膜
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培养特性
❖ 需氧或兼性厌氧 ❖ 营养要求较高，需补充血液、血清、葡萄糖
等 ❖ 在血清肉汤中易形成长链，管底呈长温度为37℃，最适pH为7.4-7.6
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培养特性 ---血平板
❖ 血平板上菌落为灰白色，半透明或不透明， 表面光滑，有乳光，直径约0.5～0.75 mm， 为圆形突起的细小菌落，乙型溶血链球菌 周围有2～4 mm界限分明、无色透明的溶 血圈
❖ 溶血及菌落形态的观察 ❖ 革兰氏染色 ❖ 链激酶试验 ❖ 杆菌肽敏感试验
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链激酶试验 ---原理
致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶(即 溶纤维蛋白酶)，此酶能激活正常人体血液 中的血浆蛋白酶原，使成血浆蛋白酶，而 后溶解纤维蛋白
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链激酶试验 ---方法
吸取草酸钾血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐 水，混匀，加入链球菌18-24h36℃肉浸液肉 汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL ，混 匀，置于36℃水浴10min,血浆混合物自行凝 固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶 解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。同时用 肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳 性的菌株做阳性对照。
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生化反应
❖ 分解葡萄糖，产酸不产气。对乳糖、甘露醇、 水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的 分解能力因不同菌株而异
❖ 一般不分解菊糖，不被胆汁溶解 ❖ 触酶阴性(与葡萄球菌相区别)
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毒素及侵袭性酶
❖ 链球菌溶血素 ❖ 致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素 ❖ 透明质酸酶：又称扩散因子，溶解细胞间质 ❖ 链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶 ，能使血液中纤维蛋白酶
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溶血性链球菌检测流程（GB/T4789.11）
25g(ml)样品+225ml无菌生理盐水
葡萄糖肉浸液肉汤 或匹克氏肉汤
36+1 ℃ 24h
血平板 36+1℃ 24h
血平板(分纯培养)
36+1 ℃ 24h
链激酶试验
杆菌肽敏感试验
观察溶血 革兰氏染色
报告
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鉴定步骤