实验室生物安全及个人防护

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2. 实验室工作区域外应有存放备用物品的条件。 3. 应在实验室工作区配备洗眼装置设施。 4. 应在实验室或其所在的建筑物内配备高压蒸汽灭菌器或
其他适当的消毒灭菌设备,所配备的消毒灭菌设备应以 风险评估为依据。理解:高压蒸汽灭菌器可多个实验室公用,应靠
近BSL-2
5. 应在操作病原微生物样本的实验间内配备生物安全柜。
4. 实验室的墙壁、天花板和地面应宜清洁、不渗水、耐化 学品和消毒灭菌剂的腐蚀。地面应平整、防滑,不应铺 设地毯。
5. 实验室台柜和座椅应稳固,边角应圆滑。
6. 实验室台柜和其摆放应便于清洁,实验台面防水,耐腐 蚀、耐热和坚固。
7. 实验室应有足够空间和台面摆放实验设备和物品。
8. 根据工作性质和流程合理摆放实验室设备、台柜、物品 等,避免相互干扰、交叉污染,并应不妨碍逃生和急救。
什么是HIV职业暴露?
HIV职业暴露是工作人员,如实验室技术人员、医 生、护士、护理员、警察、监狱管理人员等,在 从事艾滋病防治工作中,意外地被HIV感染者或 艾滋病人的血液、体液污染了破损的皮肤或非胃 肠道粘膜,或被含有HIV的血液、体液污染了的 针头及其他税器刺破皮肤,而导致有被HIV感染 可能性的情况。
在-70 ℃不加保护剂冷冻保存,其感染性可丧失.但 若在 - 70 ℃保存于35%山梨醇或50%胎牛血清 (FBS)中可存活3个月以上
对化学品的抵抗力
HIV不耐酸, pH3.0时病毒滴度在10分钟下降4个对 数.
HIV较耐碱, pH高达9.0时,病毒滴度下降甚微 HIV对消毒剂、去污剂等化学因素敏感:
0.2%次氯酸钠 0.1%家用漂白粉 0.3%双氧水 75%酒精 0.5%来苏儿等5分钟可灭活HIV
对紫外线的抵抗力
对紫外线或射线不敏感,紫外线、射线不能灭活 HIV。
(二)工作人员的自我防护
WHO推荐的普遍性防护原则认为,在为病人提供 医疗服务时,无论是病人还是病人的血液和体液, 也不论他们是阳性还是阴性,都应当作为具有潜 在性传染性加以防护。
接种环灭菌时,用电子加热器,而不应该 使用明火;
在实验结束时,生物安全柜里的所有物品 都应清除表面污染,标本个培养基移出安 全柜;
每天实验结束时,用75%酒精擦拭工作台面、 四壁及玻璃的内外侧等部位来清除污染;
HIV相关检测的生物安全级别
1. HIV抗体检测(包括初筛和确证实验)、抗原检 测和相关的免疫学检测应在符合二级生物安全实 验室(BSL-2)要求的艾滋病检测实验室中进行。
职 业 暴 露 主要方 式
皮肤针刺伤或锐器切割伤; 粘膜或破损皮肤(如皲裂、皮肤炎症等)
接触感染性材料; 皮肤虽然完整无破损,但大面积或长时间
(几分钟或更长)接触感染性材料
HIV对环境的抵抗力
HIV对外界环境中物理和化学因素抵抗力均 较低,比乙型肝炎病毒(HBV)的抵抗力低得多.因此, 对HBV的消毒和灭活方法对HIV均可使用。
检验人员自我防护的主要内容
鞋套
当实验室中存在物理、化学和生物危险因 子的情况下,穿合适的鞋子和鞋套或靴套。 可以防止实验人员足部(鞋袜)避免受到 损伤。 BSL-2和BSL-3实验室要坚持穿鞋套或靴套。
《医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规定》
环境保护总局(环发[2003]188号)2003.11.20
《医疗废物集中处置技术规范》
环境保护总局(环发[2003]206号)2003.12.26
《人间传染的病原微生物菌(毒)种保藏机构管理 办法》
中华人民共和国卫生部令(第68号)2009.7.18
4、国家标准ຫໍສະໝຸດ Baidu行业标准
《生物安全柜》
中华人民共和国医药行业标准(YY0569-2005)2008.6.1
《生物安全柜》
中华人民共和国建筑工业行业标准(JG170-2005)2005.6.1
(二)、实验室生物安全
实验室不可能完全没有风险。应考虑实验过 程中涉及的所有因素,尽可能降低风险。
1.充分保障工作人员避免所操作生物因子的 危害,确保其不受实验对象的侵染 2.保证危险生物因子不向实验室外扩散, 确 保周围环境不受其污染
《实验室生物安全通用要求》
中华人民共和国国家标准(GB19489-2008)2008.12.26
《生物安全实验室建筑技术规范》
中华人民共和国国家标准(GB50346-2004)2004.9.1
《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》
中华人民共和国卫生行业标准(WS233-2002)2003.8.1
生物安全柜的辅助装置保障操作者 安全
1、负压报警装置: 安全柜的负压不能达到要求时, 自动报警。
2、操作窗高度报警: 操作窗高度超过安全高度时, 自动报警。提醒您注意调整。
接种环灭菌时,用电子加热 器,而不应该使用明火; 在实验结束时,生物安全柜 里的所有物品都应清除表面 工作原理: 污染,标本个培养基移出安 1. 物理屏障全柜; 2. 高效过滤每天实验结束时,用75%酒 3. 空气屏障精擦拭工作台面、四壁及玻 4. 定向层流璃的内外侧等部位来清除污 染;
国务院发布的《病原微生物实验室生物安全
管理条例》中要求,根据实验室对病原微生物的 生物安全防护水平不同,将实验室分为一级、二 级、三级和四级。一级、二级实验室不得从事高 致病性病原微生物的实验活动,三级、四级实验 室从事高致病性病原微生物的实验活动。高致病
性病原微生物菌(毒)种或样本在运输过程中发 生被盗、被抢、丢失、泄露时,承运单位、护送 人、保藏机构应立即采取必要的控制措施,并在2 小时内向有关部门报告。
9. 实验室可以利用自然通风。如果应用机械通风,应避免 交叉污染。理解:机械通风应单向风流动,空调不与其他房间交叉
10. 如果有可开启的窗户,应安装纱窗。
11. 实验室内应避免不必要的反光和强光。
12. 若操作刺激和腐蚀性物质,应在30m内设洗眼装置,必 要时设紧急喷淋装置。
13. 若操作有毒、刺激性、放射性挥发物质,应在风险评估 的基础上,配备适当的负压排风柜。
《病原微生物实验室生物安全管理条例》
中华人民共和国国务院令(第424号)2004.11.12
《突发公共卫生事件应急条例》
中华人民共和国国务院令(第376号)2003.5.9
《医疗废物管理条例》
中华人民共和国国务院令(第380号)2003.6.6
3、部门规章
《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运 输管理规定》
生物安全柜 (safety cabinet)
一种专用的排风柜。通过对排到 大气中的气体过滤(filter),防止 操作者和环境接触到处理有潜在 危险性和危险微生物时产生的气 溶胶。
生物安全柜产品的特点:
1、整个操作区内的三面墙体都为双 层墙体,其夹层互相贯通(包括台面下 部的夹层,形成互相连通的负压风道. 2、安全柜内部墙体一体成型,三面 墙体间无接缝(seamless). 3、采用进口的超高效过滤器 (HEPA),过滤效率高达99.999%.
座 19. 供水和排水管道系统应不渗漏,下水应有防回流设计。 20. 应配备使用的应急器材,如消防器材,救急器材等。 21. 应配备适用的通讯设备。 22. 必要时应配备适当的消毒灭菌设备。
BSL-2实验室设施和设备要求
BSL-2实验室在符合BSL-1实验室的要求基础上,满足 以下7条。
1. 实验室主入口的门、放置生物安全柜实验室间的门应可 自动关闭;实验室主入口的门应有进入控制措施。
国家环境保护总局令(第32号)2006.5.1
《医疗卫生机构医疗废物管理办法》
中华人民共和国卫生部令(第35号)2003.10.15
《医疗废物管理行政处罚办法》
中华人民共和国卫生部、环境保护总局令(第21号)2004.6.1
《医疗废物分类目录》
中华人民共和国卫生部、环境保护总局(卫医发[2003]287号)2003.10.10
检验人员自我防护的主要内容
口罩和防护眼镜
当处理血液、体液、分泌物、排泄物等有可能溅出时, 应戴口罩和防护眼镜。
安全镜
护目镜
检验人员自我防护的主要内容
防护服 (实验服、隔离衣、连体衣、围裙以及正压防护服) 1、在实验室中工作人员应该一直或持续穿上防护服 2、清洁的防护服应放置在专用存放处 3、污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中 4、每隔适当的时间应更换防护服以确保清洁 5、当防护服已被危险材料污染后应立即更换 6、离开实验室区域之前应脱去防护服。
2. HIV分离培养、浓缩、中和试验、细胞培养及研 究工作及其他需要应用活病毒的研究实验,应在 三级生物安全实验室(BSL-3)中进行。
3. HIV核酸提取和检测应在符合二级生物安全实验 室(BSL-2)要求的艾滋病检测实验室中进行。
4. HIV病毒株应保存在符合三级生物安全实验室 (BSL-3)要求的艾滋病检测实验室; HIV阳性样 品(血清、血浆、全血和其他组织(液)、核酸 提取物)应保存在符合二级生物安全实验室 (BSL-2)要求的艾滋病检测实验室。
检验人员自我防护的主要内容
手套
1、 手套应在实验室工作时使用。 2、在接触感染性物质 (血液、体液、分泌液、渗出液、以
及接触粘膜和非完整皮肤时),必须使用合适的手套以保 护工作人员避免受到污染物溅出或生物污染的事故所造成 的损害。 3、手套被污染,应该尽可能早的脱下,消毒后丢弃。 4、手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐 磨、耐扎和耐撕的要求,并应对所涉及的危险提供足够的 防护。 5、对实验室工作人员进行手套选择、使用前及使用后的配 戴及摘 除等培训。 6、一次性手套不得重复使用。 7、一次性手套必须先消毒后丢弃。
14. 若使用高毒性、放射性等物质,应配备相应的安全设施、 设备和个体防护装备,应符合国家和地方的相关规定和 要求。
15. 若使用高压气体,应有安全措施,应符合国家、地方的 相关规定和要求。
16. 应设紧急照明装置。 17. 应有足够的电力供应。 18. 应有足够的电源插座,避免多台设备使用共同的电源插
中华人民共和国卫生部令(第45号)2006.2.1
《人间传染的病原微生物名录》
中华人民共和国卫生部文件(卫科教发[2006]15号)2006.2.1
《人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物 安全审批管理办法》
中华人民共和国卫生部令(第50号)2006.8.1
《病原微生物实验室安全环境管理办法》
二、个人防护
个人防护装备 工作人员的自我防护
(一)个人防护装备
所涉及的防护部位 : 1、眼睛 2、头面部 3、躯体 4、手 5、足
装备包括: 1、 眼镜(安全镜、护目镜) 2、口罩、帽子 3、防护衣 4、手套 5、鞋套
艾滋病传播的主要途径
性接触 血液接触 母婴传播
血液传播途径:实验室人员具有感染HIV 的危险性
BSL-1 、BSL-2实验室设施和设备要求
根据《实验室生物安全通用要求》GB19489-2008 的要求, BSL-1实验室标准条款有:
1. 实验室的门应有可视窗并可锁闭,门锁及门的开启方向 应不妨碍室内人员逃生。
2. 每个实验室应设洗手池,宜设置在靠近出口处。
3. 在实验室门口处应设挂衣装置,个人便装与实验室工作 服分开设置。
实验室生物安全及个人防护
主要内容
一、实验室生物安全 二、个人防护
一、实验室生物安全
(一)中国实验室生物安全相关法律法规
1、国家法律:
《中华人民共和国刑法修正案》
中华人民共和国主席令(第51号)2006.6.29
《中华人民共和国传染病防治法》
中华人民共和国主席令(第17号)2004.12.1
2、国务院条例
BSL-2实验室设施和设备要求
6. 应按照产品的设计要求安装和使用生物安全柜,如果安 全柜的排风在室内循环,室内应具备通风换气的条件; 如果需要使用管道排风的生物安全柜,应通过独立于建 筑物其他公共通风系统的管道排出。
7. 应有可靠的电力供应。必要时,重要设备如培养箱、生 物安全柜、冰箱等设备应配置备用电源。
对热的抵抗力 对化学品的抵抗力 对紫外线的抵抗力
对热的抵抗力
在室温(22-27℃)液体环境下可存活15天以上.
在54-56 ℃时病毒活性约每20分钟下降1个对数 TCID50(细胞的半数感染单位)
56 ℃30分钟可使HIV在体外对人的T淋巴细胞失 去感染性
经过60 ℃3小时或80 ℃30分钟作用,不能检出感 染性病毒,对逆转录病毒灭活,WHO推荐100 ℃20 分钟
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