马铃薯Y病毒病的检测技术及防治策略
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有 多年 生杂 草 、 大 棚里 的蔬 菜 、 周年栽 植 的茄科 作 物 次在 植物病 毒检 测方 面应 用 陔方 法 ,该方 法 检测 非 及马铃 薯块 茎 , 越 冬病 毒 即初 侵染 的毒 源 。 自然条 件 常 灵 敏 ,能 检 测 出浓 度 为 1 0 ~ 1 0 0 n g / m1 的病 毒 下, 病 毒 的传播方 式 主要是 靠 有翅蚜 虫 传播 , 它在 毒 E L I S A的原 理 是 将 酶 和抗 体 结 合形 成 酶 标抗 体 ,
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园 艺 与种 苗
马铃 薯 Y病 毒是其 中典型 的代表 种 。植 物病毒 中最 播 P V Y为非持久性传播。桃蚜取食 5 S 即可获毒 , 传 大 的属 就是 马 铃薯 Y病 毒 属 , 该 属 的很 多病 毒是 田 毒饲 育 1 0 S 就 能将病毒传播 到健康烟 株一 h。
严重 。尤其当烟草和蔬菜 、 马wk.baidu.com薯等作物混种时, 病 于大量样 品 的检测 ,因此 已广泛 应用 于各 种植物 病
害 的发生最 严 重 。
毒 的检测 。但 该方法 的缺点是 对仪 器 设备有 较 高 的
茄科 蔬 菜 、 马铃 薯 块 茎 、 杂草等是 P V Y最 主 要 要求 , 整 个操作 过程 需要 多种 缓 冲液 , 检 测 的耗 时较
酶联免 疫吸 附测定法 ( E L I S A) 和 胶 体 金 免 疫 1 9 7 1 年成功研究 … E L I S A, 1 9 7 6年 巾 V o l l e r 等1 8 I 田块 发病较 严重 , 连作 烟 田易发 病 , 发病 程度 随连 作 层 析法 是 血 清 学最 主要 的 2种 方 法 E n g v a l l 等I I 存
通 常整个 检测过 程约 需 2 d I 9 1 。 的越 冬场 所 ,这 些 也是 P V Y初 侵 染 毒 源 的 主要 来 长 ,
源, P V Y再 侵 染 的 毒 源 来 源 则 主要 是 田 间发 病 的
烟株I I 。
胶体金免疫层析 法又称为免疫层析试 验( G I C A) ,
P o l y ( A ) 。马铃薯 Y病毒的寄主范围为茄科及一些苋 不 同接 种 植 物 上 表 现 不 同的症 状 : 在 千 日红 、 白花 昆诺 阿藜 、 菜豆 、 苋色 藜 上不 引 起任 何 科、 藜科 、 菊科和豆科植物 , 主要 以蚜虫非持久方式 刺 果 曼 陀 罗 、
症 状 ;在 马铃 薯 A 6 、洋 酸浆 上 引起 局 部 或 系 统症 传播 , 也可以通过机械接种传播。 2 病 害发 生规律 状; 在 德伯尼 烟 、 心叶烟 、 克利 夫兰烟 、 光曼陀 罗 、 烟 草 马 铃 薯 Y 病 毒 病 是 由 马 铃 薯 Y 病 毒 番茄 上 引起 系 统症 状 1 6 l 。因此 可 以根 据 这些 指 示植
源植物 上取 食得 毒后迁 入 烟 田取食 再传 毒 ,此种 传 酶标 抗 体 与相 应 抗 原接 触 时形 成 酶标 免 疫 复合 物 ,
播 方 式为非 持久 性传 毒 ,在很 大程 度上 受蚜 传辅 助
该酶 标免 疫复 合物 中 的酶 与相 应 的底物 相 遇时会 产
抗 原量 的多 少与颜 色深 浅呈 正相关 。 常 因子( H C — P r o ) 与蚜传活性影响l I ; 此外病毒也可 以 生颜 色 反应 , 通过汁液磨擦传播。蚜虫数量越多 、 烟权数量越多 、 规的 E L I S A包 括抗 原 竞争 法 、 双抗 体夹 心 法 和 间接 烟株 越幼 嫩 , 病 害发 生 的概率 就越 大 , 发 病后 也 就越 法 。 该方 法具 有简 单 、 特异 性强 、 灵敏 度高 等优点 , 适
( P o t a t o v i r u s Y) 侵染 烟草后 , 病 毒在 烟草植 株 内不 断 物检 测 出 P V Y。 扩 增从 而引起 的一 种 系统性 侵染 病 害 ,又称 烟草 脉 指 示植 物法 的优点 是 准确且 直观 ,不 仅 可检测
带 病 或烟 草 脉坏 死病 l 3 I 。烟 草 马铃 薯 Y病毒 病 的发 出病 毒 , 而且 能 直观地 观察 出病 毒 的毒力 指标 , 但其 检测 周期 较 长 、 当环 生 主要 受气 候 因素 、烟 田环 境 状况 和传 毒蚜 等 多 因 缺点 是维 护指示 植物 的费 用高 、 素影响, 烟 草在 苗期 的时候此 病 一般 不发 生 , 长至 团 境 改 变时指 示植 物表现 的症 状不 同 ,因而大规 模检 棵 期 时病害 开始轻 微 发生 ,当烟草 旺长 至封 顶后 病 测很 难使用 该方 法 。 害则 可能大 发生 。 带毒 蚜虫 、 病苗 是病 害传播 的主要 3 . 2 血 清学 方法 介体 , 排水不 良、 土壤 板 结 、 土 壤 黏重 及 土 质瘠 簿 的 年 限的变长 而加 重 。马铃 薯 Y病 毒 的越冬 场所 主要
间作物 、 果树 、 药材 、 牧草等病害的重要病原物 , 对全 3 检测 技术 世 界范 围内农业 生产 造成 的经 济 损失 非 常严 重 。 马 3 . 1 生物 学方法
铃 薯 Y病 毒 为 线 形 粒 体 ( 长6 5 0 ~ 9 0 0 n m, 直径 1 1 ~ 鉴 定一 种 植 物病 毒 主要 通 过 病 害症 状 的 观察 、 1 5 n m) , 基 因组 为 + s s R N A, 5 ’ 末端有 V P g , 3 ’ 末 端有 电镜观察 、 指示植物接种鉴定等 。 马铃薯 Y病毒在
是 2 O世 纪末 在 免 疫渗 滤技 术 的基础 上 建 立 的一 种
P V Y主要通过汁液磨擦传播和蚜虫传播 。当叶 检测技术。因为胶体金颗粒具有结合生物大分子特 这 些 生物大 分 子有抗 生 素 、 毒 片上的茸毛有一点小损伤时 , 病叶和健康叶只要轻轻 性 和高 电子 密度特 性 , 核酸 、 激素 、 蛋 白质 、 多 肽缀合 物 等 。可 以利 片 j 这 地磨擦几下 ,就能把病毒从病叶传到健康叶上去 , 另 素、 外农事操作也可传播病毒 。蚜虫 中的桃蚜是传 播 些生物 大 分子作 为示踪 标 志物 ,利用 抗原 抗 体反 应 P V Y的重 要介 体 , 其 次还 有 马铃 薯 长 管蚜 、 棉蚜 、 桃 来 检测 抗原 l l I j I 。 G I C A的原 理是用 硝酸纤 维素 膜 当作