纸色谱分离氨基酸

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二、实验原理
三、实验步骤
铺在白纸上 取层析滤纸
茚三酮与氨基酸作用 控制在0.2~0.5cm 1个已知 样,一个 混合样
层析纸制备
点样 2个点
喷显色剂
干燥
展开
放层析缸中展开
干燥
画出色斑
计算Rf值
比较样品和标准的Rf值 鉴 定 组 成
四、结果与分析
1.将实验结果填入下表
Ⅱ纸 甘氨酸 斑点中心距 离 混合氨基酸 1 2 丙氨酸 混合氨基酸 1 2
纸色谱分离氨基酸
授课单位:生命科学学院应用化学系
一、实验目的
1.了解纸色谱分离氨基酸的原理; 2.学习纸色谱进行定性分析的操作方法。
二、实验原理
1.色谱法----一种重要的分离分析方法。
起源:1906年,俄国植物学家 Michael Tswett
胡萝卜素 叶绿素a
叶黄素
叶绿素b
二、实验原理
石油醚 色素混合液 (流动相)
展开剂距离
Rf
10cm
结论
混合样品中含有


2.思考:影响Rf值的因素?
五、实验关键点
(1) 在整个操作过程中,手只能接触滤纸边缘, 否则手指上的氨基酸会造成滤纸上众多斑点。 (2) 点样斑点不能太大(其直径应小于0.5cm), 防止氨基酸斑点重叠。
(3) 展层剂接触滤纸时一定要均匀、保持前沿线 与滤纸平行。
色谱柱
碳酸钙粉末 (固定相)
色带
二、实验原理
按固定相的固定方式,色谱法为
气相色谱法
柱色谱 固定相装于柱内的色谱法
液相色谱法
超临界色谱法 纸色谱 薄层色谱
平板色谱 固定相呈平板状的色谱法
二、实验原理
纸色谱法是分离、鉴定氨基酸、糖类、抗生素 等有机物质的一项重要而简便的分析方法。 载体:滤纸 固定相:滤纸上吸附的水
六、作业布置
1.撰写本次实验报告,查阅相关资料对结果 进行分析讨论; 2.下次实验预习报告 实验名称:从茶叶中提取咖啡因,p91-93 准备知识:索氏提取操作技术,p57 升华操作,p59
流动相:含有一定比例水分的有机溶剂 分离原理:利用样品中各组分在滤纸上吸附的水(即固定
相)和流动相中溶解度的不同,在展开剂展开过程中各组分 在两相间多次分配,在水相中溶解度大的组分移动较慢,在 水相中溶解度小的组分移动较慢,经过一定时间展开后,达 到分离的目的 起始线到氨基酸色斑中 心距离a Rf 分析依据: 起始线到终止线距离 b
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