纸色谱法

注意事项
思考题
实验步骤
——计算RF
用铅笔 描出各 斑点的 轮廓
b
a1 a2
a3
实验目的 实验原理 仪器试剂 实验步骤 注意事项 思考题
数据处理
（1）计算RF和△RF。 （2）定性分析。
实验目的
实验原理
仪器试剂
实验步骤
注意事项
思考题
注意事项
1.手应捏纸条顶端； 2.毛细管不能混用； 3. 纸条应垂直悬挂在层析筒中，不能卷 曲； 4. 应均匀喷洒显色剂，显色剂喷洒量应 适当，不能流淌。
实验目的 实验原理 仪器试剂 实验步骤 注意事项 思考题
实验原理
分离示意图
上 行 法
A B
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实验原理
溶剂 前沿 展开后 斑点
A B
实验目的
原点
a1
a2
b
实验原理
仪器试剂
实验步骤
注意事项
思考题
实验原理
RF:
通常用比移值RF衡量各组分的分离程度：
点 样
显 色
实验目的
实验原理
仪器试剂
实验步骤
注意事项
思考题
实验步骤
——点 样
异 亮 赖 谷 混 氨 氨 氨 合 酸 酸 酸 液 各点 φ≈2mm 2.5cm 1 2 3 4
2.5cm
实验目的
实验原理
仪器试剂
实验步骤
注意事项
思考题
实验步骤 ——展开分离
滤纸下端浸 入展开剂约 0.5cm，计 时。
一段时间后， 前沿上升15cm 左右
量、温度等实验条件。
实验目的
实验原理
仪器试剂
实验步骤
注意事项
思考题
实验原理
本实验分离和鉴定的氨基酸混合液：异亮氨酸、
赖氨酸和谷氨酸。 氨基酸是无色的，在层析后需在纸上喷洒显色剂 茚三酮，斑点呈现蓝紫色。 显色机理：
O O C C C O O + H2O C O C OH OH C
（1）
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实验步骤
注意事项
思考题
实验原理
O
（2）
R
C CH NH2 O C C C O OH H COOH + C O C
OH OH
+ 源自文库CHO + NH3 + CO2
实验目的
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实验步骤
注意事项
思考题
实验原理
O C H C C O O C C C O N C C O H O C +
注意事项
思考题
仪器试剂
主要试剂：
（1）展开剂 （3）茚三酮 正丁醇:甲酸:水＝60:12:8。 2 g· -1水溶液。 L 将（2）配制的三 1 g· -1乙醇溶液。 L （2）氨基酸标准溶液 （4）氨基酸混合试液 种氨基酸等量混合。
实验目的
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仪器试剂
实验步骤
注意事项
思考题
实验步骤
展 开 分 离 计 算 比 移 值
2H 2O
O C + NH3 + OH C O C O
（3）
实验目的
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仪器试剂
实验步骤
注意事项
思考题
仪器试剂
主要仪器：
（1）玻璃层析筒 150mm×300mm(φ×h)。 （2）层析纸条 100mm×240mm 。 （3）毛细管 直径1mm左右。 （4）喷雾器
实验目的
实验原理
仪器试剂
实验步骤
纸色谱法分离氨基酸
化学与材料科学学院 实验教学中心
实验目的
1、掌握纸色谱法分离物质的原理和操作 技术； 2、学习如何根据不同组分的分离结果来 鉴别未知试样的组分。
实验目的
实验原理
仪器试剂
实验步骤
注意事项
思考题
实验原理
定义：
纸色谱分离法又称纸层析法，是根据不 同物质在两相中的分配比不同而进行分离 的一种微量分离方法。 •载体——层析纸（滤纸）； •固定相——滤纸上的吸湿水分； •流动相——有机溶剂（展开剂）。
组分原点中心到展开后的斑点中心的距离a RF 组分原点中心到溶剂前沿的距离b
RF:0～1。 RF值相差越大，分离效果越好。
实验目的 实验原理 仪器试剂 实验步骤 注意事项 思考题
实验原理
RF：物质定性分析的依据。 在进行分析工作时，可使用各组分
相应的标准样品同时作对照实验。
影响因素：主要是展开剂、滤纸质
展开剂
记下展开 停止时间
实验目的
实验原理
仪器试剂
实验步骤
注意事项
思考题
实验步骤
——展开分离
取出层析 纸，画出 溶剂前沿
晾干或烘 干展开剂
实验目的
实验原理
仪器试剂
实验步骤
注意事项
思考题
实验步骤
——显色
在层析纸 上均匀喷 洒显色剂
l00 ℃ 烘箱中， 烘3～ 5min
实验目的
实验原理
仪器试剂
实验步骤
实验目的 实验原理 仪器试剂 实验步骤 注意事项 思考题
思考题
1.实验时，能否用手指直接拿取滤纸 条中部，对实验结果有何影响？ 2.为什么在纸色谱法中要采用标准品 对照鉴别？
实验目的
实验原理
仪器试剂
实验步骤
注意事项
思考题