流式应用
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流式细胞仪是测量染色细胞标记物荧 光强度的细胞分析仪,是在单个细胞分 析和分选基础上发展起来的对细胞的物 理或化学性质(如大小、内部结构、 DNA、RNA、蛋白质、抗原等)进行快速 测量并可分类收集。
7
流式细胞术概述
8
流式细胞术概述
9
流式细胞术概述
流式细胞仪检测细胞特性
细胞组成
大小
细胞功能
细胞表面/胞浆/核--特异性抗原
53
胞内因子测定
54
树突状细胞 (dendritic cell,DC)
DC的生物学特点
• DC因其具有膜样或树突样突起而得名
• DC包括郎罕氏细胞、间隙DC、滤泡DC(FDC)、并指 DC(IDC)等等。其在体内含量甚微,仅占外周血单 个核细胞(PBMC)的1%以下, 但分布非常广泛, 在血液、肝、脾、淋巴结及非免疫器官组织中都有 存在。
38
二、淋巴细胞功能分析 • 细胞介导细胞毒性试验(死细胞与活细 胞比例) • 细胞内细胞因子测定
39
三、淋巴造血系统及白血病免疫分型
对淋巴瘤和白血病进行多色免疫分型 用于选择化疗方案、判断预后及检出微小残留 病变
40
四、肿瘤耐药基因分析
MDR(+)表示对化疗药物耐药
五、AIDS病检测中的应用
18
荧光染料的特性
•激发波长(EXCITING) •发射波长(EMISSION)
19
参 数
FSC:反映颗粒的大小
SSC:反映颗粒的内部结构复杂程度 FL:反映颗粒被染上的荧光数量多少
20
流式细胞术
流式细胞术的基本原理
21
免疫细胞的检测
22
免疫细胞的检测
• 免疫细胞的分离
流式细胞术
23
免疫细胞的检测
粒被染上荧光部分数量的多少,根据其标记的抗原分子不
同,即反映了不同抗原分子的表达情况。 同型对照为免疫荧光标记中的阴性对照,可使荧光标记 单抗的信号保持其特异性。
26
概述 流式细胞仪的基本应用 流式细胞术在临床与科研的应用 近期流式细胞术应用研究进展
27
流式细胞仪的基本应用 • Cell surface markers
• •
•
仪上检测。 需用刺激剂PMA+Ionomycin等激活细胞分泌细胞因子, 为了阻止产生的细胞因子分泌到细胞外,需要同时加入 BrefedlinA或Monensin等共孵育细胞,使胞内细胞因子 蓄积。 胞内染色前需用多聚甲醛固定,保留细胞形态完整性和 胞内物质抗原性,随后用皂角苷(破膜剂)增加细胞膜 通透性,使细胞因子特异性抗体渗入到胞内,达到流式 细胞仪检测目的。
56
DC的生物学功能
• 是一类抗原呈递细胞(APC),将抗原递呈给特殊 的初始T淋巴细胞,引发初次免疫反应,在诱导免 疫耐受和调控免疫活性方面扮演着重要角色,是 机体内惟一能激活初始T细胞的APC。 • 通过激活巨噬细胞,NK细胞和嗜酸性粒细胞引发 机体对入侵感染因素的反应,连接天然免疫系统 和适应性免疫系统 • 受细胞因子调控的同时, 本身也可产生多种细胞 因子, 如IFN-α, IL - 12, GM - CSF, IL - 1, IL - 6和TNF- α等
30
胞内因子测定
31
胞内因子测定
血清、血浆或培养液上清、眼泪、房水等各种液相中 可溶性细胞因子的浓度检测 • 免疫性疾病的检测与监控 • 传染性疾病
• 肿瘤临床研究
• 总体免疫功能分析 • 药效评价
• 细胞凋亡等信号传导研究,磷酸化蛋白定量分析等
• 免疫细胞功能性研究 • 疫苗研发
32
分选基本原理
证了检测速度与统计分析精确性。
11
流式细胞术
流式细胞术的基本原理
12
流式细胞术
流式细胞术 的基本原理
13
流式细胞术
14
前向散射光(forward scatter, FSC):激光束照射细胞时, 光以相对轴较小角度(0.5°~10°)向前方散射的讯号用于 检测细胞等粒子的表面属性,信号强弱与细胞体积大小成正 比。
57
DC的表面标志
• 人DC的主要特征性表面标志为CD1a和CD83, CD83还是DC充分成熟的标志。 • 成熟DC高表达CD80(B7-1),CD86,CD40和 CD54等共刺激分子,而未成熟DC不表达或低表 达这些分子
• 未成熟DC具有强大的内吞作用,并高表达大多
数趋化因子受体
58
DC的分化
光散射测量最有效用途:从非均一群体中鉴别出某些亚群
17
荧光测量
• 荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激 发后产生,发射的荧光波长与激发光波长不同。 • 每种荧光染料会产生特定波长的荧光和颜色,通过 波长选择通透性滤片,可将不同波长的散射光和荧 光信号区分开,送入不同的光电倍增管。 • 选择不同的单抗及染料就可同时测定一个细胞上的 多个不同特征。 • 线性放大器和对数放大器
CD4+Th细胞、CD4+/CD8+比例
41
六、自身免疫病相关HLA抗原分析
HLA-B27可出现在58%~97%的强直 性脊椎炎(As) 患者
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
42
流式细胞仪的科研应用
免疫功能研究(淋巴细胞亚群分析、细胞活化、 细胞因子)
磷酸化蛋白的检测
干细胞研究/树突细胞研究 细胞功能研究(细胞内PH值、细胞内钙离子流、 细胞膜电位、线粒体膜电位) 血小板分析(心脑血管疾病)
43
流式细胞仪的科研应用
肿瘤相关基因表达的研究 抗肿瘤药物作用机制以及多药耐药性的研究
细胞周期和倍体分析
细胞凋亡及凋亡相关蛋白
转染&基因沉默效率检测
细胞分选、分选后培养及相关生物学研究
44
概述 流式细胞仪的基本应用 流式细胞术在临床与科研的应用 近期流式细胞术应用研究进展
• 在细胞因子(如GM-CSF,IL-4和TNF-α)的作用 下诱导DC体外分化
50
细胞因子
病毒、细菌 寄生虫、过敏源
51
细胞因子相关的主要研究领域
• 肿瘤 • 肾炎 • 感 染 ( SARS/ 禽 流 • 基于细胞水平的研究 感) • 胞内因子 • 胞外因子 • 自身免疫病 • 超敏反应 • 移植排斥反应 • 免疫缺陷病 • 血液疾病
52
胞内因子测定
原理:
• 未活化的细胞所分泌的细胞因子很少,很难在流式细胞
T淋巴细胞及其亚群分析
Th(CD3+CD4+CD8-T); Tc(CD3+CD4-CD8+T)
B淋巴细胞及其亚群分析
B1(CD19+CD5+): 产生IgM型自身抗体, 参与免疫调节、 与自身免疫病的发生有关
B2(CD19+CD5-): 受外来抗原刺激, 产生高亲和性特异 性抗体
NK细胞分析
NK(CD3-CD16+CD56+)
• Intracellular cytokines • Sorting to isolate cell populations
28
免疫细胞的检测
• 免疫细胞的计数 T细胞及其亚群 Th细胞亚群 B细胞 NK细胞
29
胞内因子测定
• 原理:
未活化的细胞所分泌的细胞因子很少,很难在流式细胞
细胞悬液形成液流柱
压电晶体 产生机械振动
流动室振动 液流断裂成液滴
空白液滴
含细胞的液滴 充电 偏转落入收集器
不充电 弃去
流式细胞术发展趋势
①流式细胞仪从单纯大型仪器发展为适应各种实际 应用的便携式、台式、分辨率、高质量分选的研 究型流式细胞仪; ②对流式细胞术检测荧光参数,从采用荧光单色、 双色分析发展为多色分析,目前最多可同时检测 15 种荧光信号; ③从检测参数的相对定量发展为绝对定量; ④从检测参数的手动人工分析发展为利用计算机软 件的自动分析; ⑤所采用的荧光试剂,从非配套试剂发展为配套的 试剂盒试剂
流式分子技术 (流式细胞术) 应用研究进展
郑芳
概述 流式细胞仪的基本应用 流式细胞术在临床与科研的应用 近期流式细胞术应用研究进展
2
概述 流式细胞仪的基本应用 流式细胞术在临床与科研的应用 近期流式细胞术应用研究进展
3
流式细胞术概述
流式细胞术(flow cytometry, FCM) 是用流式细胞仪测量液相中悬浮细胞或微 粒的一种现代分析新技术,能快速、精确的 对单个细胞理化特性进行多参数定量分析 和分选。 它是众多不同学术背景、不同科技领 域相结合的结晶,是物理学、生物学、医 学等综合运用的产物。
15
侧向散射光(side scatter, SSC):激光束照射细胞时,
光以90°角散射的讯号,用于检测细胞内部结构属性。
16
测得的FSC与 SSC信号通过计算机 处理,可得到FS-SS 图,由此可仅用散 射光信号对未染色 的活细胞进行分析 或分选。 此为血细胞分 类的基本原理,但 不能分析表面分子。
24
如十字门分析时,起
就可以由四个区域构 成,即
G=D1+D2+D3+D4。
CD4 PE
D1 CD4+/CD3-
D2 CD4+/CD3+
D3 CD4- /CD3D4 CD4- /CD3+
CD3 FITC
25
小 结
流式细胞术(FCM)是在保持细胞及细胞器或微粒的结
构及功能不被破坏的状态下,从分子水平上获取多种信号 实现对单个细胞进行定量分析或纯化分选。 FCM分析中前向散射光反映颗粒的大小;侧向散射光反 映颗粒内部结构复杂程度、表面的光滑程度;荧光反映颗
仪上检测。 因此检测前需用刺激剂PMA+Ionomycin等激活细胞分泌 细胞因子, 为阻止产生的细胞因子分泌到细胞外,需同时加入 Brefedlin A或Monensin等共孵育,使胞内细胞因子蓄积。 胞内染色前需用多聚甲醛固定,保留细胞形态完整性和 胞内物质抗原性,随后用皂角苷(破膜剂)增加细胞膜 通透性,使细胞因子特异性抗体渗入到胞内,达到流式 细胞仪检测目的。
34
概述 流式细胞仪的基本应用 流式细胞术在临床与科研的应用 近期流式细胞术应用研究进展
35
流式细胞术在临床中的应用
流式细胞术目前已广泛地被应用于免疫 学基础研究和逐步进入临床应用各方面,用 流式细胞仪对细胞表面的抗原成分进行标记 分析,可区别多种细胞的特性,为细胞免疫 的研究增加了有效的手段和帮助。
4
流式细胞术概述
从流式细胞术的发明、发展直到今天在各个领域 应用的拓展 , 每一步都是诸如电子技术、流体力学、 计算机科学、激光技术、生物学、生物技术、高等数 学、临床医学、分子生物学、有机化学和生物物理学 等学科知识综合运用的结晶。 现代流式细胞术更是由于它结合单克隆抗体技术、
定量细胞化学技术和定量荧光细胞化学 , 使其在生物
粒度
DNA, RNA含量
细胞活性
胞内细胞因子
蛋白质含量
钙离子,PH值,膜电位
激素结合位点
酶活性
10
工作原理
采用激光作为激发光源,保证其具有更好
的单色性与激发效率;
利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标
记技术,保证检测的灵敏度和特异性;
用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个
细胞的多个参数信号进行数据处理分析,保
59
DC的表面标志
• 所有DC共同的突出特点是能高水平表达MHC-II类分子
如HLA-DR。DC成熟过程突出的标志是MHC-II类分子
的重分布,从主要在细胞浆内转变为主要在细胞膜表面.
60
体外人DC制备
• 前体DC来源
外周血单个核细胞/单核细胞 • 密度梯度离心 • BD™ IMag Cell Separation System 骨髓、新生儿脐带血的CD34+细胞
45
近期流式应用研究进展
细胞因子检测
树突状细胞
调节性T细胞
46
细胞因子检测
细胞活化
• 细胞数目增殖 • 细胞表面表达 活化标记 • 分泌细胞因子
48
细胞活化
• 细胞数目增殖 • 细胞表面表达活化标记 • 分泌细胞因子
49
细胞活化
• 细胞数目增殖 • 细胞表面表达 活化标记 • 分泌细胞因子
学、临床医学、药物学、材料学等众多研究领域中的 应用有更加突飞猛进的发展。
5
流式细胞术概述 流式细胞术最大的特点是能在保持细
胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏
的状态下,通过荧光探针的协助,从分子
水平上获取多种信号对细胞进行定量分析
或纯化分选。
细胞不被破坏,测量快速、大量、准确、灵敏、定量
6
流式细胞术概述
36
流式细胞仪的临床应用
HIV免疫分型,CD4绝对计数 淋巴细胞亚群分析 白血病和淋巴瘤的免疫分型 肿瘤的细胞周期和倍体分析 网织红细胞计数 细胞移植的免疫状态监测 干细胞计数 阵发性血红蛋白尿 HLA-B27检查 血小板功能及相关疾病
37
一、淋巴细胞及其亚群的分析
7
流式细胞术概述
8
流式细胞术概述
9
流式细胞术概述
流式细胞仪检测细胞特性
细胞组成
大小
细胞功能
细胞表面/胞浆/核--特异性抗原
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胞内因子测定
54
树突状细胞 (dendritic cell,DC)
DC的生物学特点
• DC因其具有膜样或树突样突起而得名
• DC包括郎罕氏细胞、间隙DC、滤泡DC(FDC)、并指 DC(IDC)等等。其在体内含量甚微,仅占外周血单 个核细胞(PBMC)的1%以下, 但分布非常广泛, 在血液、肝、脾、淋巴结及非免疫器官组织中都有 存在。
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二、淋巴细胞功能分析 • 细胞介导细胞毒性试验(死细胞与活细 胞比例) • 细胞内细胞因子测定
39
三、淋巴造血系统及白血病免疫分型
对淋巴瘤和白血病进行多色免疫分型 用于选择化疗方案、判断预后及检出微小残留 病变
40
四、肿瘤耐药基因分析
MDR(+)表示对化疗药物耐药
五、AIDS病检测中的应用
18
荧光染料的特性
•激发波长(EXCITING) •发射波长(EMISSION)
19
参 数
FSC:反映颗粒的大小
SSC:反映颗粒的内部结构复杂程度 FL:反映颗粒被染上的荧光数量多少
20
流式细胞术
流式细胞术的基本原理
21
免疫细胞的检测
22
免疫细胞的检测
• 免疫细胞的分离
流式细胞术
23
免疫细胞的检测
粒被染上荧光部分数量的多少,根据其标记的抗原分子不
同,即反映了不同抗原分子的表达情况。 同型对照为免疫荧光标记中的阴性对照,可使荧光标记 单抗的信号保持其特异性。
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概述 流式细胞仪的基本应用 流式细胞术在临床与科研的应用 近期流式细胞术应用研究进展
27
流式细胞仪的基本应用 • Cell surface markers
• •
•
仪上检测。 需用刺激剂PMA+Ionomycin等激活细胞分泌细胞因子, 为了阻止产生的细胞因子分泌到细胞外,需要同时加入 BrefedlinA或Monensin等共孵育细胞,使胞内细胞因子 蓄积。 胞内染色前需用多聚甲醛固定,保留细胞形态完整性和 胞内物质抗原性,随后用皂角苷(破膜剂)增加细胞膜 通透性,使细胞因子特异性抗体渗入到胞内,达到流式 细胞仪检测目的。
56
DC的生物学功能
• 是一类抗原呈递细胞(APC),将抗原递呈给特殊 的初始T淋巴细胞,引发初次免疫反应,在诱导免 疫耐受和调控免疫活性方面扮演着重要角色,是 机体内惟一能激活初始T细胞的APC。 • 通过激活巨噬细胞,NK细胞和嗜酸性粒细胞引发 机体对入侵感染因素的反应,连接天然免疫系统 和适应性免疫系统 • 受细胞因子调控的同时, 本身也可产生多种细胞 因子, 如IFN-α, IL - 12, GM - CSF, IL - 1, IL - 6和TNF- α等
30
胞内因子测定
31
胞内因子测定
血清、血浆或培养液上清、眼泪、房水等各种液相中 可溶性细胞因子的浓度检测 • 免疫性疾病的检测与监控 • 传染性疾病
• 肿瘤临床研究
• 总体免疫功能分析 • 药效评价
• 细胞凋亡等信号传导研究,磷酸化蛋白定量分析等
• 免疫细胞功能性研究 • 疫苗研发
32
分选基本原理
证了检测速度与统计分析精确性。
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流式细胞术
流式细胞术的基本原理
12
流式细胞术
流式细胞术 的基本原理
13
流式细胞术
14
前向散射光(forward scatter, FSC):激光束照射细胞时, 光以相对轴较小角度(0.5°~10°)向前方散射的讯号用于 检测细胞等粒子的表面属性,信号强弱与细胞体积大小成正 比。
57
DC的表面标志
• 人DC的主要特征性表面标志为CD1a和CD83, CD83还是DC充分成熟的标志。 • 成熟DC高表达CD80(B7-1),CD86,CD40和 CD54等共刺激分子,而未成熟DC不表达或低表 达这些分子
• 未成熟DC具有强大的内吞作用,并高表达大多
数趋化因子受体
58
DC的分化
光散射测量最有效用途:从非均一群体中鉴别出某些亚群
17
荧光测量
• 荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激 发后产生,发射的荧光波长与激发光波长不同。 • 每种荧光染料会产生特定波长的荧光和颜色,通过 波长选择通透性滤片,可将不同波长的散射光和荧 光信号区分开,送入不同的光电倍增管。 • 选择不同的单抗及染料就可同时测定一个细胞上的 多个不同特征。 • 线性放大器和对数放大器
CD4+Th细胞、CD4+/CD8+比例
41
六、自身免疫病相关HLA抗原分析
HLA-B27可出现在58%~97%的强直 性脊椎炎(As) 患者
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
42
流式细胞仪的科研应用
免疫功能研究(淋巴细胞亚群分析、细胞活化、 细胞因子)
磷酸化蛋白的检测
干细胞研究/树突细胞研究 细胞功能研究(细胞内PH值、细胞内钙离子流、 细胞膜电位、线粒体膜电位) 血小板分析(心脑血管疾病)
43
流式细胞仪的科研应用
肿瘤相关基因表达的研究 抗肿瘤药物作用机制以及多药耐药性的研究
细胞周期和倍体分析
细胞凋亡及凋亡相关蛋白
转染&基因沉默效率检测
细胞分选、分选后培养及相关生物学研究
44
概述 流式细胞仪的基本应用 流式细胞术在临床与科研的应用 近期流式细胞术应用研究进展
• 在细胞因子(如GM-CSF,IL-4和TNF-α)的作用 下诱导DC体外分化
50
细胞因子
病毒、细菌 寄生虫、过敏源
51
细胞因子相关的主要研究领域
• 肿瘤 • 肾炎 • 感 染 ( SARS/ 禽 流 • 基于细胞水平的研究 感) • 胞内因子 • 胞外因子 • 自身免疫病 • 超敏反应 • 移植排斥反应 • 免疫缺陷病 • 血液疾病
52
胞内因子测定
原理:
• 未活化的细胞所分泌的细胞因子很少,很难在流式细胞
T淋巴细胞及其亚群分析
Th(CD3+CD4+CD8-T); Tc(CD3+CD4-CD8+T)
B淋巴细胞及其亚群分析
B1(CD19+CD5+): 产生IgM型自身抗体, 参与免疫调节、 与自身免疫病的发生有关
B2(CD19+CD5-): 受外来抗原刺激, 产生高亲和性特异 性抗体
NK细胞分析
NK(CD3-CD16+CD56+)
• Intracellular cytokines • Sorting to isolate cell populations
28
免疫细胞的检测
• 免疫细胞的计数 T细胞及其亚群 Th细胞亚群 B细胞 NK细胞
29
胞内因子测定
• 原理:
未活化的细胞所分泌的细胞因子很少,很难在流式细胞
细胞悬液形成液流柱
压电晶体 产生机械振动
流动室振动 液流断裂成液滴
空白液滴
含细胞的液滴 充电 偏转落入收集器
不充电 弃去
流式细胞术发展趋势
①流式细胞仪从单纯大型仪器发展为适应各种实际 应用的便携式、台式、分辨率、高质量分选的研 究型流式细胞仪; ②对流式细胞术检测荧光参数,从采用荧光单色、 双色分析发展为多色分析,目前最多可同时检测 15 种荧光信号; ③从检测参数的相对定量发展为绝对定量; ④从检测参数的手动人工分析发展为利用计算机软 件的自动分析; ⑤所采用的荧光试剂,从非配套试剂发展为配套的 试剂盒试剂
流式分子技术 (流式细胞术) 应用研究进展
郑芳
概述 流式细胞仪的基本应用 流式细胞术在临床与科研的应用 近期流式细胞术应用研究进展
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概述 流式细胞仪的基本应用 流式细胞术在临床与科研的应用 近期流式细胞术应用研究进展
3
流式细胞术概述
流式细胞术(flow cytometry, FCM) 是用流式细胞仪测量液相中悬浮细胞或微 粒的一种现代分析新技术,能快速、精确的 对单个细胞理化特性进行多参数定量分析 和分选。 它是众多不同学术背景、不同科技领 域相结合的结晶,是物理学、生物学、医 学等综合运用的产物。
15
侧向散射光(side scatter, SSC):激光束照射细胞时,
光以90°角散射的讯号,用于检测细胞内部结构属性。
16
测得的FSC与 SSC信号通过计算机 处理,可得到FS-SS 图,由此可仅用散 射光信号对未染色 的活细胞进行分析 或分选。 此为血细胞分 类的基本原理,但 不能分析表面分子。
24
如十字门分析时,起
就可以由四个区域构 成,即
G=D1+D2+D3+D4。
CD4 PE
D1 CD4+/CD3-
D2 CD4+/CD3+
D3 CD4- /CD3D4 CD4- /CD3+
CD3 FITC
25
小 结
流式细胞术(FCM)是在保持细胞及细胞器或微粒的结
构及功能不被破坏的状态下,从分子水平上获取多种信号 实现对单个细胞进行定量分析或纯化分选。 FCM分析中前向散射光反映颗粒的大小;侧向散射光反 映颗粒内部结构复杂程度、表面的光滑程度;荧光反映颗
仪上检测。 因此检测前需用刺激剂PMA+Ionomycin等激活细胞分泌 细胞因子, 为阻止产生的细胞因子分泌到细胞外,需同时加入 Brefedlin A或Monensin等共孵育,使胞内细胞因子蓄积。 胞内染色前需用多聚甲醛固定,保留细胞形态完整性和 胞内物质抗原性,随后用皂角苷(破膜剂)增加细胞膜 通透性,使细胞因子特异性抗体渗入到胞内,达到流式 细胞仪检测目的。
34
概述 流式细胞仪的基本应用 流式细胞术在临床与科研的应用 近期流式细胞术应用研究进展
35
流式细胞术在临床中的应用
流式细胞术目前已广泛地被应用于免疫 学基础研究和逐步进入临床应用各方面,用 流式细胞仪对细胞表面的抗原成分进行标记 分析,可区别多种细胞的特性,为细胞免疫 的研究增加了有效的手段和帮助。
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流式细胞术概述
从流式细胞术的发明、发展直到今天在各个领域 应用的拓展 , 每一步都是诸如电子技术、流体力学、 计算机科学、激光技术、生物学、生物技术、高等数 学、临床医学、分子生物学、有机化学和生物物理学 等学科知识综合运用的结晶。 现代流式细胞术更是由于它结合单克隆抗体技术、
定量细胞化学技术和定量荧光细胞化学 , 使其在生物
粒度
DNA, RNA含量
细胞活性
胞内细胞因子
蛋白质含量
钙离子,PH值,膜电位
激素结合位点
酶活性
10
工作原理
采用激光作为激发光源,保证其具有更好
的单色性与激发效率;
利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标
记技术,保证检测的灵敏度和特异性;
用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个
细胞的多个参数信号进行数据处理分析,保
59
DC的表面标志
• 所有DC共同的突出特点是能高水平表达MHC-II类分子
如HLA-DR。DC成熟过程突出的标志是MHC-II类分子
的重分布,从主要在细胞浆内转变为主要在细胞膜表面.
60
体外人DC制备
• 前体DC来源
外周血单个核细胞/单核细胞 • 密度梯度离心 • BD™ IMag Cell Separation System 骨髓、新生儿脐带血的CD34+细胞
45
近期流式应用研究进展
细胞因子检测
树突状细胞
调节性T细胞
46
细胞因子检测
细胞活化
• 细胞数目增殖 • 细胞表面表达 活化标记 • 分泌细胞因子
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细胞活化
• 细胞数目增殖 • 细胞表面表达活化标记 • 分泌细胞因子
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细胞活化
• 细胞数目增殖 • 细胞表面表达 活化标记 • 分泌细胞因子
学、临床医学、药物学、材料学等众多研究领域中的 应用有更加突飞猛进的发展。
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流式细胞术概述 流式细胞术最大的特点是能在保持细
胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏
的状态下,通过荧光探针的协助,从分子
水平上获取多种信号对细胞进行定量分析
或纯化分选。
细胞不被破坏,测量快速、大量、准确、灵敏、定量
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流式细胞术概述
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流式细胞仪的临床应用
HIV免疫分型,CD4绝对计数 淋巴细胞亚群分析 白血病和淋巴瘤的免疫分型 肿瘤的细胞周期和倍体分析 网织红细胞计数 细胞移植的免疫状态监测 干细胞计数 阵发性血红蛋白尿 HLA-B27检查 血小板功能及相关疾病
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一、淋巴细胞及其亚群的分析