猪进行性萎缩性鼻炎

免疫程序
猪传染性萎缩性鼻炎-猪多杀巴氏杆菌二联 灭活苗, 对妊娠母猪及仔猪进行免疫预防,可 获得较理想的保护效果。
可以推荐的免疫程序为: ①妊娠母猪产前 40 d、25 d 各肌肉注射蜂胶苗 2. 0m l/头; ②仔 猪于1 周龄、4 周龄各颈部肌注接种2. 0m l/ 头; ③公猪接种2 次/年, 每次肌注2. 0m l/头。
PAR的诊断方法
分子生物学检测技术:Kamps(1990)用亚克隆的方
法获得5个DNA探针,这5个探针覆盖了全部的toxA
基因,用来检测DNA片断。
1991
年,Magyar等用过氧化物标记的单克隆抗体在尼龙
膜上进行菌落原位杂交。该方法特异性好,可以用
于检测初级培养物的菌落。
自1994年
Nagai首次报道用PCR的方法检测T＋Pm以来,人们
猪进行性萎缩性鼻炎
Pm的染色特性
Pm的产毒素菌株多为D型,少数A型Pm菌株也可产毒素。 我国已有T＋Pm菌株的流行。 T＋Pm与非产毒素多杀性巴 氏杆菌(non-toxigenic Pasteurella multocida, T-Pm)在形态 特征及生化反应特性上没有明显区别。但T-Pm不含toxA 基因,不能导致进行性萎缩性鼻炎。有无toxA基因是两种 菌的根本区别。
预防与治疗
实验证实,Bb菌苗中加有D型T+Pm提纯类毒素的 联苗效果最好,而且该联苗对A型T+Pm菌株的攻 击也同样具有保护作用。
目前,科研工作者已克隆了toxA基因片段 ,转化大 肠杆菌BL21(DE3) 诱导表达 ,检测表明,表达蛋白 具有良好的生物学活性,为研制猪进行性萎缩性鼻
炎新型基因工程疫苗奠定了基础 。
T＋Pm分泌一种约146kDa的皮肤坏死毒素(PMT) ,该毒素 由toxA基因编码,是T+Pm的主要致病因子。
1986年Dominic等人用少量提纯的毒素就复制出本病,有力 的证明了PMT是T＋Pm的主要致病因子.
PMT不耐热,70℃加热30min,甲醛、戊二醛或胰酶等处理
均可使其失去毒素活性 。在PH<5环境下该蛋白对蛋白
PCR检测T+Pm （860bp）
双重PCR
预防与治疗
猪萎缩性鼻炎的疫苗: 最初,AR的疫苗为Bb单苗。随着人们对该病认识 的不断加深,制成了加有T+Pm或/和其类毒素的 联苗。 类毒素具有免疫原性。相关研究表明,纯类毒素与 粗类毒素的免疫原性差异显著。用天然毒素PMT 攻击时,前者免疫的猪可完全得到保护,而用后者免 疫的猪只有部分得到了保护,并证实来自不同型菌 株的类毒素具有交叉免疫性,抗毒素虽然能大大降 低T+Pm在鼻腔内的定居及繁殖,但并不能消除其 感染。
危害:猪厂一旦被产毒素多杀性巴氏杆菌污染,很难 净化。 患PAR 的猪鼻甲骨变形、萎缩或消失 ,发 育迟缓、饲料转化效率降低 ,对其它病原的易感性 强 ,从而使养猪业造成巨大经济损失 。
Fig. 3. Representative photographs of the turbinate conchae of experimental pigs in groups vaccinated with rsPMTs vaccine (B), conventional AR-toxoid vaccine (C), and unvaccinated (D), at 2-weeks after authentic PMT challenge. The unvaccinated and unchallenged pigs were served as the negative control (A).
Thanks
已建立了多种T＋Pm 的PCR检测方法,包括多重
PCR、巢式PCR。PCຫໍສະໝຸດ Baidu法灵敏性高,特异性强。
PAR的诊断方法
X-射线诊断法: 根据有关材料报道,X射线诊断法 比细菌学和血清学检查具有更高的阳性检出率和 较大的诊断准确性. X射线检查或照相时,可将胶片贴在病畜的硬腭上, 从鼻背部向 鼻腔投照,相片上可显示出鼻甲骨和黏 膜的改变.
PAR的诊断方法
细菌学方法 :常用方法通过尸体剖检和活体拭子 中分离鉴定多杀性巴氏杆菌进行诊断。
免疫学方法: Forged(1988)等最先使用单克隆抗体 检测初代分离培养基中细菌混合物所产生的毒素。 以两种不同的鼠抗Pm毒素单克隆抗体P3F51和 P3F37为基础建立的夹心ELISA检测Pm。目前,已 有商品化DAKO PMT-ELISA -Kit(K0009)和DAKO ELISA-Kit(K0038)分别用于检测毒素和血清及初 乳中抗毒素抗体,可用于区分带菌猪及预防传播。
预防与治疗
消毒:本菌抵抗力不强,阳光中曝晒10min,或在60℃ 10min可被杀死。3%石碳酸、3%福尔马林,10%石 灰乳,2%来苏儿,0.5%—1% 氢氧化钠等5min可杀死 本菌。
治疗: ①氯霉素粉剂,每千克体重50毫克,内服,每日1 次,连 服3～5天。 ②盐酸土霉素,每千克体重50毫 克,肌肉注射,每日1 次,连用3～5天。。 ③磺胺六 甲氧嘧啶,每千克体重0.05～0.1克,拌饲料中 喂服, 每日1次,连服5天,同时用青霉素滴鼻,每天两次。
酶敏感。
该毒素是一种促有丝分裂原,它通过对造骨细胞有丝分裂 的激活,致使造骨细胞的异常生长及形态变化,最终导致破 骨细胞对骨细胞的瓦解。正因为PMT在PAR的产生过程中 起着如此重要的作用,现在有关PAR的研究,无论是诊断方
法的建立还是疫苗的研制,都关注于PMT。
PAR的症状及危害
猪萎缩性鼻炎的临床症状表现为打喷嚏、鼻塞、 鼻衄、颜面部变形或歪斜,病猪生长发育缓慢 。 另外,患猪由于鼻泪管阻塞,泪液流出眼外,在眼内 眦下皮肤上形成弯月形的湿润区,被尘土沾污后形 成灰黑色痕迹,称为“泪斑”。