蛋白酶抑制剂选择的原则
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a。蛋白酶抑制剂选择的原则
1.当处理细胞或组织时,应该考虑到标本中存在活性蛋白酶,故在蛋白样本制备的早期阶段就应该使用蛋白酶抑制剂。
2.为得到理想的实验结果,在蛋白样本制备过程中,应在临用前才往蛋白溶液标本中加入蛋白酶抑制剂以确保其发挥最大活性。一般而言,抑制剂不应溶解在缓冲液里贮存较长时间。
3.merck的蛋白酶抑制剂“鸡尾酒式”混合物之所以分为多种类型,是由于不同的细胞和组织表达不同类型的蛋白酶。如:丝氨酸蛋白酶广泛分布于所有细胞内;细菌含高水平的丝氨酸蛋白酶及金属蛋白酶;动物组织提取物中富含丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶及金属蛋白酶,植物提取物中含高水平的丝氨酸蛋白酶及半胱氨酸蛋白酶。
4.除了样本类型外,还要考虑下游实验方法的影响,如要进行金属螯合层析或2D凝胶电泳实验,则不宜选用EDTA来抑制蛋白酶的活性。
b。以前使用片剂抑制剂混合物,换成即用型的液体混合物是否很方便?
是的,实际上,使用预制的液体蛋白酶抑制剂混合物有很多优势。如下:
1,稳定--比溶解在液体中的片剂蛋白酶抑制剂混合物有更高的稳定性
2. 高效-可以使抑制剂更快与样本内的蛋白酶起反应
3 灵活又经济--可以按实验需要加入特定剂量的抑制剂混合物
4. 使用方便,即用型的贮存液形式,节省更多成本及时间。