菊花的组织培养PPT课件

二、实验操作
（一）制备MS固体培养基 MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般 使用4。C保存配制好的培养基母液来制备. 1、配置各种母液
①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓 缩100倍，常温保存.
②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一 般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液.
③用母液配制培养基时，需要根据各种母液 的浓缩倍数，计算用量.
①定义：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整 个体的潜能的特性.
②原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所 特有的全套遗传物质，都有发育成为完 整个体所必需的全部基因.
③实例 已分化的植物细胞，仍具有全能性. 高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能 性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性， 这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的 遗传物质.
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
（2）离体的植物组织和细胞对营养、环境等条 件的要求相对特殊，需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括： A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等
B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等
C、有机物、植物激素
MS固体培养基成分及比例
④全能性的比较: 受精卵>生殖细胞>体细胞
（3）植物组织培养 细胞离体
①必要条件： 一定的营养物质、激素和其他 外界条件
②原理: 细胞的全能性
③相关概念:
A.外植体：从活植物体上切下进行培养的那 部分细胞、组织或器官.
B.脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细 胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。
同时使用
实验结果 有利于细胞分裂，但不 利分化 细胞既分裂也分化
分化频率高
③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对 植物细胞发育方向的影响 生长素 > 细胞分裂素：有利于根的分化
生长素 < 细胞分裂素： 有利于芽的分化，抑 制根的分化
生长素 ＝ 细胞分裂素： 促进愈伤组织生长
（4）pH、温度、光照
(4)、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法
人工种子
组织培养与常规繁殖相比优点众多
同常规的无性繁殖方法相比，组织培养快速繁殖法主要具有以 下优点： （1）快速。 采用常规的方法如分株法，一棵花卉一年一般只能生产几株或几十 株，但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的 小植株。 （2）周年生产。花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行，因条 件可控，所以不受季节限制，可以全年进行连续生产。而常规 的无性繁殖则受季节限制，只能在花卉生长季节进行繁殖。 （3）经济效益高。花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小，在一 个200平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。如按每株 1元计算，每年产值上百万元。 （4）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因。所以使 用这项技术可让优良的品种不断地延续。
2、配置培养基
① 配制培养液 ② 调PH
③培养基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml. 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此 不必添加植物激素.
细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤 （ 6－BA）、玉米素（ZT）
赤霉素类： 赤霉酸（GA3）
②生长素和细胞分裂素作用
植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在 的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势
使用顺序
先使用生长素，后使用 细胞分裂素
先使用细胞分裂素后使 用生长素
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养 不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐 混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素 两大类。
（3）植物激素的影响
①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉 素
生长素类：2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲 哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲 哚丁酸（IBA）
C.再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中 重新分化根或芽等器官的过程
D.愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液 泡化的、成无定形状态的薄壁细胞.
人参的愈伤组织
菠萝的愈伤组织
2、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择
烟草和胡萝卜的组织培养较为容易
枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会 影响实验结果
课题1 菊花的组织培养
组织培养是指在人工培养基植物的器官、组织、细胞和原生质体， 并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。
一、基础知识 1、植物的组织培养
（1）细胞的分化
①概念：在个体发育中，相同细胞的后代在形态、 结构、生理功能上发生稳定性差异的过 程.
②过程：如：受精卵增殖、生长、分化形成组 织、器官、系统.
再分化
根和芽
完整的植 物体
4、植物组织培养的应用：
(1)、培育无病毒植株
(2)、 培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗 烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）
(3)、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能 力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种 子，可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子 困难或发芽率低等问题.
讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题 2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方 有哪些明显的不同？
答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必 需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持培养 基的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了 满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响 后所产生的特殊营养需求。
③特点： A.持久性：
是一种持久性的变化，它发生在生物体的 整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度.
B.稳定性： 细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的.
C.全能性：
已分化的细胞，仍具有发育的潜能.
④结果： 形成不同的细胞和组织
⑤原因： 基因在特定的时间和空间条件下的选 择性表达的结果.
（2）细胞的全能性
pH控制在5.8左右，温度控制在18－22。C,每日 用日光灯照射12h.
3、植物组织培养过程:
植物细胞培养
细胞分裂素>
离
生长素
体 组
脱分化
愈 伤 再分化
芽Baidu Nhomakorabea
织 或 细
细胞分裂素 ≈生长素
组 织
根 细胞分裂素
植 物 体
胞
<生长素
不需要光?
需要光
植物组织培养的过程
离体的植 脱分化 物组织或 细胞
愈伤组织