猪蓝耳病活疫苗免疫效果实验观察

猪蓝耳病活疫苗免疫效果试验观察

周志平1，2，陈火光2，田同军2，孙仁华2，徐学平2，郑立栋2，金晓林2，周继勇1

（1．浙江大学农业部疫病病原学与免疫控制重点开放实验室；2．杭州灯塔养殖总场）

摘要：共选择杜大长仔猪约3 452 头分成4 组，分别在19 日龄免疫蓝耳病活疫苗（R98 株）2 批，9 日龄免疫一批、7 日龄或15 日龄分别免疫一批，其中免疫仔猪共1188 头，非免疫对照2264 头。选61 头大长母猪在怀孕80 ～ 90 d 免疫蓝耳病活疫苗，48 头不免疫对照，观察产仔及哺乳期健康状况。并抽取部分试验猪血样检测PRRS 血清ELISA 抗体。结果显示，19 日龄1 组、19 日龄2 组、9 日龄1 组保育猪僵病仔率分别是1.38%、1.08%、1.66%，对照组分别是30.7%、14.5%、15.82%；出栏健仔率试验组分别是91.72%、96.77%、97.35%，对照组分别是67.54%、84.72%、82.64%；日增重试验组分别是293.4 g、274.6 g、304.7 g，对照组分别是241.9 g、236.9 g、256.9 g；差异很明显。对1-2 胎母猪比率达46.8% ～71.1% 的产后哺乳仔猪分别在7 日龄、15 日龄免疫对比试验表明，2 组仔猪窝发病率分别为23.4%、50.0%，出栏健仔率分别为97.19%、76.14%，说明对1-2 胎母猪产后仔猪7 日龄免疫比15 日龄免疫更好。母猪免疫组胎产活仔、死胎、初生仔猪头均重分别为10.11 头、0.98 头、1.482 kg，对照组分别为10.15 头/胎、0.90 头/ 胎、1.483 kg，2 组差异不显。试验组产后母猪不正常发生率为16.67%，比对照组40.43%要低23.76 个百分点，差异明显。哺乳仔猪精神不佳窝发生率分别为10.0%、17.02%，差异明显。说明母猪怀孕80 ～ 90 d 接种PRRS 活疫苗对母猪及胎猪尚未产生不良影响，且对产后母猪和仔猪临床健康情况有明显改善。2 周、4 周、6 周、8 周血清ELISA 抗体检测结果显示19 日龄1 组抗体阳性率分别为92.86%、85.71%、78.57%、92.86%，19 日龄2 组分别为100.0%、93.33%、86.67%、100.0%，9 日龄免疫组分别为100.0%、100.0%、92.86%、100.0%，对照组分别为73.33%、93.33%、86.67%、100.0%，说明免疫组和对照组升降曲线较一致，以9 日龄免疫组阳性率最高，对照组和19 日龄免疫组差异不大。总体说明活疫苗在阳性场并不能抵抗野毒攻击而影响血清学抗体转化，但在减少野毒临床致病性上有较明显改善作用。

关键词：蓝耳病活疫苗；母猪；免疫；抗体；效果

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome ，PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的高度接触性传染病，以妊娠母猪的繁殖障碍及各年龄猪特别是仔猪的呼吸道疾病为特征[1]。该病1987—1988 年在美国北卡罗来纳州、明尼苏达州及衣阿华州首先发生，随后开始流行，短短几年几乎席卷了整个北美和欧洲大陆。该病曾称为“神秘猪病”、“猪生殖与呼吸综合征”、“猪流行性流产和呼吸综合征”、“新猪病”、“蓝耳病”等，1991 年欧洲学者提出命名为“猪繁殖与呼吸综合征”，1992 年在美国的明尼苏达州召开的第1届国际研讨会上正式采用，世界动物卫生组织（OIE）将其列为B 类传染病[2]。我国大陆于1995 年首先在华北地区规模化猪场发生，1996 年郭宝清首次

分离到PRRSV 进而证实[3]，1999 年2 月12 日我国农业部第96 号公告将其列为二类传染病。2007 年4 月，农业部正式确定“无名高热病”为高致病性蓝耳病，并定义为是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性疫病，仔猪发病率可达100%、死亡率可达50% 以上，母猪流产率可达30% 以上育肥猪也可发病死亡是其特征。

10 多年来，人们对猪蓝耳病免疫学的研究开展了大量的工作，促使人们开发了多种类型的疫苗，中国市场上获农业部批准的有蓝耳病灭活疫苗如CH-1a 株、NVDC-JXA1 株，蓝耳病活疫苗有CH-1R 株、R98株、JXA1-R 株、ATCCVR-2332 株。依其毒力来源不同，存在二种，美洲株疫苗、变异株疫苗。但猪蓝耳病疫苗的免疫效果至今尚未得到一致公认，还存在着很多的争论。为探索蓝耳病活疫苗的临床免疫效果，我们也进行了仔猪和母猪的免疫试验，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 试验疫苗

国产猪蓝耳病活疫苗（R98 株，瑞普保定）。

1.2 试验猪

7 日龄-80 日龄杜大长仔猪3452 头。大长二元怀孕母猪109 头。

1.3 观察

临床发病情况观察、生产技术参数统计。

1.4 血样采集和处理

在2、4、6、8 周龄抽样，在前腔静脉或耳静脉采集3 - 4 mL 血液，冷藏保存一夜或室温静置12 h后，3 000 r/min 离心5 - 10 min 取上清液置于1.5 mL 小试管内，贴标签标记后冷冻保存，等各次跟踪血清抽取处理完成后一起检测血清ELISA 抗体。

1.5 主要仪器设备

酶标测定仪（BioTek®），猪繁殖与呼吸综合征ELISA 检测试剂盒（为美国IDEXX 公司产品）。96 孔平底微量反应块，微量移液器、恒温箱、洗板机（BioTek®）等。

1.6 检测方法

猪蓝耳病抗体检测参照美国IDEXX 公司ELISA 诊断试剂盒说明书进行。待检血清做1∶40 稀释，取血清5μL, 加入稀释液195L。取稀释好的待检血清100μL 加入包被好的96 孔聚苯乙烯诊断试剂盒中，置室温作用30min，取出，用洗涤液充分洗涤3 -5 次，甩尽残留液体，拍净于吸干纸。每孔加入辣根过氧化物酶标记抗体100 uL，室温作用30 min，洗涤拍干。再在每孔中加入TMB 底物溶液100 uL，室温作用15 min，加入终止液100uL，立即置Bio-rad 550 型酶标仪上650nm 处测定。分别按所附计算公式判定是否为血清抗体阳性。

1.7 结果判定

猪蓝耳病抗体阳性对照平均值（PC:PRRS）减去阴性对照平均值（NC:PRRS）必须≥0.150。NHC 孔阳性对照平均值（PC:NHC）必须≤ 0.120，NHC 孔阴性对照平均值（NC:NHC）