妇科感染常见病原菌及检测方法参考课件

4. DNA杂交探针
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盐水湿片和10％KOH
检出孢子及假菌丝即可确诊。
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培养
复发病例或有症状，但盐水/KOH 镜检阴性 时考虑培养。
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DNA 杂交探针
不需要活的微生物 需要特殊转运管 仅针对白色假丝酵母菌 FDA 批准仅用于有症状女性阴道分泌物
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细菌性阴道病(BV)
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阴道加德纳菌
革兰染色：
大小：0.5μm ×1.5 - 2.5μm 形态：具有多形性，呈小杆状或球状 排列：呈单个或成双排列
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动弯杆菌
为厌氧菌 革兰阴性弧菌 形态：呈弧形，两端尖细 排列：呈单个或呈双排列
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细菌性阴道病的实验室诊断
1. pH > 4.5
3.定量革兰染色——Nugent评分
➢ 提高患者治疗依从性；
➢ 使患者更有可能遵从性伴侣告知。
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3
病例一
患者，女性，24岁，已婚，孕25周。外阴瘙 痒一周来就诊。妇检：宫高与妊娠月份相符 ,外阴潮红、充血，见大量黄色脓性分泌物 。
考虑什么病？进一步做什么检查？
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4
阴道炎
正常情况下阴道内寄居有大量需氧菌及 厌氧菌，形成正常的阴道菌群。
2. 盐水湿片+10% KOH
线索细胞
KOH 氢氧化钾
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4. DNA杂交探针
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盐水湿片
线索细胞是诊断BV的最敏感特异的指 标。
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胺试验
将一滴阴道分泌物滴于玻片上，再加一滴 10％KOH，可闻到氨味或鱼腥样气味，即 胺试验阳性。
10%KOH 氢氧化钾
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定量革兰染色 ——Nugent评 分
任何原因将阴道菌群生态平衡打破，可 形成条件致病菌，引起阴道炎。
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阴道粘膜生5态系统
阴道炎
临床常见有：细菌性阴道病、念珠菌性阴 道炎、滴虫性阴道炎。
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吴文湘, 廖秦平. 阴道炎的诊治进展[J]. 中6国实用妇科与产科杂志, 2009(12):949-952.
阴道炎相关病原实验室检查
常见病原因子 酵母菌
医生：
根据病史及临床表现可初步诊断为阴 道炎。取阴道分泌物拭子，嘱病人立即送 检，以明确病原学诊断。
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念珠菌性阴道炎
主要病原菌为：
白色假丝酵母菌
约占80%-90%
光滑假丝酵母菌 热带假丝酵母菌 近平滑假丝酵母菌
约占10%-20%
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念珠菌性阴道炎的实验室诊断
1. pH < 4.5
3.培养
2. 盐水湿片+10% KOH
阴道分泌物拭子
转运拭子送检， 室温， 12h
阴道分泌物拭子
室温，7d
阴道分泌物拭子
置于 0.5mL 生理盐水或转 运拭子 ，室温， 2h
阴道分泌物拭子
转运拭子送检， 室温， 12h
阴道分泌物拭子
室温，7d
阴道分泌物拭子
置于盐水送检， 室温， 30min（最佳）－ 2h
阴道上皮/分泌物拭子
转运拭子或盐水送检， 室 温， 24h
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vaginosis.[J]. New England Journal of Medicine1,42005, 353(353):1899-911.
阴道加德纳菌
为革兰阴性或染色不定的球杆菌，有细胞 壁，无鞭毛，不形成荚膜和芽孢。
兼性厌氧 最适温度：时35℃-37 ℃ 最适PH：6.0-6.5
定量革兰染色 ——Nugent评 分
乳酸杆菌3分，加德纳菌/普雷沃菌等 3分，动
弯杆菌 4分。
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评分：10分 诊断：B3V0
阴道毛滴虫
阴道的致病性厌氧寄生原虫，虫体为 845μm，呈梨形或椭圆形，无色透明，大小为 白细胞的2-3倍。
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毛滴虫性阴道炎的实验室诊断
阴道正常菌群（乳酸杆菌）减少，而其他 条件致病菌大量繁殖。
主要致病菌有：阴道加德纳菌、动弯杆菌 、普雷沃菌等厌氧菌和支原体等。
Fredricks D N, Fiedler T L, Marrazzo J M. Molecular identification of bacteria associated with bacterial
定量革兰染色是BV 诊断最特异的检查
。
形态类别
每个油镜视野菌体数 / 分值 得分
0 ≤1 1 - 5 5 -30 >30
加德纳菌/普雷沃菌
(革兰染色不定、球杆 0
1
2
3
4
菌)
动弯杆菌 乳酸杆菌
0
1
2
3
4
4
3
2
1
0
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定量革兰染色 ——Nugent评 分
乳酸杆菌革兰染色
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定量革兰染色 ——Nugent评 分
（ pH<4.5 ）
细菌性阴道病 （ pH>4.5 ）
毛滴虫 （ pH>4.5 ）
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诊断方法
盐水湿片 和 10％KOH
培养 DNA 杂交探针
盐水湿片和 10％KOH 定量革兰染色 DNA 杂交探针 盐水湿片
快速抗原检查 DNA 杂交探针
培养
核酸扩增实验
最优标本
转运要求及最佳时间
阴道分泌物拭子
置于 0.5mL 生理盐水或转 运拭子 ，室温， 2h
阴道加德纳菌革兰染色
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定量革兰染色 ——Nugent评 分
动弯杆菌革兰染色
2
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定量革兰染色 ——Nugent评 分
线索细胞革兰染色
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定量革兰染色 ——Nugent评 分
分数解释标准：
0-3 分 正常 4-7 分 中介
7-10 分 细菌性阴道炎
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定量革兰染色 ——Nugent评 分
阴道分泌物拭子
室温，7d
阴道分泌物拭子
直接放入 InPouch TV 培养 系统送检 室温， 48h
阴道拭子、宫颈拭子、尿液、
液基细7 胞学标本、尿道拭子、 室温，7d 直肠拭子、咽拭子
病例1
患者，女性，24岁，已婚，孕25周。外阴瘙痒一 周来就诊。妇检：宫高与妊娠月份相符,外阴潮 红、充血，见大量黄色脓性分泌物。
乳酸杆菌0分，上皮细胞周围非常清楚。
评分：0分
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定量革兰染色 ——Nugent评 分
乳酸杆菌0分，少量杂菌，见白细胞和菌丝。
评分：1分 诊断：BV阴性，但诊断为VVC
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定量革兰染色 ——Nugent评 分
乳酸杆菌2分，加德纳菌/普雷沃菌等 3分
，动弯杆菌 1分。
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评分：6分 诊断：29BV中间型
妇科感染常见病原菌及检测方法
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妇科感染常见疾病
阴道病/阴道炎 尿道炎 子宫颈炎 盆腔感染
➢ 子宫内膜炎 ➢ 输卵管－卵巢脓肿 ➢ 输卵管炎症
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2Βιβλιοθήκη Baidu
妇科感染实验室检查的意义
很多妇科感染症状、体征有很多相似之 处。临床诊断本身既不敏感，也不特异 。
实验室诊断可以：
➢ 明确病原微生物，使治疗更具针对性；