薄荷油药理作用和急性毒性的研究

实验研究

薄荷油药理作用和急性毒性的研究

陈光亮　姚道云　汪远金　佘玉宝　范　峰

(安徽中医学院药理学教研室　合肥　230038)

提　要　目的:研究薄荷油的药理作用。方法:采用大鼠利胆、体外溶石、离体平滑肌、角叉菜胶致炎等方法。结果:薄荷油120、60、30mg/kg十二指肠给药,对大鼠有明显的利胆作用,并能轻度增加胆汁中胆汁酸的排出量。5、015、0105mg/L在4～5周内对胆固醇结石、胆色素结石无明显溶解作用。薄荷油对豚鼠离体回肠有一定的抑制作用,并能拮抗组胺和乙酰胆碱引起的回肠痉挛。对角叉菜胶致大鼠足肿胀和醋酸致小鼠扭体反应有一定的抑制作用,但对二甲苯致小鼠耳肿胀、小鼠棉球肉芽肿增生、小鼠温浴致痛反应潜伏期无明显影响。小鼠ig M TD>4000mg/kg,ip LD50为114419±7815(106911～122610)mg/kg。结论:薄荷油有明显的利胆作用、一定的解痉作用和较弱的抗炎镇痛作用,体外无溶石作用。

关键词　薄荷油;利胆;解痉;抗炎;镇痛;急性毒性

薄荷油系薄荷的挥发油,主要含l2薄荷脑、l2薄荷酮及薄荷

酯类。薄荷油具有清凉止痒、解痉、抗炎镇痛等作用,近年研究

表明薄荷脑有促渗透作用。本文报道薄荷油的利胆、溶石、解

痉、抗炎镇痛作用和急性毒性试验的研究结果。

1　材料

111　试验药物与试剂　薄荷油经环糊精包裹、干燥、制成胶囊

剂,每粒含薄荷油50mg,由本院药剂教研室提供,批号981012,

临用前用015%羧甲基纤维素钠配成所需浓度。熊去氧胆酸

片,上海三维长江生化制药厂,批号980301。硫酸阿托品注射

液,上海禾丰制药有限公司,批号980701。胆固醇,北京化学试

剂公司,批号940628。胆固醇结石、胆色素结石由安徽医科大

学第一附院和安徽中医学院第一附院提供;氯化乙酰胆碱,上

海试剂三厂,批号950601;磷酸组胺,上海丽珠东风生物技术有

限公司,批号980602;角叉菜胶由军事医学科学院惠赠。

112　动物　雄性Wistar大鼠、昆明种小鼠、豚鼠均由安徽医科

大学实验动物中心提供,合格证号为:皖医实动准第01号。

113　仪器　DC2001型离体器官测定仪,南京分析仪器厂生产;

721型分光光度计,上海第三分析仪器厂生产。

2　方法与结果

211　对大鼠胆汁分泌的影响　大鼠戊巴比妥钠40mg/kg ip麻

醉后,分离胆管,插管,引流胆汁入刻度离心管,十二指肠给药,

观察给药前1h及给药后1、2、3、4h胆汁流量及4h胆汁总量,并

按法测定胆汁中胆固醇、胆汁酸、胆色素的含量,结果见图1、图

2和表1。

表1　薄荷油对大鼠胆汁成分的影响( x±s,n=8)

组　别

剂量

(mg/kg)

胆汁酸(mmol/L)

给药前给药后

胆固醇(μmol/L)

给药前给药后

生理盐水　2515±5132410±3192128±01422116±0144熊去氧胆酸152212±5102515±4172190±01712138±0161薄荷油 1202116±4142615±5152167±01512124±0146 6021

17±5182312±5142116±01541184±0130 302214±4172317±5132116±01651175±01

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图1　薄荷油对大鼠的利胆作用

A:生理盐水,B:熊去氧胆酸片15mg/kg,C:薄荷油120mg/kg,D:薄荷油60mg/kg,E:薄荷油30mg/kg。与生理盐水组比较3P<0.05,33P <0.01;与药前比较△P<0.05,△△P<0.01

图2　薄荷油对大鼠的利胆作用

A:生理盐水,B:熊去氧胆酸片15mg/kg,C:薄荷油120mg/kg,D:薄荷油60mg/kg,E:薄荷油30mg/kg。相对量=4h总量/给药前1h量,与生理盐水组比较3P<0.05,33P<0.01

薄荷油高、中、低剂量组胆汁流量明显增加,以药后1～2h 作用最明显。与给药前相比,胆汁中胆汁酸含量增加,胆固醇含量减少,胆色素的含量无明显变化,表明薄荷油有明显的利胆

01中药药理与临床2001;17(1)

作用,并能增加胆汁中胆汁酸的排出量。

212　体外溶石试验　将胆石标本浸入盛有受试药物的试管中,37℃水浴中静置,每隔3d更换药液1次,薄荷油用生理盐水配至所需浓度,同时设生理盐水对照组和熊去氧胆酸片组,观测时间为4～5周,以结石的重量变化率和结石消失时间为观测指标。结果:薄荷油5、015、0105mg/L和熊去氧胆酸片10、1、011mg/L剂量组与生理盐水组比较,受试药液颜色、结石外观、重量变化率均无显著性差异(数据未列出),表明薄荷油在上述浓度范围无明显的溶石作用。

213　对豚鼠离体回肠收缩活动的影响　280～340g豚鼠击昏后迅速取出回肠2～3cm,移入含Krebs2Henselit营养液的浴槽中,与张力换能器相连,记录肠管收缩曲线。在浴槽内加入不同浓度的药物,观察薄荷油对正常肠管收缩活动的影响以及对磷酸组胺(终浓度为111×1027mol/L)或氯化乙酰胆碱(终浓度为212×1026mol/L)所致肠管痉挛的拮抗作用,结果见表2。薄荷油能抑制豚鼠离体回肠的正常收缩活动,可降低其收缩幅度、频率和张力,并能拮抗组胺或乙酰胆碱所致肠管痉挛,且呈明显的量效关系。

表2　薄荷油对豚鼠离体回肠收缩活动的影响及对组胺、乙酰胆碱所致肠管痉挛的拮抗作用( x±s)

药　物终浓度

(mg/L)

标本数

(条)

收缩幅度(cm)

药前药后

生理盐水等容量50011±011

薄荷油3380-014±012

668-017±0133

1338-110±0143

乙酰胆碱01590319±110

乙酰胆碱+薄荷油339319±110218±0193

669117±01733

1338019±01433

乙酰胆碱01550415±112

乙酰胆碱+阿托品1167×10225415±112019±01533

乙酰胆碱01550412±111

乙酰胆碱+生理盐水等容量5412±111319±117

组 胺1167×102270311±019

组胺+薄荷油337311±019118±01533

667110±01333

1335018±01233

组 胺1167×102250410±112

组胺+阿托品1167×10225410±112314±110

组 胺1167×102250313±019

组胺+生理盐水等容量5313±019310±110

给药前回肠收缩幅度记为0;与给药前比较3P<0.05,33P<

0.01

214　抗炎作用

21411　对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响　雄性大鼠随机分组, n=10,灌胃给药1h后,每鼠左后足皮下注射1%角叉菜胶0107ml,测定致炎前及致炎后1、2、4、6h足容积,以致炎前后容积之差为肿胀度(ml)。结果:生理盐水组为0141±0113,0174±0118,0179±0114,0182±0119;消炎痛组为0121±0111, 0137±0115,0153±0123,0149±0119(P均<0.01);薄荷油高(120mg/kg)、低(30mg/kg)剂量组分别为0123±0119(P<0.

05),0155±0114(P<0.05),0170±0116,0175±0120;0137±0117,0174±0118,0174±0113,0177±0107。薄荷油高剂量组对角叉菜胶致大鼠足肿胀有一定的抑制作用。

21412　对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响　雄性小鼠随机分组,n =10,灌胃给药1h后,每鼠左耳两面涂二甲苯30μl,2h后处死,打下耳片称重,以左右耳片重量的差值为肿胀度(mg)。结果生理盐水组为1419±215,消炎痛组为914±215(P<0.01),薄荷油高(125mg/kg)、中(6215mg/kg)、低(31125mg/kg)剂量组分别为1410±415、1212±310、1419±316,薄荷油对二甲苯致小鼠耳肿胀无明显影响。

21413　对小鼠棉球肉芽肿增生的影响　雄性小鼠随机分组,n =12,戊巴比妥钠麻醉下将10±015mg灭菌棉球置入右侧腹股沟部皮下。术后当天开始给药,每日1次,连续7d,第8天处死小鼠,取出棉球肉芽肿,在60℃烤箱中烘干,称重,以mg/g体重表示。结果:生理盐水组为1101±0117,薄荷油高(250mg/kg)、中(125mg/kg)、低(6215mg/kg)剂量组分别为1106±0115, 0197±0110,1104±0117,地塞米松组为0188±0112(P<0.

01),薄荷油对小鼠棉球肉芽肿增生无明显影响。

215　镇痛作用

21511　对醋酸致小鼠扭体反应的影响　小鼠分组与给药同21412,给药后1h,每鼠ip0.4%醋酸溶液0125ml/10g体重,观察15min内小鼠扭体反应次数。结果:生理盐水组为3414±1010,消炎痛组为417±616(P<0.01),抑制率为8613%,薄荷油高、中、低剂量组分别为2312±1019(P<0.05),2010±1012 (P<0.01),2716±917,抑制率分别为3215%、3819%、1918%,表明薄荷油对醋酸致小鼠扭体反应有明显的抑制作用。

21512　对小鼠温浴致痛反应潜伏期的影响　小鼠分组同21412,将鼠尾垂直浸入48℃恒温水浴5cm,记录缩尾反应潜伏期作为基础痛阈,给药后1、2、3h再分别测定小鼠痛阈的变化。结果薄荷油对小鼠温浴致痛反应潜伏期无明显影响(数据未列出)。

216　急性毒性　给药后小鼠很快(2～10min)出现兴奋、震颤、多动、上跳、定向障碍、呼吸急促、俯卧不动,呈深度醉酒状,40～60min后逐渐恢复或出现死亡。灌胃给药最大耐受量> 4000mg/kg,腹腔注射LD50为114419±7815(106911～122610) mg/kg。尸检主要脏器未见明显病变。

3　讨论

薄荷油十二指肠给药,能显著增加大鼠的胆汁分泌量,药后1～2小时作用最明显,4小时胆汁分泌总量明显增加,且有一定的剂量相关性,表明薄荷油有明显的利胆作用,与文献[1]报道相似,但作用强度稍弱。内源性胆固醇约80%在肝脏内合成,进一步酯化为胆固醇酯或氧化成胆汁酸,胆汁酸是胆固醇的主要代谢终产物,胆固醇/胆汁酸的比例增加是形成胆固醇结石的最基本原因。薄荷油在增加胆汁分泌的同时,还能轻度增加胆汁中胆汁酸的浓度,降低胆固醇的浓度,有利于防治胆固醇结石。但体外试验,薄荷油和熊去氧胆酸片在4～5周时间内对胆固醇结石、胆红素结石均未见溶解作用。亦未见到有薄荷油溶石作用的报道[2]。

薄荷油能抑制豚鼠离体回肠的收缩活动,可降低其收缩幅度、频率和张力,但所需浓度较高,并能浓度依赖性地拮抗组胺或乙酰胆碱所致的肠管痉挛,表明这种抑制作用是非特异性的。文献[3]报道薄荷醇46mg/kg灌胃给药,能抑制小鼠小肠推

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