薄荷油药理作用和急性毒性的研究

实验研究
薄荷油药理作用和急性毒性的研究
陈光亮　姚道云　汪远金　佘玉宝　范　峰
(安徽中医学院药理学教研室　合肥　230038)
提　要　目的:研究薄荷油的药理作用。

方法:采用大鼠利胆、体外溶石、离体平滑肌、角叉菜胶致炎等方法。

结果:薄荷油120、60、30mg/kg十二指肠给药,对大鼠有明显的利胆作用,并能轻度增加胆汁中胆汁酸的排出量。

5、015、0105mg/L在4～5周内对胆固醇结石、胆色素结石无明显溶解作用。

薄荷油对豚鼠离体回肠有一定的抑制作用,并能拮抗组胺和乙酰胆碱引起的回肠痉挛。

对角叉菜胶致大鼠足肿胀和醋酸致小鼠扭体反应有一定的抑制作用,但对二甲苯致小鼠耳肿胀、小鼠棉球肉芽肿增生、小鼠温浴致痛反应潜伏期无明显影响。

小鼠ig M TD>4000mg/kg,ip LD50为114419±7815(106911～122610)mg/kg。

结论:薄荷油有明显的利胆作用、一定的解痉作用和较弱的抗炎镇痛作用,体外无溶石作用。

关键词　薄荷油;利胆;解痉;抗炎;镇痛;急性毒性
薄荷油系薄荷的挥发油,主要含l2薄荷脑、l2薄荷酮及薄荷
酯类。

薄荷油具有清凉止痒、解痉、抗炎镇痛等作用,近年研究
表明薄荷脑有促渗透作用。

本文报道薄荷油的利胆、溶石、解
痉、抗炎镇痛作用和急性毒性试验的研究结果。

1　材料
111　试验药物与试剂　薄荷油经环糊精包裹、干燥、制成胶囊
剂,每粒含薄荷油50mg,由本院药剂教研室提供,批号981012,
临用前用015%羧甲基纤维素钠配成所需浓度。

熊去氧胆酸
片,上海三维长江生化制药厂,批号980301。

硫酸阿托品注射
液,上海禾丰制药有限公司,批号980701。

胆固醇,北京化学试
剂公司,批号940628。

胆固醇结石、胆色素结石由安徽医科大
学第一附院和安徽中医学院第一附院提供;氯化乙酰胆碱,上
海试剂三厂,批号950601;磷酸组胺,上海丽珠东风生物技术有
限公司,批号980602;角叉菜胶由军事医学科学院惠赠。

112　动物　雄性Wistar大鼠、昆明种小鼠、豚鼠均由安徽医科
大学实验动物中心提供,合格证号为:皖医实动准第01号。

113　仪器　DC2001型离体器官测定仪,南京分析仪器厂生产;
721型分光光度计,上海第三分析仪器厂生产。

2　方法与结果
211　对大鼠胆汁分泌的影响　大鼠戊巴比妥钠40mg/kg ip麻
醉后,分离胆管,插管,引流胆汁入刻度离心管,十二指肠给药,
观察给药前1h及给药后1、2、3、4h胆汁流量及4h胆汁总量,并
按法测定胆汁中胆固醇、胆汁酸、胆色素的含量,结果见图1、图
2和表1。

表1　薄荷油对大鼠胆汁成分的影响( x±s,n=8)
组　别
剂量
(mg/kg)
胆汁酸(mmol/L)
给药前给药后
胆固醇(μmol/L)
给药前给药后
生理盐水　2515±5132410±3192128±01422116±0144熊去氧胆酸152212±5102515±4172190±01712138±0161薄荷油 1202116±4142615±5152167±01512124±0146 6021
17±5182312±5142116±01541184±0130 302214±4172317±5132116±01651175±01
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图1　薄荷油对大鼠的利胆作用
A:生理盐水,B:熊去氧胆酸片15mg/kg,C:薄荷油120mg/kg,D:薄荷油60mg/kg,E:薄荷油30mg/kg。

与生理盐水组比较3P<0.05,33P <0.01;与药前比较△P<0.05,△△P<0.01
图2　薄荷油对大鼠的利胆作用
A:生理盐水,B:熊去氧胆酸片15mg/kg,C:薄荷油120mg/kg,D:薄荷油60mg/kg,E:薄荷油30mg/kg。

相对量=4h总量/给药前1h量,与生理盐水组比较3P<0.05,33P<0.01
薄荷油高、中、低剂量组胆汁流量明显增加,以药后1～2h 作用最明显。

与给药前相比,胆汁中胆汁酸含量增加,胆固醇含量减少,胆色素的含量无明显变化,表明薄荷油有明显的利胆
01中药药理与临床2001;17(1)
作用,并能增加胆汁中胆汁酸的排出量。

212　体外溶石试验　将胆石标本浸入盛有受试药物的试管中,37℃水浴中静置,每隔3d更换药液1次,薄荷油用生理盐水配至所需浓度,同时设生理盐水对照组和熊去氧胆酸片组,观测时间为4～5周,以结石的重量变化率和结石消失时间为观测指标。

结果:薄荷油5、015、0105mg/L和熊去氧胆酸片10、1、011mg/L剂量组与生理盐水组比较,受试药液颜色、结石外观、重量变化率均无显著性差异(数据未列出),表明薄荷油在上述浓度范围无明显的溶石作用。

213　对豚鼠离体回肠收缩活动的影响　280～340g豚鼠击昏后迅速取出回肠2～3cm,移入含Krebs2Henselit营养液的浴槽中,与张力换能器相连,记录肠管收缩曲线。

在浴槽内加入不同浓度的药物,观察薄荷油对正常肠管收缩活动的影响以及对磷酸组胺(终浓度为111×1027mol/L)或氯化乙酰胆碱(终浓度为212×1026mol/L)所致肠管痉挛的拮抗作用,结果见表2。

薄荷油能抑制豚鼠离体回肠的正常收缩活动,可降低其收缩幅度、频率和张力,并能拮抗组胺或乙酰胆碱所致肠管痉挛,且呈明显的量效关系。

表2　薄荷油对豚鼠离体回肠收缩活动的影响及对组胺、乙酰胆碱所致肠管痉挛的拮抗作用( x±s)
药　物终浓度
(mg/L)
标本数
(条)
收缩幅度(cm)
药前药后
生理盐水等容量50011±011
薄荷油3380-014±012
668-017±0133
1338-110±0143
乙酰胆碱01590319±110
乙酰胆碱+薄荷油339319±110218±0193
669117±01733
1338019±01433
乙酰胆碱01550415±112
乙酰胆碱+阿托品1167×10225415±112019±01533
乙酰胆碱01550412±111
乙酰胆碱+生理盐水等容量5412±111319±117
组 胺1167×102270311±019
组胺+薄荷油337311±019118±01533
667110±01333
1335018±01233
组 胺1167×102250410±112
组胺+阿托品1167×10225410±112314±110
组 胺1167×102250313±019
组胺+生理盐水等容量5313±019310±110
给药前回肠收缩幅度记为0;与给药前比较3P<0.05,33P<
0.01
214　抗炎作用
21411　对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响　雄性大鼠随机分组, n=10,灌胃给药1h后,每鼠左后足皮下注射1%角叉菜胶0107ml,测定致炎前及致炎后1、2、4、6h足容积,以致炎前后容积之差为肿胀度(ml)。

结果:生理盐水组为0141±0113,0174±0118,0179±0114,0182±0119;消炎痛组为0121±0111, 0137±0115,0153±0123,0149±0119(P均<0.01);薄荷油高(120mg/kg)、低(30mg/kg)剂量组分别为0123±0119(P<0.
05),0155±0114(P<0.05),0170±0116,0175±0120;0137±0117,0174±0118,0174±0113,0177±0107。

薄荷油高剂量组对角叉菜胶致大鼠足肿胀有一定的抑制作用。

21412　对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响　雄性小鼠随机分组,n =10,灌胃给药1h后,每鼠左耳两面涂二甲苯30μl,2h后处死,打下耳片称重,以左右耳片重量的差值为肿胀度(mg)。

结果生理盐水组为1419±215,消炎痛组为914±215(P<0.01),薄荷油高(125mg/kg)、中(6215mg/kg)、低(31125mg/kg)剂量组分别为1410±415、1212±310、1419±316,薄荷油对二甲苯致小鼠耳肿胀无明显影响。

21413　对小鼠棉球肉芽肿增生的影响　雄性小鼠随机分组,n =12,戊巴比妥钠麻醉下将10±015mg灭菌棉球置入右侧腹股沟部皮下。

术后当天开始给药,每日1次,连续7d,第8天处死小鼠,取出棉球肉芽肿,在60℃烤箱中烘干,称重,以mg/g体重表示。

结果:生理盐水组为1101±0117,薄荷油高(250mg/kg)、中(125mg/kg)、低(6215mg/kg)剂量组分别为1106±0115, 0197±0110,1104±0117,地塞米松组为0188±0112(P<0.
01),薄荷油对小鼠棉球肉芽肿增生无明显影响。

215　镇痛作用
21511　对醋酸致小鼠扭体反应的影响　小鼠分组与给药同21412,给药后1h,每鼠ip0.4%醋酸溶液0125ml/10g体重,观察15min内小鼠扭体反应次数。

结果:生理盐水组为3414±1010,消炎痛组为417±616(P<0.01),抑制率为8613%,薄荷油高、中、低剂量组分别为2312±1019(P<0.05),2010±1012 (P<0.01),2716±917,抑制率分别为3215%、3819%、1918%,表明薄荷油对醋酸致小鼠扭体反应有明显的抑制作用。

21512　对小鼠温浴致痛反应潜伏期的影响　小鼠分组同21412,将鼠尾垂直浸入48℃恒温水浴5cm,记录缩尾反应潜伏期作为基础痛阈,给药后1、2、3h再分别测定小鼠痛阈的变化。

结果薄荷油对小鼠温浴致痛反应潜伏期无明显影响(数据未列出)。

216　急性毒性　给药后小鼠很快(2～10min)出现兴奋、震颤、多动、上跳、定向障碍、呼吸急促、俯卧不动,呈深度醉酒状,40～60min后逐渐恢复或出现死亡。

灌胃给药最大耐受量> 4000mg/kg,腹腔注射LD50为114419±7815(106911～122610) mg/kg。

尸检主要脏器未见明显病变。

3　讨论
薄荷油十二指肠给药,能显著增加大鼠的胆汁分泌量,药后1～2小时作用最明显,4小时胆汁分泌总量明显增加,且有一定的剂量相关性,表明薄荷油有明显的利胆作用,与文献[1]报道相似,但作用强度稍弱。

内源性胆固醇约80%在肝脏内合成,进一步酯化为胆固醇酯或氧化成胆汁酸,胆汁酸是胆固醇的主要代谢终产物,胆固醇/胆汁酸的比例增加是形成胆固醇结石的最基本原因。

薄荷油在增加胆汁分泌的同时,还能轻度增加胆汁中胆汁酸的浓度,降低胆固醇的浓度,有利于防治胆固醇结石。

但体外试验,薄荷油和熊去氧胆酸片在4～5周时间内对胆固醇结石、胆红素结石均未见溶解作用。

亦未见到有薄荷油溶石作用的报道[2]。

薄荷油能抑制豚鼠离体回肠的收缩活动,可降低其收缩幅度、频率和张力,但所需浓度较高,并能浓度依赖性地拮抗组胺或乙酰胆碱所致的肠管痉挛,表明这种抑制作用是非特异性的。

文献[3]报道薄荷醇46mg/kg灌胃给药,能抑制小鼠小肠推
11
中药药理与临床2001;17(1)
进率,提示薄荷油在体内对平滑肌运动也有抑制作用。

薄荷油120mg/kg灌胃对角叉菜胶致大鼠足肿胀有一定的抑制作用,但作用较弱,仅维持1～2小时;对二甲苯致小鼠耳肿胀和小鼠棉球肉芽肿增生无明显抑制作用;对小鼠温浴致痛反应潜伏期无明显影响,但能抑制醋酸致小鼠扭体反应,抑制率为20%～39%,本文结果与文献报道相似[4],表明薄荷油的抗炎镇痛作用均较弱。

薄荷油灌胃或腹腔注射给药,小鼠很快出现中毒症状,表明薄荷油吸收迅速,易通过血脑屏障,对中枢神经系统有抑制作用,但作用维持时间短。

文献报道[5]薄荷醇能加强戊巴比妥钠的中枢抑制作用,使小鼠入睡时间缩短,但对睡眠时间无影响,并认为可能与促进戊巴比妥钠的吸收有关。

本文结果显示薄荷油本身有抑制中枢神经系统的作用。

参考文献
1　山源条仁1关于薄荷利胆作用的生物活性成分的研究1中医药信息,1986;(2)∶39～40
2　王　晖,吴　铁1薄荷及其有效成分药理作用的研究概况1中草药, 1998;29(6)∶422～424
3　谢以若,秦　杰1薄荷醇对家兔、豚鼠、小鼠离体肠平滑肌、子宫肌的作用1教学与医疗,1988;4(3)∶1～3
4　王　晖,许卫铭,王宗锐1薄荷醇对柴胡镇痛作用的影响1中医药研究,1996;(2)∶38～39
5　王　晖,许卫铭,王宗锐1薄荷醇对戊巴比妥中枢抑制作用的影响1现代应用药学,1995;12(3)∶1～2
Studies on the Pharmacologic E ffects and Acute Toxicity of Peppermint Oil
Chen Guangliang,Y ao Daoyun,Wang Yuanjin,She Yubao,Fan Feng
(Department of Pharmacology,Anhui College of TCM,Hefei　230038)
Objective:To study the pharmacologic effects of peppermint oil.Method:The methods of choleretic test,dissolving gallstone in vitro, isolated smooth muscle test,acute inflammation induced b y carrageenin were used.R esult:Peppermint oil120、60、30mg/kg giving into duodenum could significantly increase the secretion volume of bile in rat,and slightly increase the concentration of cholic acid in bile.Pe p2 permint oil5,0.5and0.05mg/L has no dissolving effect on cholesterol gallstone and bile pigment gallstone in4～5weeks.Peppermint oil could inhibit contraction of isolated ileum and antagonize the contraction induced by histamine and acetylcholine in guinea pigs.It could also suppress paw edema induced by carrageenin in rat and writhing induced by acetic acid in mice,but has no effect on the ear swelling caused by dimethylbenzene and cotton granulation hyperplasia and latent period of pain reaction in tail immersion test in mice.The MID> 4000mg/kg as single oral doses and LD50was1144.9±78.5(1069.1～1226.0)mg/kg when administered by intraperitoneal injection to mice.Conclusion:Peppermint oil has the effects of choleretic and relieve smooth muscle s pasm,and the effects of anti2inflammation and analgesia were weak,but has no dissolving effect on gallstone in vitro.
K ey w ords　peppermint oil;pharmacodynamics;acute toxicity
灯笼草镇痛作用及其机理的研究Ξ
单立冬　郭试瑜1　俞光第　久光正1　印其章
(苏州大学基础医学部神经生物学研究室　苏州　215007,　1日本昭和大学医学部第一生理学教室　东京　142)
提　要　目的:观察灯笼草的镇痛作用。

方法:采用扭体法、电刺激鼠尾2嘶叫法、钾离子透入法和辐射热2缩腿法等行为学指标以及丘脑束旁核神经元对伤害性刺激的放电反应的电生理指标。

结果:灯笼草能剂量依赖地提高大鼠电刺激鼠尾2嘶叫法的痛阈,剂量依赖地抑制醋酸引起的小鼠扭体反应,对炎症性痛敏及神经源性痛敏灯笼草也有镇痛作用,灯笼草还能明显抑制丘脑束旁核神经元对伤害性刺激的放电反应。

纳洛酮能翻转灯笼草的镇痛作用,反复给予灯笼草能产生耐受,但与吗啡镇痛之间不存在交叉耐受。

结论:灯笼草具有镇痛作用,其镇痛作用可能涉及中枢阿片受体。

关键词　灯笼草;镇痛;伤害性反应;束旁核;纳洛酮;吗啡
灯笼草(Physalis peruviana L.)具有清热、行气、止痛、消肿等功效,主要用于治疗感冒、咽喉肿痛、腮腺炎等病症。

本文以行为镇痛和电生理学指标研究灯笼草的镇痛作用,并探讨其作用机理。

1　实验材料111　试验药物　灯笼草的全部实验需要量,从上海“天草堂国药号”一次性购买(1999年5月),实验前根据剂量要求,先算出一定重量的灯笼草,然后加水500毫升,煎到100ml,去渣后再浓缩成20ml。

实验时灌胃给药,小鼠每次0.5ml,大鼠每次2ml。

112　动物　Wistar大鼠,雌雄兼用,体重180～250g;昆明小
21中药药理与临床2001;17(1)
Ξ本项目由华北制药集团新药开发中心部分资助,本文部分结果曾在2000年第四届东西方疼痛会议上进行交流,并获大会优秀论文奖。