参观仪器报告

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重庆大学

学生实验报告

实验课程名称药物分析学实验

开课实验室文科楼 5 1 0

学院生物工程年级10级专业班生工01班学生姓名吕亚慧学号20106873

开课时间2012 至2013 学年第一学期

总成绩

教师签名

生物工程学院制

《生物分析》实验报告

开课实验室:学院楼107 2012 年 11月3日学院生物工程年级、专业、班10生工2班姓名吕亚慧成绩

课程名称生物分析实验

实验项目

名称

实验仪器参观指导教师

教师

评语教师签名:

年月日

一、实验目的

了解各种常见分析仪器的使用及其注意事项

为之后的实验做知识储备

二、实验原理

通过现场参观和老师讲解有利于加深印象,了解各种常见分析仪器的使用及其注意事项,为后续实验做好准备,培养分析思维

这种实验原理见后面.

三、使用仪器、材料

包括:

荧光分光光度计

紫外分光光度计

气象色谱

微量元素测定仪

冷冻干燥仪

气浴震荡摇床

四、实验过程原始记录(数据、图表、计算等)

一、荧光分光光度计篇

1.原理:

由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态

的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一

部分的能量又以光的形式放出,从而产生荧

光.

不同物质由于分子结构的不同,其激发态

能级的分布具有各自不同的特征,这种特征反

映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光

激发和发射光谱;,因此可以用荧光激发和发

射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。

在溶液中,当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似,荧光分析通常也采用标准曲线法进行。

是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。

2.测量范围

荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。

3.应用领域

对经光源激发后产生荧光的物质或经化学处理后产生荧光的物质成份分析,可应用于生物化学、生物医学、环境化工等部门。

4.组件部分

①光源:为高压汞蒸气灯或氙弧灯,后者能发射出强度较大的连续光谱,且在300nm~400nm 范围内强度几乎相等,故较常用。

②激发单色器:置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器,筛选出特定的激发光谱。

③发射单色器:置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器,常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。

④样品室:通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。测量液体时,光源与检测器成直角安排;测量固体时,光源与检测器成锐角安排。

⑤检测器:一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。

5.分类

荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点,可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。

荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计,自动记录式荧光分光光度计,计算机控制式荧光分光光度计三个阶段;荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列。其他的还有低温激光Sh p ol’skill荧光分光光度计,配有寿命和相分辩测定的荧光分光光度计等。

6.使用步骤

①开启计算机;

②开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮“POWER”。同时,观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来,都显示绿色;

③计算机进入Windows XP视窗后,打开运行软件;

④双击桌面图标“FL Solution 2.1 for F-7000”。主机自行初始化,扫描界面自动进入。

⑤初始化结束后,须预热15-20分钟,按界面提示选择操作方式。

⑦测试模式的选择,波长扫描“wavelength scan”:点击扫描界面右侧“Method”,在“General”选项中的“Measurement”选择“wavelength scan”测量模式,在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数;

⑧设置文件存储路径;

⑨扫描测试:打开盖子,放入待测样品后,盖上盖子。点击扫描界面右侧“Measure”或快捷键F4窗口在线出现扫描谱图。

⑩数据处理:选中自动弹出的数据窗口,选择“Trace”进行读数并寻峰等操作。

7.实验注意事项

开机时,请先开氙灯电源,再开主机电源。每次开机后请先确认一下一起两边排热风扇工作正常,以确保仪器正常工作,发现风扇有故障,应停机检查。

主机工作时顶部排热器温度很高 ,切勿触摸,以免受伤.

氙灯点亮后需一定时间稳定,故进行精密测试应在 30分钟以上。

当氙灯未能触发,并连续发生“吱吱”高频声或“叭叭”打火声时,请立即关掉氙灯电源,稍后数秒重新触发。请尽量减少不必要的氙灯触发次数,避免氙灯在高压下反复触发。关闭氙灯电源后,若要重新使用,请等待 60秒以后重新触发。

运行未知浓度的样品测试时,灵敏度设置请从低位向高围( 0-7)逐步设置,当灵敏度较高

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