中国药科大学生物制药工艺学期末A卷
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中国药科大学生物制药工艺学期末试卷(A 卷)
一、填空题(每空0.5分,共30 分)
1.酶转化法与直接发酵法生产氨基酸的反应本质相同,均属酶转化反应。但两者相
比,酶转化法所需设备及工艺简单,产物浓度高,转化率高,生产周期短,副产物少,酶的利用率也高。
2.多肽的化学合成有液相合成和固相合成,常用的氨基保护基有苄氧羰基、叔丁氧羰基(BOC)和9-芴甲氧羰基(Fmoc) 。其中Fmoc最常用。3.到目前为止,多糖的构效关系方面的研究还是很不完善的,但可以确定多糖的活
性与其高级结构、分支度及其侧链、分子量、及多糖中的取代基等密切
相关。
4、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括分子扩散、涡流扩散、流动相中传质阻力、固定相中传质阻力。
5、写出下列离子交换剂类型:732 强酸型阳离子交换树脂,724 弱酸型阳离子交换树脂,717 强碱型阴离子交换树脂,CM-C 阳离子交换纤维素,DEAE-C 阴离子交换纤维素,PBE94 阴离子交换剂。
6、常用的吸附剂有活性炭,硅胶和大孔吸附树脂等。
7、过饱和溶液的形成方法有蒸发法、温度诱导法、盐析结晶法、有机溶剂结晶法、等电点法、微量扩散法、化学反应结晶、共沸蒸馏结晶(八选七)。
8、根据色谱机理,色谱柱分为:反相色谱、正相色谱、离子交换色谱、凝胶过滤色谱(或亲和色谱)。
10、透析的方法有:旋转透析器,平面透析器,连续透析器,浅流透析器。
11、常用的制备型离心机转子有角度转子,水平转子,区带转
子,垂直转子。
12、克服浓差极化现象的措施有搅拌,震动,错流,切流。
13、供体,受体和载体是重组DNA技术的三大基本元件
14、写出下列英文缩写的中文名称:IFN 干扰素;IL-2 白介素-2 ;TNF 肿瘤坏死因子。
15、青霉素属于β-内酰胺类抗生素,它的性质很不稳定,用溶剂萃取法分离时整个提炼过程应在低温,快速,准确调节pH 值下进行。
16、四环类抗生素是一类以四并苯(萘并萘)为母核的一族抗生素;链霉素是氨基糖苷类抗生素;红霉素是分子内含有14 元环大环内酯类抗生素。
二、名词解释(每小题3 分,共24分)
1、基因药物:核酸类药物,以遗传物质DNA、RNA 为治疗物质基础的药
物(1 分),如核酸疫苗、反义药物。(1 分)与基因工程类药物不同,基因工程药物化学组成上主要是蛋白质或多肽,但基因药物组成上主要为核酸(1 分)。
2、尼柯尔斯基方程式:
式中m1、m2、C1、C2 分别为树脂上和平衡溶液中A1、A2 两种离子的浓度。Z1、Z2
分别为两种离子的价电数。K 值为“交换常数”。该方程式表达了离子交换平衡时,
两种离子与交换剂吸附强弱的数量关系。当K>1 时表示树脂对A1离子的吸附力大于
A2 离子,反之亦然。(1分)
3、分级分离:将分子量相差不大的大分子物质加以分离,如分离血清球蛋白与白蛋白(2.5 分),分级分离应尽量使待分离各物质的K 值相差大些,并使分子量分布不在凝胶分离范围的一侧(0.5 分)。
4、干涉RNA(RNAi)RNA interference:是指在生物体细胞内,dsRNA(1 分)引起同源mRNA 的特异性降解(1 分),因而抑制相应基因表达的过程。是一种在生物体内普遍存在的转录后水平的基因沉默,也是抵御外在感染的重要保护机制。(1 分)
5、速度区带离心法:又叫速率区带离心法或分级区带离心法。离心操作时将样品液置于连接或不连接线性或非线性密度梯度液上(如蔗糖、甘油、KBr、CsCl
等)(1 分),控制离心时间,使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内分成一系列区带,达到彼此分离的目的。(2 分)本法适用于分离颗粒大小不同而密度相近或相同的组分,如DNA与RNA 混合物,核蛋白体亚单位及线粒体、溶酶体及过氧化酶体等。
6、渗透压冲击法:细胞破碎的一种方法(1分)。先把细胞放在高渗溶液中,由于渗透压的作用,细胞内的水分便向外渗出,细胞发生收缩,当达到平衡后,将介质快速稀释或将细胞转入水或缓冲液中,由于渗透压发生突然变化,胞外的水分迅速渗入胞内,使细胞快速膨胀而破裂,使产物释放到溶液中(2 分)。
7、气泡压力法:是测定滤膜最大孔径的简易方法(1分)。气体排除微孔滤膜孔隙中的液体并在膜表面形成气泡时,须克服液体的表面张力,孔径与气体压力有一定的关系,采用此原理测定滤膜孔径的方法称气泡压力法。(2分)
8、DNA 疫苗:属于基因药物中的一种,指使用能够表达抗原的基因本身即核酸制成的疫苗(2 分)。基因疫苗进入人体后,在人体细胞环境中表达出蛋白质抗原,持续刺激人体免疫系统产生免疫反应,达到预防疾病的目的。(1 分)
三、单项选择题(每小题1 分,共20 分)
1.利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸,第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏哪种酶的腺嘌呤缺陷型菌株,并在发酵培养基中提供亚适量的腺嘌呤。
(A )
A.SAMP 合成酶B.SAMP 裂解酶C.PRPP 转酰胺酶D.IMP 脱氢酶
2、蛋白质类物质的分离纯化往往是多步骤的,其前期处理手段多采用下列哪类的方法。( B )
A.分辨率高
B.负载量大
C.操作简便
D.价廉
3、用大网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质,一般用下列哪种溶液洗( D )
A.水
B.高盐
C.低pH
D. 高pH
4、凝胶层析中,有时溶质的Kd>1,其原因是(B )
A.凝胶排斥
B.凝胶吸附
C.柱床过长
D.流速过低
5、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量(C )
A.羟型阴
B.氯型阴
C.氢型阳
D.钠型阳
6、亲和层析的洗脱过程中,在流动相中加入配基的洗脱方法称作(C)
A. 阴性洗脱
B. 剧烈洗脱
C. 竞争洗脱
D. 非竞争洗脱
7、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度( C )
A.增大 B. 减小 C. 先增大,后减小 D. 先减小,后增大