多倍体番茄的组织培养与倍性鉴定
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观察 １次 。
为温州市农业科学研究 院蔬菜科 学研 究所 ２０ ０４年引进 利马公司的 ３ ９份材料 ， 经多年 自交选育 出的高抗番茄黄化曲 叶病毒病 和耐贮运极佳的番茄品种瓯秀 ８８及其 自然变异多 ０ 倍体植株 。多倍体番茄叶片培养使用的叶片为瓯秀 ８ ８番茄 ０ 自然变异植株的叶片。根尖压片观察使用 的根尖为瓯 秀 ８ ８ ０ 番茄 田间二倍体 、 多倍体番茄 的根尖及室 内组织培养诱导 出 的多倍体番茄 的根尖。
８ ０ ｍｇ Ｌ。 ． ／
关键词 ： 番茄 ； 多倍 体 ； 组织培养 中图分类号： ９ ３ １ Ｑ ４ ． 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ：０ ２—１０ （０ ０ ０ ０４ ０ １０ ３ ２ ２ １ ）４— ０ ０— ２
表 １ 叶片诱导愈伤 组织激素组合
在研究中发现多倍体具有普通二倍体所不具备的优 良特 性， 所以对番茄多倍体种质资源的搜集 、 保存及应用十分重要 和迫切 。随着多倍体育 种的深入研究 ， 育种家逐渐发现 了多
愈伤 组 织诱 导 率 。 １２ ２ 愈伤 组 织诱 导 不 定 根 ．． 在 Ａ、 Ｃ、 处 理 中挑 选 Ｂ、 Ｄ４个 新 鲜 、 状 的 绿 色 愈 伤 组 织 转 入 不 定 根 诱 导 培 养 基 ： Ｓ＋ 团 Ｍ ６一Ｂ ． ｇ Ｌ＋ Ａ ． ｇ Ｌ中 诱 导根 分化 。于 ２ ℃ 、 Ａ２ ５ｍ ／ Ｉ Ａ１０ｍ ／ ６ 光 照强 度 Ｉ ０ 、 照 时 间 １ ／ ０ｌ 光 ５ ｘ ４ｈｄ条件 下 培 养 。 每 隔 １ ０ｄ
１ ２ 方 法 ．
１２ ３ 染 色 体倍 性 鉴定 根 尖 压 片 本 试验 采 用 李懋 学 ． ．
方 法 。
２ 结 果 与分 析
２ １ 叶 片诱 导愈 伤 组 织 ．
从表 ２可见 ， 处理 Ｃ的愈 伤组织诱 导率最高 ， 与诱导率 最低 的处理 Ｂ相差 ２ ． 百分点。污染率最高的是处理 Ｄ， ２８ 是 处理 Ｂ的 ２倍多 ， 处理 Ａ和处理 Ｃ均为 ０ 。处 理 Ａ褐化最严
业方向 ： 茄果类育种及栽培。Ｔ ｌ（５ ７ ５ ８ ８８ ；Ｅ—ｍａ ：ｉｏ ｅ：０ ７ ）６ ３９ １ ｉ ｖ ｔ一 Ｉ ｃ
７５ ６＠ １ ３． Ｏ 。 ６ ６ Ｃｒ ｎ
通信作者 ： 孙
娟。Ｅ—ｍ ｉ ｓ￣ｕｎ６ ２ ６ ．ｏ 。 ａｌ ｕ ａ３ ８ ＠１３ ｃｒ ： ｎ
一
４ ０一
江苏农 业科学 ２ １ ０ ０年第 ４期
张海利 ， 孙
娟， 陈勇兵 ， 等．多倍体番茄 的组织培养 与倍性鉴定［ ］ Ｊ ．江苏农业科 学， １ （ ）４ ４ ２ ０４ ： ０ ０－ １
多倍体番茄 的组织培养与倍性鉴定
张海利 ， 孙 娟 陈勇兵 ，王 燕 ，
（． １ 温州科技职业学 院， 浙江温州 ３ ５ １ ； ． ２０ ４ ２ 浙江省温州市农业科学研究院， 浙江温州 ３５０ ２ ００）
道， 本试验利用 田间 自然变异多倍体植株对其进行组织培养 ， 并对照 田间 ２倍体、 多倍体植株根尖 ， 观察其倍性变化 ， 为今 后 的多倍体种质资源保存提供依据 ， 进而为将来的多倍体育
种奠定基础。
１ 材 料 与 方法 １ １ 材料 ．
重复 ３次 。每隔 １ ０ｄ观察 １ ， 次 观察统计污染 、 褐化率和
摘要 ： 采用根尖压片法对田间 １株变异番茄植株进行倍性 鉴定 ， 用离体叶组织培 养法进行种质 资源保存 。结 并
果表明 ： 二倍体番茄根尖染色体数 目 ２ ＝ ｘ ２ ， 为 ｎ ２ ＝ ４而不论是在 田间的还是经组 织培养后 的多倍体 番茄材料植株根 尖染色体数 目都为 ２ ＝ ｘ ３ ， 明确为三倍体 。最适 的愈伤组织诱 导和根分化培养基为 Ｍ ＋ Ｋ ． ｇＬ Ｉ ｎ ３ ＝ ６证 Ｓ Ｔ２０ｍ ／ ＋从
收稿 日期 ：０９— ２— １ ２０ １ ０ 基金项 目： 浙江省科技计划（ 编号：０ ８ ２ ００） 温州市科技局 资助 ２０Ｃ２９ ； 项 目（ 编号 ：２０ ０ ０ ） Ｎ ０９ ０ ５ 。
表 ２ 叶 片诱 导 愈 伤 组 织结 果 统计
作者简介 ： 张海利 （ห้องสมุดไป่ตู้ Ｏ ）男 ， １８ ～ ， 山东莱芜人 ， 硕士研究生 ， 艺师 ， 农 专
数次后 ， ７ ％ 乙醇棉球对其进行表 面消毒。在超净工作 台 用 ５
上 用 ７ ％ 乙 醇 处 理 约 １ ， 用 ０ １ 的 氯 化 汞 处 理 ５～ ０ ０８ 再 ．％
６ｍ ｎ无菌水冲洗数次。将叶片分割成 ５ｍ ｍｍ大小接 ｉ， ｍＸ ５
种 于 添加 不 同激 素 （ １ 的 Ｍ 表 ） Ｓ培 养 基 上 ， 温 度 ２ ℃ 、 于 ６ 光
１２ １ 叶片诱导愈伤组织 ．．
将 多倍 体番茄叶片用 清水冲洗
重， 有部分失绿的现象， 有少量愈伤组织形成， 但不明显 ； 处理 Ｂ愈伤组织出现在叶缘部分 ， 插入 培养 基部分没有 愈伤组织 形成， 部分褐化失绿 ， 只有绿色部分 能生 成愈伤组织 ； 处理 ｃ
生 长状 况 较好 ， 褐化 很 少 ， 多数 为绿 色 ， 伤组 织 明显 ， 每 大 愈 但
个 叶片上的并不十分 多； 处理 Ｄ整瓶污染很 多， 为真菌污染。 因此 ， 综合看来 ， 在诱导多倍 体番茄叶片形成愈伤组织的试验 中， ＭＳ＋ Ｔ２ ０ｍ ／ Ｉ Ａ ８０ｍ ／ Ｋ ． ｇ Ｌ＋ Ａ ． ｇＬ为最佳培养基。
照强度 １５０ｌ、 ０ 【光照时间 １ ／ 】 ４ｈ ｄ条件下培养 ， 每处理 ５瓶 ，
倍体有许多优点 ， 但也存在着一些不足 ， 自然界利用得非常好
的多倍体 ， 人工诱导也困难重重…。利用 组织培养技术对 自
然突变产生的多倍体进行研究 ， 对于提高产量 、 增强对环境的
适 应性 、 速 繁 殖 、 加 经 济 效 益 和 社 会 效 益 具 有 重 要 意 加 增
义 。关于番茄组织培养 及快繁工作 在我 国已经有许多报
为温州市农业科学研究 院蔬菜科 学研 究所 ２０ ０４年引进 利马公司的 ３ ９份材料 ， 经多年 自交选育 出的高抗番茄黄化曲 叶病毒病 和耐贮运极佳的番茄品种瓯秀 ８８及其 自然变异多 ０ 倍体植株 。多倍体番茄叶片培养使用的叶片为瓯秀 ８ ８番茄 ０ 自然变异植株的叶片。根尖压片观察使用 的根尖为瓯 秀 ８ ８ ０ 番茄 田间二倍体 、 多倍体番茄 的根尖及室 内组织培养诱导 出 的多倍体番茄 的根尖。
８ ０ ｍｇ Ｌ。 ． ／
关键词 ： 番茄 ； 多倍 体 ； 组织培养 中图分类号： ９ ３ １ Ｑ ４ ． 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ：０ ２—１０ （０ ０ ０ ０４ ０ １０ ３ ２ ２ １ ）４— ０ ０— ２
表 １ 叶片诱导愈伤 组织激素组合
在研究中发现多倍体具有普通二倍体所不具备的优 良特 性， 所以对番茄多倍体种质资源的搜集 、 保存及应用十分重要 和迫切 。随着多倍体育 种的深入研究 ， 育种家逐渐发现 了多
愈伤 组 织诱 导 率 。 １２ ２ 愈伤 组 织诱 导 不 定 根 ．． 在 Ａ、 Ｃ、 处 理 中挑 选 Ｂ、 Ｄ４个 新 鲜 、 状 的 绿 色 愈 伤 组 织 转 入 不 定 根 诱 导 培 养 基 ： Ｓ＋ 团 Ｍ ６一Ｂ ． ｇ Ｌ＋ Ａ ． ｇ Ｌ中 诱 导根 分化 。于 ２ ℃ 、 Ａ２ ５ｍ ／ Ｉ Ａ１０ｍ ／ ６ 光 照强 度 Ｉ ０ 、 照 时 间 １ ／ ０ｌ 光 ５ ｘ ４ｈｄ条件 下 培 养 。 每 隔 １ ０ｄ
１ ２ 方 法 ．
１２ ３ 染 色 体倍 性 鉴定 根 尖 压 片 本 试验 采 用 李懋 学 ． ．
方 法 。
２ 结 果 与分 析
２ １ 叶 片诱 导愈 伤 组 织 ．
从表 ２可见 ， 处理 Ｃ的愈 伤组织诱 导率最高 ， 与诱导率 最低 的处理 Ｂ相差 ２ ． 百分点。污染率最高的是处理 Ｄ， ２８ 是 处理 Ｂ的 ２倍多 ， 处理 Ａ和处理 Ｃ均为 ０ 。处 理 Ａ褐化最严
业方向 ： 茄果类育种及栽培。Ｔ ｌ（５ ７ ５ ８ ８８ ；Ｅ—ｍａ ：ｉｏ ｅ：０ ７ ）６ ３９ １ ｉ ｖ ｔ一 Ｉ ｃ
７５ ６＠ １ ３． Ｏ 。 ６ ６ Ｃｒ ｎ
通信作者 ： 孙
娟。Ｅ—ｍ ｉ ｓ￣ｕｎ６ ２ ６ ．ｏ 。 ａｌ ｕ ａ３ ８ ＠１３ ｃｒ ： ｎ
一
４ ０一
江苏农 业科学 ２ １ ０ ０年第 ４期
张海利 ， 孙
娟， 陈勇兵 ， 等．多倍体番茄 的组织培养 与倍性鉴定［ ］ Ｊ ．江苏农业科 学， １ （ ）４ ４ ２ ０４ ： ０ ０－ １
多倍体番茄 的组织培养与倍性鉴定
张海利 ， 孙 娟 陈勇兵 ，王 燕 ，
（． １ 温州科技职业学 院， 浙江温州 ３ ５ １ ； ． ２０ ４ ２ 浙江省温州市农业科学研究院， 浙江温州 ３５０ ２ ００）
道， 本试验利用 田间 自然变异多倍体植株对其进行组织培养 ， 并对照 田间 ２倍体、 多倍体植株根尖 ， 观察其倍性变化 ， 为今 后 的多倍体种质资源保存提供依据 ， 进而为将来的多倍体育
种奠定基础。
１ 材 料 与 方法 １ １ 材料 ．
重复 ３次 。每隔 １ ０ｄ观察 １ ， 次 观察统计污染 、 褐化率和
摘要 ： 采用根尖压片法对田间 １株变异番茄植株进行倍性 鉴定 ， 用离体叶组织培 养法进行种质 资源保存 。结 并
果表明 ： 二倍体番茄根尖染色体数 目 ２ ＝ ｘ ２ ， 为 ｎ ２ ＝ ４而不论是在 田间的还是经组 织培养后 的多倍体 番茄材料植株根 尖染色体数 目都为 ２ ＝ ｘ ３ ， 明确为三倍体 。最适 的愈伤组织诱 导和根分化培养基为 Ｍ ＋ Ｋ ． ｇＬ Ｉ ｎ ３ ＝ ６证 Ｓ Ｔ２０ｍ ／ ＋从
收稿 日期 ：０９— ２— １ ２０ １ ０ 基金项 目： 浙江省科技计划（ 编号：０ ８ ２ ００） 温州市科技局 资助 ２０Ｃ２９ ； 项 目（ 编号 ：２０ ０ ０ ） Ｎ ０９ ０ ５ 。
表 ２ 叶 片诱 导 愈 伤 组 织结 果 统计
作者简介 ： 张海利 （ห้องสมุดไป่ตู้ Ｏ ）男 ， １８ ～ ， 山东莱芜人 ， 硕士研究生 ， 艺师 ， 农 专
数次后 ， ７ ％ 乙醇棉球对其进行表 面消毒。在超净工作 台 用 ５
上 用 ７ ％ 乙 醇 处 理 约 １ ， 用 ０ １ 的 氯 化 汞 处 理 ５～ ０ ０８ 再 ．％
６ｍ ｎ无菌水冲洗数次。将叶片分割成 ５ｍ ｍｍ大小接 ｉ， ｍＸ ５
种 于 添加 不 同激 素 （ １ 的 Ｍ 表 ） Ｓ培 养 基 上 ， 温 度 ２ ℃ 、 于 ６ 光
１２ １ 叶片诱导愈伤组织 ．．
将 多倍 体番茄叶片用 清水冲洗
重， 有部分失绿的现象， 有少量愈伤组织形成， 但不明显 ； 处理 Ｂ愈伤组织出现在叶缘部分 ， 插入 培养 基部分没有 愈伤组织 形成， 部分褐化失绿 ， 只有绿色部分 能生 成愈伤组织 ； 处理 ｃ
生 长状 况 较好 ， 褐化 很 少 ， 多数 为绿 色 ， 伤组 织 明显 ， 每 大 愈 但
个 叶片上的并不十分 多； 处理 Ｄ整瓶污染很 多， 为真菌污染。 因此 ， 综合看来 ， 在诱导多倍 体番茄叶片形成愈伤组织的试验 中， ＭＳ＋ Ｔ２ ０ｍ ／ Ｉ Ａ ８０ｍ ／ Ｋ ． ｇ Ｌ＋ Ａ ． ｇＬ为最佳培养基。
照强度 １５０ｌ、 ０ 【光照时间 １ ／ 】 ４ｈ ｄ条件下培养 ， 每处理 ５瓶 ，
倍体有许多优点 ， 但也存在着一些不足 ， 自然界利用得非常好
的多倍体 ， 人工诱导也困难重重…。利用 组织培养技术对 自
然突变产生的多倍体进行研究 ， 对于提高产量 、 增强对环境的
适 应性 、 速 繁 殖 、 加 经 济 效 益 和 社 会 效 益 具 有 重 要 意 加 增
义 。关于番茄组织培养 及快繁工作 在我 国已经有许多报