有效成分含量测定方法及操作规程-修订版

中药材、饮片有效成分含量测定方法及操作规程

根据《中华人民共和国药典》2010年版（一部）中有效成分含量的测定以及附录V A中高效液相色谱法（外标法），建立中药材、饮片有效成分含量测定方法及其操作规程。

本规程适用于中药材、饮片有效成分含量测定。

1、原理

高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。注入的供试品，由流动相带入柱内，各组分在柱内被分离，并依次进入检测器，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。

2、仪器及药品

2.1 仪器

高效液相色谱仪、分析天平、粉碎机、筛分器（20目）、冷凝管、圆底烧瓶、水浴锅、旋转蒸发仪、容量瓶、离心机、烧杯、分液漏斗、移液管等。

2.2 药品

根据《中华人民共和国药典》2010年版（一部）中有效成分含量的测定项目的规定选用相应的色谱纯试剂。

3、操作规程

3.1对照品溶液的配制

按照各品种项目下的规定，精密称量对照品和供试品，配制成规定浓度溶液，分别精密取出一定量的溶液，注入进样瓶中，记录编号(或标记)，放入自动进样器中。

3.2 校正曲线的绘制及含量测定

3.2.1开机→更换新鲜的流动相→打开计算机→打开1220液相电源开关→打开仪器的联机工作站→打开排液阀替换流动相→设定方法→调用方法平衡色谱柱，待基线平衡好之后进行进样分析

3.2.2 设定序列→点击运行序列→等待仪器检测完毕。

3.2.3 建立积分事件→选择正确的定义峰积分→分析→编辑积分峰/组表→填写相应的项目(名称、ISTD标号为“0”、拟合类型、强制过零点、方法、编号、进样量等)→级别(1-5)中填入各个峰的含量。

3.2.4 调入第1级别数据→分析/单一级别校正→选择“校正”、“校正级别1”、“清除全部校正”→选择“确定”→调入第2级别数据→分析/单一级别校正→选择“校正”、“校正级别2”→调入第3级别数据→分析/单一级别校正→选择“校正”、“校正级别3”→依次校正到级别5→检查校正→导入报告选择编辑报告模版(外标法)→保存方法。

3.2.5 调入供试品数据→选择“分析”→选择“报告”→编辑报告项目→打印报告→计算供试品(样品)含量→填写测试报告。

3.2.6 保存数据、方法、序列等。关闭测试程序、仪器、电脑。关闭电源，检测仪器安全。

4、计算公式

样品含量（%）= 样品测定含量×提取液体积

×100% 样品质量