色谱柱的类型与选择 PPT

色谱柱的分类
• 美国药典对色谱柱的分类 • L1：十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定相，
简称C18或ODS L2：30～50um表面多孔薄壳型键合C18(ODS)固定相 L3：多孔硅胶微粒 即一般的硅胶柱 L4：30～50um表面多孔薄壳型硅胶 L5：30～50um表面多孔薄壳型氧化铝 L6：30～50um实心微球表面包覆磺化碳氟聚合物－强阳 离子交换固定相 L7：全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相 简称C8柱 L8：全多孔硅胶微粒键合非交联NH2固定相 简称NH2柱 L9：强酸性阳离子交换基团键合全多孔不规则形硅胶固定 相 L10：多孔硅胶微球键合氰基固定相（CN） 简称CN柱
色谱柱的类型与选择
色谱柱的规格
固定相
柱尺寸
表面类型 (键合相)
孔径
粒径
长度
内径
色谱柱(C18, 5μm, 4.6μm ×250mm)
固定相 硅胶
柱尺寸
表面类型 C18
孔径 100Å
粒径
长度
5μm 250mm
内径 4.6μm
• 分子量小于2000,选择孔径范围:80-120Å • 分子量大于2000,选择孔径范围:300Å
3.5;5
• Lichrospher RP-8
5
• Lichrospher select B
5
孔径/Å 70 80
80;300 80;300 80;300
100 60
• 按极性分类 • 正相柱 • 反相柱
正相色谱柱
• 正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其 他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和 氰基团（CN，CPS）的键合相填料。
• 由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基 团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各 组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗 出色谱柱。
• 正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如 正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯 甲烷（Methylene Chloride）等。
• L31: 季胺基改性孔径2000?的交联苯乙烯和二乙烯基苯(55%)强阴离 子交换树脂 L32: L-脯氨酸铜配合物共价键合于不规则形硅胶微粒的配位体的交换 手性色谱填料 L33: 能够分离分子量4000～40000MW范围蛋白质分子的球形硅胶固 定相,pH稳定性好 L34：铅型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂， 9um球形 L35：锆稳定的硅胶微球键合二醇基亲水分子单层固定相，孔径150? L36: 5um胺丙基硅胶键合L-苯基氨基乙酸－3,5二硝基苯甲酰 L37：适合分离分子量2000～40,000Mw的聚甲基丙烯酸酯凝胶 L38：水溶性甲基丙烯酸酯基质SEC色谱柱 L39：亲水全多孔聚羟基甲基丙烯酸酯色谱柱 L40：Tris 3,5－二甲基苯基氨基甲酸酯纤维素涂覆多孔硅胶微球
反向色谱柱
• 反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合 有极性相对较弱官能团的键合相。
• 常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、 C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等
• 反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、 缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。
• 样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被 冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的 保留。
3.5;5
• ZORBOX Rx-C18
3.5;5
Leabharlann Baidu
• ZORBOX Extend-C18
3;5
孔径/Å 70 70
80;300 80;300 80;300
120 100
L3：多孔硅胶微粒 即一般的硅胶柱
• 以安捷伦为类: • ZORBOX SIL • ZORBOX Rx- SIL
粒径 /μm 孔径/Å
• L11：键合苯基多孔硅胶微球固定相 简称苯基柱 L12：无孔微球键合季胺功能团的强阴离子填料 L13：三乙基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相（C1） 简称C1柱 L14:10um硅胶化学键合强碱性季铵盐阴离子交换固定相 简称SAX柱 L15：已基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相 简称C6柱 L16：二甲基硅烷化学键合全多孔硅胶微粒固定相 L17：氢型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子 交换树脂 L18: 3～10um全多孔硅胶化学键合胺基（NH2）和氰基 （CN） L19：钙型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物，强阳离 子交换树脂 L20：二羟基丙烷基化学键合多孔硅胶微球固定相（Diol） 简称二醇基柱
感谢聆听！
5
70
3.5;5
70
L7：全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相 简称C8柱
• 以安捷伦为类:
粒径 /μm
• ZORBOX C8
5
• ZORBOX Eclipse Plus C8 3.5;5
• ZORBOX Eclipse XDB-C8 3.5;5
• ZORBOX SB-C8
3.5;5
• ZORBOX Rx-C8
• L21：刚性苯乙烯－二乙烯基苯共聚物微球 L22：带有磺酸基团的多孔苯乙烯阳离子交换树脂 L23：带有季胺基团的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多 孔离子交换树脂 L24：表面含有大量羟基的半刚性聚乙烯醇亲水凝胶 L25：聚甲基丙烯酸酯树脂交联羟基醚（表面含有残余羧 基功能团）树脂。能分离分子量100～5000MW范围的水 溶性中性、阳离子型及阴离子型聚合物（用聚氧乙烯测定） 的固定相 L26：丁基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相 L27：30～50um的全多孔硅胶微粒 L28：多功能载体，100?的高纯硅胶加以氨基键合以及C8 反相键合的官能团 L29: 氧化铝,反相键合,含碳量低,氧化铝基聚丁二稀小 球,5um，孔径80? L30: 全多孔硅胶键合乙基硅烷固定相
L1：十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定 相， 简称C18或ODS
• 以安捷伦为类:
粒径 /μm
• ZORBOX ODS
5
• ZORBOX ODS classic
5
• ZORBOX Eclipse Plus C18 3.5;5
• ZORBOX Eclipse XDB-C18 3.5;5
• ZORBOX SB-C18
• L41：球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相 L42: C8和C18硅烷化学键合多孔硅胶固定相 L43: 硅胶微球键合五氟代苯基固定相 L44: 多功能固定相,60 ?高纯硅胶基质键合磺酸阳 离子交换功能团和C8反相功能团 L45: β-环糊精键合多孔硅胶微球 L46: 季胺基改性苯乙烯-二乙烯基苯聚合物微球