口服制剂30万级洁净区环境卫生有效期验证方案

口服制剂车间30万级洁净区环境卫生及设备卫生有效期验证方案验证编码：VLP/YZ-200932
******有限公司
目录1验证方案的起草与审批
1.1验证方案的起草
1.2验证方案的审批
2验证小组人员及职责
3概述
4验证目的与围
4.1验证目的
4.2验证围
5 参考文献
6 验证容
6.1 设备
6.2 30万级洁净区
6.3 地漏
6.4 接受标准
7结论
8 附件
《洁净室(区)沉降菌测定标准操作程序》
《洁净室(区)悬浮粒子测定标准操作程序》
1 验证方案的起草与审批
1.1验证方案的起草
1.2验证方案的审批
2 验证机构与人员职责
3 概述
为确定30万级洁净区清洁后的有效期，故做30万级洁净区环境卫生有效期的验证。

验证围包括一车间的设备和30万级洁净区。

4 验证目的与围
4.1验证目的
确定一车间30万级洁净区环境清洁后的有效期。

4.2验证围
一车间的设备和30万级洁净区。

5 参考文献
《药品生产验证指南》2003年版
6 验证容
6.1 设备
6.1.1设备的取样点
选择与产品直接接触的设备，有粉碎机，筛粉机，制粒干燥机，整粒机，总混机，压片机和包衣机。

6.1.2 取样方法及面积
因设备在每次使用前均会用75%酒精消毒，故本次验证只在第一天时取样做微生物限度检查。

在清洁结束后的在设备表面用已灭菌的棉花擦拭取样，每部设备每次取20cm2，置2份100ml无菌水中，做微生物限度检查。

6.2 30万级洁净区
6.2.1 取样点的确定
选择产尘较大的房间、人员走动较多的房间作代表，故选称量室、粉碎室、压片室、制粒室、30万级洁净区走廊、男二更、女二更作为代表；在洁净区清洁结束后的第三天、第四天和第五天取样。

6.2.2 检测项目
6.2.2.1 悬浮粒子
在系统正常运行30min后，按《洁净室（区）悬浮粒子测定标准操作规程》测定各取样点的悬浮粒子数。

见下表：
洁净区清洁日期：
测试日期：：测试状态：温度：℃相对湿度：％
6.2.2.2 沉降菌
在系统正常运行30min后，按《洁净室（区）沉降菌测定标准操作规程》测定各取样点的沉降菌。

洁净区清洁日期：
测试状态：测试时间：温度：℃相对湿度：％
6.3 地漏
见《30万级洁净区地漏消毒效果验证》
6.4 接受标准
7 结论
8 附件
《洁净室(区)沉降菌测定标准操作程序》
《洁净室(区)悬浮粒子测定标准操作程序》
附件1
洁净室(区)沉降菌测定标准操作程序
1、目的
建立沉降菌测定的操作程序，确定洁净室(区)的洁净度。

2、围
本操作程序适用于车间的洁净区、无菌实验室、洁净工作台及采样车的沉降菌测试。

3、职责
检验员
4、容
4.1 测试方法概述
本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干小时，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境的活微生物数，并以此来评定洁净室(区)的洁净度。

4.2 所用的仪器和设备
4.2.1 高压消毒锅：使用时应严格按照仪器使用SOP操作。

4.2.2 恒温培养箱：必须定期对培养箱的温度计进行检定。

4.2.3 培养皿：一般采取Φ90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。

4.2.4 培养基：普通肉汤琼脂培养基或其他药典认可的培养基。

4.3 测试步骤
4.3.1 采样方法
将已制备好的普通肉汤琼脂培养基培养皿按4.4.4.1项的要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5h，再将培养皿盖盖上后倒置。

4.3.2 培养
4.3.2.1 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温箱30℃～35℃培养48h以上。

4.3.2.2 每批培养基平皿用于采样前应预培养48h以上，确认无菌落，并且每批留3只(不按4.3.1暴露)作对照培养，检验培养基本身是否污染。

4.3.3 菌落计数
4.3.3.1 用肉眼直接计数，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。

4.3.3.2 若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上的菌落记数。

4.4 测试规则
4.4.1 测试状态
4.4.1.1 沉降菌测试前，被测试洁净室(区)的温度须达到规定的要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值。

4.4.1.2 沉降菌测试前，被测试洁净室(区)处于已清洁消毒状态。

4.4.1.3 测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测试状态。

4.4.2 测试人员
4.4.2.1 测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。

4.4.2.2 静态测试时，室测试人员不得多于二人。

4.4.3 测试时间
4.4.3.1 对单向流，100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。

4.4.3.2 对非单向流，10000级、100000级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。

4.4.4 沉降菌计数：采样点数目及其布置
4.4.4.1 最少采样点数目：最少采样点数目可按《洁净室(区)悬浮粒子测定标准操作程序》中的《最少采样点数目表》确定。

4.4.4.2 采样点的布置：洁净室(区)采样点布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于稀疏。

培养皿应布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点。

可在关键设备或关键工作活动围处增加采样点。

4.4.5 可接受标准
可接受标准表
4.5 注意事项
4.5.1 测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。

4.5.2 采取一切措施防止人为对样品的污染。

4.5.3 对培养基、培养条件及其他参数作详细记录。

4.5.4 由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并注意菌落与培养基沉淀的区别，必要时用显微镜鉴别。

4.5.5 采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质，破损或污染的应剔除。

4.6 记录
4.6.1 测试报告中应记录房间温度、相对湿度、压差及测试状态。

4.6.2 测试报告的编写见《沉降菌测试报告》。

5、结果计算
5.1 用计数方法得出各个培养皿的菌落数。

5.2 平均菌落数计算
平均菌落数 M = M 1+M 2+···M n n
式中： M ——平均菌落数；
M i ——培养皿菌落数（i=1，2，…，n ）； n ——培养皿总数。

6、结果评定
6.1 用平均菌落数判断洁净室(区)空气中的微生物。

6.2 洁净室(区)的平均菌落数必须低于所选定的评定标准。

6.3 若其洁净室(区)的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。

附件2
洁净室(区)悬浮粒子测定标准操作程序
1、目的
建立悬浮粒子测定的操作程序，评定洁净室(区)的洁净度。

2、围
本操作程序适用于车间的洁净区、无菌实验室、洁净工作台及采样车悬浮粒子测试。

3、职责
质监员对本操作程序的实施负责
4、容
4.1 仪器和设备：LZJ-01D型尘埃粒子计数器。

4.2 测试规则
4.2.1 测试条件
4.2.1.1 温度和湿度：要求与生产工艺相适应，一般温度18～26℃，相对湿度45～65%为宜。

4.2.1.2 送风：100级垂直层流工作台风速≥0.25m/s；100级水平层流工作台风速≥0.35m/s；10000级洁净室换气次数n≥25次/h；300000级洁净室换气次数n≥12次/h。

4.2.1.3 压差：洁净区与非洁净区之间压差＞10Pa；不同洁净度级别之间压差＞5Pa。

4.2.2 测试状态
静态测试和动态测试
4.2.2.1 静态测试：指洁净厂房的空气净化调节系统已处于正常运行状态，生产设备已安装，室没有生产人员的测试。

4.2.2.2 动态测试：指洁净厂房的空气净化调节系统已处于正常运行状态，生产设备及生产人员等已处于正常生产状态下的测试。

4.2.2.3 静态测试时，室人员应不超过2人，测试记录和报告中应标明所测试状态。

4.2.3 测试时间
4.2.3.1 对单向流，空气净化调节系统正常运行时间不少于10min后开始测试。

4.2.3.2 对非单向流，空气净化调节系统正常运行时间不少于30min后开始测试
4.2.4 采样点数目
最少采样点数目表
备注：表中面积，对于单向流洁净室指送风面积；对于非单向流洁净室指房间面积。

对任何小洁净室或局部空气净化区域，采样点数目不得少于2个，总采样次数不得少于5次。

每个采样点的采样次数不得少于1次，且不同采样点的采样次数可以不同。

4.2.5 采样量
不同洁净度级别的最小采样量见下表
最小采样量
4.2.6 采样点位置
4.2.6.1 采样点一般离地0.8m高度的水平面上均匀布置。

洁净工作台采样点一般在工作台面上0.2m高度的水平面上均匀布置。

4.2.6.2 采样点多于5点时，可在0.8m～1.5m(略高于工作面)高度的区域分层布置，但每层不少于5点。

4.2.6.3 洁净室(区)采样点布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于稀疏。

4.2.7 可接受标准
可接受标准表
4.3 测试操作步骤
4.3.1测试点及采样次数均应在测试开始前确定，防止在测试过程中随意改变测试点及改变采样次数。

4.3.2 检查测定仪器是否正常，采样管必须清洁并无渗漏，仪器按规定预热至稳定。

4.3.3 按《LZJ-01D 尘埃粒子计数器标准操作程序》进行测试，并记录好结果。

4.4 注意事项
4.4.1 计数器采样口和仪器工作位置应在同一气压和温度下，以免产生测量误差。

4.4.2 在确认洁净室（区）送风量和压差达到要求后，方可进行采样。

布置采样点时，应避开回风口。

4.4.3 更换测试点时，应待仪器读数下降至稳定后，方可开始新测试点的读数。

4.4.4 测试过程中测试人员应位于采样口的下风侧。

4.4.5 对于单向流，计数器采样管口朝向应正对气流方向，对于非单向流，采样管口宜向上。

4.4.6 测试结果不符合洁净级别要求时，应按原方法重复一次，并且每个测试点的采样次数增加2次；重复测试结果符合规定时，即可判定为符合该洁净级别的要求。

4.5 结果计算
悬浮粒子浓度的采样数据应按下述步骤作统计计算。

4.5.1 采样点的平均粒子浓度 N
C C C A N
21+++=
ΛΛ
式中：A —某一采样点的平均粒子浓度，粒/m 3
；
Ci —某一采样点的粒子浓度（i=1，2，…，N ），粒/m 3
； N —某一采样点上的采样次数，次。

4.5.2 平均值的均值
L
A A A M L
21+++=
ΛΛ
式中： M —平均值的均值，即洁净室（区）的平均粒子浓度，粒/m 3
；
Ai —某一采样点的平均粒子浓度（i=1，2，…，N ），粒/m 3
； L —某一洁净室（区）的总采样点数，个。

4.5.3 标准误差 ()()()()
1-L L M A M A M A SE 2
L 2221+++++-=
ΛΛ
式中： SE —平均值均值的标准误差，粒/m 3。

4.5.4 置信上限
UCL=M+t ×SE
式中： UCL —平均值均值的95%的置信上限，粒/m 3
t —95%的置信上限的t 分布系数见下表
95%的置信上限的t 分布系数
备注：当采样点数多于9点时，不需要计算UCL 5、结果评定
5.1 判断悬浮粒子洁净度级别应依据下述两个条件。

5.1.1 每个采样点的平均粒子浓度必须低于或等于规定的级别界限，即A i ≤级别界限，则判符合规定。

(采样点＞9个)
5.1.2 全部采样点的粒子浓度平均值均值的95%的置信上限小于或等于规定的级别界限，即UCL ≤级别界限，则判符合规定。

(采样点≤9个)
5.2 凡与上述规定不相符合，则判不符合规定。