中药抗肿瘤蛋白多肽类活性成分研究进展

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白果别名银杏核 、公孙树子 、鸭脚树子 ,为银杏 科植物银杏 (Ginkgo biloba L1)的种子 。白果清蛋白 ( ginkgo album in, GA )是从白果中提取分离得到的 一种新的植物蛋白 ,分子量为 29 248D ,它能抑制体 内 S180实体瘤和体外 S180细胞的生长 ,具有较强的体 外清除 ·OH 及 O2 ·的能力 。 〔18〕
女贞子为木犀科常绿乔木植物女贞 (L igustrum lucidum A it1)的干燥成熟果实 ,含有机酸 、苷类 、糖 类 、醇类 、磷脂类等多种化学成分 ,且含 17种氨基酸 如天冬氨酸 、苏氨Baidu Nhomakorabea 、丝氨酸 、谷氨酸 、甘氨酸 、丙氨
酸等 。经炮制后 ,氨基酸总量均有不同程度的增加 , 尤以黄酒制品及醋制品中增加最多 。女贞子能提高
作用 ,并可诱生巨噬细胞产生一氧化氮 ,对巨噬细胞 分泌白介素 21亦有一定的提高作用 。
白花蛇舌草为茜草科植物白花蛇舌草 [ O lden2 land ia d iffusa (W illd1) Roxb1 ]的带根全草 ,其提取 物主要为一个 90 kD 的糖蛋白 (O lden land ia d iffusa extract, ODE) 。ODE 对小鼠脾细胞的增殖活性有 很强的促进作用并可增强小鼠和人杀伤细胞对肿瘤
五加皮为五加科落叶小灌木细柱五加 (A can2 thopanax g racilisty lus W 1 W 1 Sm ith)的根皮 。将五加 皮提取物经过凝胶层析和电泳分析 ,得到单一的蛋 白质峰 ,分子量为 64 kD。体内体外实验均证明该 蛋白对多种肿瘤细胞有较强的抑制作用 。 〔20〕
从罂粟科植物罂粟 ( Papaver son iferum L1)的花 粉中分离得到的十三肽和十七肽均含有多个具有酰
肿瘤患者的免疫功能 ,与化疗药物同用 ,有一定的增 效减毒作用 。 〔16〕
茜草又称小活血 、锯子草 、地血 、茹虑等 ,为茜草 科植物茜草 ( R ubla cord ifolia L1)的干燥根及根茎 。 环己肽类是茜草属植物中主要的水溶性化学成分之
一 ,抗肿瘤动物实验结果显示 ,茜草二环六肽可以延 长肿瘤小鼠的寿命 ,抑制肿瘤的发生率 ,防止肿瘤细 胞的转移 。 〔17〕
量为 30 kD 的糖蛋白 ,它能特异性的诱导肿瘤细胞 凋亡 ,显示了巨大的临床应用价值〔1〕。
虫草 是 麦 角 菌 科 真 菌 冬 虫 夏 草 [ Cordyceps sinensis (Berk1) Sacc1 ]寄生在蛾科昆虫幼虫上的子 座及幼虫尸体的复合体 ,有较好的抗肿瘤功效 。从 冬虫夏草培养液中提取得到 2 个环二肽 ,其中 1 个 环二肽主要是通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的 途径来杀死 Hela等肿瘤细胞〔2〕。
桑寄生是桑寄生科植物桑寄生 [ Tax illus ch inen2 sis (DC1) Danser1 ]的干燥带叶茎枝 。从中分离到的 多种蛋白质成分 ,很小剂量即可表现出抗癌活性 。 其抗癌机制主要是干扰细胞遗传信息 , 表现出对 DNA 水平的选择性抑制 ,通过实验分离纯化出的蛋 白对肝癌 B el27402等细胞均有生长抑制作用 。 〔19〕
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达到抗肿瘤的功效 。现代研究表明 ,蛋白质多肽类 是动物药抗肿瘤活性物质之一 ,如蛇毒 、蝎毒 、蜈蚣 毒 、水蛭素 、土鳖虫糖蛋白等 。下面针对具有抗肿瘤 活性的蛋白多肽类成分进行概述 。
鹿茸是梅花鹿 (Cervus n ippon Temm inck)或马鹿 (Cervus elaphus L innaeus)尚未骨化的幼角 ,含有丰 富的蛋白聚糖 ,分子量大约有 40 ×103 D。鹿茸 对心 血管 、免疫 、抗炎以及抗肿瘤等方面均有作用 。 〔23〕
蕲蛇 为 蝰 科 动 物 五 步 蛇 [ A gk isstrodon acu tus ( Guenther) ]除去内脏的干燥全体 。对蕲蛇组织进 行提取 ,并对提取物做初步分析 ,以细胞毒实验对提 取物进行活性成分检测 ,表明蕲蛇提取物具有一定 的抑瘤活性 。 〔24〕
[ 4 ] 李涛 ,余长根 ,郝武常 1HPLC2ELSD 测定桃芪生血胶囊 中黄芪甲苷的含量 [ J ]1中成药 , 2005, 27 (5) : 54125431
·综述 ·
中药抗肿瘤蛋白多肽类活性成分研究进展
孙华颖 ,侯新楠 ,王春梅 3 (北京中医药大学中药学院 ,北京 100102)
摘要 本文通过查阅国内外中药材抗肿瘤的相关文献 ,按照药物来源分为植物 、动物和海洋生物三部分 ,综述 了近年来中药抗肿瘤蛋白多肽类活性成分的研究进展 。
相思子毒素 ( abrin)是从豆科植物相思子 (A brus can ton iensis H1)中分离提取的一种剧毒性高分子糖 蛋白毒素 ,其相对分子质量为 60~65 ×103 D〔8〕。实 验表明 ,其对小鼠艾氏腹水瘤细胞 、L1210 白血病 、 B16 黑 色 素 瘤 和 Lew is 肺 癌 均 有 明 显 的 抑 制 作 用 〔9 〕。
云芝为多孔菌科真菌彩绒革盖菌 [ Coriolus ver2
收稿日期 : 2009212224 基金项目 :留学回国人员科研启动经费 作者简介 :孙华颖 (19862) ,女 ,硕士研究生 ,研究方向 :动物药抗肿瘤 ; Tel: 13581977093, E2mail: sunhuaying0409@1631com。 3 通讯作者 :王春梅 , Tel: 010284738646, E2mail: wchunmei@1261com。
关键词 中药 ;抗肿瘤 ;蛋白多肽 中图分类号 : R285 文献标识码 : A 文章编号 : 100124454 (2010) 0621007205
中医药治疗肿瘤有着悠久的历史 ,中医临床也 有许多成功案例 。以往对中药活性成分的研究主要 集中在小分子物质 ,如 : 生物碱类 、黄酮类 、挥发油 类 、苷类 、萜类等 。近年来 ,中药中的大分子物质蛋 白多肽类引起了人们的广泛关注 。中药及天然产物 中蛋白多肽类活性成分的研究成为药物研发中的一 个活跃领域 。本文对近年来中药抗肿瘤蛋白多肽活 性成分的研究进展进行了综述 ,以期为从中药中开 发具有抗肿瘤活性的蛋白多肽类药物提供思路和参 考。 1 植物抗肿瘤活性蛋白多肽
参考文献
[ 1 ] 吕武清主编 1中成药中的药材薄层色谱鉴别 [M ] 1北 京 :人民卫生出版社 , 19971
[ 2 ] 田南卉 ,杨国红 ,方颖 1高效液相色谱法蒸发光散射检 测器测定黄芪和制剂中黄芪甲苷的含量 [ J ]1药物分析 杂志 , 2000, 20 (3) : 19922001
[ 3 ] 王传茂 ,朱丽华 ,李进启 ,等 1HPLC2ELSD 测定芪通颗粒 中黄芪甲苷的含量 [ J ] 1 药物分析杂志 , 2003, 23 ( 5 ) : 38823901
细胞的特异性杀伤活性 ,增强 B 细胞抗体的产生以 及单核细胞的细胞因子产生 ,并增强单核细胞对肿 瘤细胞的吞噬功能〔11〕。实验表明其提取物对多种 癌细胞生长具有明显的抑制作用〔12, 。 13〕
半 夏 是 天 南 星 科 植 物 半 夏 [ P inellia terna ta
( Thunb) B reit1 ]的块茎 ,从半夏块茎鲜汁中用凝胶 柱分离纯化出的一种植物蛋白 ,用 M TT法和流式细 胞术检测发现其对 Bel27402 细胞生长有明显抑制 作用及具有促进 B el27402 细胞凋亡的作用〔14〕。实 验证明 ,半夏提取物还能诱导宫颈癌细胞 SNU 217 的细胞凋亡 。 〔15〕
天花粉是葫芦科植物栝楼 ( T richosan thes k iril2 ow ii M axim ) 或 双 边 栝 楼 ( T richosan thes rosthorn ii Harm s)的干燥根 。其块根中含一种蛋白质名“天花 粉蛋白 ”( trichosanthin, TCS) 。它是由 247 个氨基 酸组成的单链 、碱性蛋白质 ,属核糖体失活蛋白 ( ri2 bosome2inactivating p roteins, R IPs) ,是其主要的抗肿 瘤活性成分 ,其机制可能是诱导细胞凋亡 、抑制肿瘤 细胞蛋白合成和增强免疫等〔7〕。
中药大多以植物入药 ,因此人们对植物的研究 较多 。近年来从多种中药植物中发现了具有较好的 抗肿瘤活性的蛋白或小分子多肽 。
葫芦科植物苦瓜 (M om ord ica cha ran tia L1)为药 食同源的中药 ,对其种子进行分离可获得多种活性 蛋白 。目前研究较多的 MAP30 是一种相对分子质
作用 。
从大戟科植物蓖麻 ( R icinus comm un is L1)种子 (蓖麻籽 )中分离到的蓖麻毒素 ( ricin) ,是目前发现 的植物毒素中毒性最强的毒素之一 。 R icin是由含 263和 259个氨基酸的 A、B 两条链组成的糖蛋白 , A 链为活性链 ,用于制备免疫毒素进行癌症的靶向 治疗〔5〕。研究证明 ,在体外低浓度的蓖麻毒素可选 择性的杀伤多种肿瘤细胞 ,其引起细胞死亡的机制 可能是引发了活性氧簇介导的 caspase23 级联反应 的细胞凋亡〔6〕。
胺侧链的氨基酸残基 A sn或 Gln,并在氨端或羧端 含有 2~3个连续的该类氨基酸残基 ,它们对多种恶 性肿瘤细胞株均有明显的抑制作用〔21, 。 22〕
2 动物抗肿瘤活性蛋白多肽 动物药是中药的重要组成部分 ,中医理论认为
动物药是以其破血逐瘀 、消积软坚 、以毒攻毒等作用
Journal of Chinese M edicinal M aterials 第 33卷第 6期 2010年 6月
Journal of Chinese M edicinal M aterials 第 33卷第 6期 2010年 6月
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4 讨论 黄芪甲苷的含量测定文献多采用薄层扫描法 ,
实验周期长 、重现性差 ,黄芪甲苷仅在 203 nm 处有 弱的末端吸收 ,因此噪音较大 ,分离度 、重现性均较 差 ,笔者采用高效液相色谱 2蒸发光散射法对黄芪甲 苷进行了定量分析 ,经方法学考察得到了较满意的 结果 。实验中采用不同体系和比例的流动相进行色 谱分离 ,其中以乙腈 2水 ( 32 ∶68)为流动相测定结果 最为理想 ,供试品溶液中各成分的分离效果最佳 ,且 主峰保留时间适宜 ;经对黄芪甲苷的提取方法和提 取溶剂进行试验 ,结果表明以甲醇水浴回流 2 h,黄 芪甲苷的提取率最高 ,而且提出的杂质较少 。
灵芝是多孔菌科真菌赤芝 [ Ganoderm a Iucidum (Leyss1 ex Fr1) Karst1 ]或紫芝 ( Ganoderm a sinense Zhao, Xu et Zhang)的干燥子实体 。除子实体外灵 芝的菌丝体和孢子 (粉 )亦可入药且抗肿瘤作用明 显 。研究发现 ,灵芝水萃取物或多糖肽在荷瘤肿瘤 动物体内即有显著的抗肿瘤活性 ,但灵芝多糖肽与 水提取物均无直接细胞毒作用 ,主要是通过其免疫 调节作用在体内实现抗肿瘤作用〔3〕。
白头翁为毛茛科植物白头翁 [ Pu lsa tilla ch inen2 sis (Bunge) Egel1 ]的干燥根 。白头翁糖蛋白 是 〔10〕 从中药白头翁根的水提取液中分离纯化得到的均一 糖蛋白组分 ,分子量为 6215 ×103 D。研究发现 ,其 具有体外显著增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的
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Journal of Chinese M edicinal M aterials 第 33卷第 6期 2010年 6月
sicolor (L1 ex Fr1) Quel1 ]的干燥子实体 。从云芝菌 丝体中提取出了具有抗肿瘤活性的云芝糖肽 ( PSK) 。研究表明〔4〕, PSK可以抑制肿瘤生长 ,并且 对荷瘤小鼠及经化疗后的荷瘤小鼠均具有免疫增强
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