分枝杆菌医学

一、分 类
结核分枝杆菌复合群（MTBC）包括
人结核分枝杆菌（M.tuberculosis） 牛分枝杆菌（M.bovis） 非洲分枝杆菌（M.africanum）
坎纳分枝杆菌（M.canettii）
田鼠分枝杆菌(M.microti)等
前四种对人类致病，其中人型MTB感染率最高
二、临床意义
➢ 流动人口的剧增 ➢ 耐多药结核菌的
1882年3月24日 世界著名的科学 家德国的 Robert Koch在 柏林发现并证实
结核杆菌是结核
病的病原体。
流行病学
➢ 全球疫情 1/3感染 新发900万/年 300万/年死亡
➢ 我国疫情 5.5亿感染者 估算有450万病人 新发145万/年 65万/年传染 13万/年死亡
特点 1.细胞壁含有大量的脂类 2.菌体不易着色，不易脱色，故采用抗酸染色、又称抗酸杆菌 3.无特殊结构，也不产生内外毒素。 4.所致感染多为慢性过程
分枝菌酸与菌体的抗酸性有关； 梭状因子能破坏线粒体膜，抑制白细胞游走，引起慢性肉芽 肿； 蜡质D能激发机体的Ⅳ型变态反应；硫酸脑苷脂能抑制吞噬与溶酶 体的结合 2.蛋白质：诱发变态反应 3.多糖：与蜡质D结合能引起局部病灶的细胞浸润 4分枝杆菌生长素：脂溶性的铁熬合物
二.所致疾病： 1：原发感染：多见于儿童。常有肺门淋巴结大、干酪样坏死和结核结节
孔雀绿） ◆生长缓慢，18小时分裂一次，2-4周形成R型菌落，“菜花样菌落”，
乳白色干燥不透明，表面呈颗粒结节，边缘不整。 3.抵抗力：含大量脂质，抵抗力强抗干燥、抗酸碱、抗化学消毒剂、对湿
热和紫外线敏感 4.变异性：结核杆菌易发生菌落形态（L型）、毒力（BCG）、免疫原性
和耐药性变异。
致病性
一.致病物质 1.脂质：磷脂能促进使单核细胞增生，引起结核结节和干酪样坏死；
长良好。常用罗氏培养基
最适生长温度为35～37℃，最适pH6.5～6.8
14～18h分裂1次，在固体培养基上2～5周才
出现肉眼可见的菌落
典型菌落为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，不透
明，乳白色或淡黄色，如菜花样
2.分离培养
标本接种于选择性培养基中(常用罗氏，所 含的孔雀绿或青霉素可抑制杂菌生长)
37℃，5％～10％CO2培养8周 结核杆菌出现干燥呈颗粒状、灰白色菌落
涂片染色为抗酸阳性
出现 ➢ 人类免疫缺陷病
毒的蔓延
WHO :世界仍处于 结核病严重威胁之中
生物学性状
1.形态染色：菌体细长微弯曲，有分枝，排列不规则，单个散在。易发生L 型抗酸染色阳性
2.培养特性： ◆专性需氧，最适温度37℃5-10%CO2可促进生长 ◆营养要求高，罗氏培养基（蛋黄、甘油、天门冬素、马铃薯、无机盐、
第一节 结核分枝杆菌复合群
结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）
简称结核杆菌 人和动物结核病的病原菌
三个时期： 1882年结核菌被发现之前，称之为“白色 瘟疫”
1882-1945年，发现结核杆菌到抗结核药物没有 广泛应用前。
1945年以后，进入现代化学疗法阶段
涂பைடு நூலகம்镜检的报告方式
半定量报告
未找到抗酸菌 可疑抗酸杆菌； 再送标本检测
石炭酸复红染色：抗 荧光染色：抗酸
酸杆菌（1000×）
杆菌
（450×）
0 1～2/300视野
0 1～2/70视野
1＋
1～9/100视野
2～18/50视野
2＋
1～9/10视野
4～36/10视野
3＋
1～9/视野
4～36/视野
4＋
>9/视野
引起的炎症、代谢物质的毒性以及菌体成 分引起的免疫损伤有关 结核分枝杆菌的致病物质主要是荚膜、脂 质和蛋白质
三、微生物学检验
（二）标本采集 据感染部位的不同采集不同的标本 疑肺结核：收集清晨第一口痰，清洁干燥的容器内送检 疑泌尿系结核：清晨一次全部尿量或24小时尿沉淀10～
15ml送检，必要时作无菌导尿送检（诊断泌尿道结核通 常需3～5份标本） 采集脓液应直接从溃疡处取脓汁或分泌物,深部脓肿用无 菌注射器抽取送检 其他：无菌抽取脑脊液、胸水、腹水及关节液等盛无菌 试管送检。脑脊液标本静置后，表面可有细薄凝块，取 凝块作涂片或接种培养
三、微生物学检验
（三）标本直接检查 1. 形态学检查
（1）直接涂片染色镜检 （2）浓缩集菌涂片检查法 2. 核酸检测
形态学检查
齐-尼染色（Ziehl-Neelsen technique） 是常用的抗酸染色法，染色后结核分枝杆 菌呈红色，背景呈蓝色
形态学检查
用荧光染料金胺“O”染色，在荧光显微镜 下菌体呈橘黄色
分枝杆菌
汪涵
俞敏洪
李 冰 冰
李哈冰佛冰
李嘉诚
林 徽 因
概述
分枝杆菌属（Mycobacterium）
是一类细长、直或略带弯曲专 性需氧性杆菌。无动力、无牙 胞、细胞壁含有大量脂质，该 菌一般认为革兰染色阳性。多 数细菌在生长的一定时期抵抗 酸-醇（acid-alcohol-fast）， 故又称抗酸杆菌（acid-fast bacillus）
③结果：阳性5mm＜红肿硬结直径＜2cm强阳性红肿硬结直径＞2cm； 阴性红肿硬结直径＜5mm
④意义：阳性：已感染过结核，但不一定有结核病；强阳性：可能有活 动性结核病；阴性：未感染过结核，应排除感染初期或免疫力下降
微生物学检验
（一）基本特性 结核分枝杆菌尚未发现产生内毒素、外毒
素及侵袭性酶 致病性可能与细菌在组织细胞内大量繁殖
的形成，也可经血到达多个脏器引起相应结核病。
2继发感染：多见于成人或较大的儿童，也以肺部多见，特点为病灶局限， 不易累积邻近淋巴结，病灶常钙化而愈，也可破溃成空洞。
三、免疫性
1.免疫机理：传染性免疫，主要是细胞免疫 2.免疫与变态反应：T细胞介导的结果
结核菌素试验（OT）： ①原理：细胞免疫或Ⅳ变态反应。 ②方法：用OT或PPD所做的皮内试验
>36/视野
核酸检测
用PCR法快速诊断MTB感染 PCR法检测DNA特异性更强，敏感性更高 PCR须按法规要求规范操作，应防止标本污染出现
假性结果
三、微生物学检验
（四）分离培养与鉴定
1. 培养特性
专性需氧
3％～5％CO2能促进其生长
营养要求高:须在含血清、卵黄、马铃薯、甘
油以及含某些无机盐类的特殊培养基上才能生