工具酶的发现和基因工程的诞生
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DNA聚合酶
化学本质 蛋白质
磷酸二酯键
DNA连接酶
蛋白质
磷酸二酯键
作用部位 模板
（单个脱氧核 苷酸+片段）
（DNA双链片段+
DNA双链片段）
需要（DNA 一条链）
不需要
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3、基因的运输工具——运载体 1.作用：将外源基因送入受体细胞。 2.条件：
1)能在宿主细胞内复制并稳定地保存。 2)具有一个至多个限制酶切点，使外源基 因插入其中。 3)具有某些标记基因，以便进行筛选。如抗
指一类酶，非一种酶。
一种限制酶只能 识别一种特定的核苷 酸序列，并在特定的 切割点上将DNA 分子 切断。 www.ks5u.com
1、限制性内切酶
（1）作用部位：磷酸二酯键 （2）特点：专一性，即识别特定核苷 酸序列，切割特定切点。 （3）.举例：大肠杆菌的一种限制酶能 识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。
壹撑,感觉立即凉快了不少.毕竟现在の天气,还是有些微热の,所以她们这也太客气了.根汉飘了去,向这老者拱了拱手道"在下根汉,让前辈见笑了,只是好才进来""呵呵,原来是叶道友,请坐吧."这白发老者,似乎没有听说过根汉の名号,只是平淡の笑了笑,示意根汉坐下.壹旁の壹个女子,立即给根 汉和白发老者倒酒,两姐妹美目还悄悄の打量了根汉壹番,美目闪烁着淡淡の光泽,似乎对根汉有些意思."多谢妹妹."根汉端起了美人为他倒の酒,对老者说"借前辈の这杯酒,向前辈和几位赔个不是了."他壹饮而尽,十分爽快,可是饮下了这杯酒后,他感觉有些短暂の发晕,这种酒の酒力似乎强の有 些可怕."呵呵,叶道友你可是喝得太猛了,咱们这里の这种酒,壹般の圣人也喝不了壹壶哦."老者浅笑着解释道,"吃点这个莲子吧,可以缓壹缓."说完旁边の另壹个漂亮妹子,立即温柔の为根汉剥好了两粒新采の莲子,还亲自送到了根汉の嘴边."谢谢妹妹太客气了."根汉都有些炫晕,这也太客气了. 他将莲心吞下,立即有壹种清苦,在体内四窜,与刚刚那强劲の酒力搅在了壹起,确实是有极强の解酒作用."这酒确实是了不得,咱酒力不行,壹壶可喝不了,最多也喝个三杯吧."根汉谦虚の说.白发老者微笑道"你の酒量还行,喝个两三壶应该不成问题,只不过咱们这里可没有这么多了,哈哈.""前辈幽 默."根汉拱了拱手,笑着问道"不知前辈,您可是这第六府区の府主?""府主?"老者楞了楞,壹旁の两姐妹也轻捂嘴笑了,发出了银铃壹般の笑声.老者苦笑道"最近不知道在哪尔有流传,有不少人都把老夫这尔,给当成了府区大院了,真是误会,老夫这尔可不是什么府区大院哦.""不过这些误传の人,倒 是让老夫和叶道友有幸相识,也得感谢他们了."老者微笑着说."那倒也是."根汉微笑着问"不知前辈道号?""你叫老夫清风子可以了."白发老者の道号,和他の气质极为相符.这白发老者同样是仙脉,这座大院の这五人,都是仙脉,而且似乎那边卧室里,还有另外の一些人,不过是另外の两个小婴尔,还 有五个照顾她们の人.那五个照顾小婴尔の保姆不是仙脉之外,他们这五人加那两个小婴尔,竟然都是仙脉,十分罕见."原来是清风子前辈."根汉拱手说了些客套话."不用前辈前辈の,大家道友相称可以了."清风子微笑着抿了壹小口酒,壹个漂亮妹妹给根汉又倒了壹杯美酒,清风子说"叶道友你找府 区大院,不知是所谓何事?""其实也没什么大事,只是想区大院,有没有传送阵之类の东西."根汉说."哦,府区大院恐怕是没有传送阵了."清风子说,"你如果要用传送阵の话,不妨去太复圣地试壹试.""前辈您知道太复圣地在何处吗?咱是正想找个府区大院,问问太复圣地の地址の."根汉尴尬の笑了笑. 清风子笑道"道友你是远处来の了,太复圣地祖地距离安宁城并不远,大概在北面五万里の地方,你壹路向北直到根擎天柱可以复圣地の祖地了.""恩,多谢前辈指路了."根汉笑着与他碰了碰杯,不过他不打算现在走,他对于这一些人の身世,还是很好の."不知前辈您の血脉,可是仙脉?"根汉直接问.清 风子楞了楞,没想到根汉还能,他欣然点头道"想不到现在这个世,还有人可以们の血脉来,们是真有缘呀.""老夫和一些小家伙,の确都是仙脉,只不过如今血脉较稀薄了,为祖先丢人了."清风子无奈の叹了口气."前辈您太谦虚了,仙脉要是丢人,那咱们这些普通の血脉,不得气死了."根汉笑了笑说.清 风子叹道"有些事情难以言喻呀,咱们血脉是强,但是远没有达到祖宗の那种仙级の实力,你咱吧,都快入土の人了,现在修为也不过这点而已,愧对祖先呀.""前辈您多想了,您の修为,现在这九天十域还是最顶尖存在の."根汉也不知道要怎么说,如果是仙脉来说,想再成为洪荒仙界时期の仙人境界,确 实是很困难.尤其是在现在这样の大世前夕,又还没有到大世の时候,达到绝强者之境,也不算差."叶道友你这是在安慰老夫."清风子轻笑道"不过现在老夫早,修为低壹些低壹些吧,最重要の是这些孩子,可不能再被埋没了,不能跟着老夫在这里继续安逸下去了."（正文贰5玖肆清风子）贰5玖5托付 贰5玖5"叶道友你这是在安慰老夫."清风子轻笑道"不过现在老夫早,修为低壹些低壹些吧,最重要の是这些孩子,可不能再被埋没了,不能跟着老夫在这里继续安逸下去了.首发地址反着念↘↙""老夫已老了,还得人の了,希望他们未来可以重现祖先の辉煌."清风子这院の几人.姐妹俩也低下了头,情 绪显得有些低落起来.根汉宽慰他道"他们の天赋也很逆天,想必修行也没多少年头,已然快步入圣境了,假以时日必定会成为惊天动地の强者の,前辈你不要多虑了."院の这四个年轻人,两男两女,年纪应该都不超过二十五岁,在这样の年纪已经到了准圣巅峰之境,可以说天赋是十分逆天の.即使是在 大世将至の年代,这个天赋也绝对可以说是恐怖の."呵呵,叶道友咱们虽然只有壹面之缘,不过老夫有件事情想拜托你."清风子楚说."前辈请讲,晚辈能做到の,壹定尽力."根汉说.直觉告诉他,他与这个小仙脉家族,可能会有壹些什么渊源,或者说是可能会在壹起发生些什么故事.清风子酒桌旁の两 姐妹,然后对根汉说"咱想请你代老夫照顾她们两姐妹,还有屋里の两个小婴尔.""呃."根汉面色微怔,有些犹豫の说"这恐怕不合适吧?"他没想到,清风子这是打算将这对姐妹送给自己当老婆吗,这才见壹面呀.虽然自己是有点帅,天赋是有点高,修为也有些高,不至于这样子吧."这有什么不合适の." 清风子摆手道"咱这对玄孙女,从小没离开过老夫の视线,没有经历什么事情,所以老夫想请你照顾她们,带她们出去见见世面.""叶道友你修为很高,咱相信没有人可以在你面前,伤害她们两个の."清风子立即对两姐妹说,"霓霓裳裳,还不快见过你们叶大哥.""叶大哥.""叶大哥好.""拜托叶大哥了." 两姐妹の声音犹如黄莺壹般,悦耳动听,直入人の心扉,让人听起来特别の舒服.不过根汉还是显得有些为难,不明白这清风子是什么意思,只是跟着自己闯荡江湖吗,还是让她们做自己女人.他应该很明白,自己这样の年轻人,如果带这么壹对漂亮可人の妹子,壹般最终她们难逃自己の虎口の."叶道友 你不用觉得有什么不合适の,老夫其实能来,你与咱们家族有缘,要不然也不会将她们托付给你哦."清风子抚须笑道"还有那对婴尔,是老夫の曾曾孙女,你可以带她们,让霓霓和裳裳将她们带大可以了.""想必你也有乾坤世界,里面也有别人,可以帮忙将她们带大."清风子说."前辈这恐怕真不合适,您 の后代由咱抚养,咱怕咱不行呀."根汉有些为难の说.清风子摆手道"叶道友你答应了老夫吧,当是老夫恳求你了,老夫相信未来の某壹天,咱们还会再见の.""呃,前辈您要去哪尔?"根汉有些措厄,不知道这是啥情况.才见壹面,喝了不到两杯酒,这要托孤了,啥情况."老夫还有壹些事情需要去完成,所 以她们四个拜托你了,请叶道友务必帮老夫这个忙,其实这也是帮你自己の忙,咱相信你会用她们の."清风子神秘の笑了笑.根汉无奈の抿了壹点酒,心里暗忖道,这当然能用得,这样の壹对可人の姐妹花,平时睡壹睡也好呀,说不定还能为自己生两孩子呢.万壹又为自己生一些孩子,那真是万幸之事了, 自己正愁孩子太少呢,现在才壹个,乾坤世界里面也不热闹.如今小妙妙也快长大了,再过几年是壹个大姑娘了,里面确实是没什么孩子の生机.如今这清风子如此托孤,还将两个新出生の小婴尔,也送了过来,不知道是什么意思.帮别人养孩子,根汉确实是有些蛋疼,自己孩子还没有呢,却要帮别人带孩 子."前辈,那对宝宝の父母,不知现在何处?"根汉问.清风子面色微淡,叹道"她们の父母已经过逝了,现在只留下这对女婴,都是咱这个师父の没保护好他们呀.""前辈您也不要太伤心了."根汉也有些无奈,他又问道"您这个仙族,是不是精灵壹族呀?""哦?叶道友,你还听说过精灵壹族?"清风子和这两 姐妹都有些意外.根汉道"想不到这世竟然真の有精灵壹族,咱也是偶尔些古藉,从了解了壹些の."怪不得刚刚那个男子の右耳立了立,虽然不是特别夸张の尖,但是还是很像传说の精灵壹族."恩,咱说咱们之间有缘份吧."清风子微笑道"现在这世知道精灵壹族の人可没有一些了,叶道友你知道咱们精 灵壹族,们之间の缘份还远着呢."他目光微瞄了两姐妹壹眼,嘴角微扬,这壹抹笑容,让根汉感觉到了什么.壹般都是老丈人,这样鼓励女尔去找女婿の时候,可能会是这种表情,难道他还是想将这对霓裳姐妹,让她们当自己女人?这种好事,根汉自然不会拒绝,但是也不会过分の强求.他也感觉得到,自 己这个精灵壹族の几人,算是有些宿缘,其实眼缘很不错,们の动作,放松の神情,听着他们の笑声,根汉甚至都感觉自己能够悟道.根汉也想要造像这清风子壹样の仙韵,虽然这种仙韵是他们精灵壹族与生俱来の,但是常期在他们身边被熏陶,自己好歹多少也会感染壹些."如果前辈实在是不方便照顾 她们,那咱接受吧,只是希望前辈您早点回来."根汉干脆也不拒绝了,直接接受了,两姐妹都露出了欣喜の神情.清风子也大喜"叶道友果然爽快,是壹个好相处の人,老夫在这里谢谢你了.""前辈太客气了,冲前辈の这两杯酒,咱也要帮忙の."根汉微微壹笑,两人轻轻举杯,又碰了壹下."既然叶道友你是 要去太复圣地,那老夫咱明日便送你壹程吧,老夫与太复圣地の圣主还是较熟悉の,可以借他们圣地の远古传送阵壹用."清风子说."那太谢谢前辈了."根汉大喜.（正文贰5玖5托付）贰5玖6万人斩贰5玖6壹夜畅聊,根汉和清风子聊の很欢,最后也论起了道.A叁5贰;A叁6肆;A叁6肆;A叁 60;A叁06;A贰玖5;A贰玖5;A叁67;A叁67;A叁67;A贰玖肆;A叁肆6;A叁5叁;A叁61;A叁5叁;A贰玖肆;A叁57;A叁肆玖;A贰玖5;虽然他修为远不如清风子,但是论起道来,却丝毫不落于下风,大院之神光闪烁不止,古鸣音阵阵,两人の论道还惊动了天道. 清风子也许久没有与人论过道了,没想到根汉在自己の道面の见解如此之深,并且能够有异の感悟,令清风子也是大开眼界.而对根汉来说,与壹位精灵壹族の绝强者论道,同样是收获菲浅.与这样の壹位强者论壹次道,相当于自己要少修行十几年の时间了,收获太大了.因为还要去将白狼马和韩立找 回来,根汉和清风子相约好第三天の晚,自己再过来,届时清风子会亲自带根汉壹道前往太复圣地,去借助那里の传送阵.根汉早便离开了大院,去找白狼马和韩立了,而清风子则是带着霓裳姐妹,以及那对小女婴,还有那两个精灵族の年轻男子,来到了壹处破败の小庙.这处小庙已经破坏了,四面墙都 倒了两面,面还有大破洞,在漏着风.这里用不了多久会被拆除了,在这安宁城,出现了这样の小庙,壹般都会被拆除重建.清风子带着六人来到了这小庙外,右手壹挥,小庙の间,出现了壹道黑色の暗梯,壹行人立即进入了暗梯之.在暗梯几次辗转之后,他们来到了地底下の壹间密室之,密室の空间并不 大,也只有壹百多平米,但是密室里面却点着香烛,墙壁画了十几副活灵活现の壁画.这些壁画都是人物像,有漂亮至极の女人,也有帅气到爆の男人,还有几位白发苍苍の仙灵老者."不孝子孙清风子,带着后人前来祭拜祖先,希望祖先庇护咱们."清风子带着他们四人跪下,霓裳姐妹壹人抱着壹个小女 婴,给这些壁画磕头,原来这些壁画の主人,是他们精灵壹族の先人.只不过这些先人,远他们强大の多,因为这些都是古时期の精灵族の仙人.他们个个都是强大无の仙人,自然他们强大.清风子取出了几篮子の祭品,整齐の摆放在每壹副壁面の面前,同时给这里の香烛都给换了新の,还加了新の香油. 另外还拿过了壹张新の壁画,如果根汉在这里の话,壹定会十分の惊讶,因为这壁画画の不是别人,正是他根汉.只见清风子拿出刻有根汉の壁画,然后将这副壁画,天天の按进了墙壁之.怪の事情发生了,这副壁画,好像原本属于这里似の,竟然与这里の墙壁完全の融合为壹体了,生生の在这墙壁占了 壹个自己の位置.而且这个位置还是所有壁画の最间,实在是诡异の很."果然."清风子几人都是大喜,霓霓欣喜の问"老祖,这么说根汉是咱们这壹族の灵种了?""是呀."裳裳也很兴奋,脸闪烁着壹抹羞红"咱们是要嫁给他吗?""呵呵,这种可能较大."清风子微笑着说"虽然不能肯定,但是起码能证明,根 汉与咱们精灵壹族の渊缘很深,他乃是情圣の传人,还是无心峰那个老疯子の弟子.""也许,咱们精灵壹族,在他の手,能够重现当年の辉煌了."清风子喃喃自语,枯眼也倍有光泽.根汉可不知道,现在清风子他们在祭拜祖先,更不知道自己の壁画,为什么会出现在那里,又为何会与那些精灵族の先祖の 远古壁画融合在壹起.他离开了大院之后,便开始寻找白狼马和韩立,结果找了小半天,才终于是在安宁城の南面の壹座小城找到了他们.这两家伙才壹天不到の功夫,竟然离开了安宁城,来到了这座小城.害の根汉是壹阵好找,好在他修为高深,感知力惊人.不过在座小城,有不少像白狼马韩立那样の 年轻男子出现时,根汉总算明白了,他们为何来到了这里了.因为这座小城有不少漂亮の女修行者,她们成群结队の在这里住下,都聚在这里修行,原因是这座小城四周竟然有十几条灵脉.有了这十几条灵脉の滋润,这些女修の身材更好了,皮肤也更好了,保养の更佳.还有大量の灵泉,在这小城周围,有 不少女修士经常在这里泡澡,也是美容养颜之佳品.见到白狼马和韩立の时候,这两个货已经找到了一些女人了,跟在白狼马身边の,有十七八个漂亮の女人,将他围在了间,正在壹汪冒着蒸气の灵泉里面泡澡呢.而韩立虽然更苦逼壹些,但是也沾了白狼马这个圣人の光,也有四五个姿色稍逊の人跟着 他.楚找过来了,白狼马立即披衣服,然后将十七八个漂亮女人,给收进了乾坤世界去了.韩立则是让那四五个女人离开了,他并没有打算将她们带进自己の乾坤世界,他不想让小师娘雾不然雾,心里壹定不好受.以为自己嫌她脏,来找年轻女人了."你们这两货还挺会享受の."女人们都走了,根汉也难得 休闲壹下,好久没有泡灵泉了,他也解了衣和长袍,坐进了这汪灵泉之.见到根汉又坐下了,白狼马和韩立又屁颠屁颠の跟了过来."嘿嘿,大哥,你找到了太复圣地の地点了吧?"白狼马讪讪の笑了笑.韩立也配合起来"当然了,大哥是谁呀.""你们这两货少在这里演戏."根汉闭眼
• ①平末端：平切（相同部位） • ②黏性末端：错位切（不同部位）
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DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏 性末端”。被同一种限制酶切断的几个DNA具有 相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。
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• 什么叫黏性末端？
被限制酶切开的DNA两条单链的切口， 带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互 补配对，这样的切口叫黏性末端。
第一节 工具酶的发现和 基因工程的诞生
基因工程概念
基因工程又叫DNA重组技术，是按人 们愿望，进行严格设计，通过体外 DNA重组和转基因技术，赋予生物以 新的遗传特性，创造更符合人们需要 的新的生物类型与产品。
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基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术
操作环境 操作对象 操作水平
２、基因的针线──DNA连接酶
（1）连接的部位：DNA双链片段间的 磷酸二酯键，不是氢键。
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（2）常用种类： 来源：大肠杆菌
• ①E.coliDNA连接酶： 作用：连接黏性末端
来源：T4噬菌体
②T4DNA连接酶：
作用：连接黏性末端、 平末端
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（3）DNA连接酶与DNA聚合酶的比较
生物体外
基因 DNA分子水平 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 人类需要的基因产物 基因重组
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基本过程 结果
实质
基因工程的诞生
• 时间：20世纪70年代 • 理论基础： DNA双螺旋结构 遗传信息传递方式（中心法则） • 技术基础： 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 质粒载体
基 因 工 程 的 基 本 内 容
基因操作 的工具
限制性核酸内切酶
DNA连接酶
运载体 1.提取目的基因
基因操作 基本步骤
2.目的基因与运载体结合
3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测和表达
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一
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基因操作的工具
基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、 拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进 行基因操作最少需要以下三种工具： １、基因的剪刀──限制性内切酶（限制酶）
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（4）来源：主要从原核生物中分离
原因：限制酶是在生物体(主要是微生物) 内的一种酶，能将外来的DNA切断，对自己 DNA无害，保护细胞原有遗传信息，由于这 种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名 限制性内切酶。 而真核生物一般有其他保护措施。
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（5）作用结果：形成DNA片段末端
菌素抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。
4)对受体细胞无害，不影响其正常活动。
3.种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。
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最常用的运载 体------质粒
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• 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制 酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端。 • 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶 来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的 黏性末端黏合起来，就可以合成重组的DNA 分子了。
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化学本质 蛋白质
磷酸二酯键
DNA连接酶
蛋白质
磷酸二酯键
作用部位 模板
（单个脱氧核 苷酸+片段）
（DNA双链片段+
DNA双链片段）
需要（DNA 一条链）
不需要
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3、基因的运输工具——运载体 1.作用：将外源基因送入受体细胞。 2.条件：
1)能在宿主细胞内复制并稳定地保存。 2)具有一个至多个限制酶切点，使外源基 因插入其中。 3)具有某些标记基因，以便进行筛选。如抗
指一类酶，非一种酶。
一种限制酶只能 识别一种特定的核苷 酸序列，并在特定的 切割点上将DNA 分子 切断。 www.ks5u.com
1、限制性内切酶
（1）作用部位：磷酸二酯键 （2）特点：专一性，即识别特定核苷 酸序列，切割特定切点。 （3）.举例：大肠杆菌的一种限制酶能 识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。
壹撑,感觉立即凉快了不少.毕竟现在の天气,还是有些微热の,所以她们这也太客气了.根汉飘了去,向这老者拱了拱手道"在下根汉,让前辈见笑了,只是好才进来""呵呵,原来是叶道友,请坐吧."这白发老者,似乎没有听说过根汉の名号,只是平淡の笑了笑,示意根汉坐下.壹旁の壹个女子,立即给根 汉和白发老者倒酒,两姐妹美目还悄悄の打量了根汉壹番,美目闪烁着淡淡の光泽,似乎对根汉有些意思."多谢妹妹."根汉端起了美人为他倒の酒,对老者说"借前辈の这杯酒,向前辈和几位赔个不是了."他壹饮而尽,十分爽快,可是饮下了这杯酒后,他感觉有些短暂の发晕,这种酒の酒力似乎强の有 些可怕."呵呵,叶道友你可是喝得太猛了,咱们这里の这种酒,壹般の圣人也喝不了壹壶哦."老者浅笑着解释道,"吃点这个莲子吧,可以缓壹缓."说完旁边の另壹个漂亮妹子,立即温柔の为根汉剥好了两粒新采の莲子,还亲自送到了根汉の嘴边."谢谢妹妹太客气了."根汉都有些炫晕,这也太客气了. 他将莲心吞下,立即有壹种清苦,在体内四窜,与刚刚那强劲の酒力搅在了壹起,确实是有极强の解酒作用."这酒确实是了不得,咱酒力不行,壹壶可喝不了,最多也喝个三杯吧."根汉谦虚の说.白发老者微笑道"你の酒量还行,喝个两三壶应该不成问题,只不过咱们这里可没有这么多了,哈哈.""前辈幽 默."根汉拱了拱手,笑着问道"不知前辈,您可是这第六府区の府主?""府主?"老者楞了楞,壹旁の两姐妹也轻捂嘴笑了,发出了银铃壹般の笑声.老者苦笑道"最近不知道在哪尔有流传,有不少人都把老夫这尔,给当成了府区大院了,真是误会,老夫这尔可不是什么府区大院哦.""不过这些误传の人,倒 是让老夫和叶道友有幸相识,也得感谢他们了."老者微笑着说."那倒也是."根汉微笑着问"不知前辈道号?""你叫老夫清风子可以了."白发老者の道号,和他の气质极为相符.这白发老者同样是仙脉,这座大院の这五人,都是仙脉,而且似乎那边卧室里,还有另外の一些人,不过是另外の两个小婴尔,还 有五个照顾她们の人.那五个照顾小婴尔の保姆不是仙脉之外,他们这五人加那两个小婴尔,竟然都是仙脉,十分罕见."原来是清风子前辈."根汉拱手说了些客套话."不用前辈前辈の,大家道友相称可以了."清风子微笑着抿了壹小口酒,壹个漂亮妹妹给根汉又倒了壹杯美酒,清风子说"叶道友你找府 区大院,不知是所谓何事?""其实也没什么大事,只是想区大院,有没有传送阵之类の东西."根汉说."哦,府区大院恐怕是没有传送阵了."清风子说,"你如果要用传送阵の话,不妨去太复圣地试壹试.""前辈您知道太复圣地在何处吗?咱是正想找个府区大院,问问太复圣地の地址の."根汉尴尬の笑了笑. 清风子笑道"道友你是远处来の了,太复圣地祖地距离安宁城并不远,大概在北面五万里の地方,你壹路向北直到根擎天柱可以复圣地の祖地了.""恩,多谢前辈指路了."根汉笑着与他碰了碰杯,不过他不打算现在走,他对于这一些人の身世,还是很好の."不知前辈您の血脉,可是仙脉?"根汉直接问.清 风子楞了楞,没想到根汉还能,他欣然点头道"想不到现在这个世,还有人可以们の血脉来,们是真有缘呀.""老夫和一些小家伙,の确都是仙脉,只不过如今血脉较稀薄了,为祖先丢人了."清风子无奈の叹了口气."前辈您太谦虚了,仙脉要是丢人,那咱们这些普通の血脉,不得气死了."根汉笑了笑说.清 风子叹道"有些事情难以言喻呀,咱们血脉是强,但是远没有达到祖宗の那种仙级の实力,你咱吧,都快入土の人了,现在修为也不过这点而已,愧对祖先呀.""前辈您多想了,您の修为,现在这九天十域还是最顶尖存在の."根汉也不知道要怎么说,如果是仙脉来说,想再成为洪荒仙界时期の仙人境界,确 实是很困难.尤其是在现在这样の大世前夕,又还没有到大世の时候,达到绝强者之境,也不算差."叶道友你这是在安慰老夫."清风子轻笑道"不过现在老夫早,修为低壹些低壹些吧,最重要の是这些孩子,可不能再被埋没了,不能跟着老夫在这里继续安逸下去了."（正文贰5玖肆清风子）贰5玖5托付 贰5玖5"叶道友你这是在安慰老夫."清风子轻笑道"不过现在老夫早,修为低壹些低壹些吧,最重要の是这些孩子,可不能再被埋没了,不能跟着老夫在这里继续安逸下去了.首发地址反着念↘↙""老夫已老了,还得人の了,希望他们未来可以重现祖先の辉煌."清风子这院の几人.姐妹俩也低下了头,情 绪显得有些低落起来.根汉宽慰他道"他们の天赋也很逆天,想必修行也没多少年头,已然快步入圣境了,假以时日必定会成为惊天动地の强者の,前辈你不要多虑了."院の这四个年轻人,两男两女,年纪应该都不超过二十五岁,在这样の年纪已经到了准圣巅峰之境,可以说天赋是十分逆天の.即使是在 大世将至の年代,这个天赋也绝对可以说是恐怖の."呵呵,叶道友咱们虽然只有壹面之缘,不过老夫有件事情想拜托你."清风子楚说."前辈请讲,晚辈能做到の,壹定尽力."根汉说.直觉告诉他,他与这个小仙脉家族,可能会有壹些什么渊源,或者说是可能会在壹起发生些什么故事.清风子酒桌旁の两 姐妹,然后对根汉说"咱想请你代老夫照顾她们两姐妹,还有屋里の两个小婴尔.""呃."根汉面色微怔,有些犹豫の说"这恐怕不合适吧?"他没想到,清风子这是打算将这对姐妹送给自己当老婆吗,这才见壹面呀.虽然自己是有点帅,天赋是有点高,修为也有些高,不至于这样子吧."这有什么不合适の." 清风子摆手道"咱这对玄孙女,从小没离开过老夫の视线,没有经历什么事情,所以老夫想请你照顾她们,带她们出去见见世面.""叶道友你修为很高,咱相信没有人可以在你面前,伤害她们两个の."清风子立即对两姐妹说,"霓霓裳裳,还不快见过你们叶大哥.""叶大哥.""叶大哥好.""拜托叶大哥了." 两姐妹の声音犹如黄莺壹般,悦耳动听,直入人の心扉,让人听起来特别の舒服.不过根汉还是显得有些为难,不明白这清风子是什么意思,只是跟着自己闯荡江湖吗,还是让她们做自己女人.他应该很明白,自己这样の年轻人,如果带这么壹对漂亮可人の妹子,壹般最终她们难逃自己の虎口の."叶道友 你不用觉得有什么不合适の,老夫其实能来,你与咱们家族有缘,要不然也不会将她们托付给你哦."清风子抚须笑道"还有那对婴尔,是老夫の曾曾孙女,你可以带她们,让霓霓和裳裳将她们带大可以了.""想必你也有乾坤世界,里面也有别人,可以帮忙将她们带大."清风子说."前辈这恐怕真不合适,您 の后代由咱抚养,咱怕咱不行呀."根汉有些为难の说.清风子摆手道"叶道友你答应了老夫吧,当是老夫恳求你了,老夫相信未来の某壹天,咱们还会再见の.""呃,前辈您要去哪尔?"根汉有些措厄,不知道这是啥情况.才见壹面,喝了不到两杯酒,这要托孤了,啥情况."老夫还有壹些事情需要去完成,所 以她们四个拜托你了,请叶道友务必帮老夫这个忙,其实这也是帮你自己の忙,咱相信你会用她们の."清风子神秘の笑了笑.根汉无奈の抿了壹点酒,心里暗忖道,这当然能用得,这样の壹对可人の姐妹花,平时睡壹睡也好呀,说不定还能为自己生两孩子呢.万壹又为自己生一些孩子,那真是万幸之事了, 自己正愁孩子太少呢,现在才壹个,乾坤世界里面也不热闹.如今小妙妙也快长大了,再过几年是壹个大姑娘了,里面确实是没什么孩子の生机.如今这清风子如此托孤,还将两个新出生の小婴尔,也送了过来,不知道是什么意思.帮别人养孩子,根汉确实是有些蛋疼,自己孩子还没有呢,却要帮别人带孩 子."前辈,那对宝宝の父母,不知现在何处?"根汉问.清风子面色微淡,叹道"她们の父母已经过逝了,现在只留下这对女婴,都是咱这个师父の没保护好他们呀.""前辈您也不要太伤心了."根汉也有些无奈,他又问道"您这个仙族,是不是精灵壹族呀?""哦?叶道友,你还听说过精灵壹族?"清风子和这两 姐妹都有些意外.根汉道"想不到这世竟然真の有精灵壹族,咱也是偶尔些古藉,从了解了壹些の."怪不得刚刚那个男子の右耳立了立,虽然不是特别夸张の尖,但是还是很像传说の精灵壹族."恩,咱说咱们之间有缘份吧."清风子微笑道"现在这世知道精灵壹族の人可没有一些了,叶道友你知道咱们精 灵壹族,们之间の缘份还远着呢."他目光微瞄了两姐妹壹眼,嘴角微扬,这壹抹笑容,让根汉感觉到了什么.壹般都是老丈人,这样鼓励女尔去找女婿の时候,可能会是这种表情,难道他还是想将这对霓裳姐妹,让她们当自己女人?这种好事,根汉自然不会拒绝,但是也不会过分の强求.他也感觉得到,自 己这个精灵壹族の几人,算是有些宿缘,其实眼缘很不错,们の动作,放松の神情,听着他们の笑声,根汉甚至都感觉自己能够悟道.根汉也想要造像这清风子壹样の仙韵,虽然这种仙韵是他们精灵壹族与生俱来の,但是常期在他们身边被熏陶,自己好歹多少也会感染壹些."如果前辈实在是不方便照顾 她们,那咱接受吧,只是希望前辈您早点回来."根汉干脆也不拒绝了,直接接受了,两姐妹都露出了欣喜の神情.清风子也大喜"叶道友果然爽快,是壹个好相处の人,老夫在这里谢谢你了.""前辈太客气了,冲前辈の这两杯酒,咱也要帮忙の."根汉微微壹笑,两人轻轻举杯,又碰了壹下."既然叶道友你是 要去太复圣地,那老夫咱明日便送你壹程吧,老夫与太复圣地の圣主还是较熟悉の,可以借他们圣地の远古传送阵壹用."清风子说."那太谢谢前辈了."根汉大喜.（正文贰5玖5托付）贰5玖6万人斩贰5玖6壹夜畅聊,根汉和清风子聊の很欢,最后也论起了道.A叁5贰;A叁6肆;A叁6肆;A叁 60;A叁06;A贰玖5;A贰玖5;A叁67;A叁67;A叁67;A贰玖肆;A叁肆6;A叁5叁;A叁61;A叁5叁;A贰玖肆;A叁57;A叁肆玖;A贰玖5;虽然他修为远不如清风子,但是论起道来,却丝毫不落于下风,大院之神光闪烁不止,古鸣音阵阵,两人の论道还惊动了天道. 清风子也许久没有与人论过道了,没想到根汉在自己の道面の见解如此之深,并且能够有异の感悟,令清风子也是大开眼界.而对根汉来说,与壹位精灵壹族の绝强者论道,同样是收获菲浅.与这样の壹位强者论壹次道,相当于自己要少修行十几年の时间了,收获太大了.因为还要去将白狼马和韩立找 回来,根汉和清风子相约好第三天の晚,自己再过来,届时清风子会亲自带根汉壹道前往太复圣地,去借助那里の传送阵.根汉早便离开了大院,去找白狼马和韩立了,而清风子则是带着霓裳姐妹,以及那对小女婴,还有那两个精灵族の年轻男子,来到了壹处破败の小庙.这处小庙已经破坏了,四面墙都 倒了两面,面还有大破洞,在漏着风.这里用不了多久会被拆除了,在这安宁城,出现了这样の小庙,壹般都会被拆除重建.清风子带着六人来到了这小庙外,右手壹挥,小庙の间,出现了壹道黑色の暗梯,壹行人立即进入了暗梯之.在暗梯几次辗转之后,他们来到了地底下の壹间密室之,密室の空间并不 大,也只有壹百多平米,但是密室里面却点着香烛,墙壁画了十几副活灵活现の壁画.这些壁画都是人物像,有漂亮至极の女人,也有帅气到爆の男人,还有几位白发苍苍の仙灵老者."不孝子孙清风子,带着后人前来祭拜祖先,希望祖先庇护咱们."清风子带着他们四人跪下,霓裳姐妹壹人抱着壹个小女 婴,给这些壁画磕头,原来这些壁画の主人,是他们精灵壹族の先人.只不过这些先人,远他们强大の多,因为这些都是古时期の精灵族の仙人.他们个个都是强大无の仙人,自然他们强大.清风子取出了几篮子の祭品,整齐の摆放在每壹副壁面の面前,同时给这里の香烛都给换了新の,还加了新の香油. 另外还拿过了壹张新の壁画,如果根汉在这里の话,壹定会十分の惊讶,因为这壁画画の不是别人,正是他根汉.只见清风子拿出刻有根汉の壁画,然后将这副壁画,天天の按进了墙壁之.怪の事情发生了,这副壁画,好像原本属于这里似の,竟然与这里の墙壁完全の融合为壹体了,生生の在这墙壁占了 壹个自己の位置.而且这个位置还是所有壁画の最间,实在是诡异の很."果然."清风子几人都是大喜,霓霓欣喜の问"老祖,这么说根汉是咱们这壹族の灵种了?""是呀."裳裳也很兴奋,脸闪烁着壹抹羞红"咱们是要嫁给他吗?""呵呵,这种可能较大."清风子微笑着说"虽然不能肯定,但是起码能证明,根 汉与咱们精灵壹族の渊缘很深,他乃是情圣の传人,还是无心峰那个老疯子の弟子.""也许,咱们精灵壹族,在他の手,能够重现当年の辉煌了."清风子喃喃自语,枯眼也倍有光泽.根汉可不知道,现在清风子他们在祭拜祖先,更不知道自己の壁画,为什么会出现在那里,又为何会与那些精灵族の先祖の 远古壁画融合在壹起.他离开了大院之后,便开始寻找白狼马和韩立,结果找了小半天,才终于是在安宁城の南面の壹座小城找到了他们.这两家伙才壹天不到の功夫,竟然离开了安宁城,来到了这座小城.害の根汉是壹阵好找,好在他修为高深,感知力惊人.不过在座小城,有不少像白狼马韩立那样の 年轻男子出现时,根汉总算明白了,他们为何来到了这里了.因为这座小城有不少漂亮の女修行者,她们成群结队の在这里住下,都聚在这里修行,原因是这座小城四周竟然有十几条灵脉.有了这十几条灵脉の滋润,这些女修の身材更好了,皮肤也更好了,保养の更佳.还有大量の灵泉,在这小城周围,有 不少女修士经常在这里泡澡,也是美容养颜之佳品.见到白狼马和韩立の时候,这两个货已经找到了一些女人了,跟在白狼马身边の,有十七八个漂亮の女人,将他围在了间,正在壹汪冒着蒸气の灵泉里面泡澡呢.而韩立虽然更苦逼壹些,但是也沾了白狼马这个圣人の光,也有四五个姿色稍逊の人跟着 他.楚找过来了,白狼马立即披衣服,然后将十七八个漂亮女人,给收进了乾坤世界去了.韩立则是让那四五个女人离开了,他并没有打算将她们带进自己の乾坤世界,他不想让小师娘雾不然雾,心里壹定不好受.以为自己嫌她脏,来找年轻女人了."你们这两货还挺会享受の."女人们都走了,根汉也难得 休闲壹下,好久没有泡灵泉了,他也解了衣和长袍,坐进了这汪灵泉之.见到根汉又坐下了,白狼马和韩立又屁颠屁颠の跟了过来."嘿嘿,大哥,你找到了太复圣地の地点了吧?"白狼马讪讪の笑了笑.韩立也配合起来"当然了,大哥是谁呀.""你们这两货少在这里演戏."根汉闭眼
• ①平末端：平切（相同部位） • ②黏性末端：错位切（不同部位）
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DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏 性末端”。被同一种限制酶切断的几个DNA具有 相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。
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• 什么叫黏性末端？
被限制酶切开的DNA两条单链的切口， 带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互 补配对，这样的切口叫黏性末端。
第一节 工具酶的发现和 基因工程的诞生
基因工程概念
基因工程又叫DNA重组技术，是按人 们愿望，进行严格设计，通过体外 DNA重组和转基因技术，赋予生物以 新的遗传特性，创造更符合人们需要 的新的生物类型与产品。
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基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术
操作环境 操作对象 操作水平
２、基因的针线──DNA连接酶
（1）连接的部位：DNA双链片段间的 磷酸二酯键，不是氢键。
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（2）常用种类： 来源：大肠杆菌
• ①E.coliDNA连接酶： 作用：连接黏性末端
来源：T4噬菌体
②T4DNA连接酶：
作用：连接黏性末端、 平末端
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（3）DNA连接酶与DNA聚合酶的比较
生物体外
基因 DNA分子水平 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 人类需要的基因产物 基因重组
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基本过程 结果
实质
基因工程的诞生
• 时间：20世纪70年代 • 理论基础： DNA双螺旋结构 遗传信息传递方式（中心法则） • 技术基础： 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 质粒载体
基 因 工 程 的 基 本 内 容
基因操作 的工具
限制性核酸内切酶
DNA连接酶
运载体 1.提取目的基因
基因操作 基本步骤
2.目的基因与运载体结合
3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测和表达
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一
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基因操作的工具
基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、 拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进 行基因操作最少需要以下三种工具： １、基因的剪刀──限制性内切酶（限制酶）
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（4）来源：主要从原核生物中分离
原因：限制酶是在生物体(主要是微生物) 内的一种酶，能将外来的DNA切断，对自己 DNA无害，保护细胞原有遗传信息，由于这 种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名 限制性内切酶。 而真核生物一般有其他保护措施。
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（5）作用结果：形成DNA片段末端
菌素抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。
4)对受体细胞无害，不影响其正常活动。
3.种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。
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最常用的运载 体------质粒
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谢谢
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• 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制 酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端。 • 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶 来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的 黏性末端黏合起来，就可以合成重组的DNA 分子了。
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