SDSPAGE所有详细试剂配方
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S D S-P A G E 30%聚丙烯酰胺溶液-----30%(w/v)Acrylamide
将29克丙烯酰胺和1克N,N’-亚甲丙烯酰胺溶于总体积为60ml温热(37℃左右)的去离子水中,充
pH
℃,
对人体有刺激性,请注意适当防护。
1.5MTris-HCL(pH8.8)(分离胶buffer)
称量181.7gTris碱溶于800mL的去离子水,充分搅拌溶解,加浓HCL调节所需要的pH值=8.8,将溶液定容至1L,高温高压灭菌后,室温保存。
(1.5mmol/LTris-HCL(pH8.8):18.15gTris和48ml1mol/LHCL 混合,加水稀释到100ml终体积。
过滤后40C保存。
)
【保存条件】
室温保存
【注意事项】
应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
10%十二烷基硫酸钠SDS溶液-----10%(w/v)SDS
5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液----- 5×Tris-Glycine buffer (SDS-PAGE电泳缓冲液)
称取15.1gTris,94.0g甘氨酸(glycine),5.0gSDS,用800ml蒸馏水或去离子水溶解,充分搅拌溶解,定容至1000ml,室温保存。
得0.125mol/L Tris-1.25mol/L甘氨酸电极缓冲液。
临用前稀释5倍。
【保存条件】
室温保存,两年有效。
【注意事项】
配制好的电泳液使用时间不宜超过两周。
电泳缓冲液可以回收,回收后可再使用1-2次,但为了取得最佳的电泳效果,应使用新电泳液。
5×SDS-PAGE加样缓冲液----- 5×SDS-PAGE Loading Buffer
【组分浓度】0.25MTris-HCL(pH6.8);
10%(W/V)SDS;
0.5%(W/V) BPB(溴酚蓝);
50%(V/V) 甘油;
加
考马斯亮蓝染色脱色液。