实验一 药理学实验的基本技能

实验一药理学实验的基本技能

一、实验动物的基本技能和实验技术基础

1.实验动物的标记

大、小鼠和白色家兔的标记常用3～5％黄色苦味酸溶液涂于皮毛上标号。常用的方法：1号 ---左前腿

2号 ---左腰部

3号 ---左后腿

4号 ---头部

5号 ---正中

6号 ---尾根部

7号 ---右前腿

8号 ---右腰部

9号 ---右后腿

10号 ---不标记

2.实验动物的捉持（大、小鼠）

(1)小鼠的捉持用右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠笼盖）上面，向后轻拉鼠尾；用左手拇指和食指捏住其两耳颈背部皮肤，将小鼠固定在掌中，使其腹部朝上，然后以无名指和小指夹住鼠尾或小鼠的左后肢。

（2）大鼠的捉持捉持和固定方法基本同小鼠，无经验者可戴上防护手套，并应动作轻柔。用右手捉住鼠尾，放在鼠笼盖上，向后轻拉鼠尾；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。

图 1 小白鼠捉持法

3、实验动物的给药方法（大、小鼠）

（1）小鼠的给药方法

灌胃（ig）：将小鼠固定后，使颈部拉直，右手持装有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，压其头部，使口腔与食道成一直线，沿上腭壁向鼠口腔的后下方轻轻插入食道。如遇阻力，可将针头抽出再插，以免刺破食管或误入气管。一般给药量为0.1～0.3ml/10g（体重）。

图 2 小白鼠灌胃法实验图 3 小白鼠腹腔注射法

皮下注射（H或sc）：常在背部皮下。轻轻捏起背部皮肤，将注射针头刺入皮下，稍稍摆动针头，若容易摆动则表明针尖位于皮下。然后注入药液。一般给药量为0.1～0.20ml/10g （体重）。

图 4 小白鼠皮下注射法

腹腔注射（ip）：左手固定动物，右手持注射器，从下腹部外侧，呈45度角刺入腹腔，进针约3～5mm，一般给药量为0.1～0.3ml/10g（体重）。

肌内注射(im)：多注射于后肢股部肌肉，一般每侧不超过0.1ml。

尾静脉注射（iv）：将小鼠置于固定筒内，使尾部露在外面，用70％～75％的乙醇棉球擦尾部，或将鼠尾浸入45～59ºC温水中，待尾部左右侧静脉扩张后，左手拉尾，右手进针。一般给药量为0.1～0.2ml/10g

（2）大鼠的给药方法

均同小鼠。一般情况下，灌胃剂量为1～2ml/100g，皮下注射、尾静脉注射<1ml /只，腹腔注射为1.5ml /只，肌内注射为0.1～0.2ml/只。此外大鼠尚有舌下静脉给药的方法。

图 5 家兔耳部血管分布图 6 家兔耳静脉注射法

4、实验动物给药量的计算

（1）药物浓度的表示方法

溶液的质量（g）

百分浓度（％）=—————————×100%

溶液的体积（ml）

（2）实验动物给药剂量一般按mg/kg(或g/kg)计算。为了方便，大鼠和豚鼠可按每100g 计算，小鼠可按每10g计算。

给药剂量=药物浓度×给药体积

（3）给药容量的计算：从已知药的浓度和已知给药剂量算出相当于每1kg体重应给药的毫升数（ml）。

例：小鼠体重22g，腹腔注射盐酸吗啡10mg/kg,药物浓度为0.1%,应注射多少毫升?

药物浓度：0.1%=0.1g/100ml=100mg/100ml=1mg/ml

给药剂量：10mg/kg=10ml/kg

小鼠体重：22g=0.022kg

10ml/kg×0.022kg=0.22ml

或换算成ml/10g来计算较为方便：10ml/kg=0.1ml/10g。这样再计算其他小鼠的给药量就很方便。

5、实验动物的处死方法

（1）颈椎脱臼法此法常用于小鼠。用左手拇指、食指或镊子用力压住小鼠的后头部，同时用右手抓住鼠尾用力向后上方牵拉，使之颈椎脱臼，鼠立即死亡。

（2）空气栓塞法此法常用于家兔的处死。用注射器将空气快速注入静脉，可使动物立即死亡。

（3）击打法适用于较小的动物，如家兔、大鼠和小鼠等。提起动物的尾部，用力敲击动物头部，或用要木锤打击头部，致使动物死亡。

（4）断头法此法适用于蛙、蟾蜍、小鼠和大鼠。用剪刀将动物头部剪断，由于脊髓娄离且大量出血，动物很快死亡。

二、实验记录的内容和实验报告的写作

1、实验记录

实验记录是将实验内容如实地记录下来，长期保存备用。其基本原则是真实、及时、准确、完整，实验过程中应认真做好实验记录。内容一般应包括：

（1）时间、天气、温度；

（2）实验标本：动物的种类、体重、标记和标号及如何分组等。

（3）实验药物：药物的来源、批号、剂型、浓度、剂量及给药途径。

（4）实验进程、步骤和方法的详细记录。

（5）观测指标的变化和原始的描记图纸。

2、实验报告的写作

实验报告要实事求事地反映实验的基本过程，并要对实际所得结果进行整理、计算、统计学处理，然后进行科学地分析讨论，进一步阐明实验的目的和意义。一般包括以下内容：[实验目的]

[实验材料] 包括仪器、药品和动物。要尽可能详细、具体、明确。

[实验方法] 可简明扼要地叙述，但关键环节或步骤必须写清楚。

[实验结果] 应根据实验获得的数据进行整理，并可对一个教学实验小组或全实验室的数据进行整理、归纳、分析和对比，尽量总结出图表。尤其有观察时效关系的，描出时效曲线，一目了然。数据须进行统计学处理，选择的统计学方法要恰如，检验效率要高。

[讨论]和[结论] 讨论与结论是报告的核心，应包括对实验结果的分析、思考题的探讨、实验、实验方法及实验中出现异常现象的分析、认识、体会和建议等。

实验二不同给药途径对药物作用的影响

【目的和原理】

观察给药途径不同，动物对药物反应有何不同。

【实验动物】

小白鼠，体重18-24g，雌雄兼用

【实验器材和药品】

小鼠笼、天平、注射器（1ml）、大烧杯、小鼠灌胃器、10%硫酸镁、0.5%戊巴比妥钠【实验步骤和观察项目】

1．硫酸镁不同给药途径对药物作用的影响

取体重相近的小白鼠2只，编号并称重。1号小白鼠腹腔注射10%硫酸镁溶液0.3ml，2号小白鼠经口灌胃10%硫酸镁0.6ml。观察并比较两鼠有何不同现象发生，为什么？

鼠号给药途径剂量（ml/只）呼吸肌张力大便

1号

2号

2．戊巴比妥钠不同给药途径对药物作用的影响

取体重相近的小白鼠3只，编号并称重。观察小鼠正常活动情况及翻正反射，然后用0.5%戊巴比妥钠，分别从不同途径（灌胃、皮下注射、腹腔注射）给药0.1ml/10g，观察小鼠反应，记录小白鼠腹腔注射0.5%戊巴比妥钠的时间、翻正反射消失及恢复时间，计算睡眠潜伏期和睡眠持续时间。

鼠号给药途径剂量（ml/10g）睡眠潜伏期（min）睡眠时间（min）1号