药理学实验

[方法] 物理性配伍禁忌
1、樟脑醑1ml+水1ml－→混浊、析出樟脑
2、液体石蜡3ml+水3ml－→分层 3、水合氯醛2g+樟脑2g－→液化 二、化学性配伍禁忌 １、１０％磺胺嘧啶钠１ml+维生素B1１ml－→磺胺嘧啶（反应前后均用pH广泛 试纸测定pH值） ２、２４万u青霉素Ｇ钾溶液１ml＋1.25％盐酸四环素溶液１ml 3、０．１％盐酸肾上腺素１ml＋５％碳酸氢钠１ml
攻击肝细胞膜上的磷脂分子， 使脂质过氧化
三氯甲基自由基 (· Cl3 ) 与微粒体Pr发生共价结合，损伤细胞 膜的结构功能，使可溶性酶活性↑
四氯化碳
功能氧化酶系统
(活性代谢产物）
直接溶解 肝细胞膜
抑制钙泵，使Ca 2+↑, 使肝细胞内Ca堆积
↓
死亡
戊巴比妥钠属巴比妥类药物，具有镇静催眠抗惊厥的 作用。随用量的增加而出现镇静、催眠、麻醉的作用。主要 在肝脏代谢失活。
［方法］
1、取兔一只放于兔固定箱内，对光观察兔耳血管粗细及颜色等情况，然后对一 只兔耳涂擦松节油，待两分钟后对比两只兔耳有何不同？ 2、将兔称重，先观察正常活动，用镊子轻击四肢和背部，看有何反应。
（1）给兔皮下注射0.2%硝酸士的宁注射液0.2ml/kg，用药后每隔二分钟用镊子
轻击四肢，观察兔有何反应。 （２）待兔出现典型的士的宁中毒症状（表现为全身痉挛，角弓反张，呼吸暂停 等）后，立即套上有麻醉乙醚的兔口罩，再观察兔的反应。 （３）当兔的中毒状态消失后，除去麻醉口罩，静注水合氯醛注射液2ml/kg ［讨论题］ 记录实验结果，说明哪种作用是局部作用？哪种作用是吸收作用
2、组距、组数的确定
在预备实验所获得的0%和100%的致死量范围内确定组距、组数。 组距：指相邻两组剂量对数之差。用“ⅰ”表示。 ⅰ＝ＤK-ＤL／G-1 ＤK、ＤL分别为最大剂量、最小剂量的对数值；Ｇ为预计组数。 一般组距在0.08－0.1之间（ⅰ值过小则分组过多，各组间死亡率重叠；ⅰ值过 大则分组过少，使标准误增大）。 ⅰ的大小取决于实验动物对被试因素的敏感性。敏感性大，组距可小，敏感性小 则组距大。
3
4
实验结束后将小鼠拉断颈椎处死，剖取肝脏，比较二组动物肝脏外观之不同。
四氯化碳中毒小鼠的肝脏较肿大，有的充血，有的呈土黄色，触之有油腻感，其
小叶比正常肝脏更清楚。 ［讨论题］
为什么损坏肝组织的小白鼠在注射戊巴比妥钠后作用时间长？有何意义？
实验方法
2、肾功能对药物作用的影响
取正常小白鼠和肾功能已被破坏的小白鼠（实验前24 小时腹腔注射０.1%氯化高氯化汞 )各2只，称其体重，分 别腹腔注射3%的硫酸链霉素 0.15ml/10g，观察小鼠的活
小叶比正常肝脏更清楚。 ［讨论题］
为什么损坏肝组织的小白鼠在注射戊巴比妥钠后作用时间长？有何意义？
实验方法
• 2、肾功能对药物作用的影响 取正常小白鼠和肾功能已被破坏的小白鼠（实验前 24小时腹腔注射０.1%氯化高氯化汞 )各2只，称其体重， 分别腹腔注射3%的硫酸链霉素 0.15ml/10g，观察小鼠的 活动情况，比较两只小鼠有何不同？
镇静（自发活动减少）
戊巴比妥钠 催眠（共济失调） 麻醉（翻正反射消失）
[记录]
组别
正 常
鼠 号 体重（g) 药理(ml) 注射时间
1 2
产生作用时间
醒转时间
持续时间
损坏
肝功
3
4
实验结束后将小鼠拉断颈椎处死，剖取肝脏，比较二组动物肝脏外观之不同。
四氯化碳中毒小鼠的肝脏较肿大，有的充血，有的呈灰黄色，触之有油腻感，其
实验原理
肝脏是药物代谢的主要器官，药物的代谢主要靠酶的催化。在肝细胞内质网上有专 门催化药物的酶类（药酶）。四氯化碳是一种典型的肝脏毒物，可引起中毒性肝炎，使 肝脏对药物的代谢能力降低。本实验用四氯化碳损害小鼠肝脏，使肝脏药酶活性受到抑 制，从而减缓对戊巴比妥的代谢，使麻醉维持时间延长。
Hale Waihona Puke Baidu
肝脏微粒体混合
B：灌胃组：灌胃给3.5％硫酸镁溶液0.2ml/10g；
C：腹腔注射组：腹腔注射给3.5％硫酸镁溶液0.2ml/10g。
给药后注意观察动物的活动情况，是否有肌肉松弛的表现。15min后每只小鼠均 灌胃给予5%炭末阿拉伯胶混悬液0.2ml。炭末灌胃后15min，将小鼠脱臼处死，剖开 腹腔，取出胃肠道。剪去附着在肠管上的肠系膜,将肠管不加牵引地轻轻地平铺在玻 璃板上(玻璃板上滴少许盐水)。以幽门为起点,测量炭末在肠管内的移动距离和小肠 (自幽门至回盲部)的全长,计算每只小鼠炭末的移动距离占小肠全长百分率，比较3组 动物的活动状况和胃肠炭末推进率有何不同。 炭末推进率计算公式： 炭末的移动距离（cm） 小肠推进率 = 小肠全长（cm） [记录] ×100%
肾上腺素
协同
滴眼
阿托品 （抗胆碱药）
滴眼
扩瞳
[记录]
项 瞳孔
目 左眼
正
常
毛果芸香碱
肾上腺素
阿托品
大小
右眼
［讨论题］
从实验结果中如何说明药物的协同作用和拮抗作用
药物的局部作用与吸收作用
［目的］观察药物对动物机体的局部作用和吸收作用 ［材料］兔子；兔固定箱、镊子、注射器、兔用麻醉口罩；松节油、0.1％硝酸 士的宁、麻醉乙醚、5%水合氯醛注射液
改良寇氏方法
改良寇氏法的设计要求：
1、剂量组应≥4个(一般为5-8个)； 2、组间剂量按等比级数排列；
3、最大剂量组死亡率（Pm）为100%或相近；最小剂量组死亡率(Pn)为0或接
近； 4、各组动物数相等
一、预备试验：
目的：找出上下限剂量范围和确定组数。 1、探索剂量范围：探索出使全部动物死亡的最小剂量(Dm) ，Pm=100%；使 一个动物也不死亡的最大剂量（Dn)， Pn=0%。（至少应找出引起10％－90％死亡 率）剂量的所在范围。 按估计量（经验或文献资料）给药，每次用3只动物。如动物全部死亡则降低 剂量，如动物全不死亡则加大剂量（组间剂量比为2：1） ，直到找出Dn和Dm。
不同给药途径对药物作用的影响
［目的］ 观察不同途径给药对药物效应的影响 ［材料］ 小白鼠５只；注射器、小白鼠灌胃器、钟罩、电子秤、镊子、3.5%硫酸镁 溶液、5%炭末阿拉伯胶混悬液、0.3%戊巴比妥钠。 ［方法] 一、灌胃和腹腔注射硫酸镁的药效比较 取禁食12h的昆明种小鼠3只，称重，分别标为对照组、灌胃组和腹腔注射组按以 下给药： A：对照组：灌胃给生理盐水0.2ml/10g；
药物的协同作用和拮抗作用
[目的] 观察激动剂与拮抗剂之间的相互作用 [材料] 家兔、0.5%硫酸阿托品，0.1%盐酸肾上腺素，0.2%硝酸毛果芸香碱 [原理]
1+1﹥2
协同作用 1+1=2 毛菓芸香碱（拟胆碱药） 拮 抗
拮抗(非竞争性)
拮抗作用
1+1﹤2
作用于虹膜括约肌M受体 滴眼 缩瞳 使虹膜括约肌收缩 作用于虹膜辐射肌的α受体 使虹膜辐射肌收缩 作用于虹膜括约肌M受体 使虹膜括约肌松驰 扩瞳
药物急性LD５０的测定
[目的和原理］ 通过实验了解测定LD５０的方法、步骤和计算过程。
LD５０是指一群动物中半数死亡的剂量，是衡量药物毒性大小的指标，
是评价药物优劣的重要参数。 LD５０的测定方法较多，常用的有改良寇氏法、序贯法、累计法等。寇
氏法计算简便、结果较准确，故常用。
［材料］ 小鼠（体重２０g左右）；测试药物、苦味酸、注射器、小鼠 饲养笼。 [注意] 本实验为定量药物效价测定，要求较高的准确性，在操作过程 中要求做到准确无误。
药理学实验
药学实验教学中心
实验一 药理实验的基本知识
一、药理实验课的目的 1、了解药理学实验的特点 2、了解药理实验的基本方法（行为学、形态学、生理学等学科的技术方法，整体动 物、离体器官组织、细胞、分子等不同水平的实验技术） 3、掌握药理学实验的基本技能(实验动物的选择、编号、捉持、给药、麻醉、处死等） 4、验证药理学的基本理论 5、培养动手能力 二、药理实验的基本要求 1、实验前：预习实验内容 2、实验时：分工协作，细心操作，认真观察，详细记录。 3、爱护动物，爱护器材 4、实验后：擦洗实验器材，清理后归还老师。将动物放回指定的地点，搞好教室清 洁卫生，书写实验报告。
三、药理性配伍禁忌 1、取小白鼠2只称重，其中1只肌内注射１％安钠咖注射液0.１ml/10g，待 ５分钟后二鼠分别腹腔注射0.３％戊巴比妥钠液0.２ml/１０g，观察二鼠反应有 何不同？ 2、取小白鼠２只，均肌内注射４％硫酸镁0.2ml/10g，待出现肌肉松驰现 象后，一只立即腹腔注射５％氯化钙0.1ml/10g，观察二鼠反应有何不同？ ［讨论题］ 用以上实验结果说明药物配伍禁忌的临床实用意义。
r=
n 1 Dm Dn
r=1.25 根据最小剂量(Dn)和剂量公比值 (r)可计算出： D1=Dn=最小剂量 D2=D1×r ………… Dm（最大剂量）=Dm-1×r
二、正式实验
1、动物的分组：用分层随机分组法进行分组。 首先，按性别将动物雌雄分开或各半混合编组，然后按体重分群，再随机分组，
上、下限剂量之间的距离可作为敏感性的标志。距离大，敏感性小；距离小则敏
感性大。 组数的确定：根据药物效应的强弱决定组数的多少，一般为５－８组。 根据组距大小确定实验组数、组距。
确定各组剂量：分别以D1、D2、D3、D4、Dm代表各组剂量。 1、用组距求出各组剂量： DＫ=D1 DＫ－ ⅰ＝D2 D2－ ⅰ＝D3 ………… 2、用各组剂量公比(r)求出： 查反对数表，得出剂量
药物的配伍禁忌
［目的］了解两种或两种以上的药物配合在一起时，可能产生的配伍禁忌。 ［材料］小白鼠、乳钵、注射器、电子秤、pH广泛试纸、液体石蜡、水合氯醛、 樟脑、10%磺胺嘧啶钠、维生素B1注射液、0.1%肾上腺素、5%碳酸氢钠、
0.3%戊巴比妥钠、1%安钠咖、4%硫酸镁、1.25%盐酸四环素、5%氯化钙。
[原理]
氯化汞 近曲小管 电解质、氨基酸重吸收 蛋白尿 少尿 无尿
由肾小球滤过排出
肾功能受损
前庭功能平衡失调 体内蓄积 对N肌肉接头的阻滞
硫酸链霉素
体内
步态不稳、四肢游泳状、瘫软、眼球突出、死亡
[记录]
组别
正 常
鼠 号 体重（g) 药理(ml) 注射时间
1 2
产生作用时间
醒转时间
持续时间
损坏
肝功
鼠号 体重(g) 药物及剂量 给药途径 动物反应 炭末推进率（%）
A B C
二、灌胃、皮下注射、腹腔注射戊巴比妥钠的效应比较
取体重相近的小白鼠３只，称其体重分别放入钟罩内，观察它们的正常活动及 翻正反射情况，然后用0.3%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g的量以不同途径给药,甲鼠灌 胃，乙鼠皮下注射，丙鼠腹腔注射。观察小白鼠用药后的反应及活动情况，以翻正 反射消失时作为麻醉开始指标。记录麻醉开始时间（从给药至翻正反射消失的时 间），麻醉维持时间（即从翻正反射消失至翻正反射恢复的时间），麻醉深度有何 不同（用镊子夹其后肢看其反应）。 ［记录］
鼠号 给药方法 麻醉开始时间 麻醉维持时间 麻醉深度
[讨论]
为什么会有不同的结果？
肝、肾功能对药物作用的影响
[实验目的] 观察肝功能、肾功能损伤后对药物作用的影响。
[实验材料] 小鼠、四氯化碳、氯化汞、戊巴比妥钠、硫酸链
霉素
[实验方法]
1、肝功能对药物作用的影响
取体重近似正常的小鼠及损坏肝脏的小鼠（实验前24 小时皮下注射四氯化碳0.1ml/10g），分别腹腔注0.2%戊 巴比妥钠0.1ml/10g，记录并比较两组小鼠麻醉持续时间有 何差别？
三、实验报告的写作 1、题目 2、目的 3、原理 4、方法 5、结果：应客观、准确的描述实验现象。按要求收集与处理实验结果。 量反应资料整理、质反应资料整理。 6、讨论：根据已知的理论知识对实验结果进行分析和解释。 7、结论：对分析讨论的总结与概括，应简明扼要，定义确切。 四、常用器械的使用方法 1、注射器的使用 2、手术器械的使用 五、实验动物的捉拿与给药方法 1、小白鼠的捉拿方法 2、小白鼠的给药方法 3、小鼠的雌雄鉴别 4、兔子的捉拿与给药方法 5、动物的处死方法
动情况，比较两只小鼠有何不同？
[记录]
组别 正 常 损坏 肾功 鼠号 1 2 3 4 体重(g) 药量（ml) 注射时间 产生作用时间 表 现 备 注
实验结束后可将小鼠处死，比较二组动物肾脏的差别。氯化高汞中毒小鼠的 肾脏常明显肿大。如用小刀纵切，可见到皮质部较为苍白，髓质部有充血现象。 ［讨论题］ 为什么两组小白鼠的表现不同？有何意义？