槐米中芦丁的提取、分离和检识

天然产物化学
3、实验试剂和仪器 、
试剂
槐米、 石灰乳、 槐米、 石灰乳、HCl、硫酸、镁粉、乙 、硫酸、镁粉、 醇、 α-萘酚 萘酚 仪器
烧杯、容量瓶、电炉、抽滤装置、 试纸 试纸、 烧杯、容量瓶、电炉、抽滤装置、pH试纸、 表面皿、试管、 表面皿、试管、滴管等
天然产物化学
槐花米粗粉（20g） 置500ml烧杯中，加水300ml，在搅拌下加入石 饱 灰乳（1~1.5g），调至PH8~9，加热至微沸， 和 石 灰 水， 保持30min，趁热抽滤。
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槲皮素
具有较好的祛痰、止咳作用， 具有较好的祛痰、止咳作用，并有一 定的平喘作用。此外还有降低血压、 定的平喘作用。此外还有降低血压、 增强毛细血管抵抗力、 增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管 脆性、降血脂、扩张冠状动脉， 脆性、降血脂、扩张冠状动脉，增加 冠脉血流量等作用。 冠脉血流量等作用。用于治疗慢性支 气管炎。 气管炎。对冠心病及高血压患者也有 辅助治疗作用。 辅助治疗作用。
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槐米中芦丁的提取、 槐米中芦丁的提取、分离和检识
天然产物化学
1、能 力 目 标：掌握槐花中芦丁的提 、 取分离技术。 取分离技术。 2.知 识 目 标： 知
1）熟悉槐花中黄酮类成分的结构及主要 ） 理化性质。 理化性质。 2）了解槐花中黄酮的提取分离新进展。 ）了解槐花中黄酮的提取分离新进展。
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实验报告
描述实验现象 计算槐米中芦丁（粗品）的含量。 计算槐米中芦丁（粗品）的含量。 描述检识反应的实验现象， 描述检识反应的实验现象，并分析原 因。 回答思考题。 回答思考题。
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思考题
1、提取过程中加入石灰乳的目的是什么？ 、提取过程中加入石灰乳的目的是什么？ 2、提取过程中pH值不能过低或过高，为什 、提取过程中 值不能过低或过高 值不能过低或过高， 么？ 1、分离芦丁和槲皮素用什么方法？ 、分离芦丁和槲皮素用什么方法？ 2、芦丁还可以用什么方法提取？ 、芦丁还可以用什么方法提取？
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1、实验目的和要求 、
通过芦丁的提取与精制掌握碱通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提 取黄酮类化合物的原理及操作 通过芦丁结构的检识，了解苷类结构 通过芦丁结构的检识， 研究的一般程序和方法
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芦 丁
芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶， 芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含 有三分子的结晶水，熔点为174~178℃， 有三分子的结晶水，熔点为 ℃ 无水物188~190℃。 无水物 ℃ 溶解度：冷水中为1:10000；热水中 溶解度：冷水中为 ；热水中1:200； ； 冷乙醇1:650；热乙醇 冷乙醇 ；热乙醇1:60；冷吡啶 ；冷吡啶1:12。 。 微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、 微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、 氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。 氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
搅拌下加 入饱和石 灰水 调节 pH8pH8-9 保持微 沸30min
直火/ 直火/电炉加热
双层滤纸或棉 花趁热抽滤
滤液 残渣
60-70度下 度下， 在60-70度下，用 浓盐酸调pH4 pH4浓盐酸调pH4-5
静置1h 静置1h
60-70℃下干燥 60-70℃下干燥 芦丁粗品
抽滤
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盐酸盐酸-镁粉反应
样品：少量芦丁、 样品：少量芦丁、槲皮素
盐酸盐酸-镁粉反应 黄酮母核
定 性 反 应
将样品溶于1ml乙醇，加入少许镁粉振 将样品溶于1ml乙醇， 1ml乙醇 滴加几滴浓盐酸， 2min内 摇，滴加几滴浓盐酸，1-2min内，观察颜 色变化。 色变化。
Molish反应 Molish反应
苷类
将样品溶于1ml乙醇，加入等体积10%α 将样品溶于1ml乙醇，加入等体积10%α1ml乙醇 10% 萘酚溶液，倾斜试管，摇匀， 萘酚溶液，倾斜试管，摇匀，沿管壁滴加浓 硫酸，注意观察两界面产生的变化。 硫酸，注意观察两界面产生的变化。
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芦丁
HO O
OH OH
槲皮素
wk.baidu.comOH OH
O OH OH O OH
OH O
3' HO 7 5 3 OH O
4'
O CH2O O
OH OH OH OH
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槐米功效：凉血止血、清肝泻火； 槐米功效：凉血止血、清肝泻火；可 用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、 用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、 衄血、肝热目赤、头痛眩晕等。 衄血、肝热目赤、头痛眩晕等。 芦丁具有维生素P样作用。 芦丁具有维生素 样作用。有助于保 样作用 持及恢复毛细血管的正常弹性。 持及恢复毛细血管的正常弹性。 用作防治高血压病的辅助治疗剂， 用作防治高血压病的辅助治疗剂，还 可用于治疗毛细血管脆性引起的出血 可用于治疗毛细血管脆性引起的出血 症。
黄 酮 苷 的 水 解
第一次实验所得滤液 滤液 抽滤 沉淀（粗品芦丁） 沉淀（粗品芦丁） 均分2 均分2份
1:60量加入蒸 按1:60量加入蒸 馏水， 馏水，沉淀悬浮 于蒸馏水中， 于蒸馏水中，加 重结晶 水解 1:70量加入 量加入2% 热煮沸15分钟后， 按1:70量加入2% 放冷静 热煮沸15分钟后， 15分钟后 硫酸，加热40min 硫酸，加热40min 置抽滤 趁热抽滤 残渣 滤液 冷却静置 精制芦丁（备用） 精制芦丁（备用） 滤液 沉淀 干燥 槲皮素（备用） 槲皮素（备用）
4 实 验 步 骤
残渣
滤液 在60~70℃下用浓盐酸调至 PH4~5，精置1hr,抽滤。 滤液 沉淀（粗制芦丁） 重结晶 将沉淀悬浮于蒸馏水中，加热 煮沸15min，趁热过滤 残渣 滤液 充分静置后过滤，60~70℃下干燥 芦丁（精制品）
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槐花米 20g） （20g） 加水 300ml
芦丁的提取
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实验注意事项
加入石灰乳即可达到碱溶解提取芦丁的目 的，还可以除去槐花米中含有的大量多糖 类粘液质， 值不能过高， 类粘液质，但pH值不能过高，否则钙能与 值不能过高 芦丁形成螯合物而沉淀析出 pH值过低会使芦丁形成氧盐重新溶解，降 值过低会使芦丁形成氧盐重新溶解， 值过低会使芦丁形成氧盐重新溶解 低收率（最佳pH值为 左右） 值为5左右 低收率（最佳 值为 左右）
黄酮母核
定 性 反 应
将样品溶于1ml乙醇， 将样品溶于1ml乙醇，加入少许镁粉振 1ml乙醇 滴加几滴浓盐酸， 2min内 摇，滴加几滴浓盐酸，1-2min内，观察颜 色变化。 色变化。
Molish反应 Molish反应
苷类
将样品溶于1ml乙醇，加入等体积10%α 将样品溶于1ml乙醇，加入等体积10%α1ml乙醇 10% 萘酚溶液，倾斜试管，摇匀， 萘酚溶液，倾斜试管，摇匀，沿管壁滴加浓 硫酸，注意观察两界面产生的变化。 硫酸，注意观察两界面产生的变化。
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2、实验原理 、
芦丁亦称云香苷，广泛存在于植物中。 芦丁亦称云香苷，广泛存在于植物中。其 中以槐花米(槐树的花蕾 中药店有出售)和 槐树的花蕾， 中以槐花米 槐树的花蕾，中药店有出售 和 荞麦叶内含量较高， 荞麦叶内含量较高，槐花米中含量高达 13%-16％。 ％。 黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水， 黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水，但却 难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱 难溶于酸性水，易溶于碱性水， 性水提取，再将碱水提取液调成酸性， 性水提取，再将碱水提取液调成酸性，黄 酮苷类即可沉淀析出。 酮苷类即可沉淀析出。